m Nghiên cứu định lượng kẽm Bá bệnh [Eurycomơ longifolia Jack.) phương pháp cực phổ Nguyễn Thị Ngọc Hà, Phan Túy Bộ môn Hóa Đại cương- Vỗ cơ, Trường Đại học Dược Hà Nội SUM M ARY This p a p e r outlines the developm ent o f a m etho d fo r determ ination o f total Zincum in Eurycom a longlfolla Ja c k b y differential pu lse polarography Zincum ivas determ ined a t pH 4,2 in a d d acetic- aceta te b u ffer a n d acid nitric 0,5% a t a b o u t -1,15 V The m ethod was fo un d to have a linear range o f 0,1- 1,2 ppm The qu an tity w as from 12,5175 m g/g to 48,7216 ụg/g, the highest concentration o f Zincum was recorded in trunk o f tree T k h ó a : differential pu lse polarography, Eurycom a longifolia Jack, Zincum Đặt vấn đề Cây Bá bệnh {Eurycoma longifoHa Jack.) sử dụng ngày nhiều thuốc dân gian chế phẩm đông dược Trong dược liệu có nhiều nguyên tố vi lượng, đặc biệt Bá bệnh có kẽm mối liên quan tác dụng nguyên tố vi lượng với tác dụng tăng dục nam giới Bá bệnh(1),(3) Để góp phần vào việc nghiên cứu đủ vé thành phẩn hóa học nhưtác dụng sinh học nguyên tố, hợp chất có Bá bệnh chúng tòi tiến hành khảo sát hàm lượng kẽm Bá bệnh, nguyên tó có liên quan đến tác dụng tăng dục nam giới cây, phương pháp cực phổ Nguyên liệu, thiết bị phương pháp nghiên cứu Nguyên liệu Phương pháp nghiên cứu Xử lý dược liệu trước vô hóa Rửa thân, rễ, lá; để nước, thái nhỏ, sấy khò Nghiền nhỏ máy xay, sấy khô đến độ ẩm 5% Phương pháp xử lý mẫu Sử dụng phương pháp vô hóa ướt với tác nhân oxy hóa acid nitric acid percloric đặc với tỷ lệ (mau : HNO3 65% : HCIO^ 70%) (0,25 g : 10 m L : mL) Phương pháp định lượng Sử dụng phương pháp cực phổ xung vi phân [2] Các thông số phép đo D ung dịch nén Đ ệm acetat pH 4,2 dung dịch acid HNO 0,5% Đ iện cực làm việc HMDE Cây Bá bệnh - Eurycoma longifolia Jack.: rễ, thân, Thời gian khuấy ban đáu 100 s Xuất xứ: Lào Acid nitric HNO3 65% (Merk), acid percloric HCIO^ Đ iện th ể điện phân 70% (Merk), dung dịch kẽm chuẩn 1000 ppm (Merk), Th ời gian điện phân dung dịch đệm acetat pH = 4,2, nước cất lần trao -1,15V 100 s Thời gian cân Os Đ iện th ế ban đẩu -1,15V Điện th ể kết thúc -0,85 V Biên độ xung 0,05005 V đổi ion Thiết bị Máy cực phổ VA 757 Computrace (MetrohmThụy Sĩ), máy lọc nước trao đổi ion EASY pure II (Barnstead, Mỹ), cân phân tích Mettler Toledo AB 204-S (Thụy Sĩ), tủ sấy Memmert {Memmert, Đức), máy cất nước lán Hamilton (Hamilton, Anh), tù hốt, bếp đun cách cát, máy xay sinh tố Thời gian xung ,2 s Bước nhảy điện 0,005035 V Thời gian bước nhảy điện 0,4 s SỐ2/2012 , Nghiên Cứu dược Thõng tin thuòc 59 Độ lặp /ạ/ máy Tiến hành đo bán sóng lần với dung dịch kẽm chuẩn 50 ppb P\oi SlQnal Help Bảng l Kẽt quâxác ậ n h độ lập l ậ phép đo STT Thễ bán sóng (m V) cư n g độ dòng (nA) -994 162 -994 160 -994 162 -994 161 -994 163 Giá tri trung bình -994 161,6 RSD (%) 0,71 Hình Cực p h ổ đỗ biều diễn đặ lập lợ i củũ máy Độ thu hổi phương pháp Dùng phương pháp thêm chuẩn sảng Kháo sát độ thu hỗi kẽm STT Lượng thêm vào ([íg/g) 5 5 Lượng tìm lại íịXg/g) 4,498 4,602 4,659 4,591 4,852 Hiệu su ấ t tìm lại (%) 89,96 92,04 93,18 91,82 97,04 Từ kết ta có độ thu hói trung bình 92,81%; khoảng tin cậy 92,81±3,78% RSD 2,84%; chứng tỏ trình vô hóa mẫu lượng mẫu bị không đáng kể Do phương pháp phân tích đáng tin cậy, tiến hành vô hóa đo hàng loạt mẫu Độ lặp lạl phương pháp Cân xác mẫu lá, vô hóa đem đo máy Kết nghiên cứu Quy trình định lượng Zn (xem hình trang bên) Đường chuẩn định lượng Zn Từ dung dịch kẽm chuẩn 1000 ppm pha thành dung dịch có nồng độ 0,10; 0,15; 0,20; 0,25; 0,35; 0,45; 0,55; 0,65 ppm dung dịch đệm pH 4,2 dung dịch acid HNOj 0,5% Đo máy cực phổ thu kết VỚI đường chuẩn sau: (xem hình trang bên ) Bảng l Két quảkhâo sát độ lặp lại phương pháp STT Lượng (g) 0,2523 0,2503 0,2510 0,2530 0,2517 N ồng độ (ppm) 0,1343 0,1403 0,1347 0,1343 0,1318 Hàm lượng kẽm (ụg/g) 13,3071 14,0142 13,4188 13,2703 13,0955 Hàm lượng kẽm trung bình 13,4212 |J.g/g, RSD 2,62%, phương pháp có độ lặp lại tốt m Rễ, th ân , rửa sạch, thái n hỏ, sẫy khô, nghiển nhỏ, độ ẩm < 5% , cân xác 0,25 g 10 m L H N O j6 % Đ un cách cát đến hết khói m àu vàng nâu, khoảng 1-2 m L HNO 65% _ Ị IIT IL / U to Hltih Bổ th ị sường chíiđiì kẽm Đ un cách cát đến cắn ầm , m àu trắng, để n guội Hòa tan cắn m L HNO 12,5% ch uyển vào bình định m ức 25 Hàm lượng kẽm màu nghiên cứu Hàm lượng kẽm nêu bảng giá trị trung bình lẩn đo mẫu lá, thân, rê m L, thêm nước tới vạch Bâng Hàm lượng Zn mâu nghiên cửu H àm lư ợ n g Z n tru n g STT M ấu Lá RDS (% ) b ình (ịxg/g) Đem đo m áy cực phổ VA757 Co m putrace phương phápcựcphổxun gviphân 2,62 Thân 48,7216 lu Rễ 12,5175 3,72 X lí kết Hình Otiy trinh ậ n h lượng kẽm I m g Bá bệnh băng 13,4212 Kết luận Hàm lượng Zn thay đổi từ 12,5175 |j,g/g đến 48,7216 |j.g/g mẫu rễ, thân, mẫu thân cho hàm lượng cao Các mẫu có độ lặp lại tốt độ lệch chuẩn tương đối RSD từ 2,12 % đến 3,72% Các kết giúp định hướng cho nghiên cứu val trò Zn tác dụng sinh học Bá bệnh T ài liệu tham khảo Trần Tuấn Anh, Trần Thu Hương (2007), “Nghiên cứu thành phần hóa học oây Bá bệnh (Eurycom a longlfolia Jack.)", Tạp chi D ược /lỌC, (378), tr 12 Dương Quang Phùng (2004), Một số phương pháp phàn tích điện hóa, NXB Đại học S phạm, tr 165- 213 H H, Ang, K L Chan, J w Mak (1995), "Effect of 7- day dally replacement of culture medium containing Eurycoma longifolia Ja ck constituents on the Malaysian Plasmodium falciparum isolates", Journal o f Ethnophaim acology 49, Issue 3, pp 171-175 L L Lewin, p Sanz Pedrero, M R Vilarino (1986), "Direct determination of zinc in insulin preparations by differential pulse polarography”, Journal o f Pharmaceutical and Biomedical Analysis 4, issue 1, pp 23- 29 SỐ2/2012 Nghiên CỨU dược Thông tin thuõc Í 61 ... giúp định hướng cho nghiên cứu val trò Zn tác dụng sinh học Bá bệnh T ài liệu tham khảo Trần Tuấn Anh, Trần Thu Hương (200 7), Nghiên cứu thành phần hóa học oây Bá bệnh (Eurycom a longlfolia Jack. )" ,... ( %) 0,71 Hình Cực p h ổ đỗ biều diễn đặ lập lợ i củũ máy Độ thu hổi phương pháp Dùng phương pháp thêm chuẩn sảng Kháo sát độ thu hỗi kẽm STT Lượng thêm vào ([íg/g) 5 5 Lượng tìm lại íịXg/g) 4,498... thêm nước tới vạch Bâng Hàm lượng Zn mâu nghiên cửu H àm lư ợ n g Z n tru n g STT M ấu Lá RDS (% ) b ình (ịxg/g) Đem đo m áy cực phổ VA757 Co m putrace phương phápcựcphổxun gviphân 2,62 Thân 48,7216