Đang tải... (xem toàn văn)
Xây dựng được quy trình phân đoạn cellulose bã mía bằng axit formic, thu nhận cellulose sạch (có hàm lượng cao) làm nguyên liệu cho sản xuất bioethanol. Nghiên cứu thủy phân và lên men cellulose bã mía phân đoạn nhằm đạt nồng độ cồn trong dịch lên men cao.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI NGÔ DUY SẠ NGHIÊN CỨU PHÂN ĐOẠN LIGNOCELLULOSE BÃ MÍA BẰNG AXIT FORMIC THU NHẬN CELLULOSE SỬ DỤNG LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT BIOETHANOL Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 62420201 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC Hà Nội - 2017 Cơng trình hồn thành tại: Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Tô Kim Anh TS Phạm Tuấn Anh Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án tiến sĩ cấp Trường họp Trường Đại học Bách khoa Hà Nội Vào hồi …… giờ, ngày … tháng … năm ……… Có thể tìm hiểu luận án thư viện: Thư viện Tạ Quang Bửu - Trường ĐHBK Hà Nội Thư viện Quốc gia Việt Nam DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ CỦA LUẬN ÁN Ngơ Duy Sạ, Phạm Tuấn Anh, Tô Kim Anh (2015) Ảnh hưởng trình rửa kiềm tới khả thủy phân cellulose bã mía phân đoạn formic acid Tạp chí Cơng nghệ sinh học, 13(2): p 345353 Ngo Duy Sa, Pham Tuan Anh, To Kim Anh (2016) Hydrolysis ability of the formic acid-fractionated bagasse and attempt to increase the glucose concentration in the hydrolysate for feasible cellulose ethanol production Journal of Science and Technology Technical Universities, 11: p 029-035 Ngo Duy Sa, To Kim Anh, Pham Tuan Anh (2016) Comparision study between separate and simultaneous hydrolysis and ethanol fermentation of formic fractionated sugarcane bagasse Journal of Science and Technology, 54 (2A): p 222-230 Ngo Duy Sa, To Kim Anh, Pham Tuan Anh (2014) PosterOptimization of sugarcane bagasse fractionation pretreatment using formic acid 3rd Escanber Workshop, Halong, 6/9/2014 MỞ ĐẦU 1.Lý chọn đề tài Lignocellulose loại vật liệu phổ biến trái đất có chứa hàm lượng cellulose cao (30-50%) Để sử dụng cellulose cho sản xuất sản phẩm có giá trị cao giấy cao cấp, loại sợi trắng, cellulose vi tinh thể… cần phải tách lignin, hemicellulose, thu riêng cellulose với hàm lượng cao Đối với sản xuất bioethanol sản phẩm lên men khác từ cellulose, để thủy phân được, cellulose cần tiền xử lý, mở cấu trúc cellulose, tạo điều kiện cho cellulase tiếp cận dễ dàng với chất, đồng thời tách lignin, hemicellulose, giúp loại bỏ ức chế lignin tới phản ứng thủy phân cellulose thành đường giảm tạo thành dẫn xuất lignin gây ức chế trình lên men sau Để đạt nồng độ đường cao dịch thủy phân, hàm lượng cellulose chất cần nâng cao tối đa Ở Việt Nam, lượng lignocellulose bã mía, phụ phẩm từ sản suất đường mía ước đạt 6-7 triệu tấn/năm, tập trung nhà máy, yếu tố thuận lợi lớn cho sử dụng nguồn sinh khối Phân đoạn cellulose bã mía cho phép thu cellulose có hàm lượng cao thủy phân lên men cách dễ dàng sử dụng cho nhiều mục đích có giá trị khác Góp phần giải vấn đề này, tiến hành “Nghiên cứu phân đoạn lignocellulose bã mía axit formic thu nhận cellulose sử dụng làm nguyên liệu sản xuất bioethanol” Đối tƣợng, phạm vi nghiên cứu - Đối tượng nghiên cứu: Bã mía, cellulose thu nhận từ bã mía kỹ thuật phân đoạn - Phạm vi nghiên cứu: Kỹ thuật phân đoạn cellulose bã mía axit formic; thủy phân cellulose bã mía phân đoạn thu được, nghiên cứu lên men ethanol từ cellulose bã mía Mục tiêu đề tài - Xây dựng quy trình phân đoạn cellulose bã mía axit formic, thu nhận cellulose (có hàm lượng cao) làm nguyên liệu cho sản xuất bioethanol - Nghiên cứu thủy phân lên men cellulose bã mía phân đoạn nhằm đạt nồng độ cồn dịch lên men cao Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu phân đoạn bã mía axit formic + Khảo sát điều kiện trình phân đoạn + Nghiên cứu tác động đồng thời điều kiện phân đoạn + Một số tính chất cellulose bã mía phân đoạn formiline - Nghiên cứu thủy phân cellulose bã mía phân đoạn axit formic + Ảnh hưởng nồng độ enzyme, nồng độ bã rắn tới hiệu suất thủy phân + Ảnh hưởng ức chế thủy phân cellulose glucose + Động học trình thủy phân cellulose bã mía phân đoạn thu + Thủy phân bã mía phân đoạn nồng độ bã rắn 20% - Nghiên cứu lên men ethanol từ cellulose bã mía phân đoạn axit formic + Khả lên men dịch thủy phân cellulose bã mía phân đoạn + Nghiên cứu nâng cao nồng độ ethanol dịch lên men hiệu suất thu hồi ethanol từ cellulose bã mía phân đoạn Ý nghĩa khoa học thực tiễn - Ý nghĩa khoa học: + Các kết luận án bổ sung thêm kiến thức trình phân đoạn cellulose từ nguyên liệu lignocellulose axit formic Luận án cung cấp sở khoa học cho lựa chọn kỹ thuật phân đoạn bã mía axit formic + Cung cấp sở khoa học cho lựa chọn kỹ thuật thủy phân lên men ethanol từ cellulose bã mía phân đoạn axit formic đạt hiệu suất thu hồi ethanol cao - Ý nghĩa thực tiễn: + Kết nghiên cứu cho phép phát triển sản xuất cellulose bã mía, ứng dụng làm vật liệu nguyên liệu cho sản phẩm sinh học nâng cao giá trị phụ phẩm bã mía + Kết nghiên cứu sở cho phát triển công nghệ sản xuất bioethanol từ bã mía Việt nam Đóng góp luận án - Đánh giá tác động đồng thời điều kiện phân đoạn xây dựng mơ hình ảnh hưởng điều kiện phân đoạn đến hiệu phân đoạn cellulose bã mía axit formic, đánh giá ảnh hưởng điều kiện rửa kiềm đến hàm lượng lignin, hiệu suất thủy phân cellulose bã mía phân đoạn - Là nghiên cứu Việt Nam sử dụng axit formic để phân đoạn bã mía thu cellulose Q trình phân đoạn bã mía theo chế độ lựa chọn cho phép thu cellulose có độ 90,02±1,47%, thủy phân với hiệu suất 90,04±0,53% glucan; dịch thủy phân lên men dễ dàng, hiệu suất lên men đạt 90,34±1,19% - Cellulose bã mía phân đoạn chuyển hóa thành ethanol đạt hiệu suất thu hồi 81,66 ±1,88%, nồng độ ethanol dịch lên men SSF đạt 82,46±3,42 g/L (>10% v/v), tiếp cận yêu cầu công nghiệp sản xuất ethanol Cấu trúc luận án - Chương Tổng quan tài liệu - Chương Vật liệu, phương pháp nghiên cứu - Chương Kết nghiên cứu thảo luận - Kết luận kiến nghị CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU Sản xuất bioethanol gồm công đoạn chính: Tiền xử lý sinh khối lignocellulose, thủy phân cellulose lên men tạo ethanol Quá trình tiền xử lý (TXL) coi bước có vai trị định, có tác động lớn đến tất bước tồn q trình Các phương pháp TXL cho phép thu cellulose có khả thủy phân dễ dàng enzyme Tuy vậy, phương pháp TXL có đặc điểm riêng Một số phương pháp thủy nhiệt, nổ hơi, TXL axit, làm làm hòa tan hemicellulose phá vỡ liên kết lignin-carbonhydrate Bã thu từ biện pháp TXL có hàm lượng lignin lớn Biện pháp TXL kiềm cho phép hòa tan loại bỏ lignin làm cắt ngắn thủy phân lignin tạo thành nhiều sản phẩm gây ức chế hoạt động nấm men, khả loại bỏ hemicellulose kiềm hạn chế Một số phương pháp TXL phân đoạn dung mơi, TXL dung dịch ion lỏng, giúp hịa tan loại bỏ hồn toàn lignin khỏi cấu trúc lignocellulose cho phép thu cellulose với hàm lượng cao nhờ cho phép đạt nồng độ đường cao dịch thủy phân, giúp giảm chi phí q trình sản xuất nói chung, đặc biệt chi phí q trình chưng cất Q trình phân đoạn dung mơi, dung mơi thu hồi tái sử dụng giúp giảm chi phí sản xuất, thân thiện với môi trường Thủy phân cơng đoạn có vai trị đặc biệt quan trọng, để thương mại hóa sản xuất ethanol từ lignocellulose, thủy phân cần phải tạo dịch đường có nồng độ đường đủ lớn Điều đạt dễ dàng với bã có hàm lượng cellulose cao Lên men dịch thủy phân cellulose bị ảnh hưởng chất ức chế tạo thành q trình TXL Đã có nhiều cơng trình nghiên cứu phân đoạn bã mía axit formic đạt kết khả thi với hiệu suất thu hồi ethanol hấp dẫn, nhiên ảnh hưởng tương tác tác nhân điều kiện phân đoạn chưa làm rõ Bên cạnh động học trình thủy phân lên men dịch thủy phân trình lên men thủy phân đồng thời nguyên liệu cho mục tiêu thu nhận ethanol nồng độ cao chưa khảo sát chi tiết CHƢƠNG II VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu nghiên cứu - Bã mía: Bã mía từ nhà máy đường Lam Sơn- Thanh Hóa sấy đến độ ẩm 8- 10%, nghiền tới mm mm, tách bỏ phần mùn vụn - Enzyme: NS 22192 Novozyme, Đan Mạch 160 FPU/ml; Cellic Ctec 2, Novozyme, 238 FPU/ml - Nấm men: S cerevisiae Ethanol Red®, Fermentis, Pháp, hiệu suất ethanol đạt 94% (0,48g/g glucose) 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.2.1 Phương pháp phân tích - Xác định độ ẩm bã - Phân tích thành phần bã mía (lignin, carbohydrate) - Xác định hàm lượng tro - Xác định số kết tinh cellulose - Chụp FESEM cấu trúc bề mặt bã mía - Xác định hàm lượng formic - Xác định hàm lượng đường khử Axit dinitrosalicylic - Xác định hàm lượng glucose - Xác định hàm lượng xylose, arabinose, galactose - Xác định hoạt độ FPU - Xác định hàm lượng ethanol - Đánh giá tăng trưởng nấm men 2.2.2 Thiết kế thí nghiệm Phân đoạn: Cân bã (7,5-20%) vào bình TXL hay thiết bị Parr, bổ sung axit formic (nồng độ 60-80%) đến tổng khối lượng mẫu, đậy nắp bình TXL Sau đó, bình TXL gia nhiệt (90-130ºC) để tiến hành trình phân đoạn, trì nhiệt độ yêu cầu thời gian phân đoạn Kết thúc phân đoạn, mẫu đem tách dịch rửa kiềm Tách dịch bã phân đoạn: Bã sau phân đoạn nguội có nhiệt độ 80ºC để dịch tự nhiên, ly tâm hay ép vắt đến để tách loại dịch TXL, rửa nước pH ép vắt đến độ ẩm 70-73% Rửa kiềm bã phân đoạn: Bã sau tách dịch trộn với dịch kiềm 0,5% với tỉ lệ bã/dịch kiềm 1/15 hay sử dụng tỉ lệ NaOH/ bã khô 0,05 0,1 g/g, tỉ lệ bã/nước rửa 1/10, xử lý nhiệt độ thời gian cần thiết xay bã máy xay dao cắt Philips HR2001 với thời gian phút để cắt nhỏ bã Bã sau rửa lại nước pH 7, ép vắt đến độ ẩm 70-73% Thủy phân: Cân bã mía ướt thu sau phân đoạn biết độ ẩm vào bình thủy phân Thêm đệm citrate (0,1 M, pH 4,8), 2% dung dịch 2% sodium azide 0,01% chloramphenicol theo thể tích (để ức chế vi sinh vật), nước theo yêu cầu Đưa bình thủy phân vào tủ ổn nhiệt, lắc 150 vòng/phút 30 phút để nâng nhiệt độ dịch thủy phân lên nhiệt độ thủy phân (30-50ºC) cho enzyme (5-64 FPU/g bã khô), thủy phân tiến hành thời gian 72-96 Lên men dịch thủy phân: Dịch thủy phân trùng (110ºC, 30 phút), để nguội nhiệt độ phòng bổ sung dinh dưỡng nấm men 0,01% chloramphenicol theo thể tích để ức chế phát triển vi khuẩn Bổ sung nấm men S cerevisiae (Ethanol Red®) (2 g/L) hoạt hóa với nước vơ trùng Lên men thực nhiệt độ 30ºC 72h Thủy phân lên men đồng thời (SSF) với bƣớc tiền thủy phân: Cho bã mía ướt (20% w/v) vào bình thủy phân Bổ sung dinh dưỡng trùng 121ºC 20 phút Làm nguội nhiệt độ phịng bổ sung chloramphenicol, enzyme (30 FPU/g bã khơ), đệm citrat (0,1M, pH 4,8) Tiền thủy phân thực 50ºC thời gian 6h 24h thiết bị thủy phân khuấy, tốc độ khuấy 90 v/ph để hóa lỏng mẫu Sau đó, bổ sung nấm men S cerevisiae (Ethanol Red®) (đã hoạt hóa với nước vơ trùng) SSF thực nhiệt độ 30ºC 37ºC Sau 24h, SSF chuyển sang thực tủ ổn nhiệt, tốc độ lắc 150 v/ph 96h CHƢƠNG KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 3.1 Phân đoạn cellulose bã mía axit formic 3.1.1 Thành phần bã mía nghiên cứu Kết phân tích thành phần bã mía cho thấy, bã mía sử dụng có thành phần: cellulose 39,91 ± 2,65%, hemicellulose 24,15 ± 2,97%, lignin 29,07 ± 1,44 % lignin tan axit 5,32 ± 0,2% Hàm lượng glucan (%) 100 50 76.71 63.92 86.4 56.79 90.64 67.44 33.17 90 110 121 Nhiệt độ (0C) Hàm lượng Glucan (%) 100 73.9780 60 40 20 Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) 3.1.2 Ảnh hưởng điều kiện phân đoạn đến hàm lượng glucan bã sau phân đoạn tỷ lệ lignin loại bỏ 3.1.2.1 Ảnh hưởng nhiệt độ 130 Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) Hình 3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ tới khả phân đoạn cellulose bã mía axit formic (Thí nghiệm thực với axit formic 70%, thời gian 60 phút.) Nhiệt độ có ảnh hưởng mạnh tới hàm lượng glucan bã sau phân đoạn tỉ lệ lignin loại bỏ Tỷ lệ lignin loại bỏ tăng mạnh nhiệt độ tăng từ 110ºC lên 121ºC (tăng tương ứng 9,69 10,56%) so với nhiệt độ tăng từ 121ºC lên 130ºC (tăng tương ứng 4,24 6,53%) 3.1.2.2 Ảnh hưởng thời gian phân đoạn 100 80 60 40 20 83.58 86.4 68.59 80 60 40 20 89.76 72.3 67.44 Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) Hàm lượng glucan (%) Thời gian có ảnh hưởng khơng lớn tới kết phân đoạn Thời gian từ 10 tới 90 phút hàm lượng glucan tỉ lệ lignin loại bỏ tăng đáng kể từ 83,58 68,59% lên 89,76 72,3% Tuy nhiên thời gian phân đoạn tăng từ 10 lên 60 phút, kết khác biệt không nhiều 10 60 90 Thời gian phân đoạn (phút) Hàm lượng Glucan (%) Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) Hình 3.2 Ảnh hưởng thời gian tới khả phân đoạn cellulose bã mía axit formic (Thí nghiệm thực với axit formic 70%, nhiệt độ 121ºC) 3.1.2.3 Ảnh hưởng kích thước bã Kích thước bã có ảnh hưởng khơng rõ ràng tới kết phân đoạn Tăng kích thước bã nguyên liệu từ 1mm lên 7mm làm hàm lượng glucan giảm nhẹ từ 86,60% cịn 84,51% Trong đó, tỉ lệ lignin loại bỏ lại tăng nhẹ từ 67,38% lên 71,30% 3.1.2.4 Ảnh hưởng khuấy trộn Khuấy trộn có ảnh hưởng khơng rõ ràng tới hiệu phân đoạn Hàm lượng glucan bã có xu hướng tăng nhẹ tăng tốc độ khuấy trộn, nhiên mức tăng khơng đáng kể Trong mức loại bỏ lignin lại cho thấy xu hướng giảm nhẹ tăng tốc độ khuấy 100 80 60 40 20 81.9 86.4 90.56 84.58 67.44 61.97 60 70 Nồng độ formic (%) Hàm lượng Glucan (%) 100 80 60 40 20 Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) Hàm lượng glucan (%) 3.2.2.5 Ảnh hưởng nồng độ formic Tăng nồng độ formic dùng cho phân đoạn, hàm lượng glucan bã phân đoạn tỉ lệ lignin loại bỏ tăng 80 Tỉ lệ lignin loại bỏ (%) Hình 3.3 Ảnh hưởng nồng độ formic tới khả phân đoạn cellulose bã mía Lignin hòa tan (g/L) (Phân đoạn thực nhiệt độ 121ºC thời gian 60 phút.) 160 120 80 40 72.4 71.64 62 103.8 66 70 74 78 Nồng độ formic (%) 135.34 82 Hình 3.4 Khả hịa tan lignin bã mía thu hồi từ dịch phân đoạn axit formic nồng độ formic khác 4.1 Đƣờng chuẩn phân tích hàm lƣợng đƣờng khử theo phƣơng pháp DNS 1.2 y = 0.9674x - 0.0059 R² = 0.9947 OD 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 Hàm lƣợng đƣờng khử (g/L) Phƣơng pháp dựng: 300 µl dung dịch có nồng độ glucose từ đến 1g/L (sử dụng glucose phân tích Sigma, độ tinh khiết 99,5%) đƣợc trộn với 600 µl thuốc thử DNS để phản ứng xảy nhiệt độ 95-1000C thời gian phút làm nguội nhiệt độ phòng Tiến hành đo OD dịch phản ứng bƣớc sóng 540 nm máy so màu UV/Visible GeneQuat 1300 Hàm tuyến tính OD hàm lƣợng đƣờng khử dung dịch đƣợc xây dựng sử dụng đồ thị tuyến tính XY Scatter excel 4.2 Đƣờng chuẩn phân tích hàm lƣợng glucose D glucose GOD-POD kit Phƣơng pháp dựng: Lấy 150 µl thuốc thử GOD-POD vào giếng phản ứng lấy lƣợng xác 15 µl dịch có nồng độ glucose từ đến 1g/L (sử dụng glucose phân tích Sigma, độ tinh khiết 99,5%) vào giếng phản ứng, trộn Để phản ứng xảy nhiệt độ 40-500C thời gian 20 phút điều kiện tối Kết thúc phản ứng, tiến hành đo OD bƣớc sóng 510 nm, sử dụng hệ thống đọc khay vi thể Synergy HT Multi-Mode Microplate Reader 1.4 y = 1.1889x + 0.0662 R² = 0.9988 1.2 OD 0.8 0.6 OD 0.4 0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 Hàm lƣợng glucose (g/L) 20 4.3 Đƣờng chuẩn phân tích hàm lƣợng gluocse, hàm lƣợng ethanol HPLC Các đƣờng chuẩn phân tích hàm lƣợng gluocse, hàm lƣợng ethanol đƣợc mơ tả với kết phân tích PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHÂN TÍCH THÀNH PHẦN CÁC MẪU BÃ MÍA 5.1 Kết phân tích HPLC thành phần bã mía - Đƣờng chuẩn HPLC xác định thơng số thành phần bã mía 21 - Kết phân tích bã mía thơ Hàm lƣợng Glucan 39,91%, lignin 29,07%, hemicellulose 24,15 % 22 - Kết phân tích mẫu Run Phân đoạn tiến hành với chế độ: nhiệt đô 110°C, thời gian 50 phút, nồng độ formic 70% Hàm lƣợng Glucan 79,56%, hemicellulose 1,21% 23 - Kết phân tích mẫu Run Phân đoạn tiến hành với chế độ: nhiệt đô 130°C, thời gian 50 phút, nồng độ formic 60% Hàm lƣợng Glucan 82,73 %, hemicellulose 0% - Kết phân tích mẫu Run Phân đoạn tiến hành với chế độ: nhiệt đô 90°C, thời gian 50 phút, nồng độ formic 70% Hàm lƣợng Glucan 63,92%, hemicellulose 10,47% 24 - Kết phân tích mẫu Run 10 Phân đoạn tiến hành với chế độ: nhiệt đô 130°C, thời gian 90 phút, nồng độ formic 80% Hàm lƣợng Glucan 92,28%, hemicellulose 0% 25 5.2 Kết phân tích hàm lƣợng cellulose Viện Công nghiệp giấy xenluylô (theo phƣơng pháp Kürschner-Hoffer - sử dụng axit nitric rƣợu tác nhân phản ứng để tách loại lignin, hemicellulose) 26 PHỤ LỤC ẢNH CHỤP MẪU THỦY PHÂN, LÊN MEN 6.1 Ảnh chụp hiển vi sợi cellulose trình thủy phân 0h 48h 200h 6.2 Ảnh chụp mẫu thí nghiệm thủy phân 0h 96h - Ảnh mẫu thủy phân feed batch 27 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 20%- feed lần 0h 48h 72h - Ảnh chụp mẫu thủy phân thiết bị khuấy trộn 28 0h PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHÂN TÍCH HÀM LƢỢNG ETHANOL 7.1 Đƣờng chuẩn xác định hàm lƣợng ethanol 29 7.2 Kết phân tích hàm lƣợng ethanol - Khả lên men dịch thủy phân - đối chứng (glucose) 30 - Khả lên men dịch thủy phân - đối chứng 48h 31 - Khả lên men dịch thủy phân - đối chứng 72 - Khả lên men dịch thủy phân - 32 - Khả lên men dịch thủy phân - 48 - Khả lên men dịch thủy phân - 72 33 - Kết lên men SSF- mẫu SSF với tiền thủy phân 50°C, nhiệt độ lên men 37°C, tổng thời gian 96 - Kết lên men SSF- mẫu SSF với tiền thủy phân 50°C, nhiệt độ lên men 30°C, tổng thời gian 96 34 ... SẠ NGHIÊN CỨU PHÂN ĐOẠN LIGNOCELLULOSE BÃ MÍA BẰNG AXIT FORMIC THU NHẬN CELLULOSE SỬ DỤNG LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT BIOETHANOL Chuyên ngành: Công nghệ sinh học Mã số: 62420201 LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG... ? ?Nghiên cứu phân đoạn lignocellulose bã mía axit formic thu nhận cellulose sử dụng làm nguyên liệu sản xuất bioethanol? ?? ĐỐI TƢỢNG, PHẠM VI NGHIÊN CỨU - Đối tƣợng nghiên cứu : Bã mía, cellulose thu nhận. .. HÀ NỘI NGÔ DUY SẠ NGHIÊN CỨU PHÂN ĐOẠN LIGNOCELLULOSE BÃ MÍA BẰNG AXIT FORMIC THU NHẬN CELLULOSE SỬ DỤNG LÀM NGUYÊN LIỆU SẢN XUẤT BIOETHANOL LUẬN ÁN TIẾN SĨ CÔNG NGHỆ SINH HỌC HÀ NỘI - 2017