(Luận văn thạc sĩ) nghiên cứu tác dụng điều trị thoái hóa khớp gối của cao đặc knc trên động vật thực nghiệm

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM ĐÀO THẾ ANH NGHIÊN CứU TáC DụNG ĐIềU TRị THOáI HóA KHớP GốI CủA CAO ĐặC KNC TRÊN Động vật THựC NGHIệM LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC HÀ NỘI – 2020 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ HỌC VIỆN Y DƢỢC HỌC CỔ TRUYỀN VIỆT NAM ĐÀO THẾ ANH NGHIÊN CứU TáC DụNG ĐIềU TRị THOáI HóA KHớP GốI CủA CAO ĐặC KNC TRÊN Động vật THựC NGHIệM Chuyên ngành Y học cổ truyền Mã số: 872 0115 LUẬN VĂN THẠC SỸ Y HỌC Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS NGUYỄN DUY TUÂN PGS TS ĐẬU XUÂN CẢNH HÀ NỘI – 2020 LỜI CẢM ƠN Hoàn thành luận văn này, với tất lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn đến Đảng ủy, Ban Giám đốc, Phòng đào tạo Sau Đại học, Bộ mơn, Khoa phịng Học viện Y dược học cổ truyền Việt Nam, nơi trực tiếp đào tạo tận tình giúp đỡ tơi q trình học tập, nghiên cứu để hồn thành luận văn Tơi xin bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc tới TS Nguyễn Duy Tuân PGS.TS Đậu Xuân Cảnh, người thầy hướng dẫn trực sát, thường xuyên giúp đỡ, cho nhiều ý kiến quý báu, sát thực trình học tập, nghiên cứu để hồn thành luận văn Tơi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc, Bộ môn Dược lý – Học viện Quân Y quan tâm, tạo điều kiện tốt cho việc nghiên cứu, thu thập, hoàn thiện số liệu để hoàn thành đề tài Tôi xin gửi lời cảm ơn đến thầy, cô Hội đồng thông qua đề cương luận văn cho nhiều ý kiến quý báu q trình hồn thiện luận văn Tơi vơ biết ơn gia đình, bạn bè, anh chị em đồng động viên, giúp đỡ suốt trình học tập, nghiên cứu hồn thành luận văn Mặc dù cố gắng nhiều, luận văn khơng tránh khỏi thiếu sót; tác giả mong nhận thông cảm, dẫn, giúp đỡ đóng góp ý kiến nhà khoa học, quý thầy cô, cán quản lý bạn đồng nghiệp Xin chân thành cảm ơn! Học viên Đào Thế Anh LỜI CAM ĐOAN Luận văn thân trực tiếp thực hướng dẫn khoa học Thầy TS.Nguyễn Duy Tuân PGS.TS.Đậu Xuân Cảnh Các số liệu thông tin nghiên cứu hồn tồn xác, trung thực khách quan, xác nhận chấp thuận sở nơi nghiên cứu Cơng trình khơng trùng lặp với nghiên cứu khác công bố Việt Nam Tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm trước pháp luật cam kết Hà Nội, ngày .tháng năm Người viết cam đoan Đào Thế Anh CÁC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Tiếng Anh AE BCG Tiếng Việt Đương quy Bacillus Calmette–Guérin Vắc xin phòng bệnh lao Cyclic adenosine monophosphate AMP vòng – chất truyền tin thứ hai BMP Bone morphogenic proteins Protein tạo hình thái xương COX Cylo-oxygenase Enzyme đảm nhiệm chuyển arachidonic CAMP acid thành prostaglandin H2 ELISA Enzyme-linked Immunosorbent Xét nghiệm hấp thụ miễn dịch liên kết assay với enzyme FGF Epidermal growth factor Yếu tố tăng trưởng biểu bì GAG Glycosaminoglycan ICAM-1 Intercellular Adhesion Molecule IL Phân tử bám dính nội bào tế bào nội mơ Interleukin Cytokin miễn dịch iNOS Nitric oxide synthase Oxit nitric cảm ứng IGF-1 Insulin-like Growth Factor -1 Yếu tố tăng trưởng giống insulin Lipopolysaccharide Lipoglycan/nội độc tố LPS NSAID Non-steroidal anti-inflamatoy drug Thuốc chống viêm giảm đau nonsteroids MDA Maleic dialdehyde MIA Monosodiumiodoacetate MMP Matrix Metalloproteinases Các enzyme bị kích hoạt tiếp xúc với tia tử ngoại vùng bị viêm mRNA Messenger axit ribonucleic ARN thông tin NO Nitric ocid PF Patellofemoral Khớp xương bánh chè-xương đùi PG Prostaglandin Acid béo khơng bão hịa mơ, có vai trị chất trung gian hóa học q trình viêm đau PMN Polymorphonuclear SE TF Tế bào đa hình Hồng cầm râu Tibiofemoral Khớp xương chày-xương đùi TNF α Tumor necrosis factor Yếu tố hoại tử u TGF-β Transforming growth factor beta Yếu tố thay đổi tăng trưởng β XPĐ Xuất phát điểm MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ…………………………………………………………… …1 Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan mơ hình thối hóa khớp 1.1.1 Vai trị mơ hình in vitro in vivo đánh giá tổn thương khớp 1.1.2 Mơ hình động vật đánh giá tổn thương khớp 1.1.3 Các mơ hình thối hóa khớp kinh điển 1.2 Tổng quan thối hóa khớp gối 14 1.2.1 Khái niệm 14 1.2.2 Phân loại 14 1.2.3 Nguyên nhân chế bệnh sinh thối hóa khớp gối 15 1.3 Tổng quan thuốc KNC 16 1.3.1 Thành phần 16 1.3.2 Phân tích thuốc 17 1.3.3 Các nghiên cứu KNC 20 Chƣơng CHẤT LIỆU, ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1 Chất liệu nghiên cứu 22 2.2 Thuốc tham chiếu 23 2.3 Thời gian địa điểm tiến hành nghiên cứu 23 2.4 Đối tượng nghiên cứu 23 2.5 Phương pháp nghiên cứu 24 2.5.1 Thiết kế nghiên cứu 24 2.5.2 Chọn mẫu cỡ mẫu 24 2.5.3 Cơng cụ hóa chất sử dụng nghiên cứu 24 2.5.4 Quy trình nghiên cứu 25 2.5.5 Phương pháp tiến hành 26 2.5.6 Phương pháp đánh giá kết .27 2.6 Phương pháp xử lý số liệu 28 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 29 3.1 Kết tác dụng cao đặc KNC lên thay đổi hình dáng khớp gối, ngưỡng đau phản ứng đau thực nghiệm 29 3.2 Kết tác dụng cao đặc KNC số chất trung gian hóa học gây viêm mô bệnh học khớp gối thực nghiệm .32 3.2.1 Sự thay đổi nồng độ cytokine tiền viêm lô nghiên cứu 32 3.2.2 Tổn thương mô bệnh học khớp gối 36 Chƣơng BÀN LUẬN .40 4.1 Đánh giá tác dụng cao đặc KNC lên thay đổi hình dáng khớp gối, ngưỡng đau phản ứng đau 40 4.2 Tác dụng cao đặc KNC số chất trung gian hóa học gây viêm mơ bệnh học khớp gối thực nghiệm .42 KẾT LUẬN………………………………….…………………………… 53 KIẾN NGHỊ…………………………………….………………………… 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤC DANH MỤC BẢNG ảng 2.1 Thành phần cao đặc KNC 22 ảng 3.1 Sự thay đổi khả chịu đựng trọng lượng chân sau chuột sau tuần tuần .29 ảng 3.3 Sự thay đổi nồng độ PGE2 huyết chuột 32 ảng 3.4 Sự thay đổi nồng độ TNF-α huyết chuột 33 ảng 3.5 Sự thay đổi nồng độ IL-1β huyết chuột 34 ảng 3.6 Sự thay đổi nồng độ IL-6 huyết chuột 35 ảng 3.7 Điểm đánh giá tổn thương mô bệnh học sụn xương khớp 37 ảng 3.8 Điểm đánh giá tình trạng viêm khoang mỡ Hoffa 38 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ 2.1 Sơ đồ nghiên cứu 25