(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu một số đặc điểm bệnh lý của bệnh đậu gà thả vườn tại huyện kim sơn ninh bình

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM PHẠM THỊ THÙY DƯƠNG NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM BỆNH LÝ CỦA BỆNH ĐẬU GÀ TRÊN GÀ THẢ VƯỜN TẠI HUYỆN KIM SƠN - NINH BÌNH Ngành: Thú Y Mã ngành: 60 64 01 01 Người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Hữu Nam NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2018 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tôi, kết nghiên cứu trình bày luận văn trung thực, khách quan chưa dùng để bảo vệ để lấy học vị Tơi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn cám ơn, thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Phạm Thị Thùy Dương i LỜI CẢM ƠN Trong suốt trình thực đề tài, để hồn thành luận văn thạc sĩ, ngồi nỗ lực thân tơi nhận giúp đỡ nhiệt tình thầy giáo, gia đình bạn bè suốt thời gian thực tập Đặc biệt xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến PGS.TS Nguyễn Hữu Nam môn Bệnh lý Thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam người trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ tơi tận tình q trình nghiên cứu hồn thành luận văn Các chị phịng thí nghiệm trọng điểm cơng nghệ sinh học khoa Thú Y - Học Viện Nơng Nghiệp Việt Nam Cùng tồn thể thầy cô giáo, cán công nhân viên mơn Bệnh lý thú y tồn thể thầy cô giáo khoa Thú Y, Học Viện Nông Nghiệp Việt Nam Sự động viên tạo điều kiện tốt gia đình, bạn bè góp phần giúp đỡ tơi hồn thành luận văn thạc sĩ Một lần xin chân thành cảm ơn giúp đỡ tất người Hà Nội, ngày tháng năm 2017 Tác giả luận văn Phạm Thị Thùy Dương ii MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng .vi Danh mục hình vii Danh mục chữ viết tắt viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract .x Phần Mở đầu 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích đề tài .2 Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Lịch sử tình hình nghiên cứu bệnh đậu gà 2.1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh đậu gà giới 2.1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh đậu nước 2.2 Đặc điểm bệnh .5 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Hình thái, cấu trúc 2.2.3 Tính chất nuôi cấy 2.2.4 Sức đề kháng 2.3 Dịch tễ học 2.4 Triệu chứng lâm sàng .11 2.5 Bệnh tích 13 2.5.1 Bệnh tích đại thể 13 2.5.2 Bệnh tích vi thể .14 2.6 Chẩn đoán bệnh 14 2.6.1 Chẩn đoán lâm sàng 14 2.6.2 Chẩn đoán phân biệt 14 2.6.3 Chẩn đoán virus học 15 2.6.4 Chẩn đoán huyết học 15 iii 2.6.5 Chẩn đoán phản ứng PCR (Polymerase Chain Reaction) 16 2.7 Phòng bệnh 16 2.7.1 Phòng bệnh vaccine 16 2.7.2 Vệ sinh phòng bệnh 19 2.8 Điều trị 20 Phần Đối tượng, nội dung, phương pháp nghiên cứu 21 3.1 Đối tượng nghiên cứu 21 3.2 Địa điểm nghiên cứu 21 3.3 Nội dung nghiên cứu 21 3.4 Nguyên liệu 21 3.4.1 Mẫu bệnh phẩm 21 3.4.2 Hóa chất, mơi trường, mồi cần thiết 21 3.4.3 Dụng cụ, thiết bị thí nghiệm 22 3.5 Phương pháp nghiên cứu 22 3.5.1 Phương pháp dịch tễ học mô tả 22 3.5.2 Theo dõi quan sát triệu chứng lâm sàng 22 3.5.3 Phương pháp mổ khám (theo tiêu chuẩn ngành thú y 10TCN năm 2005) 22 3.5.4 Phương pháp lấy mẫu xét nghiệm 22 3.5.5 Phương pháp làm tiêu mô bệnh học (Phương pháp vùi mô paraffin) 23 3.5.6 Phương pháp tách chiết DNA tổng số hóa chất 25 3.5.7 Phương pháp xét nghiệm số tiêu huyết học gà mắc bệnh đậu 3.5.8 Phương pháp xử lý số liệu……………………… .27 Phần Kết thảo luận 4.1 25 27 Điều tra tình hình bệnh đậu gà địa bàn xã kim tân – kim sơn ninh bình 27 4.1.1 Tình hình chăn ni dịch bệnh 27 4.1.2 Tỷ lệ mắc theo lứa tuổi 29 4.2 Triệu chứng lâm sàng gà mắc bệnh đậu 30 4.3 Kết phản ứng PCR 35 iv 4.4 Biến đổi bệnh lý gà mắc bệnh đậu 37 4.4.1 Bệnh tích đại thể 37 4.4.2 Bệnh tích vi thể chủ yếu gà mắc bệnh đậu .42 4.5 Một số tiêu sinh lý, sinh hóa máu gà mắc bệnh đậu 46 4.5.1 Số lượng hồng cầu 46 4.5.2 Tỷ khối huyết cầu 47 4.5.3 Hàm lượng huyết sắc tố (phân tử hemoglobin) 47 4.5.4 Số lượng bạch cầu công thức bạch cầu 48 4.6 Biện pháp phòng chống bệnh đậu gà 46 4.6.1 Chú ý 46 4.6.2 Phòng bệnh .49 4.6.3 Điều trị triệu chứng 50 Phần Kết luận đề nghị 51 5.1 Kết luận 51 5.2 Đề nghị .51 Tài liệu tham khảo 52 v DANH MỤC BẢNG Bảng 3.1 Quy trình chạy mẫu máy chuyển đúc mẫu tự động 23 Bảng 4.1 Tình hình chăn ni gà chung xã Kim Tân – Ninh Bình 28 Bảng 4.2 Tỷ lệ mắc bệnh đậu gà theo lứa tuổi xã Kim Tân – huyện Kim Sơn – Ninh Bình .30 Bảng 4.3 Triệu chứng lâm sàng gà mắc bệnh đậu giai đoạn - tháng tuổi 31 Bảng 4.4 Sự có mặt virus đậu tổ chức da gà xác định phản ứng PCR 35 Bảng 4.5 Bệnh tích đại thể gà mắc đậu giai đoạn - tháng tuổi 38 Bảng 4.6 Bệnh tích vi thể số quan gà mắc bệnh đậu 42 Bảng 4.7 Một số tiêu huyết học gà mắc bệnh 46 Bảng 4.8 Công thức bạch cầu gà mắc bệnh đậu .48 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Lớp vỏ virus Hình 2.2 Cấu trúc virus .6 Hình 4.1 Một số hình ảnh triệu chứng lâm sàng 33 Hình 4.2 Kết phản ứng PCR .36 Hình 4.3 Một số hình ảnh chạy PCR 37 Hình 4.4 Một số hình ảnh bệnh tích đại thể gà mắc đậu .41 Hình 4.5 Một số hình ảnh bệnh tích vi thể 45 vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Nghĩa tiếng Việt PCR : Polymerase Chain Reaction ELISA : Enzyme linked immuno sorbent assay DNA : Acid Deoxyribo Nucleic Nhuộm HE : Haematoxilin Eosin TBE buffer : Tris boric acid EDTA TAE : Tris acid axetic EDTA AVP : Variola avium pox FPV : Fowpox virus TCID50 : 50 % tissue culture infective dose (Liều gây nhiễm 50 % tế bào) CAM : Chorioallantoic membrane (màng nhung niệu) CPE : Cytophathic Effect (bệnh tích tế bào) viii TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Phạm Thị Thùy Dương Tên luận văn: “Nghiên cứu số đặc điểm bệnh lý bệnh đậu gà đàn gà thả vườn Kim Sơn – Ninh Bình ” Ngành: Thú y Mã số: 60 64 01 01 Tên sở đào tạo: Học Viện Nơng Nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Xác định đặc điểm bệnh lý chủ yếu bệnh đậu gà gà thả vườn từ đề xuất biện pháp phịng điều trị bệnh có hiệu Phương pháp nghiên cứu Thơng tin tình hình bệnh đậu gà theo dõi thu thập trực tiếp từ 20 hộ chăn nuôi gà thả vườn xã Kim Tân, huyện Kim Sơn, tỉnh Ninh Bình Các triệu chứng lâm sàng quan sát, theo dõi ghi chép lại Bệnh tích đại thể thực phương pháp mổ khám Bệnh tích vi thể thực phương pháp lấy mẫu xét nghiệm, phương pháp làm tiêu mô bệnh học Kết phản ứng PCR dùng phương pháp tách chiết DNA hóa chất Phương pháp nghiên cứu tiêu huyết học; phương pháp xử lý số liệu Kết kết luận Kết nghiên cứu cho thấy bệnh xảy tất lứa tuổi với triệu chứng tập trung chủ yếu da, hình thành nốt đậu da vùng lơng mào, tích, mí mắt, khóe mắt, khóe miệng … viêm niêm mạc mắt, chảy nước mắt Bệnh tích đại thể chủ yếu gà mắc đậu nốt đậu vùng da lông chiếm 100,00%, viêm niêm mạc miệng chứa dịch nhày chiếm 76,67%, phổi sưng nhạt màu chiếm tỷ lệ 73,33%, khí quản xuất huyết có dịch xuất lẫn bọt chiếm 66,67%, gan sưng màu nâu nhạt (56,67%), tim nhão tim nhạt màu (53,33%), thận sưng to, xuất huyết (43,33%), lách nhạt màu (40,00%), niêm mạc ruột xuất huyết (33,33%) Bệnh tích vi thể chủ yếu gà mắc đậu da có tượng sung huyết, xuất huyết, thâm nhiễm tế bào viêm, hoại tử thối hóa tế bào đặc biệt bao hàm bollinger mụn đậu, phổi sung huyết Ngoài bệnh tích khác thay đổi tùy thuộc vào tình trạng bệnh Phương pháp PCR cho phép chẩn đoán nhanh xác virus đậu Những kết nghiên cứu cung cấp thêm sở khoa học giúp ích cho bác sĩ thú y, người làm cơng tác chẩn đốn lâm sàng chẩn đốn virus đậu sơ dựa vào triệu chứng lâm sàng, biến đổi bệnh lý đại thể trước thu mẫu đến phòng xét nghiệm Các tiêu huyết học gà mắc đậu nói lên tình trạng gà bị thiếu máu số lượng hồng cầu giảm dẫn tới hàm lượng huyết sắc tố giảm tăng số lượng bạch cầu toan, bạch cầu đa nhân trung tính ix