(Luận văn) nghiên cứu tái sinh cây bò khai (erythropalum scandens) bằng phương pháp nuôi cấy mô tế bào

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN ĐÌNH KHANG Tên đề tài: a lu NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY BÕ KHAI n n va (ERYTHROPALUM SCANDENS) p ie gh tn to BẰNG PHƢƠNG PHÁP NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO d oa nl w KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC a nv a lu u nf : : : : ll m n oi Chính quy Cơng nghệ sinh học CNSH - CNTP 2011 – 2015 tz Hệ đào tạo Chuyên ngành Khoa Khóa học z m co l gm @ an Lu n va Thái Nguyên, 2015 ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN ĐÌNH KHANG Tên đề tài: a lu NGHIÊN CỨU TÁI SINH CÂY BÒ KHAI n n va (ERYTHROPALUM SCANDENS) p ie gh tn to BẰNG PHƢƠNG PHÁP NI CẤY MƠ TẾ BÀO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC d oa nl w a lu a nv ll u nf : : : : : : m n oi Chính quy Cơng nghệ sinh học K43 – CNSH CNSH - CNTP 2011 – 2015 ThS Vi Đại Lâm tz Hệ đào tạo Chuyên ngành Lớp Khoa Khóa học Giảng viên HD z m co l gm @ an Lu n va Thái Nguyên, 2015 ac th si i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu khoa học thân Các số liệu kết nghiên cứu q trình điều tra thực địa hồn tồn trung thực, chƣa cơng bố tài liệu Nếu có sai tơi xin chịu hồn tồn trách nhiệm! Thái Nguyên, ngày năm 2015 tháng Ngƣời viết cam đoan a lu Xác nhận GVHD n n va Nguyễn Đình Khang p ie gh tn to ThS Vi Đại Lâm oa nl w XÁC NHẬN CỦA GIÁO VIÊN CHẤM PHẢN BIỆN d Giáo viên chấm phản biện xác nhận sinh viên a lu f an nv Đã sửa chữa sai xót sau Hội đồng chấm yêu cầu! (Ký, ghi rõ họ tên) oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th si ii LỜI CẢM ƠN Thực tập tốt nghiệp hoạt động giáo dục đặc thù nhằm góp phần hình thành, phát triển phẩm chất lực nghề nghiệp cần thiết sinh viên theo mục tiêu đào tạo đề ra, trình áp dụng kiến thức học đƣợc nhà trƣờng vào thực tế công việc giúp sinh viên nhận biết đƣợc điểm mạnh, điểm yếu cần trang bị thêm kiến thức, kỹ để đáp ứng nhu cầu cơng việc Đƣợc chí Ban giám hiệu trƣờng Đại học Nông Lâm Ban chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học & Công nghệ thực phẩm, đồng ý hai thầy giáo ThS Vi Đại Lâm Th.S Đào Duy Hưng, tiến hành nghiên cứu đề tài: a lu nghiên cứu tái sinh Bò Khai (Erythropalum scandens) phương pháp n Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám hiệu nhà trƣờng Đại học Nông Lâm, Ban n va nuôi cấy mô tế bào tn to chủ nhiệm khoa Công nghệ sinh học, Lãnh đạo viện Khoa học sống- Đại học p ie gh Nông Lâm Thái Nguyên, chuyên viên môn Công nghệ tế bào (Viện khoa học sống), thầy cô giáo môn CNSH (khoa Công nghệ sinh học & Công oa nl w nghệ thực phẩm) Đặc biệt, xin trân trọng cảm ơn hai thầy giáo ThS Vi Đại Lâm Th.S Đào Duy Hưng dành nhiều thời gian q báu, tận tình hƣớng dẫn tơi suốt thời gian thực tập hoàn thành luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn d a lu gia đình bạn bè giúp đỡ mặt để tơi hồn thành khóa luận nv Măc dù có nhiều cố gắng để thực đề tài cách hoàn chỉnh Song f an bƣớc đầu làm quen với công tác nghiên cứu khoa học, tiếp cận với thực tế oi lm ul nhƣ hạn chế kiến thức kinh nghiệm nên khơng thể tránh khỏi hạn chế thiếu sót định mà thân chƣa thấy đƣợc Tôi mong đƣợc góp ý at Xin chân thành cảm ơn! nh quý thầy cô giáo bạn để khóa luận đƣợc hồn chỉnh hơn! z z Thái Nguyên, ngày năm 2015 gm @ tháng Sinh viên om l.c Nguyễn Đình Khang an Lu n va ac th si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iii DANH MỤC CÁC CỤM TỪ VIẾT TẮT a lu n n va p ie gh tn to : 2,4 Diclorophenoxy acetic acid Cs : Cộng BA : 6-Benzylaminopurine CT : Công thức CV : Coeficient of Variation ĐC : Đối chứng GA3 : Gibberellic acid IAA : Indole-3-acetic acid IBA : Indole butyric acid BAP : Bezylamino purine Kinetin : 6-Furfurylaminopurine d oa nl w 2,4 D : Murashige & Skoog (1962) f an MS : Least Singnificant Difference Test nv a lu LSD ul : Mơi trƣờng W/v : Khối lƣợng/ thể tích V/v : Thể tích/thể tích oi lm MT at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iv DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 phân tích định tính nhóm chất hữu phần rễ Bò khai Bảng 4.1 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vô trùng mẫu 25 Bảng 4.2 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu cấy 27 Bảng 4.3 Kết ảnh hƣởng thời gian khử trùng a lu n HgCl2 (0,1%) đến hiệu khử trùng mẫu 28 n va Bảng 4.4 Kết ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 30 tn to Bảng 4.5 Kết ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi p ie gh Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 33 Bảng 4.6 Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP IAA đến hiệu tái sinh chồi Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 36 oa nl w Bảng 4.7 Kết ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 39 d f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 v DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 4.1 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vơ trùng mẫu Bị khai 26 Hình 4.2 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu Bò khai 27 Hình 4.3 Ảnh hƣởng thời gian khử trùng HgCl2 (0,1%) đến hiệu khử trùng mẫu Bò khai 29 Hình 4.4 Ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 32 a lu Hình 4.5 Ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi Bò khai 35 n n va Hình 4.6 Ảnh hƣởng kết hợp BAP IAA đến hiệu tn to tái sinh chồi Bò khai 38 Hình 4.7 Ảnh hƣởng kết hợp BAP IBA đến hiệu p ie gh tái sinh chồi Bò khai .41 d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 vi MỤC LỤC PHẦN MỞ ĐẦU .1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục đích đề tài 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn a lu PHẦN TỔNG QUAN TÀI LIỆU n 2.1 Giới thiệu chung Bò khai n va 2.1.1 Đặc điểm Bò khai tn to 2.1.2 Nguồn gốc phân bố .4 p ie gh 2.1.3 Phân loại 2.1.4 Giá trị Bò khai 2.2 Tình hình nghiên cứu Bị khai .7 oa nl w 2.3 Khái niệm sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 10 2.3.1 Khái niệm 10 d a lu 2.3.2 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 10 nv 2.4 Một số yếu tố ảnh hƣởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật .11 f an 2.4.1 Vật liệu nuôi cấy 11 oi lm ul 2.4.2 Điều kiện nuôi cấy 11 2.4.3.Vô trùng mẫu cấy: 12 at nh 2.4.3 Thành phần môi trƣờng nuôi cấy 12 2.4.4 Môi trƣờng vật lý 17 z z PHẦN VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .19 @ gm 3.1 Vật liệu, hóa chất thiết bị nghiên cứu 19 om l.c 3.1.1 Vật liệu 19 3.1.2 Hóa chất 19 3.1.3 Thiết bị 19 an Lu 3.2 Địa điểm thời gian nghiên cứu 19 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 vii 3.2.1.Địa điểm nghiên cứu 19 3.2.2 Thời gian nghiên cứu 19 3.3 Nội dung nghiên cứu 19 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu 19 3.4.1 Nội dung 1: Nghiên cứu ảnh hƣởng số chất khử trùng đến khả vô trùng mẫu Bò khai 20 3.4.1 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng dung dịch H2O2 (4,0%) đến khả vô trùng mẫu .20 3.4.2 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng viên khử trùng Johnson (2,5ppm) đến hiệu khử trùng mẫu cấy 21 a lu n 3.4.3 Nghiên cứu ảnh hƣởng thời gian khử trùng với HgCl2(0,1%) 21 n va 3.5 Nội dung 2: Nghiên cứu số chất điều hòa sinh trƣởng tn to đến khả tái sinh chồi Bò khai 22 3.5.1.Nghiên cứu ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi 22 p ie gh 3.5.2.Nghiên cứu ảnh hƣởng BAP đến khả tái sinh chồi 22 3.5.3.Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp (kinetin BAP) oa nl w IAA đến hiệu tái sinh chồi 23 3.5.4.Nghiên cứu ảnh hƣởng kết hợp (kinetin BAP) d IBA đến hiệu tái sinh chồi 23 a lu nv 3.6 Xử lý số liệu .24 f an PHẦN DỰ KIẾN KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 25 oi lm ul 4.1 Kết ảnh hƣởng số chất khử trùng đến khả vơ trùng mẫu Bị khai 25 nh 4.2 Kết ảnh hƣởng số chất điều hòa sinh trƣởng đến khả at tái sinh chồi Bò Khai Kết nghiên cứu đƣợc thu thập sau 60 ngày 30 z z PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 42 @ gm 5.1 Kết luận 42 om l.c 5.2 Kiến nghị 42 an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 PHẦN MỞ ĐẦU Đặt vấn đề Cây Bò khai hay gọi Dây hƣơng có tên khoa học Erythropalum scandens (Đỡ Tất Lợi, 2003) [13] Bò khai loại dây leo dài từ 5-10m Ở Việt Nam, Bị khai có hầu hết tỉnh vùng núi phía Bắc, nhiều Bắc Kạn Thái Nguyên đƣợc coi loại rau đặc sản địa phƣơng a lu Theo Đỗ Tất Lợi 100g Bị khai có chứa: 78,8g nƣớc; n n va 6g Protein; 6,1g Gluxit; 7,5 g xơ; 1,6g tro; 138 mg canxi; 40,7mg photpho; tn to 2,6 mg carotene 60 mg VitaminC Nhiều nghiên cứu tác dụng p ie gh dƣợc lí Bị khai dùng chữa viêm thận, viêm gan, viêm đƣờng tiết liệu, tiểu tiện không thông Khi ngƣời xa mệt mỏi, nƣớc tiểu vàng đục, oa nl w cần ăn rau Bò khai 1-2 lần nƣớc tiểu trở lại bình thƣờng Đặc biệt Bị khai sắc lấy nƣớc uống chữa bệnh viêm gan siêu vi trùng đạt kết tốt d (Đỗ Tất Lợi, 2003) [13] a lu nv Đây cho suất thu nhập cao với giá bán thị trƣờng f an từ 3000-5000 đồng/bó (một bó khoảng 200-300 gam), 15000-30000 ul oi lm đồng/1kg non Vì việc trồng khai thác Bị khai hƣớng làm kinh tế triển vọng cho bà vùng đồi núi phía Bắc (Nguyễn Tiến at nh Bân, 1998) [1] z z Hiện nhu cầu giống Bò khai tƣơng đối lớn, @ gm phƣơng pháp nhân giống truyền thống (giâm hom) nhiều hạn chế Mất om l.c nhiều thời gian công sức, hệ số nhân chồi thấp, độ trẻ hóa khơng cao Trong ni cấy mơ tế bào phát triển, có nhiều ƣu điểm vƣợt an Lu trội so với nhân giống thơng thƣờng Đó phƣơng pháp ni cấy n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 41 Gía trị 95,56 100 88,44 90 77,78 80 68,89 70 57,48 60 Tỷ lệ nảy chồi (%) 50 Hệ số bật chồi (lần) 40 a lu 30 n n va 20 2,09 3,29Công thức 1,56 p ie gh tn to 10 CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 oa nl w Hình 4.7 Ảnh hưởng kết hợp BAP IBA đến hiệu tái sinh chồi Bò khai d Kết bảng 4.7 cho thấy: a lu nv Với giá trị LSD0,5 đạt 5,63 công thức khác có sai khác có ý f an nghĩa so với công thức đối chứng mức độ tin cậy 95% Công thức thứ cho ul oi lm kết tái sinh thấp với tỷ lệ mẫu nảy chồi đạt 57,48%, hệ số bật chồi 1,0 lần thấp so với công thức đối chứng Công thức tốt với nồng độ nh at BAP (1,5mg/l) + IBA (0,4mg/l) cho kết tái sinh cao với tỷ lệ nảy z chồi đạt 95,56%, hệ số nảy chồi đạt 3,29 lần chồi mập, xanh đậm z @ gm Qua kết thí nghiệm cho thấy kết hợp BAP với IBA đạt om l.c hiệu cao việc tái sinh chồi so với việc sử dụng chất đơn lẻ kết hợp với IAA Với nồng độ BAP (1,5mg/l) +IBA (0,4mg/l) cho kết chồi mập, xanh đậm an Lu tái sinh cao với tỷ lệ nảy chồi đạt 95,56%, hệ số nảy chồi đạt 3,29 lần n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 42 PHẦN KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận Từ thực tế tiến hành thí nghiệm kết thu đƣợc, đƣa số kết luận sau: - Khi khử trùng mẫu Bị khai loại hóa chất H2O2 (4,0%), HgCl2 (0,1%) viên khử trùng johnson (2,5ppm), khoảng thời gian: 5, a lu 10, 15, 20 phút cơng thức khử trùng mẫu Bị khai tốt sử dụng dung n dịch HgCl2 (0,1%) 10 phút cho tỷ lệ mẫu cao đạt 63,33%, tỷ n va - Môi trƣờng tốt cho tái sinh chồi Bị khai mơi trƣờng có bổ p ie gh tn to lệ mẫu nhiễm thấp với 23,33% tỷ lệ mẫu chết đạt 13,33% sung kết hợp BAP (1,5mg/l) IBA (0,4mg/l) cho tỷ lệ tái sinh đạt 95,56%, hệ oa nl w số bật chồi cao 3,29 lần, chất lƣợng chồi tốt, mập, xanh đậm 5.2 Kiến nghị d Để tiếp tục hồn thiện quy trình nhân giống in vitro Bị khai nv a lu (Erythropalum scandens) tơi xin có số kiến nghị sau: f an - Tiếp tục nghiên cứu hồn thiện quy trình nhân giống phƣơng oi lm ul pháp nuôi cấy mô tế bào thực vật Bò khai (Erythropalum scandens) - Tách chiết nghiên cứu tác dụng hợp chất Bò khai at nh (Erythropalum scandens) z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 43 TÀI LIÊU THAM KHẢO: I.Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Tiến Bân (1998), Một số rau dại ăn Việt Nam, Nxb QĐND Lê Trần Chấn (1993), "Hệ thực vật Ba Vì - Nguồn gen đặc hữu cần đƣợc bảo vệ”, Tạp chí Lâm nghiệp, 5/1993, tr 13-14 Lê Tùng Châu, Nguyễn Văn Tập (1996), Nguồn tài nguyên di truyền a lu thuốc Việt Nam, Tài Nguyên di truyền thực vật Việt Nam, Nxb Nông n n va nghiệp, Hà Nội, tr 70-76 cứu nhân giống hom có ích, Tuyển tập Hội thảo Quốc tế p ie gh tn to Trần Cự, Đỡ Đình Tiến (2000), Nhân giống kết bước đầu nghiên Bảo tồn sử dụng bền vững tài ngun có ích Vƣờn quốc gia oa nl w Tam Đảo, VƣờnQuốc gia Tam Đảo, Vĩnh Phúc tr 70-75 Nguyễn Tiến Đàn, Nguyễn Việt Tựu (2003), Phương pháp nghiên cứu d hóa học thuốc, Nxb Y dƣợc TPHCM a lu nv Trịnh Đình Đạt (2007), Cơng nghệ sinh học, tập bốn-Công nghệ di f an truyền, Nxb Giáo dục oi lm ul Phạm Văn Điển (2005), Bảo tồn phát triển thực vật cho Lâm sản gỗ, Nxb Nông nghệp, Hà Nội nh at Trần Văn Hiền, Mai Văn Hiển, Phạm Mạnh Hùng, Ngô Văn z Thông(2003), hoạt tính sinh học số flavonoit chiết từ thuốc z gm @ nam, Nxb Hà Nội om l.c Nguyễn Chí Hiểu, Đặng Kim Vui, Đặng Văn Minh (2009), “Ảnh hưởng số loại thuốc kích thích rễ (NAA, IBA, ABT) tới khả Blume)”, Tạp chí NN & PTNT số12/2009 an Lu rễ nảy chồi hom giâm Bò khai (Erythropalum Scanden n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 44 10 Phạm Hoàng Hộ (l999), Cây cỏ Việt Nam (quyển I,II,III), Nxb trẻ, TP Hồ Chí Minh 11 Triệu Văn Hùng (2002), Kỹ thuật trồng số loài đặc sản rừng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 12.Nguyễn Nhƣ Khanh, Nguyễn Văn Đính (2011), Giáo trình chất điều hịa sinh trưởng thực vật, Nxb Giáo dục Việt Nam 13 Đỗ Tất Lợi (2003), Cây thuố c và vi ̣ thuố c Niê ̣t Nam, Nxb Thời Đại 14 Đặng Văn Minh, Đặng Kim Vui, Nguyễn Chí Hiểu(2011), “Nghiên cứu a lu kiến thức địa rau Bò khai (Erythropalum Scanden Blume) n vùng núi phía Bắc Việt Nam” Tạp chí Khoa học Cơng nghệ, Đại học va n Thái Nguyên, số 01/2011 tn to 15 Nguyễn Hoàng Nghĩa (1999), Một số loài bị đe dọa, Nxb Nông p ie gh nghiệp Hà Nội 16 Nguyễn Hồng Nghĩa (2001), Nhân giống vơ tính Trồng rừng dịng oa nl w vơ tính, Nxb Nơng nghiệp 17 Đỡ Thị Ngọc Oanh (2004), Giáo trình - Phương pháp thí nghiệm đồng d nv a lu ruộng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội f an 18 Dƣơng Hữu Phùng, Triệu Văn Phú (2003), Nghiên cứu khả nhân oi lm ul giống vơ tính Bị Khai, ngót rừng, gừng dại, Nxb Giáo dục Việt Nam at nh 19 Mai Văn Quyền, Nguyễn Đăng Nghĩa, KS Nguyễn Mạnh Chính (2006), z Đời Sống Cây Trồng 2, Nxb Nông nghiệp z thực vật, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội gm @ 20 Hoàng Minh Tấn, Nguyễn Quang Thạch (1994), Giáo trình - Sinh lý Quốc gia Hà Nội om l.c 21.Vũ Trung Tạng (2003), Giáo trình Cơ sở sinh thái học, Nxb Đại học an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 45 22 Phạm Văn Thỉnh, Hứa Văn Thao, ThS Lê Thị Hƣơng bước đầu nghiên cứu thành phần hóa học Bị Khai, Tạp chí Khao học công nghệ ĐHTN số năm 2000 23 Lê Văn Tri (1997), Hỏi - đáp chế phẩm điều hòa sinh trưởng, tăng suất trồng, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội 24 Vũ Văn Vụ, Hoàng Đức Cự, Vũ Thanh Tâm, Trần Văn Lài (1993), Sinh lý học thực vật, Giáo trình cao học Nơng nghiệp, sinh học, Nxb Nông nghiệp, Hà Nội a lu II.Tài liệu tiếng anh n n va 25 Johan Rusydi Iskandar,Kotanegara (l995), Methodology for Frameworks, andMethods, Yunan University Press, pp 88-128 p ie gh tn to BiodiversityResearch, Regional study on Biodiversity, concepts, 26 Michael J Balick, Elaine Elisabetsky and Sarah A Laird.(1996), oa nl w Medicinal Resouces of the Tropical Forest - Biodiversity and its Impotance to HumanHealth, Columbia University Press - New York: d pp 80-92 a lu 27 Tonga Noweg, Abdul Rashid Abdullah, Dimbab Nidang (2003), nv f an Forestplants as vegetables for communities bodering the crocker range oi lm ul NationalPark, ASEAN Review of Biodiversity and Environmental Conservation: from site 69-73 at nh 28 Tugba Bayrak Ozbucak, Hamd, Guray Kutbay and Oznur Ergen Akcın z (2006), The Contributıon of Wıld Edible Plants to Human Nutrıtion in the z om l.c gm @ Black SeaRegıon of Turkey, Ethnobotanical Leaflets: from site 98-103 an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 46 Phụ luc Môi trƣờng MS - Murashige and Skoog’s Thành phần Hàm lƣợng (mg/l) NH4NO3 1650 KNO3 1900 KH2PO4 170 MgSO4 7H2O 370 MnSO4 H2O 22.3 ZnSO4 7H2O 10.6 CuSO4 H2O 0.25 CaCl2 2H2O 440 KI 0.83 CoCl2 6H2O 0.025 H3BO3 6.2 Na2MoO4 2H2O 0.25 FeSO4 7H2O 27.85 Nhóm I a lu n n va II p ie gh tn to d oa nl w III a lu IV f an nv ul oi lm V Na2EDTA 2H2O 37.25 nh Nicotinic acid 0.5 at z om l.c Pyridoxine HCl 0.1 gm Thiamine HCl @ Vitamins z Glycine 0.5 an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 47 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch H2O2 nồng độ (4,0%) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V003 TLMS LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 5423.33 1355.83 232.43 0.000 R 3.33334 1.66667 0.29 0.761 * RESIDUAL 46.6666 5.83333 * TOTAL (CORRECTED) 14 5473.33 390.952 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V004 TLMN a lu n n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 11616.7 2904.17 366.84 0.000 R 70.0000 35.0000 4.42 0.051 * RESIDUAL 63.3345 7.91681 * TOTAL (CORRECTED) 14 11750.0 839.286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF d oa nl w SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1423.33 355.833 20.83 0.000 R 63.3333 31.6667 1.85 0.217 * RESIDUAL 136.667 17.0833 * TOTAL (CORRECTED) 14 1623.33 115.952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE MEANS FOR EFFECT T TLMS 0.000000 18.3333 31.6667 53.3333 45.0000 TLMN 100.000 70.0000 51.6667 28.3333 25.0000 TLMC 0.000000 11.6667 16.6667 18.3333 30.0000 oi lm ul NOS 3 3 f an nv a lu T at nh SE(N= 3) 1.39443 1.62448 2.38630 5%LSD 8DF 4.54711 5.29727 7.78150 - z z MEANS FOR EFFECT R TLMN 57.0000 56.0000 52.0000 TLMC 13.0000 15.0000 18.0000 om l.c TLMS 30.0000 29.0000 30.0000 gm NOS 5 @ R SE(N= 5) 1.08012 1.25832 1.84842 5%LSD 8DF 3.52217 4.10325 6.02752 - an Lu ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:50 :PAGE n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 48 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 29.667 15 55.000 15 15.333 TLMS TLMN TLMC STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 19.773 2.4152 8.1 0.0000 28.970 2.8137 5.1 0.0000 10.768 4.1332 27.0 0.0004 |R | | | 0.7612 0.0506 0.2175 | | | | a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 49 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch Jonhson (2,5ppm) BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V003 TLMS SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2616.67 654.167 224.29 0.000 R 10.0000 5.00000 1.71 0.240 * RESIDUAL 23.3333 2.91666 * TOTAL (CORRECTED) 14 2650.00 189.286 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V004 TLMN a lu LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF n n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 10426.7 2606.67 329.26 0.000 R 3.33333 1.66667 0.21 0.816 * RESIDUAL 63.3340 7.91675 * TOTAL (CORRECTED) 14 10493.3 749.524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF d oa nl w SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2793.33 698.333 64.46 0.000 R 13.3333 6.66667 0.62 0.568 * RESIDUAL 86.6665 10.8333 * TOTAL (CORRECTED) 14 2893.33 206.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE MEANS FOR EFFECT T - f an nv a lu TLMN 100.000 66.6667 43.3333 33.3333 28.3333 TLMC 0.000000 23.3333 33.3333 35.0000 36.6667 at TLMS 0.000000 10.0000 23.3333 31.6667 35.0000 nh NOS 3 3 oi lm ul T z SE(N= 3) 0.986013 1.62447 1.90029 5%LSD 8DF 3.21529 5.29725 6.19665 - z @ NOS 5 TLMS 19.0000 20.0000 21.0000 TLMN 54.0000 55.0000 54.0000 TLMC 27.0000 25.0000 25.0000 om l.c R gm MEANS FOR EFFECT R - an Lu SE(N= 5) 0.763762 1.25831 1.47196 5%LSD 8DF 2.49055 4.10323 4.79991 - n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 50 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:54 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 20.000 15 54.333 15 25.667 TLMS TLMN TLMC STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 13.758 1.7078 8.5 0.0000 27.377 2.8137 5.2 0.0000 14.376 3.2914 12.8 0.0000 |R | | | 0.2397 0.8156 0.5679 | | | | a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 51 Kết thí nghiệm khử trùng dung dịch HgCl 0,1% BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V003 TLMS SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 8166.67 2041.67 257.90 0.000 R 3.33333 1.66667 0.21 0.816 * RESIDUAL 63.3332 7.91665 * TOTAL (CORRECTED) 14 8233.33 588.095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMN FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V004 TLMN a lu LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF n n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 17843.3 4460.83 535.30 0.000 R 205080E-11 102540E-11 0.00 1.000 * RESIDUAL 66.6671 8.33339 * TOTAL (CORRECTED) 14 17910.0 1279.29 BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLMC FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE VARIATE V005 TLMC LN SOURCE OF VARIATION DF d oa nl w SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 2793.33 698.333 57.79 0.000 R 3.33333 1.66667 0.14 0.873 * RESIDUAL 96.6669 12.0834 * TOTAL (CORRECTED) 14 2893.33 206.667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE MEANS FOR EFFECT T - f an nv a lu TLMN 100.000 68.3333 23.3333 16.6667 11.6667 TLMC 0.000000 8.33333 13.3333 30.0000 36.6667 at TLMS 0.000000 23.3333 63.3333 53.3333 51.6667 nh NOS 3 3 oi lm ul T z SE(N= 3) 1.62446 1.66667 2.00693 5%LSD 8DF 5.29721 5.43485 6.54441 - z @ NOS 5 TLMS 38.0000 39.0000 38.0000 TLMN 44.0000 44.0000 44.0000 TLMC 18.0000 17.0000 18.0000 om l.c R gm MEANS FOR EFFECT R - an Lu SE(N= 5) 1.25830 1.29100 1.55456 5%LSD 8DF 4.10320 4.20982 5.06928 - n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 52 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE KHANGP1 28/ 5/15 21:56 :PAGE F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 38.333 15 44.000 15 17.667 TLMS TLMN TLMC STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 24.251 2.8137 7.3 0.0000 35.767 2.8868 6.6 0.0000 14.376 3.4761 19.7 0.0000 |R | | | 0.8156 1.0000 0.8730 | | | | a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 53 Kết ảnh hƣởng nồng độ BAP đến tái sinh chồi Bò khai BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE VARIATE V003 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 4018.31 1004.58 64.62 0.000 R 112.634 56.3170 3.62 0.075 * RESIDUAL 124.373 15.5467 * TOTAL (CORRECTED) 14 4255.32 303.951 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBC FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE VARIATE V004 HSBC a lu n n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 3.13977 784943 85.57 0.000 R 116800E-01 584000E-02 0.64 0.558 * RESIDUAL 733868E-01 917336E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.22484 230346 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLBC 37.7767 48.8900 71.1133 84.4467 62.2233 oa nl w HSBC 0.846667 1.02333 1.39667 2.09000 1.75333 d SE(N= 3) 2.27645 0.552972E-01 5%LSD 8DF 7.42327 0.180319 - nv a lu TLBC 57.3340 64.0020 61.3340 HSBC 1.42600 1.38600 1.45400 oi lm NOS 5 ul R f an MEANS FOR EFFECT R - at nh SE(N= 5) 1.76333 0.428331E-01 5%LSD 8DF 5.75004 0.139674 - z ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 123456 28/ 5/15 21:59 :PAGE z @ VARIATE STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 17.434 3.9429 6.5 0.0000 0.47994 0.95778E-01 6.7 0.0000 |R | | | 0.0753 0.5576 om l.c TLBC HSBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 60.890 15 1.4220 gm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - | | | | an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 54 Kết ảnh hƣởng kinetin đến khả tái sinh chồi BALANCED ANOVA FOR VARIATE TLBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V003 TLBC LN SOURCE OF VARIATION DF LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 1167.34 291.835 24.63 0.000 R 53.3333 26.6667 2.25 0.167 * RESIDUAL 94.7854 11.8482 * TOTAL (CORRECTED) 14 1315.46 93.9613 BALANCED ANOVA FOR VARIATE HSBC FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE VARIATE V004 HSBC a lu n n va p ie gh tn to SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= T 481760 120440 43.48 0.000 R 149733E-01 748667E-02 2.70 0.126 * RESIDUAL 221600E-01 277000E-02 * TOTAL (CORRECTED) 14 518893 370638E-01 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE MEANS FOR EFFECT T T NOS 3 3 TLBC 51.1100 64.4467 75.5533 71.1100 57.7767 oa nl w HSBC 0.866667 1.17667 1.31000 0.910000 0.890000 d SE(N= 3) 1.98731 0.303864E-01 5%LSD 8DF 6.48041 0.990871E-01 - nv a lu TLBC 66.6660 62.6660 62.6660 HSBC 1.05400 1.05200 0.986000 oi lm NOS 5 ul R f an MEANS FOR EFFECT R - at nh SE(N= 5) 1.53936 0.235372E-01 5%LSD 8DF 5.01970 0.767525E-01 - z z ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE 123456 28/ 5/15 22: :PAGE @ VARIATE STANDARD DEVIATION C OF V |T SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 9.6934 3.4421 5.4 0.0002 0.19252 0.52631E-01 5.1 0.0000 |R | | | 0.1669 0.1260 om l.c TLBC HSBC GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 63.999 15 1.0307 gm F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - | | | | an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99

Định dạng
Số trang	64
Dung lượng	0,97 MB