Nghiên cứu được thực hiện với mục tiêu xác định giá trị của các phương pháp quan sát trực tiếp (QSTT), Kato-Katz (KK), Sasa (SS) trong chẩn ñoán nhiễm giun móc, giun lươn ở học sinh cấp 1 & 2 huyện Củ Chi, Tp. HCM. Nghiên cứu tiến hành trên 2.778 trẻ học cấp 1 & 2 huyện Củ Chi, TP. HCM
GIÁ TRỊ CỦA CÁC KỸ THUẬT QUAN SÁT TRỰC TIẾP, KATO – KATZ VÀ SASA TRONG CHẨN ĐOÁN NHIỄM GIUN MÓC, GIUN LƯƠN Nhữ Thị Hoa*, Nguyễn Kiều Trinh*, Nguyễn Thế Hùng*, Hồ Thanh Phong* TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu : xác ñịnh giá trị phương pháp quan sát trực tiếp (QSTT), Kato-Katz (KK), Sasa (SS) chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn học sinh cấp & huyện Củ Chi, Tp HCM Phương pháp : nghiên cứu ñược tiến hành theo thiết kế mô tả cắt ngang 2.778 trẻ học cấp & huyện Củ Chi, TP HCM ñược chọn từ phương pháp mẫu cụm bậc (cụm = xã) Mỗi mẫu phân ñược xét nghiệm quan sát trực tiếp, Kato-Katz, cấy phân Sasa so sánh với tiêu chuẩn vàng tập hợp hội kết dương tính ba kỹ thuật giun móc, hai kỹ thuật quan sát trực tiếp Sasa ñối với giun lươn Độ nhạy (Sp), giá trị tiên đốn âm (PV–), trung bình thời gian tiêu biến trứng, tỉ lệ nhiễm, trung bình cường độ nhiễm phân tích Stata 8.0 ở mức tin cậy 95%, OR[KTC 95%] Kết : tỉ lệ nhiễm trung bình nhân số trứng gram phân 33,87% 3,89 [3,5 – 4,3] với mức độ nhiễm trung bình-nặng 4,52% Nhìn chung, chẩn đốn giun móc, QSTT, KK SS có độ nhạy 40,4%, 68,9%, 56,4% giá trị tiên đốn dương 76,6%, 86,2%, 81,8% Trong cộng ñồng nhiễm nhẹ, KK nhạy gấp 2,38 1,40 lần QSTT SS; phối hợp, cặp KK-SS KK-QSTT cho kết cao SS-QSTT 1,57 2,17 lần Ở nhóm nhiễm nặng, QSTT SS phát giun móc mạnh gấp KK 3,08 lần lần; cặp SS-QSTT hiệu 5,91 4,26 lần so với cặp KK-QSTT KK-SS Thời gian thích hợp để đọc tiêu KK sau chuẩn bị hoàn tất 30 – 45 phút, vượt quá, trứng tiêu biến theo dạng tiêu phôi (75,53%) teo nhỏ (27,47%) Đối với giun lươn, cấy phân SS nhạy QSTT 9,6 [3,84 – 30,9] lần (21,3% so với 91,8%) Kết luận kiến nghị : mẫu khảo sát thuộc cộng đồng nhiễm giun móc nhóm III nhiễm giun lươn nhẹ Phối hợp QSTT mẫu phân cố ñịnh với kỹ thuật KK lựa chọn ưu tiên ñể phát bệnh vùng nội dịch giun móc giun lươn Việt Nam Ở bệnh viện, nên khuyến cáo sử dụng cấy phân Sasa ñối với ñịa cần ñiều trị corticoides kéo dài nghi ngờ bị nhiễm giun lươn Thời gian tối ưu từ lúc chuẩn bị hoàn tất tiêu KK ñến ñược phép ñọc 30 – 45 phút với điều kiện nhiệt độ phòng khoảng 28oC – 29oC ABSTRACT ACCURACY OF DIRECT SMEAR, KATO-KATZ AND SASA TECHNIQUES IN THE DIAGNOSIS OF HOOKWORM AND STRONGYLOIDES STERCORALIS INFESTATION Nhữ Thị Hoa*, Nguyễn Kiều Trinh*, Nguyễn Thế Hùng*, Hồ Thanh Phong* Objective: to determine accuracy of the three techniques: direct smear (DS), Kato-Katz (KK) and Sasa (SS) in the detection of hookworm and Strongyloides stercoralis infestation among primary and secondary schoolchildren of Cu Chi district, HCM city in 2007 Methods: a cross-sectional descriptive study was conducted among 2,778 primary & secondary schoolchildren of Cu Chi district, HCM city in 2007 The subjects were chosen via one-step cluster sampling (with commune as cluster) and diagnosed for hookworm infestation and Strongyloidiasis via direct smear, Kato-Katz and Sasa methods These techniques were compared to the gold standard which was defined when at least one of the three techniques indicated possitive results in case of hookworms, and when DS and/or SS indicated positive results in case of eelworm Sensitivity, negative predictive value, mean degeneration time of hookworm egg, prevalence, mean of eggs per gram of feces were analysed with Stata 8.0 Results : hookworm prevalence is 33.87%, and geometric mean of eggs per gram of feces is 3.89 [3.5 – 4.3], with 4.52% cases as moderate and severe infestations Overall for hookworm, sensitivities of DS, KK, SS are 40.4%, 68.9%, 56.4%, respectively, and negative predictive values are 76.6%, 86.2%, 81.8%, respectively In light hookworm infestation, the sensitivity of KK is 2.38 and 1.40 times as high as that of DS and SS, respectively, therefore, the combinations of KKSS, KK-DS will detect hookworm more frequently than SS-DS combination 1.57 and 2.17 times, respectively In severe infestation, DS and SS are 3.08 and times as sensitive as KK, respectively; combination of SS-DS is 5.91 and 4.26 times as sensitive as than combinations of KK-DS and KK-SS, respectively It is more appropriate to wait for 30-45 minutes before reading the KK smear; if the standing time is longer, degeneration of eggs will appear in two forms: eggs * Bộ Môn Ký sinh Trùng – Vi Nấm Học, Trường Đại Học Y Khoa Phạm Ngọc Thạch, TP HCM 37 with destroyed embryo (75.53%) or atrophied eggs (27.47%) For Strongyloides stercoralis, the prevalence is 2.20%, SS technique is 9.6 [3,84 – 30,9] times as sensitive as DS (21.3% vs 91.8%) Conclusions and recommendations: the studied subjects belong to hookworm infested community of group III and light S stercoralis infested community Combination of DS-KK is the first-choice method for detection in endemic area of hookworm and S stercoralis in Viet Nam In hospital, Sasa technique should be recommended for patients under corticosteroid therapy with suspect S stercoralis infestation The optimal standing time before reading KK smear is 30 – 45 minutes at 28oC – 29oC ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh giun móc giun lươn vấn đề sức khỏe cần quan tâm tính phổ biến tác hại bệnh Nhiễm giun móc gây thiếu máu thiếu sắt, dẫn ñến chậm phát triển tâm thần vận ñộng trẻ em, gây sẩy thai, sanh non phụ nữ mang thai Đối với giun lươn, không ñiều trị, chu trình tự nhiễm tạo ñiều kiện cho bệnh tồn suốt ñời sống ký chủ thể giảm sức ñề kháng, mầm bệnh xâm lấn nhiều quan, đe dọa tính mạng bệnh nhân, sử dụng corticoid dài ngày Trên giới, khoảng 900 triệu người nhiễm giun móc, 100 – 200 triệu người nhiễm giun lươn [17] Tại Việt Nam, nhiễm giun móc dao động từ 3% – 70% [4], chưa có khảo sát qui mơ bệnh giun lươn toàn quốc Củ Chi, huyện ngoại thành Tp HCM, chủ yếu ñất nơng nghiệp, điều kiện thổ nhưỡng hành vi nguy cộng đồng thích hợp cho giun móc, giun lươn tồn : khoảng 33,86% – 48,2% dân cư dương tính với giun móc [1,12] 2% – 12,6% nhiễm giun lươn[7,8] Hiện nay, chương trình phòng chống giun sán ñang ñược triển khai diện rộng, việc ñánh giá trước sau can thiệp cần phải có kỹ thuật xét nghiệm phù hợp: ñộ nhạy cao, giá thành rẻ thực dễ dàng, tiện lợi Một số kỹ thuật ñáng tin cậy cấy phân dĩa thạch, ELISA, PCR…, nhiên, giá thành ñắt khơng khả thi điều tra dịch tễ Tổ chức Y Tế Thế Giới (TCYTTG) khuyến cáo sử dụng phương pháp Kato-Katz (KK) để đánh giá nhiễm giun móc cộng đồng khả định lượng mật độ nhiễm, chi phí phù hợp[3,10], nhiên, phải xét nghiệm sau thu thập mẫu phân phát giun lươn Kỹ thuật cấy Sasa (SS) tầm sốt loại giun này, độ nhạy cao, phức tạp đòi hỏi thời gian[7,15,16] Kỹ thuật đơn giản, tốn kém, chủ động thời gian quan sát trực tiếp (QSTT) mẫu phân ñã cố ñịnh lại nhạy hơn[5,9,14] Vì vậy, vấn ñề ñặt khác biệt giá trị quan sát trực tiếp, Kato-Katz SaSa chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn nào? Từ lựa chọn phương pháp xét nghiệm phù hợp cộng ñồng, hỗ trợ cho việc thực chương trình can thiệp MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác ñịnh giá trị phương pháp quan sát trực tiếp, Kato-Katz, Sasa chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn học sinh cấp & huyện Củ Chi, Tp HCM năm 2007 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nghiên cứu ñược tiến hành theo thiết kế mô tả cắt ngang trẻ học cấp & huyện Củ Chi, TP HCM Các ñối tượng khảo sát ñược chọn từ phương pháp mẫu cụm bậc (cụm = xã) với số lượng ≥ 712 (= 356 x 2) học sinh dựa cơng thức tính cỡ mẫu ñể ước lượng tỉ lệ mức tin cậy 95%, sai số cho phép 5% p tham khảo ñộ nhạy phương pháp chẩn đốn giun móc (QSTT : 63,67%; KK: 81,5%; SS : 86,7%)[3,7], giun lươn (QSTT : 27,03%; SS : 80,09%)[7,16] Tiêu chuẩn vàng tập hợp hội kết dương tính ba kỹ thuật giun móc, hai kỹ thuật QSTT SS giun lươn; đó, độ đặc hiệu xét nghiệm ñều 100% Độ nhạy (Sp), giá trị tiên đốn âm (PV–) , trung bình thời gian tiêu biến trứng, tỉ lệ nhiễm, trung bình cường độ nhiễm phân tích Stata 8.0 với kiểm định chi bình phương, kiểm định McNemar Trình bày kết dạng bảng, biểu KẾT QUẢ Đặc ñiểm mẫu nghiên cứu Bảng 1: ñặc ñiểm mẫu nghiên cứu Tần số Tỉ lệ (%) Dân số học Giới Nam 1.333 47,98 Nữ 1.445 52,02 Cấp lớp Cấp 2.037 73,33 Cấp 741 26,67 38 Giun lươn Nhiễm Có 61 2,20 Khơng 2.717 97,80 Giun móc Nhiễm Có 941 33,87 Khơng 1.837 66,13 Mức ñộ Nhẹ 530 19,08 TB – nặng 118 4,52 * Trung bình nhân EPG 3,89 [3,5 – 4,3] * EPG (eggs per gram) : số trứng/gram phân Tổng số mẫu nghiên cứu 2.778 mẫu, nữ nhiều nam, ña số trẻ học cấp 1, thuộc nhóm nhiễm nhẹ giun móc giun lươn Giá trị phương pháp chẩn đốn nhiễm giun móc Bảng 2: Sp, PV– phương pháp QSTT, Kato-Katz Sasa chẩn đốn giun móc TC vàng PV- [KTC Se [KTC 95%] 95%] (+) (-) Trên toàn mẫu nghiên cứu QSTT 380 ( 561 1.837 +) 40,4[37,2–43,6] 76,6[74,9–78,3] ( –) KK 648 ( 293 1.837 +) 68,9[65,8–71,8] 86,2[84,7–87,7] ( –) Sasa 531 ( 410 1.837 +) 56,4[53,2–59,6] 81,8[80,1–83,3] ( –) Trên cộng ñồng nhiễm nhẹ QSTT 313 ( 510 1.837 +) 38,0[34,7–41,4] 78,3[76,5–79,9] ( –) KK 530 ( 293 1.837 +) 64,4[61,0–67,7] 86,2[84,7–87,7] ( –) Sasa 452 ( 371 1.837 +) 54,9[51,4–58,4] 83,2[81,6–84,7] ( –) Trên cộng ñồng nhiễm nặng QSTT 224 ( 187 1.837 54,5[49,5-59,4] 90,8[89,4-92,0] +) ( –) KK 118 28,7[24,4-33,3] 86,2[84,7-87,7] 39 ( 293 1.837 +) ( –) Sasa 274 ( 137 1.837 66,7[61,9-71,2] 93,1[91,8-94,1] +) ( –) Bảng 3: so sánh Sp phương pháp theo mức độ nhiễm giun móc Phương Giun móc OR [KTC 95%] pMcNemar pháp (+) (-) Trên cộng ñồng nhiễm nhẹ KK 530 2.130 2,38 [1,97–2,88] 0,000 QSTT 313 2.347 KK 530 2.130 1,40 [1,16–1,69] 0,000 Sasa 452 2.208 Sasa 452 2.208 1,87 [1,58–2,22] 0,000 QSTT 313 2.347 Trên cộng ñồng nhiễm nặng QSTT 224 2.024 3,08 [2,23 – 4,30] 0,000 KK 118 2.130 Sasa 274 1.974 5,00 [3,53 – 7,24] 0,000 KK 118 2.130 Sasa 274 1.974 1,44 [1,12 – 1,84] 0,003 QSTT 224 2.024 Khả phát giun móc nhóm nhiễm nhẹ KK cao QSTT SS 2,38 1,40 lần, nhóm nhiễm nặng, SS QSTT thể tỉ lệ nhiễm giun móc cao gấp lần 3,08 lần so với KK Bảng 4: ñộ nhạy giá trị tiên đốn âm phối hợp hai phương pháp Phương TC vàng PV– [KTC Se [KTC 95%] pháp 95%] (+) (-) Trên toàn mẫu nghiên cứu KKQSTT 805 ( 136 1.837 85,6[83,1–87,7] 93,1[91,9– 94,2] +) ( –) KK-SS ( 843 +) 98 1.837 89,6[87,5–91,5] 94,9[93,9–95,9] ( –) SS-QSTT ( 705 +) 236 1.837 74,9[72,0–77,7] 88,6[87,2–89,9] ( –) Trên cộng ñồng nhiễm nhẹ KKQSTT 687 ( 136 1.837 83,5[80,8–85,9] 93,1[91,9–94,2] +) ( –) KK-SS 88,1[85,7–90,2] 94,9[93,9–95,9] 40 +) ( 725 98 1.837 ( –) SS-QSTT ( 610 +) 213 1.837 74,1[71–77,1] 89,6[88,2–90,9] ( –) Trên cộng ñồng nhiễm nặng KKQSTT 275 ( 136 1.837 66,9[62,1–71,4] 93,1[91,9–94,2] +) ( –) KK-SS ( 313 +) 98 1.837 76,2[71,7–80,2] 94,5[93,9–95,9] ( –) SS-QSTT ( 388 +) 23 1.837 94,9[91,7–96,4] 98,8[98,2–99,2] ( –) Bảng 5: so sánh Sp cặp phương pháp theo mức độ nhiễm giun móc Phương Giun móc OR [KTC 95%] pMcNemar pháp (+) (-) Trên cộng ñồng nhiễm nhẹ KK– 687 1.973 QSTT 610 2.050 1,57 [1,25 – 1,95] 0,000 SS– QSTT KK–SS 725 1.935 SS– 610 2.050 2,17 [1,70 – 2,78] 0,000 QSTT KK–SS 725 1.935 KK– 687 1.973 1,38 [1,06 – 1,81] 0,01 QSTT Trên cộng ñồng nhiễm nặng SS– 388 1.860 QSTT 275 1.973 5,91 [3,78 – 9,64] 0,000 KK– QSTT SS– 388 1.860 QSTT 313 1.935 4,26 [2,68 – 7,03] 0,000 KK–SS KK–SS 313 1.935 0,000 KK– 275 1.973 1,39 [ 1.6 – 1,81] QSTT Phối hợp KK-SS cho giá trị chẩn đốn giun móc mức độ nhiễm nhẹ cao 2,17 lần cặp SSQSTT 1,38 cặp KK-QSTT Trường hợp nhiễm nặng, SS-QSTT cho kết tốt cặp KKQSTT cặp KK-SS 5,91 lần 4,26 lần 41 40 30 Frequency 20 10 50 100 150 200 250 300 tg Biểu ñồ 1: phân bố thời gian tiêu biến trứng giun móc Thời gian tiêu biến trứng giun móc phân bố lệch Số trường hợp tiêu biến trứng sớm tập trung từ 50 phút ñến khoảng 125 phút Trung bình nhân thời gian tiêu biến trứng giun = 121,5 [114,4 – 127,7] phút Bảng 6: dạng tiêu biến trứng giun móc kỹ thuật Kato-Katz Dạng tiêu biến Tần số Tỉ lệ Thời gian tiêu biến trứng (n) (%) trung bình Dạng teo nhỏ 75/273 27,47 115,6 [101,7 – 131,6] Dạng tiêu phôi 198/273 75,53 123,9 [114,4 – 129,0] Dạng tiêu phôi chiếm ña số, thời gian bắt ñầu xuất trứng biến dạng ñều sau Giá trị phương pháp chẩn đốn nhiễm giun lươn Bảng 7: Sp PV– QSTT Sasa chẩn đốn nhiễm giun lươn TC vàng Se [KTC PV– [KTC (+ (-) 95%] 95%] ) QSTT 21,3 [11,9– 98,3 [97,7– (+) 98,7] 2.71 33,7] (–) Sasa (+) (–) 2.71 91,8 [81,9– 97,3] 99,8 [99,6– 99,9] 9,6 [3,84 – 30,9] p = 0,000 Độ nhạy SS cao QSTT 9,6 lần tầm sốt nhiễm giun lươn BÀN LUẬN Đặc điểm chung mẫu nghiên cứu Theo bảng 1, số học sinh tham gia nghiên cứu 2.778, ña số tập trung cấp (73,33%), nữ nhiều nam (52,02%) trẻ lớn phái nam thường ngại lấy phân Số liệu trái ngược với thống kê cấp lớp tháp dân số giới trẻ tồn huyện, ảnh hưởng phần đến khả khái qt hố tỉ lệ nhiễm, cường ñộ nhiễm cộng ñồng học sinh cấp & huyện Củ Chi Xét nghiệm mẫu phân phát 33,87% trường hợp nhiễm giun móc, trung bình nhân cường ñộ nhiễm 3,89 [3,5 – 4,3] trứng/gam phân 4,52% đối tượng nhiễm nặng, cho phép xếp quần thể nghiên cứu vào cộng ñồng nhiễm giun móc nhóm III [10] Về giun lươn, 2,2% mẫu dương tính, thấp kết xã Phú Mỹ Hưng năm 2004 (12,6%), xã Phú Hòa Đơng năm 2007 (9,2%)[7,8] Một phần mẫu khảo sát bao gồm nhóm tuổi lao động, nhóm nguy cao bệnh; phần tác giả phối hợp nhiều phương pháp chẩn đốn giun lươn đặc thù Baermann, cấy Harada Mori, cấy Sasa Giá trị phương pháp chẩn đốn nhiễm giun móc Khả phát giun móc xét nghiệm OR, pMcNemar 42 Bảng mơ tả độ nhạy tăng dần theo thứ tự: QSTT (40,4%), cấy SS (56,4%) KK (68,9%) Tuy nhiên khả phát phương pháp bị tác động mật độ nhiễm nên phân tích phân tầng phản ánh giá trị phương pháp cách xác Đối với quần thể nhiễm nhẹ, KK nhạy QSTT 2,38 lần (bảng 3), lượng phân sử dụng QSTT ít, giọt phân lam kính (khoảng 1mg/giọt), nên khả bỏ sót ký sinh trùng thường xảy Ngược lại, cường độ nhiễm giun móc nặng, độ nhạy QSTT lại cao KK 3,08 lần (bảng 3) Lượng trứng dày ñặc mẫu phân thu thập ñòi hỏi nồng ñộ oxy cao cho trứng sinh tồn; ñiều tra cộng ñồng, thời gian từ lúc học sinh lấy mẫu cho ñến mẫu ñược xét nghiệm kéo dài 24 giờ, lượng oxy hộp đựng phân khơng đủ làm trứng suy yếu Đồng thời tác dụng dung dịch glycerin tiêu KK, trứng dễ bị thoái hoá, khó phát quan sát Trong đó, mẫu QSTT ñược bảo quản dung dịch formol 10%, trứng ñược cố ñịnh, với mật ñộ cao, khả tìm thấy trứng nâng lên rõ rệt Theo Hồng Thị Kim, tỉ số chẩn đốn QSTT KK quần thể nhiễm nhẹ 9/26 [4] Xét nghiệm phân 100 người, Mohamed A.I phát 7% dương tính KK, so với QSTT ghi nhận 1% [9] Tuy Mohamed A.I khơng đánh giá cường độ nhiễm, nghề nghiệp ñối tượng nghiên cứu cho phép suy đốn họ khơng thuộc nhóm nhiễm nặng (nấu ăn nhà hàng, khách sạn, cửa hàng thực phẩm …) nên khả tiếp xúc thường xuyên với nguồn nhiễm thấp Có lẽ từ lập luận trên, năm 2007, Emmanue IO & al ñã ñưa phương pháp Odongo-Aginya dựa nguyên tắc KK chất màu malachite green ñược thay hỗn hợp dung dịch 7,5% nigrosin 10% formalin 5% vàng eosin 10% formalin theo tỉ lệ 1:1 nhằm khắc phục phá hủy trứng giun kỹ thuật KK, cố ñịnh ký sinh trùng, kể ấu trùng giun lươn[2] Khi so sánh cấy SS với QSTT, ñộ nhạy SS cao hẳn dù cường ñộ nhiễm nhẹ hay nặng (bảng 3) Lượng phân soi trực tiếp so với lượng phân lớn, khoảng gam, phương pháp cấy ñã dẫn ñến khác biệt Ngoài ra, việc quan sát cặn lắng sau ly tâm dung dịch cấy tăng hội nhận diện ấu trùng kính hiển vi Kết phù hợp với báo cáo Lê Đức Vinh, QSTT (63,67%) nhạy SS (86,17%)[7] Tương tự, kỹ thuật cấy Harada-Mori Komiya chẩn đốn 79,6% trường hợp nhiễm giun móc, cao 18,3% soi trực tiếp bệnh phẩm, chứng tỏ QSTT yếu cấy phân nói chung, SS nói riêng – kỹ thuật cải tiến từ Harada-Mori [5] Khi xét hiệu KK SS, bảng cho thấy cộng ñồng nhiễm nhẹ, tỉ lệ bệnh giun móc phát KK gấp 1,4 lần Sasa, ngược lại, với mức ñộ nhiễm nặng, Sasa phát dương tính mạnh KK lần Trong trình cấy, phân rớt xuống phần dung dịch, chất chuyển hóa phân làm thay ñổi pH, ức chế ấu trùng tồn tại, dẫn đến âm tính giả Bên cạnh đó, nhiều mẫu phân bị nhiễm trứng ñộng vật chân khớp, trẻ khơng sử dụng hố xí hợp vệ sinh hố xí xây dựng ngồi vườn, có nhiều trùng bay đến Khi nở canh cấy, ấu trùng ñộng vật chân khớp tiêu thụ chất bổ dưỡng phân kể trứng ấu trùng giun móc, làm ảnh hưởng đến kết đọc mẫu nhiễm nhẹ Trường hợp nhiễm nặng, ñã giải thích phần bàn luận kỹ thuật KK QSTT, trứng bị thối hố, đồng thời tác động glycerine, tiêu biến nhanh trước thời gian tối thiểu cho phép ñọc tiêu KK Đối với SS, lượng phân xét nghiệm nhiều hơn, nên dù bị tiêu thụ thối hố, số mầm bệnh tồn tại, phát sau tập trung Tuy nhiên, chưa tìm thấy ổn ñịnh ñánh giá hiệu KK SS y văn Syahril ghi nhận cộng ñồng nhiễm nặng, KK phát 109 trường hợp nhiễm giun móc so với 257 mẫu dương từ cấy phân SS [15] Ngược lại, theo Navitsky, KK xác ñịnh 78,8% số người nhiễm giun móc SS tìm thấy 66,1% [11] Do khơng tìm tồn văn báo nên khơng thể phân tích ngun nhân khác biệt Như vậy, giá trị, cấy phân SS ñứng thứ hai sau KK mật ñộ nhiễm nhẹ thứ cộng ñồng nhiễm nặng Tuy nhiên, SS đòi hỏi mẫu phân tươi, phải xét nghiệm sau thu thập, thao tác phức tạp, – ngày ñể trứng nở thành ấu trùng cần khơng gian để ủ mẫu cấy, đặc biệt số lượng mẫu nhiều, gây mùi khó chịu Tương tự, KK sử dụng phân tươi, thực qua nhiều cơng đoạn, cho kết sau khoảng nhờ khả ñịnh lượng mật ñộ nhiễm giun móc, nên TCYTTG khuyến cáo sử dụng kỹ thuật ñánh giá nhiễm giun móc cộng đồng, hỗ trợ cho chương trình can thiệp[10,17] QSTT mẫu phân cố ñịnh formol 10% F2AM (formol phenol bleu methylene) tiện lợi cho nghiên cứu cộng đồng với cỡ mẫu lớn ñơn giản chủ ñộng (có thể xét nghiệm lúc sau thu thập), an toàn cho xét nghiệm viên, hạn chế mùi khó chịu thao tác, cho kết nhanh chóng giá thành thấp Khả phát giun móc phối hợp xét nghiệm Tại mức ñộ nhiễm nhẹ, bảng cho thấy hai phức hợp KK-QSTT KK-SS phát giun móc mạnh 1,57 2,17 lần (p = 0,000) so với phức hợp SS-QSTT Vì mức ñộ nhiễm nhẹ, KK xét nghiệm tốt (như ñã phân tích trên) nên kết hợp KK với 43 phương pháp ñều vượt trội kết hợp SS với QSTT, kỹ thuật vốn có khả phát yếu Ở cá thể nhiễm nặng, cặp SS-QSTT vượt trội KK-QSTT KK-SS với OR 5,91 [3,78 – 9,64] 4,26 [2,68 – 7,03] (p = 0,000) kết hợp KK-QSTT hiệu lý trình bày phần bàn luận phương pháp Trần Thị Hồng nhận ñịnh phối hợp SS QSTT làm tăng khả phát giun móc, giảm tỉ lệ âm tính giả xuống 2,7 lần so với áp dụng soi trực tiếp ñơn thuần[16] Về giá trị tiên đốn âm, xét riêng phương pháp, SS có giá trị cao dù cường ñộ nặng nhẹ Khi phối hợp, bảng & phản ánh cặp SS-QSTT cho giá trị cao mức ñộ nặng mức ñộ nhiễm nhẹ, 89,6% số cao thực tế Thời gian tiêu biến trứng giun kỹ thuật KK Kỹ thuật KK tập trung trứng giun sán dựa vào lượng lớn phân tươi dàn trải diện tích nhỏ nên phết phân dày đặc, khó quan sát Dung dịch glycerine sử dụng với mục đích làm mơi trường phân để bộc lộ trứng giun, giúp nhận diện dễ dàng, sau thời gian phá hủy cấu trúc trứng, đặc biệt trứng giun móc Thời gian tiêu biến trứng giun móc phụ thuộc vào lượng dung dịch glycerine tẩm vào giấy cellophane, chất lượng trứng giun mạnh hay yếu, nhiệt độ phòng xét nghiệm, … [6,13] Vì vậy, phải đảm bảo thời gian tốt – từ lúc chuẩn bị ñến lúc ñọc tiêu – ñể quan sát trứng giun Theo y văn, thời gian tối thiểu ñể làm tiêu 20 – 30 phút [5] Biểu ñồ thể thời gian tiêu biến trứng dao ñộng khoảng 50 phút đến 330 phút với trung bình nhân 121,5 [114,4 – 127,7], tương ñương thời gian khuyến cáo TCYTTG, khoảng 60 – 120 phút [17] Như có trứng chịu đựng với hóa chất có trứng bền vững với dung dịch xét nghiệm Khả đề kháng mơi trường trứng giun móc tùy thuộc vào chủng loại giun móc Ngồi ra, yếu tố mật độ nhiễm góp phần vào chất lượng trứng đề cập phần Renee nhận ñịnh, bên cạnh glycerine mật độ trứng, điều kiện khí hậu tác ñộng phần Iquitos (Peru), nơi tác giả thực nghiên cứu, khí hậu nóng ẩm, nên tiêu ñược ñọc sau khoảng 25 phút ñể tránh tình trạng tiêu biến trứng giun[13] Theo biểu ñồ 1, thời gian tiêu biến tập trung nhiều giá trị 55 phút 125 phút Vì thế, để đảm bảo ñộ xác xét nghiệm, kết cho phép ñề nghị thời gian từ lúc tiêu KK ñược chuẩn bị hoàn tất ñến bắt ñầu ñọc 30 – 45 phút ñiều kiện nhiệt ñộ phòng khoảng 28 – 29oC Hai trạng thái tiêu biến trứng giun móc gặp khảo sát : i) dạng tiêu phơi : chiếm đa số (75,53%), trứng giữ hình tròn bầu dục, vỏ trứng căng mỏng phơi bào bị thối hố dần; ii) dạng teo nhỏ (27,7%): trứng méo mó, teo nhỏ, vỏ nhăn nheo phôi bào tồn (bảng 6) Giá trị phương pháp chẩn đốn nhiễm giun lươn Bảng chứng tỏ SS có độ nhạy 91,8%, cao soi trực tiếp (21,3%) gấp 9,6 lần, phù hợp với y văn lượng phân xét nghiệm nhiều, khả phát cao quan sát cặn sau ly tâm dung dịch tập trung ấu trùng Điều tra xã Phú Hòa Đơng xã Phú Mỹ Hưng (Củ Chi) tìm thấy 9,2% 9,9% cá thể nhiễm giun lươn cấy phân, QSTT chẩn đốn < 4% [7,8] Với tỉ lệ nhiễm > 5%, xã ñược kết luận vùng lưu hành nặng giun lươn, sử dụng phương pháp soi trực tiếp, vơ tình đánh giá sai tình hình nhiễm giun lươn địa phương, ảnh hưởng đến chiến lược phòng chống bệnh Một đánh giá nhóm bệnh nhân có biểu viêm dày tá tràng ñiều trị bệnh viện 115 ghi nhận tương tự, SS tầm sốt 8,7% mẫu dương tính, vượt trội tỉ lệ 2,5% soi trực tiếp [16] Mặc dù SS ñòi hỏi máy quay ly tâm thao tác cồng kềnh hơn, lựa chọn hàng ñầu chẩn đốn giun lươn, tránh bỏ sót trường hợp nhiễm bệnh có nguy chuyển biến trầm trọng, ñe dọa tính mạng bệnh nhân chức miễn dịch bị suy yếu Tóm lại, để tăng khả tầm soát trường hợp bệnh, phối hợp phương pháp cần thiết Ngoài ra, vùng nhiễm giun móc vùng dịch tễ giun lươn, ñó nên lựa chọn kỹ thuật có khả phát hai loại Cặp SS-QSTT ñáp ứng tốt với yêu cầu vừa nêu : ñạt hiệu tầm sốt giun lươn cao đồng thời chiếm ưu chẩn đốn giun móc cộng đồng nhiễm nặng, khơng có khả định lượng, khơng thể hỗ trợ chương trình kiểm sốt bệnh giun móc KK-SS phù hợp để đánh giá cụ thể xác tình trạng nhiễm giun móc nhẹ giun lươn, phối hợp tăng mức tốn kém, khó khăn vốn có phương pháp ñiều tra cộng ñồng Giá trị cặp KK-QSTT yếu KK-SS ñánh giá quần thể nhiễm giun móc nhẹ phát giun lươn Tuy vậy, i) giun lươn phổ biến giun móc (< 10% so với > 30%)[1,4,7,8,12]; ii) nhiễm giun móc tác hại mạnh đến phụ nữ có thai trẻ em, giun lươn gây biến chứng ñịa giảm miễn dịch sử dụng 44 corticosteroides dài ngày nguyên nhân khác; iii) biện pháp phòng ngừa nhiễm giun móc đồng thời giúp tránh nhiễm giun lươn; iv) ñiều trị ñại trà giun móc bao phủ phần đến giun lươn v) điều tra giun móc Việt Nam cho thấy tỉ lệ nhiễm nhẹ chiếm đa số[4,12]; đó, Việt Nam, phối hợp KK-QSTT tỏ thích hợp chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn cộng đồng Tại bệnh viện, cần tầm sốt nhanh nhiều loại ký sinh trùng (ñơn bào, giun, sán) nên QSTT bệnh phẩm cố ñịnh F2AM ñược sử dụng chủ yếu Dù vậy, nên khuyến cáo áp dụng cấy phân SS để phát xác nhiễm giun lươn trước tiến hành corticoides liệu pháp, ñặc biệt cá thể sống vùng dịch tễ bệnh KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ Mẫu khảo sát thuộc cộng ñồng nhiễm giun móc nhóm III nhiễm giun lươn nhẹ Phối hợp QSTT mẫu phân cố ñịnh với kỹ thuật KK lựa chọn ưu tiên để tầm sốt bệnh vùng nội dịch giun móc giun lươn Việt Nam Ở bệnh viện, nên khuyến cáo sử dụng cấy phân Sasa ñối với ñịa phải ñiều trị corticoides kéo dài nghi ngờ nhiễm giun lươn Thời gian tối ưu từ lúc chuẩn bị hoàn tất tiêu KK ñến ñược phép ñọc 30 – 45 phút nhiệt độ phòng khoảng 28oC – 29oC TÀI LIỆU THAM KHẢO Đoàn Hồng Ngọc, Bùi Thị Diệu Thanh, Ngơ Anh Trung (1999) Tìm hiểu tình hình nhiễm ký sinh trùng ñường ruột xã Thái Mỹ, huyện Củ Chi, TP.HCM Luận văn Tốt nghiệp Bác sĩ Y khoa, khóa 1993 – 1999, Trung tâm Đào Tạo & BDCB Y Tế TP.HCM Emmanuel I.O, Dongo Aginya, Narcis Kabatereine, Siefert Ludwig, HenryWabinga, Alan Fenwick, Antonio Montresor (2007) Substitution of Malachite Green with Nigrosin-Eosin Yellow Stain in the Kato-Katz method: microscopical appearance of the helminth eggs African Health Sciences, vol.7, No.1, March, p 33-36 Goodman D, Haji HJ, Bickle QD, et al (2007) A comparison of methods for detecting the eggs of Ascaris, Trichuris, and hookworm in infant stool, and the epidemiology of infection in Zanzibari infants Am J Trop Med Hyg; 76(4):725-31 Hoàng Thị Kim & cs (1998) Những kết nghiên cứu viện Sốt rét - Ký sinh trùng - Cơn trùng TƯ đặc điểm dịch tễ, chẩn đốn, điều trị phòng chống bệnh giun truyền qua đất Việt Nam Thơng tin phòng chống sốt rét bệnh ký sinh trùng, số 2, Viện sốt rét – KST – CT, Hà Nội, tr 9-12 Jitra Waikagul, Malinee Thairungroj (1999) Method used in detection of infection in living host Diagnosis Helminthology laboratory manual Larry K.M & Paul C.B (1968) Evaluation of Kato thick-smear technique for quantitative diagnosis of helminth infections Am J Trop Med Hyg., 17(3), 1968, p 382-391 Lê Đức Vinh, Ngụy Cẩm Huy, Nguyễn Minh Phước, Võ Thị Thanh Trà Điều tra tình hình nhiễm giun móc giun lươn phương pháp cấy phân cải tiến xã Phú Hồ Đơng huyện Củ Chi, TP.HCM từ tháng 7-2006 ñến tháng 7-2007 Tạp chí y học TP.HCM, tập 11, phụ số 2, tr 39-47 Lê Đức Vinh, Trần Thị Hồng (2005) Điều tra nhiễm Strongyloides stercoralis phương pháp xét nghiệm phân cải tiến xã Phú Mỹ Hưng huyện Củ Chi, TP.HCM từ tháng /2003 ñến tháng 7/2004 Tạp chí y học TP.HCM, tập 9, phụ số 4, tr 101-105 Mohamed Aidris, Ayda M Al-Jabri (2001) Usefulness of Kato-Katz and trichrome staining as diagnostic methods for parasitic infections in clinical laboratories SQU Juornal for scientific research: medical sciences 2001, vol:3, No:2, p 6568 Montresor A., Crompton D.W.T., Hall A., Bundy D.A.P., Savioli L Guidelines for evalution of soil-transmitted helminthiasis and Schistosomiasis at community level.WHO/CTD/SIP/98.1, p 7-33 Navitsky RC, Dreyfuss ML, Shrestha J, Khatry SK, Stoltzfus RJ, Albonico M (1998) Ancylostoma duodenale is responsible for hookworm infections among pregnant women in the rural plains of Nepal J Parasitol Jun;84(3):647-51 Nhữ Thị Hoa, Đặng Thị Thanh Tuyền, Thái Quang Tùng, Phùng Đức Thuận (2006) Hiệu ñiều trị giun móc Albendazole 400mg đơn liều xã Phạm Văn Cội, huyện Củ Chi, TR.HCM từ 7/2006 ñến 9/2006 Y Học TPHồ Chí Minh Tập 12 - số - 2008:92 - 97 Renee Larocque, Martin Casapia, Eduardo Gotuzzo, and Theresa W Gyorkos (2005) Relationship between intensity of soil-transmitted helminth infections and anemia during pregnancy Am J Trop Med Hyg., 73(4):783-789 Rina Girard de Kaminsky (1993) Evaluation of three methods for laboratory diagnosis of Strongyloides stercoralis J.Parasitol.,79(2):277-280 Syahril Pasaribu, Chairuddin P Lubis Diagnosis of hookworm infestation by using modified Kato-Katz thick smear http://library.usu.ac.id/modules.php?op=modload &name=Downloads&file =index&req=getit&lid=1195 Trần Thị Hồng (2007) Khả phát ký sinh trùng phối hợp kỹ thuật xét nghiệm phân bệnh nhân bị rối loạn tiêu hoá bệnh viện 115 từ 1/2/2003 ñến 1/2/2005 Tạp chí y học thành phố Hồ Chí Minh, tập 11, phụ số 2, tr 43-47 WHO How to set up a deworming programme Newsletter - Action against worms January 2004 Issue http://www.who.int/wormcontrol/newsletter/en 45 ... nhóm nhiễm nhẹ giun móc giun lươn Giá trị phương pháp chẩn đốn nhiễm giun móc Bảng 2: Sp, PV– phương pháp QSTT, Kato- Katz Sasa chẩn đốn giun móc TC vàng PV- [KTC Se [KTC 95%] 95%] (+) (-) Trên... chương trình can thiệp MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU Xác ñịnh giá trị phương pháp quan sát trực tiếp, Kato- Katz, Sasa chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn học sinh cấp & huyện Củ Chi, Tp HCM năm 2007 PHƯƠNG... ñã cố định lại nhạy hơn[5,9,14] Vì vậy, vấn ñề ñặt khác biệt giá trị quan sát trực tiếp, Kato- Katz SaSa chẩn đốn nhiễm giun móc, giun lươn nào? Từ ñó lựa chọn phương pháp xét nghiệm phù hợp cộng