Thông tin tài liệu
i Låìi Cm Ån h Được phân cơng khoa Nông học, trường Đại học Nông Lâm Huế đồng ý cô giáo hướng dẫn TS Nguyễn Thị Thu Thủy, thực đề tài luận văn “Đánh giá đa dạng di truyền độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith thu thập tỉnh phía Nam Việt Nam” Để hồn thành luận văn này, tơi tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến giáo TS Nguyễn Thị Thu Thủy cô giáo TS Trương Thị Hồng Hải người trực tiếp tận tình hướng dẫn tơi suốt q trình thực viết đề tài Với vốn kiến thức tiếp thu q trình học khơng tảng cho q trình nghiên cứu đề tài mà cịn hành trang quý báu giúp trưởng thành sống Xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo trực tiếp giảng dạy truyền đạt kiến thức khoa học chuyên ngành thời gian học tập trường Xin ghi nhận đóng góp nhiệt tình anh chị học viên cao học ngồi lớp K19, K20, nhóm em sinh viên K45, K46, K47, bạn trường THPT Lê Hồng Phong giúp đỡ tơi q trình thực đề tài Có thể khẳng định thành cơng luận văn này, trước hết thuộc công lao tập thể Đặc biệt quan tâm, động viên khuyến khích từ phía gia đình người bạn tốt đồng hành Trần Thị Bảo Ngà Nhân đây, xin bày tỏ lòng biết ơn sâu đậm đến tất người Mặc dù cố gắng nhiều song buổi đầu làm quen với công tác nghiên cứu khoa học phịng thí nghiệm hạn chế kỹ thao tác nên tránh khỏi thiếu sót định Tơi mong nhận đóng góp quý thầy cô bạn đồng nghiệp để luận văn hồn chỉnh Tơi xin chân thành cảm ơn! Huế, ngày 20 tháng năm 2015 Học viên Phạm Thanh Bình PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma ii LỜI CAM ĐOAN Để hoàn thiện cơng trình nghiên cứu chúng tơi tiến hành công việc liên quan từ xử lý mẫu, phân lập mẫu, chạy PCR đánh giá đa dạng di truyền phịng Cơng nghệ Sinh học, phịng thí nghiệm Bệnh thực thí nghiệm lây nhiễm nhà lưới Bộ môn Bảo vệ thực vật, trường Đại học Nông lâm Huế Đây thành tập thể nhóm nghiên cứu chúng tơi Tất số liệu, thông tin luận văn ghi nhận từ thực tế nghiên cứu Vì tơi cam đoan tất số liệu luận văn xác khách quan, có tính khoa học cao chưa công bố luận văn cao học khác Huế, ngày 20 tháng năm 2015 Học viên Phạm Thanh Bình h PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma iii MỤC LỤC MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 10 Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN 10 NHỮNG ĐIỂM MỚI CỦA ĐỀ TÀI 10 Chương TỔNG QUAN CÁC VẤN ĐỀ NGHIÊN CỨU 11 1.1 CÂY CÀ CHUA 11 1.1.1 Giá trị dinh dưỡng 11 1.1.2 Tình hình sản xuất cà chua giới 12 1.1.3 Tình hình sản xuất cà chua Việt Nam 12 1.1.4 Các bệnh thường gặp cà chua 13 1.1.5 Thiệt hại bệnh héo xanh vi khuẩn gây cà chua 14 1.2 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM h 15 1.2.1 Vi khuẩn Ralstonia solanacearum 16 1.2.2 Các nghiên cứu vi khuẩn Ralstonia solanacearum giới 19 1.2.3 Nghiên cứu vi khuẩn Ralstonia solanacearum nước 20 1.3 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU VỀ BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN 21 1.3.1 Triệu chứng bệnh 21 1.3.2 Nguyên nhân gây bệnh điều kiện phát sinh bệnh 21 1.3.3 Các phương pháp chẩn đoán, phát bệnh héo xanh vi khuẩn 22 1.3.4 Biện pháp phòng trừ 22 1.3.5 Các nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn giới 26 1.3.6 Các nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn nước 27 1.3.7 Các nghiên cứu bệnh héo xanh vi khuẩn cà chua Việt Nam 28 1.4 ĐÁNH GIÁ ĐA DẠNG DI TRUYỀN 29 1.4.1 Tổng quan đa dạng sinh học - đa dạng di truyền 29 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma iv 1.4.2 Ý nghĩa việc nghiên cứu đa dạng di truyền 30 1.4.3 Các phương pháp nghiên cứu đa dạng di truyền 30 1.4.4 Các kết nghiên cứu đa dạng di truyền vi khuẩn Ralstonia solanacearum 36 Chương MỤC TIÊU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU 38 2.1.1 Mục tiêu chung 38 2.1.2 Mục tiêu cụ thể 38 2.2 NỘI DUNG NGHIÊN CỨU 38 2.2.1 Đánh giá đa dạng di truyền chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum thu thập tỉnh phía Nam 38 2.2.2 Đánh giá độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum thu thập tỉnh phía Nam 38 2.3 ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHẠM VI NGHIÊN CỨU 39 h 2.3.1 Nguồn vi khuẩn Ralstonia solanacearum 39 2.3.2 Giống cà chua 43 2.3.3 Môi trường nhân tạo 43 2.3.4 Vật liệu nghiên cứu 44 2.4 PHẠM VI NGHIÊN CỨU 46 2.5 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 46 2.5.1 Phương pháp thu mẫu bệnh 46 2.5.2 Phương pháp phân lập vi khuẩn Ralstonia solanacearum 46 2.5.3 Phương pháp tách chiết DNA 47 2.5.4 Phương pháp xác định phylotype vi khuẩn Ralstonia solanacearum 47 2.5.5 Phương pháp đánh giá đa dạng di truyền vi khuẩn Ralstonia solanacearum 48 2.5.6 Phương pháp lây nhiễm nhân tạo 49 Chương KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 52 3.1 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM HÌNH THÁI KHUẨN LẠC CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM 52 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma v 3.2 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM BẰNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ 55 3.3 KẾT QUẢ TÁCH CHIẾT DNA 57 3.4 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH PHYLOTYPE CỦA 19 CHỦNG VI KHUẨN RALSTONIA SOLANACEARUM 58 3.5 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH ĐA HÌNH BẰNG KỸ THUẬT RAPD 58 3.6 ĐÁNH GIÁ KIỂU GEN CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN BẰNG KỸ THUẬT RAPD 60 3.7 ĐÁNH GIÁ MỐI QUAN HỆ DI TRUYỀN GIỮA 19 CHỦNG VI KHUẨN 62 3.8 ĐÁNH GIÁ DIỄN BIẾN BỆNH HÉO XANH VI KHUẨN SAU KHI LÂY NHIỄM 66 3.9 ĐÁNH GIÁ ĐỘ ĐỘC TÍNH CỦA CÁC CHỦNG VI KHUẨN VỚI CÁC GIỐNG CÀ CHUA 74 h 3.9.1 Tính kháng giống cà chua 74 3.9.2 Độc tính chủng vi khuẩn 75 3.9.3 Tương tác tính kháng giống cà chua với độc tính chủng vi khuẩn 75 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 78 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 PHỤ LỤC 88 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma vi DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT AFLP : Amplified Fragment Length Polymorphism AVRDC : The World Vegetable Center (Trung tâm rau giới) cs : Cộng DNA : Deoxy ribonucleic axit dNTP :Deoxy nucleotide triphosphates H7996 : Haiwaii 7996 HXVK : Héo xanh vi khuẩn PCR : Polymerase chain reaction (Phản ứng chuỗi polymerase) RAPD : Random Amplified Polymorphic DNA (Phân tích DNA đa hình nhân ngẫu nhiên) : Restriction enzyme RFLP : Restriction Fragment Length Polymorphism RNA : Ribonucleic acid SSR : Simple Sequence Repeats TBE : Tris-Boric acid-EDTA TE : Tris-EDTA TLB : Tỷ lệ bệnh Tp : Thành phố W700 : West Virginia 700 h RE PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma vii DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Diện tích loại rau trồng phổ biến giới (năm 2013) 12 Bảng 2.1 Danh sách mẫu vi khuẩn thu thập tỉnh phía Nam 39 Bảng 2.2 Các giống cà chua chuẩn bị cho thí nghiệm lây nhiễm 43 Bảng 2.3 Một số môi trường nhân tạo chuẩn bị cho phân lập vi khuẩn 43 Bảng 2.4 Bộ mồi RAPD biểu đa hình 44 Bảng 2.5 Bộ mồi xác định phylotype vi khuẩn Ralstonia solanacearum 47 Bảng 3.1 Danh sách chủng vi khuẩn phân lập 52 Bảng 3.2 Tổng số băng DNA khuếch đại 19 chủng vi khuẩn phân tích với 24 mồi RAPD 61 Bảng 3.3 Hệ số tương đồng 19 chủng vi khuẩn 64 Bảng 3.4 Diễn biến bệnh HXVK sau lây nhiễm chủng vi khuẩn 67 Bảng 3.5 Tính kháng bệnh héo xanh vi khuẩn giống cà chua 74 h Bảng 3.6 Độc tính chủng vi khuẩn héo xanh 75 Bảng 3.7 Sự tương tác tính kháng mẫu giống cà chua với độc tính chủng vi khuẩn 76 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma viii DANH MỤC SƠ ĐỜ, HÌNH VẼ, ĐỜ THỊ h Sơ đồ 2.1 Bố trí thí nghiệm cho giống cà chua 49 Hình 2.1 Thang điểm đánh giá diễn biến bệnh HXVK 50 Hình 3.1 Dịch nhầy trắng sữa vi khuẩn 54 Hình 3.2 Hình thái khuẩn lạc đặc trưng 55 Hình 3.3 Một số hình thái khuẩn lạc đại diện khác 55 Hình 3.4 Kết điện di sử dụng cặp mồi đặc hiệu vi khuẩn Ralstonia solanacearum 56 Hình 3.5 Kết tách chiết DNA lần đầu 19 chủng vi khuẩn 57 Hình 3.6 Kết tách chiết DNA hồn chỉnh 19 chủng vi khuẩn 57 Hình 3.7 Kết điện di phylotype 19 chủng vi khuẩn 58 Hình 3.8 Kết điện di cuả số mồi RAPD biểu đa hình khảo sát từ chủng vi khuẩn Rs11, Rs66, Rs86 59 Hình 3.9 Kết điện di mồi UBC#353 chủng vi khuẩn 60 Hình 3.10 Kết điện di sản phẩm RAPD 19 chủng vi khuẩn với mồi UBC#333 UBC#388 62 Hình 3.11 Biểu đồ quan hệ di truyền 19 chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum 65 Đồ thị 3.1 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs24 sau lây nhiễm 68 Đồ thị 3.2 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs38 sau lây nhiễm 69 Đồ thị 3.3 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs51 sau lây nhiễm 70 Đồ thị 3.4 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs57 sau lây nhiễm 71 Đồ thị 3.5 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs66 sau lây nhiễm 72 Đồ thị 3.6 Diễn biến bệnh HXVK chủng vi khuẩn Rs86 sau lây nhiễm 73 Biểu đồ 3.1 Tỷ lệ bệnh giống lây nhiễm chủng vi khuẩn khác 77 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma MỞ ĐẦU ĐẶT VẤN ĐỀ Bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum gây bệnh hại phổ biến nghiêm trọng đồng ruộng, có khu phân bố rộng vùng nhiệt đới, cận nhiệt đới nhiều khu vực ôn đới giới [39] Đây loại vi khuẩn tìm thấy châu lục, có nhiều chủng sinh lý nịi sinh học khác nhau, có phổ ký chủ rộng, có khả gây hại 200 loại cây, đặc biệt gây hại nặng họ cà cà chua, cà tím, khoai tây, thuốc khác họ đậu phụng, gừng, chuối [64] Bệnh khó phịng trừ vi khuẩn có khả tồn lâu dài đất, thể ký chủ thực vật thân, hạt giống, củ giống, tàn dư thực vật, Tác hại bệnh héo xanh nghiêm trọng, bệnh héo gây hại nặng làm chết diện tích lớn, gây khuyết mật độ Bệnh gây hại làm ảnh hưởng đến suất, giảm từ 15-95%, chí có lên tới 100% ảnh hưởng đến phẩm chất rau thu hoạch [38] Chẳng hạn, đầu năm 2000, bệnh héo xanh vi khuẩn (HXVK) làm giảm suất từ 30-80% ruộng khoai lang Đài Loan [99] Theo dự báo nhà khoa học, với thay đổi khí hậu tồn cầu, bệnh HXVK ngày gây hại nghiêm trọng sản xuất h Việt Nam nằm khu vực khí hậu nhiệt đới nóng ẩm thuận lợi cho bệnh phát triển Bệnh HXVK thường phát sinh gây hại nặng vùng chuyên canh rau màu truyền thống, bệnh gây hại nước, nhiên mức độ nhiễm phụ thuộc vào nhiều yếu tố như: chế độ luân canh trồng, kỹ thuật canh tác, Biện pháp dùng hóa chất phịng chống bệnh HXVK cho có hiệu vi khuẩn có nguồn gốc từ đất xâm nhập sinh sản hệ thống bó mạch Hiện phương pháp ghép cà chua suất cao lên gốc cà tím EG203 có khả kháng bệnh HXVK áp dụng rộng rãi xem biện pháp hiệu để phòng trị bệnh HXVK Tuy nhiên, nhiều ruộng trồng cà chua ghép xuất tỷ lệ bị bệnh cao, đặc biệt thời tiết nóng ẩm Điều cho thấy khơng bền vững tính kháng Ralstonia solanacearum giống Nguyên nhân đa dạng di truyền vi khuẩn gây bệnh yếu tố môi trường [96] Chọn tạo giống mang gen kháng bệnh xem biện pháp ưu việt hiệu Nhưng tính kháng giống phụ thuộc nhiều vào độ độc tính chủng vi khuẩn Chính để tạo giống kháng bền vững phải hiểu đặc điểm di truyền độ độc tính chủng vi khuẩn vùng sinh thái khác Để chọn tạo giống kháng bệnh cần định dạng chủng vi khuẩn gây bệnh độ độc tính chủng đến đối tượng gây bệnh Tuy nhiên, chưa có PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 10 tài liệu cụ thể nghiên cứu phân loại đánh giá độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Việt Nam Từ thực tiễn trên, tiến hành thực đề tài: “Đánh giá đa dạng di truyền độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Smith thu thập tỉnh phía Nam Việt Nam” h MỤC ĐÍCH CỦA ĐỀ TÀI Đề tài nhằm đánh giá đa dạng di truyền độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum làm sở cho công tác chọn tạo giống kháng bệnh HXVK Ý NGHĨA KHOA HỌC VÀ THỰC TIỄN Ý nghĩa khoa học Kết đề tài góp phần tạo sở khoa học để xây dựng phương pháp đánh giá đa dạng di truyền, phân loại đánh giá độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum Ý nghĩa thực tiễn - Phân loại chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum thu thập phía Nam Việt Nam để hỗ trợ việc thiết lập chương trình kiểm sốt bệnh HXVK Việt Nam - Đánh giá độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum góp phần làm sở cho việc chọn giống có tính kháng cao để bố trí trồng vùng thích hợp với mục đích hạn chế bệnh cao NHỮNG ĐIỂM MỚI CỦA ĐỀ TÀI - Cung cấp cho nhà sinh học, nhà lai tạo giống, nghiên cứu bệnh học thông tin chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum tỉnh phía Nam Việt Nam - Xác định độ độc tính chủng vi khuẩn Ralstonia solanacearum tỉnh phía Nam Việt Nam PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 87 93 Truong, H T H., Esch, E., Wang, J-F, (2008) “Resistance to Taiwanese race strains of Ralstonia solanacearum in wild tomato germplasm”, European Journal of Plant Pathology 122, 471-9 94 Tsuchiya K., Horita M., Boonseubsakul W., Joselito, Villa E and Mulya K., (2004), “Genetic diversity of Ralstonia solanacearum strains in Japan and Southeast Asian countries”, Innovative Roles of Biological Resource Centers, Published by Japan Society for Culture Collection & World Federation for Culture Collections, pp 241-245 95 Wang J.F., (1998) Sysmtoms and diagnostic methods for bacterial wilt in tomato in the field, Field guide for CLV Project h 96 Wang JF, Olivier J, Thoquet P, Mangin B, Sauviac L, Grimsley NH, (2000) “Resistance of tomato line Hawaii7996 to Ralstonia solanacearum Pss4 in Taiwan is controlled mainly by a major strain-specific locus”, Molecular PlantMicrobe Interactions 13, 6-13 97 Winstead, N N., and Kelman, A , (1952) ‘Inoculation techniques for evaluating resistance to Pseudomonas solanacearum”, Phytopathology 42: 628-634 98 Yi – Jeng Chen, Yi – Sheng Lin, Wen – Hsin Chung, (2012) “Bacterial wilt of sweet potato caused by Ralstonia solanacearum in Taiwan”, J Gen Plant Pathol, 78: 80-84 99 Yingqin Liu et al, (2009) “Molecular typing of Japanese strains of Ralstonia solanacearum in relation to the ability to induce a hypersensitive reaction in tobacco”, J Gen Plant Pathol 75: 369 -380 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 88 h PHỤ LỤC PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 89 PHỤ LỤC KẾT QUẢ XỬ LÝ THỐNG KÊ STATISTIX 10.0 Tỷ lệ bệnh LSD All-Pairwise Comparisons Test of TLB for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 86,667 A 80,000 A 73,333 AB 2 53,333 BC 1 40,000 CD 40,000 CD 40,000 CD 33,333 CDE 33,333 CDE 26,667 DEF 20,000 DEF 20,000 DEF 3 20,000 DEF 13,333 DEF 6,6667 EF 6,6667 EF 0,0000 F 0,0000 F h Comparisons of means for the same level of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 11,843 Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 24,186 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF Comparisons of means for different levels of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 13,893 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 90 Critical T Value 2,332 Critical Value for Comparison 32,396 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another Split-plot AOV Table for TLB Source DF SS F P LNL 548,1 274,07 Giong 13703,7 6851,85 10,00 0,0278 Error LNL*Giong 2740,7 685,19 Chung 19948,1 3989,63 18,96 0,0000 Giong*Chung 10 1674,1 167,41 0,80 0,6334 Error LNL*Giong*Chung 30 6311,1 210,37 Total 44925,9 53 MS h Grand Mean 32,963 CV(LNL*Giong) 79,41 CV(LNL*Giong*Chung) 44,00 Tukey HSD All-Pairwise Comparisons Test of TLBTB for GiỐNG GiỐNG Mean 53,333 A 31,100 B 14,450 C Homogeneous Groups Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 4,3087 Critical Q Value 3,881 Critical Value for Comparison 11,824 All means are significantly different from one another PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 91 Tukey HSD All-Pairwise Comparisons Test of TLBTB for CHỦNG CHỦNG Mean 66,667 A 46,667 AB 35,533 BC 22,233 CD 13,333 D 13,333 D Homogeneous Groups Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 6,0934 Critical Q Value 4,904 Critical Value for Comparison 21,129 There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another Chỉ số bệnh h Split-plot AOV Table for CSB4 Source DF SS F P LNL 4,148 2,0741 Giong 116,148 58,0741 7,84 0,0413 Error LNL*Giong 29,630 7,4074 Chung 26,370 5,2741 0,88 0,5057 Giong*Chung 10 47,407 4,7407 0,79 0,6366 Error LNL*Giong*Chung 30 179,556 5,9852 Total 403,259 53 Grand Mean 1,7037 CV(LNL*Giong) 159,75 MS CV(LNL*Giong*Chung) 143,60 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 92 LSD All-Pairwise Comparisons Test of CSB4 for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 5,3333 A 1 4,0000 AB 4,0000 AB 4,0000 AB 4,0000 AB 2,6667 AB 2 2,6667 AB 2,6667 AB 1,3333 AB 0,0000 B 0,0000 B 0,0000 B 0,0000 B 0,0000 B 0,0000 B 3 0,0000 B 0,0000 B 0,0000 B h Comparisons of means for the same level of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 1,9975 Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 4,0795 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF Comparisons of means for different levels of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 2,0367 Critical T Value 2,188 Critical Value for Comparison 4,4562 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 93 There are groups (A and B) in which the means are not significantly different from one another Split-plot AOV Table for CSB7 Source DF SS F P LNL 61,04 30,519 Giong 381,04 190,519 3,31 0,1421 Error LNL*Giong 230,52 57,630 Chung 414,81 82,963 2,79 0,0348 Giong*Chung 10 116,74 11,674 0,39 0,9398 Error LNL*Giong*Chung 30 892,44 29,748 Total 2096,59 53 Grand Mean 5,6296 CV(LNL*Giong) 134,85 MS h CV(LNL*Giong*Chung) 96,88 LSD All-Pairwise Comparisons Test of CSB7 for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 13,333 A 12,000 AB 10,667 ABC 9,3333 ABC 1 8,0000 ABC 8,0000 ABC 8,0000 ABC 2 6,6667 ABC 6,6667 ABC 5,3333 ABC PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 94 4,0000 ABC 4,0000 ABC 3 2,6667 BC 1,3333 BC 1,3333 BC 0,0000 C 0,0000 C 0,0000 C Comparisons of means for the same level of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 4,4533 Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 9,0949 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF Comparisons of means for different levels of Giong 0,05 Standard Error for Comparison Critical T Value 2,247 Critical Value for Comparison 4,7885 h Alpha 10,761 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another Split-plot AOV Table for CSB14 Source DF SS F P LNL 270,81 135,41 Giong 2215,70 1107,85 6,07 0,0614 Error LNL*Giong 730,07 182,52 Chung 1946,37 389,27 4,91 0,0021 Giong*Chung 10 305,19 30,52 0,38 0,9436 Error LNL*Giong*Chung 30 2380,44 79,35 Total 7848,59 53 MS PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 95 Grand Mean 11,630 CV(LNL*Giong) 116,17 CV(LNL*Giong*Chung) 76,60 LSD All-Pairwise Comparisons Test of CSB14 for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 29,333 A 28,000 AB 25,333 ABC 18,667 ABCD 18,667 ABCD 2 16,000 ABCDE 1 13,333 ABCDE 12,000 BCDE 10,667 CDE 9,3333 CDE 3 8,0000 CDE 6,6667 DE 5,3333 DE 4,0000 DE 2,6667 DE 1,3333 DE 0,0000 E 0,0000 E h Comparisons of means for the same level of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 7,2732 Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 14,854 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 96 Comparisons of means for different levels of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 8,0226 Critical T Value 2,274 Critical Value for Comparison 18,240 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another Split-plot AOV Table for CSB21 Source DF SS MS P LNL 285,0 142,52 Giong 5109,9 2554,96 6,95 0,0500 Error LNL*Giong 1471,4 367,85 Chung 5068,1 1013,63 7,27 0,0001 Giong*Chung 10 717,6 71,76 0,51 0,8663 Error LNL*Giong*Chung 30 4184,9 139,50 Total 16837,0 h F 53 Grand Mean 17,407 CV(LNL*Giong) 110,18 CV(LNL*Giong*Chung) 67,85 LSD All-Pairwise Comparisons Test of CSB21 for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 46,667 A 42,667 AB 41,333 AB 28,000 ABC 2 24,000 BCD 24,000 BCD PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 97 1 18,667 BCD 17,333 CD 16,000 CD 13,333 CD 3 12,000 CD 10,667 CD 8,0000 CD 4,0000 CD 4,0000 CD 2,6667 D 0,0000 D 0,0000 D Comparisons of means for the same level of Giong 0,05 Standard Error for Comparison Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 9,6435 h Alpha 19,695 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF Comparisons of means for different levels of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 10,880 Critical T Value 2,296 Critical Value for Comparison 24,978 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another Split-plot AOV Table for CSB28 Source DF SS MS LNL 353,8 176,89 Giong 8412,4 4206,22 Error LNL*Giong 1468,4 367,11 F P 11,46 0,0221 PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 98 Chung 7448,0 1489,60 8,71 0,0000 Giong*Chung 10 878,2 87,82 0,51 0,8671 Error LNL*Giong*Chung 30 5132,4 171,08 Total 23693,3 53 Grand Mean 21,556 CV(LNL*Giong) 88,89 CV(LNL*Giong*Chung) 60,68 LSD All-Pairwise Comparisons Test of CSB28 for Giong*Chung Giong Chung Mean Homogeneous Groups 61,333 A 52,000 AB 48,000 ABC 33,333 BCD 2 30,667 BCDE 29,333 CDEF 1 22,667 CDEF 21,333 DEFG 21,333 DEFG 18,667 DEFG 3 14,667 DEFG 10,667 DEFG 9,3333 DEFG 5,3333 EFG 5,3333 EFG 4,0000 FG 0,0000 G 0,0000 G h PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 99 Comparisons of means for the same level of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 10,680 Critical T Value 2,042 Critical Value for Comparison 21,811 Error term used: LNL*Giong*Chung, 30 DF Comparisons of means for different levels of Giong Alpha 0,05 Standard Error for Comparison 11,655 Critical T Value 2,263 Critical Value for Comparison 26,372 Error terms used: LNL*Giong and LNL*Giong*Chung There are groups (A, B, etc.) in which the means are not significantly different from one another h PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 100 PHỤ LỤC MỘT SỐ HÌNH ẢNH THÍ NGHIỆM Xử lý mẫu bệnh sau thu thập h Phân lập mẫu sau xử lý Thu dịch vi khuẩn môi trường 523 trước lây nhiễm PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma 101 Cà chua trước lây nhiễm h Cà chua sau lây nhiễm PDF Watermark Remover DEMO : Purchase from www.PDFWatermarkRemover.com to remove the waterma
Ngày đăng: 20/11/2023, 14:39
Xem thêm:
