QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN

CỘNG HOÀ XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM QCVN - 12:2010/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN National technical regulation on Food Additive - Preservatives HÀ NỘI - 2010 QCVN - 12 : 2010/BYT Lời nói đầu QCVN 4-12:2010/BYT Ban soạn thảo quy chuẩn kỹ thuật quốc gia Phụ gia thực phẩm chất hỗ trợ chế biến biên soạn, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm trình duyệt ban hành theo Thơng tư số 44/2010/TT-BYT ngày 22 tháng 12 năm 2010 Bộ trưởng Bộ Y tế QCVN - 12 : 2010/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN National technical regulation on Food Additive – Preservatives I QUY ĐỊNH CHUNG Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau gọi tắt Quy chuẩn) quy định yêu cầu kỹ thuật quản lý chất lượng, vệ sinh an toàn chất bảo quản sử dụng với mục đích làm phụ gia thực phẩm Đối tƣợng áp dụng Quy chuẩn áp dụng đối với: 2.1 Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất bảo quản làm phụ gia thực phẩm (sau gọi tắt tổ chức, cá nhân) 2.2 Cơ quan quản lý nhà nước có liên quan Giải thích từ ngữ chữ viết tắt: 3.1 Chất bảo quản: phụ gia thực phẩm sử dụng với mục đích kéo dài thời hạn sử dụng sản phẩm cách ngăn chặn hư hỏng ô nhiễm vi sinh vật 3.2 JECFA monograph - Vol (JECFA monographs - Combined compendium of food addiditive specifications; Joint FAO/WHO expert committee on food additives; Volume - Analytical methods, test procedures and laboratory solutions used by and referenced in the food additive specifications; FAO, 2006): Các yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm, Tập Các phương pháp phân tích, quy trình thử nghiệm, dung dịch thử nghiệm sử dụng (hoặc tham chiếu) yêu cầu kỹ thuật phụ gia thực phẩm; JECFA biên soạn; FAO ban hành năm 2006 3.3 Mã số C.A.S (Chemical Abstracts Service): Mã số đăng ký hóa chất Hiệp hội Hóa chất Hoa Kỳ 3.4 TS (test solution): Dung dịch thuốc thử 3.5 ADI (Acceptable daily intake): Lượng ăn vào hàng ngày chấp nhận 3.6 INS (International numbering system): Hệ thống mã số quốc tế phụ gia thực phẩm QCVN - 12 : 2010/BYT II YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƢƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử chất bảo quản quy định phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn sau: 1.1 Phụ lục 1: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử acid sorbic 1.2 Phụ lục 2: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử kali sorbat 1.3 Phụ lục 3: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử calci sorbat 1.4 Phụ lục 4: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử acid benzoic 1.5 Phụ lục 5: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri benzoat 1.6 Phụ lục 6: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử kali benzoat 1.7 Phụ lục 7: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử calci benzoat 1.8 Phụ lục 8: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử ethyl phydroxybenzoat 1.9 Phụ lục : Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử methyl phydroxybenzoat 1.10 Phụ lục 10 : Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử lưu huỳnh dioxyd 1.11 Phụ lục 11 : Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri sulfit 1.12 Phụ lục 12 : Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri hydrogen sulfit 1.13 Phụ lục 13 : Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri metabisulfit 1.14 Phụ lục 14: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử kali metabisulfit 1.15 Phụ lục 15: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử kali sulfit 1.16 Phụ lục 16: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử nisin 1.17 Phụ lục 17: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử hexamethylen tetramin 1.18 Phụ lục 18: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử dimethyl dicarbonat 1.19 Phụ lục 19: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử acid propionic 1.20 Phụ lục 20: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri propionat 1.21 Phụ lục 21: Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử natri thiosulfat QCVN - 12 : 2010/BYT Các yêu cầu kỹ thuật quy định Quy chuẩn thử theo JECFA monograph - Vol 4, ngoại trừ số phép thử riêng mô tả phụ lục Các phương pháp thử hướng dẫn Quy chuẩn không bắt buộc phải áp dụng, sử dụng phương pháp thử khác có giá trị tương đương Lấy mẫu theo hướng dẫn Thông tư 16/2009/TT-BKHCN ngày 02 tháng năm 2009 Bộ Khoa học Công nghệ hướng dẫn kiểm tra nhà nước chất lượng hàng hóa lưu thơng thị trường quy định khác pháp luật có liên quan III YÊU CẦU QUẢN LÝ Công bố hợp quy 1.1 Các chất bảo quản phải công bố phù hợp với quy định Quy chuẩn 1.2 Phương thức, trình tự, thủ tục cơng bố hợp quy thực theo Quy định chứng nhận hợp chuẩn, chứng nhận hợp quy công bố hợp chuẩn, công bố hợp quy ban hành kèm theo Quyết định số 24/2007/QĐ-BKHCN ngày 28 tháng năm 2007 Bộ trưởng Bộ Khoa học Công nghệ quy định pháp luật Kiểm tra chất bảo quản Việc kiểm tra chất lượng, vệ sinh an toàn chất bảo quản phải thực theo quy định pháp luật IV TRÁCH NHIỆM CỦA TỔ CHỨC, CÁ NHÂN Tổ chức, cá nhân phải công bố hợp quy phù hợp với quy định kỹ thuật Quy chuẩn này, đăng ký cơng bố hợp quy Cục An tồn vệ sinh thực phẩm bảo đảm chất lượng, vệ sinh an tồn theo nội dung cơng bố Tổ chức, cá nhân nhập khẩu, xuất khẩu, sản xuất, buôn bán sử dụng chất bảo quản sau hồn tất đăng ký cơng bố hợp quy bảo đảm chất lượng, vệ sinh an toàn, ghi nhãn phù hợp với quy định pháp luật QCVN - 12 : 2010/BYT V TỔ CHỨC THỰC HIỆN Giao Cục An toàn vệ sinh thực phẩm chủ trì, phối hợp với quan chức có liên quan hướng dẫn triển khai tổ chức việc thực Quy chuẩn Căn vào yêu cầu quản lý, Cục An toàn vệ sinh thực phẩm có trách nhiệm kiến nghị Bộ Y tế sửa đổi, bổ sung Quy chuẩn Trường hợp hướng dẫn quốc tế phương pháp thử quy định pháp luật viện dẫn Quy chuẩn sửa đổi, bổ sung thay áp dụng theo văn QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID SORBIC Tên khác, số Sorbic acid INS 200 ADI = – 25 mg/kg thể trọng Định nghĩa Tên hóa học Acid sorbic; acid 2,4-hexadienoic; acid 2-propenylacrylic Mã số C.A.S 110-44-1 Cơng thức hóa học C6H8O2 Cơng thức cấu tạo Khối lượng phân tử 112,12 Cảm quan Dạng tinh thể hình kim khơng màu bột trơn chảy màu trắng, có mùi nhẹ đặc trưng Chức Chất bảo quản chống vi sinh vật, chất chống nấm Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Tan ethanol, tan nước Khoảng nhiệt độ nóng chảy 132-135oC (Máy đo điểm chảy cần gia nhiệt đến 125oC trước đo mẫu) Quang phổ Cực đại hấp thụ dung dịch 1/400.000 isopropanol 254±2 nm Liên kết đơi Phải có phản ứng đặc trưng cho liên kết đôi 5.2 Độ tinh khiết Hàm lượng nước Không 0,5% Tro sunfat Không q 0,2% Các Aldehyd Khơng q 0,1% (tính theo formaldehyd) Chì Khơng q 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C6H8O2 Khơng thấp 99% tính theo chế phẩm khan QCVN - 12 : 2010/BYT Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Liên kết đơi Lắc khoảng 0,02 g mẫu thử với 1ml dung dịch brom (TS) Dung dịch brom màu 6.2 Độ tinh khiết Hàm lượng nước - Phương pháp Karl Fischer - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 Tro sunfat - Sử dụng g mẫu thử - Thử theo phương pháp I, JECFA monograph - Vol.4 Các Aldehyd Thêm 0,5 ml dung dịch thuốc thử Schiff (TS) vào ml dung dịch bão hòa mẫu thử nước để yên 10-15 phút So sánh màu ống thử với màu tạo thành từ ml dung dịch formaldehyd (chứa µg) với lượng thuốc thử Schiff điều kiện mẫu thử Màu dung dịch thử không đậm màu dung dịch đối chứng Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.3 Định lượng Cân 0,25 g (chính xác đến mg) mẫu thử, hồ tan 50 ml methanol khan trung hoà dung dịch natri hydroxyd 0,1 N Thêm vài giọt dung dịch phenolphthalein (TS), chuẩn độ tiếp dung dịch natri hydroxyd 0,1 N xuất màu hồng bền vòng 30 giây Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd 0,1 N tương đương với 11,21 mg C6H8O2 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI KALI SORBAT Tên khác, số Potassium sorbate INS 202 ADI = – 25 mg/kg thể trọng Định nghĩa Tên hóa học Kali sorbat; Muối kali acid trans, trans-2,4-hexadienoic Mã số C.A.S 24634-16-5 Cơng thức hóa học C6H7KO2 Cơng thức cấu tạo Khối lượng phân tử 150,22 Cảm quan Dạng tinh thể, bột tinh thể hạt nhỏ có màu trắng trắng vàng Chức Chất bảo quản Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Tan tốt nước, tan ethanol Kali Phải có phản ứng đặc trưng kali Khoảng nhiệt độ nóng chảy acid sorbic lấy từ mẫu thử 132-135oC Liên kết khơng no Phải có phản ứng đặc trưng liên kết không no 5.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng sấy khô Không q 1,0 % Tính acid tính kiềm Khơng 1,0 % (tính theo acid sorbic kali carbonat) Các Aldehyd Khơng q 0,1% (tính theo formaldehyd) Chì Không 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C6H7KO2 Không thấp 98,0% khơng q 102,0% tính theo chế phẩm sau làm khô QCVN - 12 : 2010/BYT Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Kali Thử theo JECFA monograph - Vol Khoảng nhiệt độ nóng chảy acid sorbic lấy từ mẫu thử Acid hóa dung dịch mẫu thử dung dịch acid hydrocloric loãng (TS) Lọc thu phần acid sorbic kết tủa tạo thành giấy lọc, rửa tủa nước khơng cịn clorid làm khô acid sulfuric chân không Thử liên kết không no Thêm vài giọt dung dịch thuốc thử brom (TS) vào ml dung dịch mẫu thử nồng độ 1/10 Nước brom màu 6.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng sấy khơ Tính acid tính kiềm Thử theo JECFA monograph - Vol (sấy 105oC giờ) Hoà tan 1,1 g mẫu thử 20 ml nước thêm giọt dung dịch phenolphthalein (TS) Nếu dung dịch thử không màu, chuẩn độ dung dịch natri hydroxyd 0,1 N đến xuất màu hồng bền 15 giây Thể tích dung dịch natri hydroxyd 0,1 N sử dụng khơng 1,1 ml Nếu dung dịch mẫu thử có màu hồng, chuẩn độ dung dịch acid hydrochloric 0,1 N đến màu Thể tích dung dịch acid hydrochloric 0,1 N sử dụng không 0,8 ml Các Aldehyd Pha dung dịch mẫu thử 0,3 %, chỉnh pH đến HCl N lọc Lấy ml dịch lọc, thêm 2,5 ml thuốc thử Schiff (TS) để yên 10-15 phút So sánh màu dịch thử với màu thu lấy ml dung dịch chứng có chứa 15 µg formaldehyd thay cho mẫu thử Màu dịch thử không đậm màu dung dịch chứng Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol.4 - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng quy định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol.4 phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.3 Định lượng Cân 0,25 g mẫu thử (chính xác đến 0,1 mg), sấy 105oC Hoà tan vào hỗn hợp gồm 36 ml acid acetic băng ml anhydrid acetic bình dung tích 250 ml có nút thủy tinh, làm ấm dung dịch để tan hoàn tồn Làm nguội đến nhiệt độ phịng, thêm giọt thị dung dịch tím tinh thể (TS) chuẩn độ dung dịch acid percloric 0,1 N acid acetic băng, đến dung dịch có màu lục lam bền 30 giây Tiến hành làm mẫu trắng song song hiệu chỉnh kết chuẩn độ cần Mỗi ml dung dịch acid percloric 0,1 N acid acetic băng 10 QCVN - 12 : 2010/BYT 6.1 Định tính Phân biệt với - Độ bền vững môi trường acid: Cho 100 mg mẫu vào chất kháng khuẩn dung dịch HCl 0,02N mô tả phần “Dung dịch chuẩn” phần Định lượng Đun sôi dung dịch khác thời gian phút Sử dụng phương pháp định lượng để xác định hoạt độ nisin Xử lý nhiệt không làm giảm hoạt độ nisin Nồng độ nisin tính tốn mẫu đun sôi 100% ± 5% giá trị định lượng Điều chỉnh pH dung dịch nisin tới giá trị pH = 11 cách thêm dung dịch NaOH 5N Gia nhiệt dung dịch 650C 30 phút, sau làm nguội Điều chỉnh đến pH = cách nhỏ vào giọt dung dịch HCl Xác định lại nồng độ nisin sử dụng phương pháp định lượng miêu tả Hoạt tính kháng khuẩn nisin hoàn toàn thấy rõ sau trình xử lý - Khả tồn vi khuẩn Lactococcus lactis mơi trường có nồng độ nisin cao: Chuẩn bị nhân giống Lactococcus lactis (ATCC 11454, NCIMB 8596) sữa tách chất béo tiệt trùng (chất béo sữa < 1%) ủ ấm 18 giờ, nhiệt độ 300C Chuẩn bị nhiều bình tam giác chứa 100 ml sữa quì, tiệt trùng nhiệt độ 1210C 15 phút Cho 0,1 g mẫu vào sữa quì tiệt trùng để nhiệt độ phòng Thêm vào 0,1 ml môi trường L.lactis ủ 300C 24 Vi khuẩn L.lactis phát triển dịch mẫu có nồng độ khoảng 1.000 IU/ml; nhiên, vi khuẩn L.lactis không phát triển nồng độ tương tự chất kháng khuẩn khác Phép thử không phân biệt nisin subtilin 6.2 Độ tinh khiết Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.2 Định lượng Nisin (theo phương pháp Friedman Epstein, J.Gen Microbiol.5: 830, 1951) Chuẩn bị vi khuẩn thử: Chuyển Lactococcus lactis sbsp cremoris (ATCC 14365, NCDO 495) nuôi cấy hàng ngày sữa tách chất béo tiệt trùng vào bình McCartney có chứa sữa q que cấy ủ nhiệt độ 300C Chuẩn bị sữa chứa vi khuẩn cho phép thử cách cấy 2% dịch nuôi vi khuẩn 24h vào lượng tỷ lệ phù hợp sữa tách béo tiệt trùng, đặt vào bể điều nhiệt 300C 90 phút Sau mang dùng Dung dịch chuẩn gốc: 47 QCVN - 12 : 2010/BYT Hồ tan lượng nisin chuẩn cân xác dung dịch acid HCl 0,02N để tạo dung dịch 5.000 đơn vị/ml Ngay trước dùng, pha loãng dung dịch acid HCl 0,02 N tạo dung dịch 50 đơn vị/ml (Lưu ý: Chế phẩm nisin hãng Sigma, St Louis, USA Fluka gồm có 2,5% nisin, hoạt độ tối thiểu 106 IU/g, sử dụng làm dung dịch chuẩn gốc tương tự, chế phẩm có tên Nisaplin hãng Daniscom, Copenhagen, Đan Mạch) Dung dịch mẫu: Cân lượng mẫu đủ để đảm bảo ống tương ứng mẫu phù hợp với loạt chuẩn, tức giới hạn chặt chẽ, hàm lượng nisin mẫu chuẩn Pha loãng dung dịch mẫu dung dịch acid HCl 0,02N đến nồng độ 50 đơn vị nisin/ml Dung dịch resazurin: Phải chuẩn bị dung dịch resazurin 0,0125% nước trước dùng Cách tiến hành: Dùng pipet hút thể tích (0,60; 0,55; 050; 0,45; 0,41; 0,38; 0,34; 0,31; 0,28; 0,26 ml) dung dịch mẫu 50 đơn vị/ml dung dịch chuẩn cho vào hàng 10 ống thử vi sinh làm khơ, kích thước ống x 5/8 inch Bổ sung 4,6 ml sữa chứa vi khuẩn vào ống thiết bị pipet tự động Cho thêm sữa chứa vi khuẩn vào hàng ống có nồng độ khơng đáng kể trừ hàng có 10 ống Đặt ống vào bể điều nhiệt nhiệt độ 300C 15 phút, sau làm nguội bể nước đá, lúc thêm vào ml dung dịch resazurin cho ống Việc thêm vào thực thiết bị pipet tự động Lắc ống Tiếp ủ nhiệt độ 300C, thời gian – phút bể điều nhiệt Kiểm tra ống ánh sáng huỳnh quang buồng tối Ống mẫu có nồng độ cao phân biệt rõ trước tiên thông qua màu sắc (chẳng hạn chuyển từ màu xanh sang màu hoa cà) so sánh với ống dịng chuẩn để tìm đồng màu Tìm phù hợp hai nồng độ thấp mẫu chuẩn Nội suy phù hợp bước pha loãng nửa Khi ống chuẩn biết hàm lượng nisin tính nồng độ nisin dung dịch mẫu Có nồng độ dung dịch trung bình chúng Tính hoạt độ chế phẩm theo đơn vị IU/g NaCl Cân xác 100 mg mẫu cho vào bát sứ Thêm 100 ml nước, ml dung dịch dextrin 2% ml dung dịch diclorofluorescein 0,1% Trộn chuẩn độ dung dịch AgNO3 0,1N AgCl kết vón lại hỗn hợp có màu hồng nhạt NaCl (% theo trọng lượng) tính theo cơng thức sau: 48 QCVN - 12 : 2010/BYT Trong đó: V: Thể tích dung dịch AgNO3 dùng để chuẩn độ (ml) N: Nồng độ đương lượng dung dịch AgNO3 58,5 : Khối lượng phân tử NaCl W: Khối lượng mẫu (mg) 49 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục 17 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI HEXAMETHYLEN TETRAMIN Tên khác, số Hexamethylenetertramine; Hexamine; Methenamine INS 239 ADI = - 0,15 mg/kg thể trọng Định nghĩa Tên hóa học 1,3,5,7-tetraazatricylo[3.3.1.13,7]-decan; hexamethylentetramin Mã số C.A.S 100-97-0 Cơng thức hóa học C6H12N4 Cơng thức cấu tạo Khối lượng phân tử 140,19 Cảm quan Tinh thể khơng màu, bóng sáng, gần khơng mùi bột tinh thể màu trắng Chức Chất bảo quản chống vi sinh vật Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Dễ tan nước, tan ethanol Formaldehyd Phải có phản ứng đặc trưng formaldehyd Amoni Phải có phản ứng đặc trưng amoni 5.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng làm Không 2,0% khô Tro sulfat Không 0,05% Các muối amoni Đạt yêu cầu (mô tả phần Phương pháp thử) Chì Khơng q 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C6H12N4 Khơng thấp 99,0% tính theo chế phẩm sấy khô Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính 50 QCVN - 12 : 2010/BYT Formaldehyd Đun nóng dung dịch mẫu thử 1/10 với dung dịch acid hydrocloric lỗng (TS) Formaldehyd giải phóng, nhận biết qua mùi tính chất làm đen giấy tẩm dung dịch bạc amoni nitrat (TS) Amoni Thử theo JECFA monograph - Vol 6.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng làm Thử theo JECFA monograph - Vol (làm khô P2O5 giờ) khô Tro sulfat Thử theo JECFA monograph - Vol 4, phương pháp I (cân g mẫu) Các muối amoni Thêm ml thuốc thử Nessler (TS) vào 10 ml dung dịch mẫu thử 5% Màu dung dịch không thẫm màu hỗn hợp ml thuốc thử Nessler (TS) 10 ml nước Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.3 Định lượng Cân g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử làm khô trước P2O5 Cho vào cốc thêm 40,0 ml acid sulfuric N Đun nhẹ thêm nước từ từ (nếu cần) đến khơng thấy cịn mùi formaldehyd Làm mát, thêm 20 ml nước, dung dịch đỏ methyl (TS) chuẩn độ acid dư natri hydroxyd N Mỗi ml acid sulfuric N tương đương với 35,05 mg C6H12N4 51 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục 18 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI DIMETHYL DICARBONAT Tên khác, số Dimethyl dicarbonate; DMDC, dimethyl pyrocarbonat INS 242 Định nghĩa Tên hóa học Dimethyl dicarbonat Mã số C.A.S 004-525-33-1 Cơng thức hóa học C4H6O5 Cơng thức cấu tạo Khối lượng phân tử 139,09 Cảm quan Dạng lỏng không màu Chú ý: có tính ăn mịn với mắt da, gây độc qua đường hơ hấp tiêu hóa Phải bảo quản bao bì kín để tránh ẩm Chức Chất bảo quản Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Tan nước kèm theo phân hủy, hịa lẫn với toluen Hấp thụ hồng ngoại Phổ hồng ngoại mẫu phải tương ứng với phổ chuẩn phần phụ lục 5.2 Độ tinh khiết Dimethyl carbonat Khơng q 0,2% Chì Khơng 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C4H6O5 Không thấp 99,8% Phƣơng pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Dimethyl carbonat Thiết bị: Máy sắc ký khí với detector ion hóa lửa (FID), cột sắc ký mao quản, phận inlet cho kỹ thuật "on column" (VD Carlo Erba Fraktovap 4160, Hewlett-Packard 5880 5792 thiết bị khác tương đương) - Cột mao quản: 50 m SE 30-D (đường kính 0,3 mm) 52 QCVN - 12 : 2010/BYT - Máy ghi (đo) thế, 1mV - Microsyring với kim tiêm thạch anh, dung tích 0,01ml, phù hợp Điều kiện hoạt động thiết bị Nhiệt độ: - Buồng bơm mẫu: nhiệt độ phòng ~25oC - Deterctor: 200oC - Cột: Nhiệt độ ban đầu 30oC; giữ nhiệt độ phút, sau tăng nhiệt độ lên 120oC với tốc độ 40oC/phút, giữ 120oC phút Khí mang: - Áp suất van sơ cấp: 3,0 bar (heli) - Tốc độ dòng qua cột: 11 ml/phút - Tốc độ dịng khí make up: 28ml/phút - Tốc độ khí hydro: 35 ml/phút - Tốc độ khơng khí nén: 300 ml/phút Tốc độ máy ghi: cm/phút Thuốc thử: Methylisobutylketon, tinh khiết sắc ký Tiến hành: Cân khoảng 10 g mẫu, xác đến mg (lượng cân xác w1 mg), cho vào lọ đựng mẫu Thêm lượng (W mg) dimethyl-isobutyl keton tương đương với hàm lượng ước đoán dimethyl carbonat Đậy kín lọ, lắc kỹ bơm vào máy sắc ký 0,002 ml Thời gian lưu thu sau: dimethyl carbonat: ~ phút methyl-isobutyl keton: ~4,5 phút dimethyl-isobutyl keton: ~8 phút Sắc ký đồ mẫu phần 7.2 Xác định diện tích pic, tính hàm lượng (%) dimethyl carbonat theo cơng thức: đó: F1: Diện tích pic dimethyl carbonat F2: Diện tích pic chuẩn K: Hệ số hiệu chỉnh cho dimethyl carbonat Chú ý: Dimethyl dicarbonat nhạy với độ ẩm nhiệt Nếu pic sắc ký bị chẻ đôi điều kiện sắc ký đó, diện tích pic xác định tổng diện tích pic Hệ số hiệu chỉnh dimethyl carbonat xác định đo dung dịch Dimethyl dicarbonat không chứa dimethyl carbonat Mẫu trộn chuẩn cần phân tích Syring Hamilton với đầu kim kim loại gây phân hủy phần Dimethyl dicarbonat 53 QCVN - 12 : 2010/BYT Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.2 Định lượng Lấy khoảng 70 ml aceton tinh khiết vào cốc thủy tinh dung tích 150 ml Dùng syring lấy khoảng 1,0-1,3 g mẫu, mẫu cần cân xác đến 0,1 mg, cho vào cốc thủy tinh Dùng pipet lấy xác 20 ml dung dịch dibutyl amin (thêm clorobenzen vào 120 g dibutyl amin đến đủ l), cho vào cốc thủy tinh, khuấy Chuẩn độ với acid hydrocloric N, xác định điểm tương đương đo Tiến hành đồng thời mẫu trắng Tính hàm lượng dimethyl dicarbonat theo cơng thức sau: đó: V1: Lượng acid hydrocloric chuẩn độ mẫu thử (ml) V2: Lượng acid hydrocloric chuẩn độ mẫu trắng (ml) t: Nồng độ dung dịch acid hydrocloric W: khối lượng mẫu (g) Phổ sắc ký đồ đối chiếu 7.1 Phổ hồng ngoại chuẩn 54 QCVN - 12 : 2010/BYT 7.2 Sắc ký đồ 55 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục 19 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI ACID PROPIONIC Tên khác, số Propionic acid; acid propanoic; ethylformic acid; methylacetic acid INS 280 ADI “khơng giới hạn” Định nghĩa Tên hóa học Acid propionic Mã số C.A.S 79-09-4 Công thức phân tử C3H6O2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 74,08 Cảm quan Dung dịch sánh, có mùi hăng nhẹ Chức Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh, hương liệu Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Có thể trộn lẫn với nước ethanol Khối lượng riêng d2020 = 0,993 – 0,997 5.2 Độ tinh khiết Khoảng chưng cất 138,5 - 142,5o Cặn không bay Không 0,01% (khi sấy 1400C đến khối lượng không đổi) Acid formic Không 0,1 % Các aldehyd Khơng q 0,2 % (tính theo propionaldehyd) Chì Khơng q 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng C3H6O2 Khơng thấp 99,5% tính theo chế phẩm làm khô Phƣơng pháp thử 6.1 Độ tinh khiết Acid formic Hòa tan 15 g natri hydroxyd 50 ml nước, làm nguội thêm ml nước brom, khuấy để hịa tan hồn tồn, pha lỗng nước đến đủ 2000 ml Lấy 25 ml dung dịch 56 QCVN - 12 : 2010/BYT vào bình nón 250 ml nút mài có chứa 100 ml nước, thêm 10 ml dung dịch natri acetat 1/5 10,0 ml mẫu thử Để yên 15 phút, thêm ml dung dịch kali iodid 1/4 10 ml acid hydrocloric Chuẩn độ dung dịch natri thiosulfat 0,1 N đến dung dịch màu nâu Tiến hành làm mẫu trắng song song Sự chênh lệch thể tích dung dịch natri thiosulfat 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không 4,4 ml Các aldehyd Chuyển 10,0 ml mẫu thử vào bình nón 250 ml nút mài chứa sẵn 50 ml nước 10,0 ml dung dịch natri bisulfit 1/8 Đậy nút lắc đều, để yên hỗn hợp 30 phút Tiến hành làm mẫu trắng song song Sau chuẩn độ mẫu trắng với dung dịch iod 0,1 N đến màu dung dịch bắt đầu có màu nâu và tiếp tục chuẩn độ bình thử đến có màu tương đương với màu bình trắng Sự chênh lệch thể tích dung dịch iod 0,1 N chuẩn độ mẫu thử so với mẫu trắng không 7,0 ml Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.2 Định lượng Cân khoảng g (chính xác đến 0,1 mg) mẫu thử, hịa tan 50 ml nước bình 250 ml, thêm dung dịch phenolphtalein (TS) chuẩn độ với dung dịch natri hydroxyd N đến dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền 30 giây Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd N tương đương với 74,08 mg C3H6O2 57 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục 20 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI PROPIONAT Tên khác, số Sodium propionate; Sodium propanoate; INS 281 ADI “không giới hạn” Định nghĩa Tên hóa học Natri propionat Mã số C.A.S 137-40-6 Công thức phân tử C3H5NaO2 Công thức cấu tạo Khối lượng phân tử 96,06 Cảm quan Tinh thể trắng khơng màu, dễ hút ẩm, có mùi đặc trưng nhẹ Chức Chất bảo quản, chống nấm, chống đặc quánh Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Dễ tan nước, tan ethanol Natri Phải có phản ứng đặc trưng natri Propionat Phải có phản ứng đặc trưng propionat Muối kiềm acid hữu Phải có phản ứng đặc trưng muối kiềm acid hữu 5.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng làm khô Không 4,0 % pH Dung dịch mẫu thử 1/10 có pH khoảng 7,5 - 10,5 Chất khơng tan nước Không 0,1 % Sắt Không q 50,0 mg/kg Chì Khơng q 5,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng Khơng thấp 99,0% tính theo chế phẩm làm khô 58 QCVN - 12 : 2010/BYT C3H6NaO2 Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Natri Thử theo JECFA monograph - Vol Propionat Làm nóng mẫu acid sulfuric ; acid propionic nhận biết mùi đặc trưng Muối kiềm acid hữu Nung mẫu thử nhiệt độ tương đối thấp Cặn cịn lại có tính kiềm sủi bọt với acid 6.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng làm khô Thử theo JECFA monograph - Vol (sấy 105o giờ) Chất không tan nước Cân g (chính xác đến mg) mẫu thử, cho vào cốc 100 ml thêm 50 ml nước Khuấy đến mẫu thử tan hoàn toàn Lọc qua chén lọc Gooch cân bì (cân xác đến 0,2 mg) Rửa cốc 20 ml nước Sấy khô chén lọc chứa phần không tan tủ sấy 60o đến khối lượng không đổi để nguôi bình hút ẩm, cân tính hàm lượng % Sắt - Thử theo JECFA monograph - Vol - Cân 0,5 g mẫu Sử dụng 2,5 ml dung dịch sắt chuẩn (25 g Fe) làm mẫu chứng Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích cơng cụ 6.3 Định lượng Cân khoảng g (chính xác đến mg) mẫu thử sấy khô 105o giờ, thêm 200 ml dung dịch acid phosphoric 50% Đun sôi giờ, thu lấy dịch cất Trong suốt q trình cất, trì thể tích dịch bình cất khoảng 200 ml cách bổ sung thêm nước qua phễu nhỏ giọt Chuẩn độ dịch cất với dung dịch natri hydroxyd N, sử dụng thị dung dịch phenolphtalein đến dung dịch bắt đầu có màu hồng nhạt bền 30 giây Mỗi ml dung dịch natri hydroxyd N tương đương với 96,06 mg C3H6NaO2 59 QCVN - 12 : 2010/BYT Phụ lục 21 YÊU CẦU KỸ THUẬT VÀ PHƢƠNG PHÁP THỬ ĐỐI VỚI NATRI THIOSULFAT Tên khác, số Sodium hyposulfite; INS 539 ADI = - 0,7 mg/kg thể trọng Định nghĩa Tên hóa học Natri thiosulfat Mã số C.A.S 7772-98-7 Cơng thức hóa học Na2S2O3.5H2O Khối lượng phân tử 248,17 Cảm quan Tinh thể không màu, bột tinh thể thô, chảy rữa khơng khí ẩm lên hoa nhiệt độ > 33o khơng khí khơ Chức Chất bảo quản, chống biến màu, chất chống oxy hóa, chất tạo phức kim loại Yêu cầu kỹ thuật 5.1 Định tính Độ tan Rất dễ tan nước, khơng tan ethanol Hoạt tính khử Phải có phản ứng khử đặc trưng Natri Phải có phản ứng đặc trưng natri Thiosulfat Phải có phản ứng đặc trưng thiosulfat 5.2 Độ tinh khiết Giảm khối lượng làm khô 32 - 37% (sấy 40-45o chân không 16 giờ) Sắt Không 10,0 mg/kg Selen Khơng q 5,0 mg/kg Chì Khơng q 2,0 mg/kg 5.3 Hàm lượng Na2S2O3 Khơng thấp 99,0% tính theo chế phẩm làm khô Phƣơng pháp thử 6.1 Định tính Hoạt tính khử Thêm vào ung dịch mẫu thử 1/10 giọt dung dịch iod (TS) Màu dung dịch iod Natri Thử theo JECFA monograph - Vol 60 QCVN - 12 : 2010/BYT Thiosulfat Thử theo JECFA monograph - Vol 6.2 Độ tinh khiết Sắt - Thử theo JECFA monograph - Vol - Sử dụng 0,5 ml dung dịch chuẩn sắt (5 g sắt) làm mẫu chứng Selen Thuốc thử Acid hydrocloric, hydrazin sulfat, dung dịch chuẩn selen (100 g Se/ml) Tiến hành thử Cân g 0,1 g mẫu thử, cho cốc 50 ml Cân g 0,1 g mẫu thử, cho cốc thứ hai, thêm 0,05 ml dung dịch chuẩn selen Thêm hai cốc: 10 ml nước, ml acid hydrocloric đun sôi để loại bỏ hết SO2; Sau thêm g hydrazin sulfat làm ấm dung dung dịch (trong cốc) để hịa tan hồn tồn Pha lỗng dung dịch nước đến đủ 50 ml cho vào ống Nessler, so màu hai dung dịch Màu hồng dung dịch mẫu nhạt màu dung dịch mẫu thêm chuẩn Chì - Thử theo JECFA monograph - Vol - Xác định kỹ thuật quang phổ hấp thụ nguyên tử thích hợp cho hàm lượng qui định Lựa chọn cỡ mẫu thử phương pháp chuẩn bị mẫu dựa nguyên tắc phương pháp mô tả JECFA monograph - Vol phần phương pháp phân tích công cụ 6.3 Định lượng Cân khoảng khoảng 0,5 g (chính xác đến mg) mẫu thử Hịa tan 30 ml nước Chuẩn độ với dung dịch iod 0,1 N, dùng thị dung dịch hồ tình bột (TS) Tiến hành làm mẫu trắng song song Mỗi ml dung dịch iod 0,1 N tương đương với 15,81 mg Na2S2O3 61 ... I QUY ĐỊNH CHUNG Phạm vi điều chỉnh Quy chuẩn kỹ thuật quốc gia (sau gọi tắt Quy chuẩn) quy định yêu cầu kỹ thuật quản lý chất lượng, vệ sinh an toàn chất bảo quản sử dụng với mục đích làm phụ. .. hành theo Thơng tư số 44/2010/TT-BYT ngày 22 tháng 12 năm 2010 Bộ trưởng Bộ Y tế QCVN - 12 : 2010/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT BẢO QUẢN National technical regulation... mã số quốc tế phụ gia thực phẩm QCVN - 12 : 2010/BYT II YÊU CẦU KỸ THUẬT, PHƢƠNG PHÁP THỬ VÀ LẤY MẪU Yêu cầu kỹ thuật phương pháp thử chất bảo quản quy định phụ lục ban hành kèm theo Quy chuẩn