(Luận văn) đánh giá khả năng lên men và phân tích một số hoạt chất trong tỏi đen

51 0 0
(Luận văn) đánh giá khả năng lên men và phân tích một số hoạt chất trong tỏi đen

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM a lu n ĐỖ THỊ HOAN va n Tên đề tài: p ie gh tn to KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ TRONG QUÁ TRÌNH LÊN MEN TỎI ĐEN VÀ PHÂN TÍCH MỘT SỐ oa nl w HOẠT CHẤT TRONG TỎI ĐEN d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC f an nv a lu ul : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học oi lm Hệ đào tạo : CNSH - CNTP at : 2012 - 2016 z z Khóa nh Khoa om l.c gm @ an Lu THÁI NGUYÊN, NĂM 2016 n va ac th si ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM a lu n ĐỖ THỊ HOAN n va KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA MỘT SỐ YẾU TỐ TRONG p ie gh tn to Tên đề tài: QUÁ TRÌNH LÊN MEN TỎI ĐEN VÀ PHÂN TÍCH MỘT SỐ HOẠT oa nl w CHẤT TRONG TỎI ĐEN d KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC f an nv a lu Hệ đào tạo : Chính quy ul : Cơng nghệ Sinh học Lớp : K44 - CNSH oi lm Chuyên ngành nh : CNSH - CNTP Khóa : 2012 – 2016 at Khoa z z @ om l.c gm Giảng viên hƣớng dẫn: ThS Lƣơng Thị Thu Hƣờng an Lu THÁI NGUYÊN, NĂM 2016 n va ac th si i LỜI CẢM ƠN Trong suốt thời gian nghiên cứu thực khóa luận này, tơi ln nhận hướng dẫn bảo tận tình ThS.Lương Thị Thu Hường, người trực tiếp hướng dẫn làm khóa luận tốt nghiệp cho tơi Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới cô Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo khoa Công nghệ Sinh họcĐại học Nông Lâm Thái Nguyên tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ a lu thời gian học tập thực đề tài n Tôi xin chân thành cảm ơn ThS.Lê Hồng Dũng cán bộ, kỹ thuật n va viên phịng Hóa Thực phẩm Viện Dinh Dưỡng tạo điều kiện giúp đỡ tốt tn to để tơi hồn thành đề tài nghiên cứu p ie gh Cuối tơi xin bày tỏ lịng biết ơn chân thành tới gia đình, bạn bè ln động viên, khích lệ, chia sẻ khó khăn tơi suốt trình oa nl w học tập nghiên cứu hồn thiện khóa luận Thái Ngun, ngày 18 tháng 05 năm 2016 d f an nv a lu Sinh viên oi lm ul Đỗ Thị Hoan at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th si ii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1: Phân loại khoa học tỏi Bảng 2.2 Giá trị dinh dưỡng 100 g tỏi tươi Bảng 4.1: Kết phân tích hàm lượng đường 33 Bảng 4.2: Kết phân tích hàm lượng số amino acid có tỏi đen 34 Bảng 4.3: Kết hàm lượng Flavonoidss tổng số tỏi đen 35 Bảng 4.4: Kết hàm lượng Polyphenol tổng số tỏi đen 36 a lu n va n DANH MỤC CÁC HÌNH tn to p ie gh Hình 2.1: Hình ảnh tỏi Hình 2.2: Hình ảnh củ tỏi oa nl w Hình 3.1: Sơ đồ qui trình lên men sản xuất tỏi đen 22 Hình 3.2: Sơ đồ bố trí thí nghiệm 23 d Hình 4.1 Thay đổi màu sắc tỏi đen lên men tủ sấy 29 a lu nv Hình 4.2 Thay đổi màu sắc tỏi ủ nồi cơm điện ứng với tỏi Hải Dương f an (a), tỏi Lý Sơn (b) 30 oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT Nghĩa tiếng Việt Từ, cụm từ Nghĩa tiếng Anh Amino acid Amino acid (axit amin) (axit amin) GAE Axit tỏi tương đương Garlic acid equivalents HD Hải Dương Hải Dương LS Lý Sơn Lý Sơn a.a a lu n n va p ie gh tn to Maillard reaction Phản ứng Millard products d oa nl w MRPS Nồi cơm điện // f an nv a lu NCĐ ul Rutin tương đương TS Tủ sấy Rutin equivalents oi lm RE at nh z // z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 iv MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i DANH MỤC CÁC BẢNG ii DANH MỤC CÁC HÌNH ii DANH MỤC TỪ, CỤM TỪ VIẾT TẮT iii MỤC LỤC iv PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề a lu 1.2 Mục đích yêu cầu nghiên cứu n 1.2.1 Mục đích nghiên cứu n va 1.2.2 Yêu cầu nghiên cứu tn to 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài p ie gh 1.3.1 Ý nghĩa khoa học 1.3.2 Ý nghĩa thực tiễn oa nl w Phần 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan tỏi d nv a lu 2.1.1 Tên gọi nguồn gốc f an 2.1.2 Đặc điểm hình thái đặc điểm sinh trưởng tỏi oi lm ul 2.1.3 Thành phần dinh dưỡng tỏi 2.1.4 Công dụng tỏi at nh 2.1.5 Nguồn nguyên liệu tỏi Việt Nam 12 z 2.2 Đặc điểm Tỏi Đen 12 z 2.2.1 Tổng quan tỏi đen 12 @ gm 2.2.2 Thành phần hóa học tỏi đen 13 om l.c 2.3 Công dụng tỏi đen 14 2.4 Tình hình nghiên cứu lên men Tỏi đen phân tích hoạt chất Việt an Lu Nam Thế giới 16 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 v 2.4.1 Tình hình nghiên cứu Việt Nam năm gần 16 2.4.2.Tình hình nghiên cứu giới 17 Phần 3: ĐỐI TƢỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 20 3.1 Đối tượng (vật liệu) phạm vi nghiên cứu 20 3.1.1 Đối tượng 20 3.1.2 Hóa chất 20 3.1.3 Dụng cụ 20 a lu 3.1.4 Thiết bị 21 n 3.1.5 Phạm vi nghiên cứu 21 n va 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành nghiên cứu 21 tn to 3.2.1 Địa điểm 21 p ie gh 3.2.2 Thời gian 21 3.2.3 Nội dung nghiên cứu 21 oa nl w 3.3 Phương pháp nghiên cứu 22 3.3.1 Sơ đồ qui trình lên men sản xuất tỏi đen 22 d nv a lu 3.3.2 Sơ đồ bố trí thí nghiệm 22 f an 3.4 Phương pháp chuẩn bị mẫu phân tích 24 oi lm ul 3.5 Phương pháp phân tích 24 3.5.1 Xác định tiêu lý hóa 24 at nh 3.5.2 Xác định tiêu hóa học 24 z Phần 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 z 4.1 Kết đặc tính lý hóa tỏi đen 29 @ gm 4.1.1 Thay đổi màu sắc tỏi đen 29 om l.c 4.1.2 Thay đổi ẩm độ tỏi đen lên men 31 4.1.3 Thay đổi mùi vị tỏi lên men 32 an Lu 4.2 Kết hàm lượng chất hóa học có tỏi đen 33 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 vi 4.2.1 Kết hàm lượng đường tổng tỏi đen 33 4.2.2 Kết thay đổi hàm lượng axit amin tỏi đen 34 4.2.3 Kết hàm lượng chất chống oxy hóa tỏi đen 35 Phần 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 38 5.1 Kết luận 38 5.2 Đề nghị 39 TÀI LIỆU THAM KHẢO 40 I Tài liệu Tiếng Việt 40 a lu II Tài liệu Tiếng Anh 40 n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 Phần MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Tỏi (Allium sativum L.), thuộc họ Alliaceae, nguyên liệu thường sử dụng chế biến thực phẩm Tỏi sử dụng loại thuốc truyền thống có loạt tác dụng sinh học, chẳng hạn như: tăng sức bền, giúp kích thích tiêu hóa để ngăn ngừa tiêu chảy nhiễm giun, điều trị bệnh tim mạch, viêm khớp, mệt mỏi [12] Gần đây, nhiều nghiên a lu cứu tỏi có loạt chất có hoạt tính sinh học, có chất n chống oxy hóa, kháng khuẩn, chống ung thư, hạ huyết áp, bảo vệ gan giải n va độc [30] Mặc dù thuộc tính sinh học tỏi có liên quan đến tn to polyphenolic - chất chống oxy hóa hợp chất lưu huỳnh tỏi p ie gh nghiền nát bị hư hỏng, số thành phần lưu huỳnh có hoạt tính sinh học tạo mùi hăng mạnh, kết hợp với thể làm cho thở oa nl w người sử dụng có mùi [14] Tỏi đen (BG - black garlic) gần biết đến từ thị trường Hàn d nv a lu Quốc sản phẩm y tế Tỏi đen hình thành qúa trình biến f an đổi toàn tỏi nhiệt độ độ ẩm cao, làm tỏi chuyển sang màu đen oi lm ul hợp chất hóa nâu Hơn nữa, tỏi đen khơng có mùi hăng mạnh tỏi tươi Điều thay đổi hợp chất allicin, liên quan đến hình at nh thành mùi hăng, chống oxy hóa thành hợp chất hòa tan nước z S-allylcysteine, tetrahydro-β-carbolines, alkaloids hoạt tính sinh học, z flavonoid [14,20] S-Allylcysteine hình thành dị hóa γ- @ gm glutamylcysteine ức chế q trình ơxy hố có liên quan tới lão hóa om l.c bệnh khác [18] Các dẫn xuất tetrahydro-β-Carboline xác định chiết xuất tỏi đen, cho thấy tác dụng chống oxy hóa [21, 31] an Lu Các dẫn xuất tetrahydro-β-Carboline hình thành cách ngưng tụ n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 tryptophan aldehyde, tương tự việc sản xuất axit pyruvic đường Allin-allicin trình phản ứng Maillard [31] Hơn nữa, số nghiên cứu chiết xuất tỏi đen có tác dụng chống oxy hóa, chống dị ứng, chống bệnh tiểu đường, chống viêm, kháng cholesterol, kháng lipidemic tác dụng chống ung thư [12] Các nghiên cứu trước cho thấy tỏi đen lên men từ tỏi thường khoảng thời gian từ 7-50 ngày, tuỳ thuộc vào điều kiện nhiệt độ, độ ẩm, phương pháp xử lý mẫu giống tỏi Mục đích nghiên cứu khảo sát điều kiện lên men để sản xuất tỏi a lu đen từ số giống tỏi thu thập Việt Nam phân tích hàm lượng n chất tỏi đen tương ứng với điều kiện lên men, với tên đề tài: “Đánh giá n va khả lên men phân tích số hoạt chất tỏi đen” tn to 1.2 Mục đích yêu cầu nghiên cứu p ie gh 1.2.1 Mục đích nghiên cứu Đánh giá khả lên men số giống tỏi phân tích số oa nl w hoạt chất có tỏi đen 1.2.2 Yêu cầu nghiên cứu d nv a lu Xác định ảnh hưởng thời gian điều kiện lên men đến: f an - Thay đổi đặc điểm lý hóa tỏi đen oi lm ul - Hàm lượng đường tỏi đen - Hàm lượng amino acid tỏi đen at nh - Hàm lượng chất chống oxy hoá tỏi đen z 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài z @ 1.3.1 Ý nghĩa khoa học gm - Kết nghiên cứu đề tài cung cấp dẫn liệu khoa học tỏi om l.c ảnh hưởng thời gian lên men đến khả chuyển hóa hoạt chất có an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 29 Phần KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Kết đặc tính lý hóa tỏi đen 4.1.1 Thay đổi màu sắc tỏi đen Màu sắc đặc tính quan trọng sản phẩm thực phẩm nói chung tỏi đen nói riêng, ảnh hưởng đến tâm lý người tiêu dùng Màu sắc tỏi đen thay đổi từ màu trắng -> xám nhạt -> nâu đen -> đen suốt a lu q trình lên men Ở thí nghiệm này, giống tỏi tỏi Hải Dương tỏi Lý Sơn n khảo sát khả lên men hai phương pháp khác lên men n va tủ sấy (điều kiện nhiệt độ 600C) nồi cơm điện (nhiệt độ tn to 700C) Ở hai phương pháp, tỏi bọc kín túi nilon giấy bạc để p ie gh trì độ ẩm Các kết cho thấy thời gian tối ưu để chuyển hóa thành tỏi đen khác giống tỏi khác điều kiện ủ (nhiệt độ) oa nl w khác *Kết lên men tỏi Hải Dƣơng tủ sấy d f an nv a lu oi lm ul at nh Hình 4.1 Thay đổi màu sắc tỏi đen lên men tủ sấy z Tỏi có thay đổi màu sắc từ màu trắng nguyên thủy thành màu z gm @ đen suốt 35 ngày chuyển hóa Nguyên nhân thay đổi màu sắc phản ứng Maillard, hay cịn gọi phản ứng hóa nâu khơng enzym Theo tài om l.c liệu có liên quan, sản phẩm phản ứng Maillard thường liên quan với tăng hấp thụ 280 nm, 320-360 nm, 420-450 nm, tương ứng với giai đoạn an Lu chuyển hóa: Giai đoạn đầu, giai đoạn giai đoạn cuối sản phẩm n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 30 phản ứng Maillard (MRPS) hình thành Trong giai đoạn đầu phản ứng Maillard tạo màu (khoảng 280 nm) sản sinh đường, amino axit Giai đoạn trung (320-360 nm) sinh sản phẩm không màu màu vàng thông qua số phản ứng, chẳng hạn nước đường, phân mảnh đường, suy thoái axit Giai đoạn cuối (420-450 nm) đánh giá cao với màu đối nghịch với màu ban đầu, aldehyde-amin ngưng tụ, hình thành hợp chất nitro dị vòng MRPs bắt nguồn từ glucose cysteine hấp thụ 285 nm với độ hấp thụ tối đa mức 340-360 nm Sự hình thành MRPs phụ thuộc vào điều kiện a lu chế biến nhiệt độ thời gian Do đó, thay đổi màu sắc tỏi đen n liên quan đến việc hình thành MRPs giai đoạn chuyển hóa nhiệt độ cao n va Kết chuyển hóa tỏi đen hình 4.1 cho thấy tỏi Hải Dương ủ tủ tn to sấy với nhiệt độ 600C, thời gian chuyển hóa tối ưu để tạo tỏi đen 35 p ie gh ngày, tỏi có màu đen đặc trưng khơng bị khơ, để lâu (40 ngày) màu sắc chuyển thành đen cháy khơ cứng, ăn có vị đắng Kết luận: Lên oa nl w men tỏi HD tủ sấy 40 ngày tỏi lên men vào ngày thứ 35 có màu sắc đẹp d f an nv a lu * Kết lên men tỏi Lý Sơn Hải Dƣơng nồi cơm điện oi lm ul at nh z z om l.c gm @ Dƣơng (a), tỏi Lý Sơn (b) an Lu Hình 4.2 Thay đổi màu sắc tỏi ủ nồi cơm điện ứng với tỏi Hải n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 31 Đối với tỏi Hải Dƣơng: - Dựa vào kết màu sắc tỏi hình 4.2a ta thấy: Tỏi HD lên men nồi cơm điện hóa nâu nhanh so với tỏi lên men tủ sấy Nguyên nhân nồi cơm điện có nhiệt độ cao so với nồi ủ nên q trình hóa nâu xảy nhanh Nếu màu sắc tỏi HD ủ nồi ủ đẹp vào ngày thứ 35 tỏi ủ nồi cơm điện lại có màu đen đẹp vào ngày thứ 23 Chính tơi có kết luận sau: Tỏi HD sau lên men nồi a lu cơm điện khoảng thời gian 28 ngày tỏi ủ vào ngày thứ 23 có n màu đẹp n va Đối với tỏi Lý Sơn - tn to Dựa vào hình 4.2b ta thấy: Màu sắc tép tỏi qua giai đoạn lên p ie gh men(ngày) -> -> 11 -> 14 -> 17 -> 20 sau: Trắng -> nâu nhạt -> nâu đậm -> nâu đen -> đen -> đen khô -> đen cháy Nguyên nhân thay oa nl w đổi màu sắc phản ứng Maillard, gọi phản ứng hóa nâu khơng enzym Nếu tỏi tỏi HD có màu đẹp vào ngày thứ 23 tỏi d nv a lu LS lại có màu đẹp vào ngày thứ 17 Nguyên nhân gây khác biệt f an màu sắc tỏi LS nhỏ tỏi HD Tỏi LS có đường kính trung bình oi lm ul 1,5cm tép tỏi nhỏ Tỏi HD có đường kính từ - 2,5cm tép tỏi to, thời gian ủ màu lâu so với tỏi LS at nh => Kết luận chung: Khi tỏi ủ nồi cơm điện, thời gian để tạo tỏi z đen có màu đặc trưng tỏi LS 17 ngày tỏi HD 23 ngày Tỏi Lý z Sơn có thời gian chuyển hóa (17 ngày) có kích thước củ tep tỏi @ to 4.1.2 Thay đổi ẩm độ tỏi đen lên men an Lu *Đối với tỏi Hải Dương lên men tủ sấy om l.c gm bé nhất, ngược lại tỏi HD lâu (23 ngày) kích thước củ tép tỏi n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 32 Trong trình lên men, tỏi có tượng nước ảnh hưởng nhiệt độ cao khoảng thời gian dài Qua hình ảnh cắt ngang tỏi đen dễ dàng nhận thấy thay đổi hình dáng tép tỏi qua giai đoạn lên men khác nhau: tỏi lên men 17 ngày tép tỏi ướt, dễ bị bóp nát, nhìn rõ váng nước tép tỏi, vỏ tỏi dính liền với tép tỏi, khó bóc Tỏi lên men 20 ngày tép tỏi bở nhiên vỏ tỏi khơng cịn dính liền với tép tỏi, dễ bóc Tỏi lên men 35 ngày Tép tỏi nhỏ đáng kể, dai dẻo, mặt ngồi tép tỏi khơ, dễ bóc a lu *Đối với tỏi Hải Dương lên men nồi cơm điện n Tỏi lên men nồi cơm điện nhanh khô so với tỏi n va lên men tủ sấy nhiệt độ nồi cơm điện cao nên thời gian tn to chuyển hóa nhanh Tỏi lên men 23 ngày đạt tính chất p ie gh tỏi lên men 35 ngày tủ sấy *Đối với tỏi Lý Sơn lên men nồi cơm điện oa nl w Tỏi Lý Sơn có thời gian chuyển hóa tối ưu nồi cơm điện 17 ngày, vào ngày thứ 17 tép tỏi nhỏ khô, dẻo dai dễ bóc d nv a lu Nguyên nhân dẫn đến tạo thành tỏi đen nhanh tỏi LS nhỏ nhiệt f an độ nồi cơm điện cao tủ sấy oi lm ul 4.1.3 Thay đổi mùi vị tỏi lên men Tỏi sau lên men hồn chỉnh có thay đổi rõ rệt mùi vị, at nh không mùi vị hăng nồng tỏi sống Tép tỏi sau lên men hoàn chỉnh z trở nên dai dẻo, có mùi giống thuốc bắc thơm, khơng cịn giịn, có vị chua z giống vị hoa Đối với tỏi Hải Dương lên men tủ sấy có @ gm mùi vị ngon vào ngày thứ 35 Đối với loại tỏi Hải Dương Lý Sơn lên om l.c men nồi cơm điện có mùi vị ngon vào ngày thứ 23 17 Khoảng thời gian tỏi cho mùi vị ngon tương ứng với khoảng thời gian mà an Lu tỏi có màu đẹp n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 33 4.2 Kết hàm lƣợng chất hóa học có tỏi đen Dựa vào kết đánh giá cảm quan định lấy mẫu tỏi Hải Dương ủ vào ngày thứ 35 tủ sấy để phân tích hàm lượng chất hóa học có tỏi đen 4.2.1 Kết hàm lượng đường tổng tỏi đen Trong tiêu đánh giá chất lượng tỏi đen đường tiêu quan trọng Nó định đến chất lượng tỏi đen, tạo vị cho tỏi đen sau trình lên men Đồng thời, đường yếu tố a lu quan trọng trình lên men để tạo nên phản ứng tạo màu cho sản n phẩm Chính việc xác định hàm lượng đường có ý nghĩa quan trọng n va định đến chất lượng sản phẩm tn to Hàm lượng đường tổng tỏi Hải Dương thể bảng 4.1 p ie gh Bảng 4.1: Kết phân tích hàm lƣợng đƣờng Tỷ lệ % (mg/g) oa nl w Hàm lƣợng Giống Hải Dương d 47,09 4,7% a lu f an nv Dựa vào kết bảng 4.1 cho thấy: Hàm lượng đường 47,09mg/100g chiếm 4,7% Theo nghiên cứu Choi cs [13], tỏi lên men điều ul oi lm kiện 70°C, độ ẩm tương đối 90%, thời gian 35 ngày hàm lượng đường đạt giá trị 16,07mg/g chiếm 1,6% Tại Việt Nam Nguyễn Thanh Huyền nh at – Đại học Nha Trang [7] thời gian 13 ngày lên men tỏi hàm lượng z z đường tổng đạt 50% Theo trung tâm nghiên cứu ứng dụng sản xuất thuốc @ gm - Học Viện Quân Y nghiên cứu thành công sản phẩm tỏi đen om l.c khoảng thời gian 35 ngày cho thấy hàm lượng đường 47,9% [38] Từ kết nghiên cứu đồng thời kết hợp với nghiên cứu khác an Lu cho thấy khác hàm lượng đường tổng số có tỏi đen Tuy n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 34 nhiên, khác hàm lượng đường nghiên cứu khác giống tỏi, nhiệt độ qui trình lên men dẫn đến biến đổi khác cho qui trình 4.2.2 Kết thay đổi hàm lượng axit amin tỏi đen Axit amin thành phần dinh dưỡng có mặt hầu hết loại thực phẩm, định đến chất lượng dinh dưỡng sản phẩm thực phẩm Axit amin có vai trị sản xuất kháng thể, giảm cholesterol, giúp hấp thụ canxi, giảm đau, kích thích tiêu hóa Chính iệc xác định hàm lượng axit amin a lu có tỏi đen cần thiết nghiên cứu n Bảng 4.2: Kết phân tích hàm lượng số amino acid có tỏi đen va n Hàm lƣợng Tỷ lệ % (mg/g) Leucine 6.10% Lysine 35,74 3,57% 65,03 6,50% Methionine 67,14 6,71% 135,54 13,55% 61,05 oa nl w p ie gh tn to Amino acid Isoleucine d f an nv a lu Phenylalanine oi lm ul Năm tiêu a.a quan trọng lựa chọn để xác định hàm lượng có 100g BG Kết bảng 4.2 cho thấy, Phenylalanine chiếm hàm lượng nh at cao 135,54 mg chiếm 13,55%; Methionine Isoleucine với z hàm lượng gần tương đương – 67,14mg 65,03mg (chiếm 6,71 6,5%) z gm @ Hàm lượng Lysine Leucine thấp – 35,74 61.05g; chiếm 3,57 om l.c 5,56% Theo nghiên cứu Choi cs [13] tỏi lên men nhiệt độ 700C với độ ẩm tương đối 90% thời gian lên men 35 ngày hàm lượng Leucine an Lu 59,19 mg; Lysine 40,5 mg; Isoleucine 71,07mg; Methionine 71,11mg Phenylalanine 143,07mg Ngoại trừ Phelylalanine có hàm lượng cao vào n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 35 ngày thứ 35 axit amin lại đạt hàm lượng cao vào ngày thứ 21 trình lên men Qua kết nghiên cứu đồng thời kết hợp với kết nghiên cứu trước cho thấy khác hàm lượng axit amin có tỏi đen Tuy nhiên, khác hàm lượng axit amin nghiên cứu khác giống tỏi, nhiệt độ qui trình lên men dẫn đến biến đổi khác cho qui trình 4.2.3 Kết hàm lượng chất chống oxy hóa tỏi đen a lu 4.2.3.1 Kết hàm lượng Flavonoids tỏi đen n Flavonoid nhóm chất màu quan trọng thực phẩm, có nhiều n va loại rau, hoa, số lượng tỉ lệ flavonoid khác tn to nhau, làm cho chúng có nhiều màu sắc khác Flavonoid dẫn xuất p ie gh phenol hầu hết người, động thực vật vi sinh vật đưa trực tiếp vào từ nguồn thức ăn Flavonoid tham gia vào tất trình trao đổi chất, oa nl w sinh tổng hợp trình enzyme Flavonoid thuộc nhóm hợp chất phenol, nhóm hợp chất có khả chống ơxy hóa mạnh Chính vậy, việc xác định d f an hóa tỏi đen nv a lu hàm lượng flavonoid tiêu quan trọng để đánh giá hoạt tính chống ơxy Chỉ tiêu oi lm ul Bảng 4.3: Kết hàm lƣợng Flavonoidss tổng số tỏi đen Hàm lƣợng Tỷ lệ % 5,6 0,05 z Flavonoid at nh (mg/100g) z @ gm Dựa vào bảng 4.3 cho thấy hàm lượng Flavonoids có tỏi HD lên om l.c men tủ sấy khoảng thời gian 35 ngày 5,66 mg/100g chiếm 0,05% Theo nghiên cứu Nguyễn Thanh Huyền [7] thời gian an Lu ngày trình lên men, tỏi giữ nhiệt độ 750C độ ẩm n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 36 tương đối 90% Trong ngày lên men tiếp theo, tỏi giữ nhiệt độ 650C độ ẩm tương đối 80% Trong thời gian ngày lên men cuối cùng, tỏi trì nhiệt độ 600C độ ẩm tương đối 70% Đến ngày lên men thứ 13 hàm lượng Flavonoids tổng số cao 21,5 mgRE/ g, Theo nghiên cứu Choi cộng [13] tỏi lên men nhiệt độ 700C với độ ẩm tương đối 90% thời gian lên men 35 ngày hàm lượng Flavonoids 16,26 mg RE/g có hàm lượng cao vào ngày lên men thứ 21 trình lên men a lu Từ kết nghiên cứu đồng thời kết hợp với nghiên cứu khác n cho thấy khác hàm lượng Flavonoids tổng số có tỏi đen Tuy n va nhiên, khác hàm lượng Flavonoids nghiên cứu khác tn to giống tỏi, nhiệt độ qui trình lên men dẫn đến biến đổi khác p ie gh cho qui trình 4.2.3.2 Kết hàm lượng Polyphenol tỏi đen oa nl w Polyphenol chất có đặc tính chống oxy hóa giúp chống lại việc tạo lập gốc tự dư thừa thể Gốc tự nguyên nhân gây lão d nv a lu hóa tế bào thể Polyphenol bảo vệ thể giúp thể chống lại f an nhiều loại bệnh khác nhau: Chống lại ung thư, chống loãng xương, chống lại oi lm ul bệnh tim mạch Flavonoids việc xác định hàm lượng Polyphenol tiêu quan trọng để đánh giá hoạt tính chống ơxy hóa tỏi đen at nh Bảng 4.4: Kết hàm lƣợng Polyphenol tổng số tỏi đen Tỷ lệ % z (mg/100g) 1,79% om l.c gm 17,91 @ Polyphenol Hàm lƣợng z Chỉ tiêu Dựa vào bảng 4.3 cho thấy hàm lượng Polyphenol có tỏi HD lên an Lu men tủ sấy khoảng thời gian 35 ngày 17,91 mg/100g chiếm n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 37 1,79% Cũng theo nghiên cứu Choi cs [13] lên men tỏi nhiệt độ 700C với độ ẩm tương đối 90% thời gian lên men 35 ngày hàm lượng Polyphenol tổng số 48,35 mg/g có hàm lượng cao vào ngày thứ 21 trình lên men Từ kết nghiên cứu đồng thời kết hợp với nghiên cứu khác cho thấy khác hàm lượng Polyphenol tổng số có tỏi đen Tuy nhiên, khác hàm lượng Polyphenol nghiên cứu khác giống tỏi, nhiệt độ qui trình lên men dẫn đến biến đổi khác a lu cho qui trình n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 38 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Qua thời gian thực tập tiến hành nghiên cứu khả lên men tỏi phân tích hoạt chất số giống tỏi Việt Nam phòng vi sinh khoa CNSH – CNTP chúng tơi có kết luận sau: Sử dụng phương pháp lên men tỏi tủ sấy cho màu sắc mùi vị a lu n đạt chuẩn vào ngày thứ 35 trình lên men va n Sử dụng phương pháp lên men nồi cơm điện cho màu sắc mùi Sau kết thúc 35 ngày lên men tủ sấy cho sản phẩm tỏi đen p ie gh tn to vị đạt chuẩn vào ngày thứ 23 q trình lên men có hàm lượng đường 47,09mg/g chiếm 4,7% oa nl w Hàm lượng axit amin thiết yếu tỏi đen lên men tủ sấy khoảng thời gian 35 ngày là: Leucine 61,05 mg/100g chiếm 6,10%; d nv a lu lysine 35,74 mg/100g chiếm 3,57%; isoleucine 65,03 mg/100g chiếm 6,50%; methionine 67,14 mg/100g chiếm 6,71%; phenylalanine 135,54 mg/100g f an oi lm ul chiếm 13,55% Hàm lượng flavonoids polyphenol tỏi đen lên men tủ z 17,91 mg/100g chiếm 1,79% at nh sấy khoảng thời gian 35 ngày là: 5,66 mg/100g chiếm 0,05% z gm @ Cả phương pháp lên men cho sản phẩm tỏi đen đạt yêu cầu màu sắc mùi vị Nhưng phương pháp lên men tủ sấy hiệu om l.c tạo sản phẩm tỏi đen có hàm lượng chất cao an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 39 5.2 Đề nghị Qua q trình thực tập trường tơi học nhiều kinh nghiệm quý báu đồng thới mạnh dạn đưa số đề nghị sau: Tiếp tục lập lại chuyên đề quy mô, số lượng lớn So sánh hiệu nhiều loại phương pháp lên men tỏi để tìm phương pháp lên men tốt nhằm khuyến khích người áp dụng, tuyên truyền sâu rộng phổ biến quy trình lên men tỏi có hiệu quả, hạn chế áp dụng qui trình hiệu a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w f an nv a lu oi lm ul at nh z z om l.c gm @ an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 40 TÀI LIỆU THAM KHẢO I Tài liệu Tiếng Việt Vũ Bình Dương, Phạm Xuân Phong Nghiên cứu thành phần hóa học tỏi đen Lý Sơn Tạp chí Y dược lâm sàng 108 2013 Vũ Bình Dương, Vũ Xuân Nghĩa, Phạm Xuân Phong Nghiên cứu khả bảo vệ quan tạo máu dịch chiết tỏi đen Lý Sơn chuột bị chiếu xạ Tạp chí Dược học 2013, số 446 Vũ Bình Dương, Nguyễn Văn Long Đánh giá tác dụng chống oxy óa dịch chiết tỏi đen Lý Sơn động vật thực nghiệm Tạp chí ược học số 447 a lu Nguyễn Thanh Hải, Bùi Thị Tho Nghiên cứu tác dụng diệt khuẩn invitro n n va dịch chiết tỏi (Allium Sativum L) E.Coli gây bệnh E.Coli số 6: 804-808 p ie gh tn to kháng Ampicillin, Kanamycin Tạp chí Khoa học Phát triển 2013, tập 11, Phạm Hoàng Hộ (2006) “ Cây có vị thuốc Việt Nam”, Nhà xuất trẻ Đỗ Tất Lợi (2003) Những thuốc vị thuốc Việt Nam NXBY oa nl w học, Hà Nội Nguyễn Thanh Huyền (2015) Nghiên cứu biến đổi thành phần hóa lý d Nguyễn Đức Vượng (2015) Nghiên cứu lên men tỏi đen từ tỏi trắng xã f an nv a lu tỏi (Allium Sativum L) Phan Rang theo thời gian lên men Quảng Hịa - Quảng Trạch – Quảng Bình Tạp chí thơng tin khoa học ul II Tài liệu Tiếng Anh nh Amagase, H.; Petsch, B.L.; Matsuura, H.; Kasuga, K.; Itakura, Y Intake at oi lm công nghệ Quảng Bình – số 1/2015 z of garlic and its bioactive components J Nutr 2001, 131, 955S–962S z Asdaq SM, Inamdar MN, Asad M (2009) Effect of conventional gm @ 10 antihypertensive drugs on hypolipidemic action of garlic in rats Indian J om l.c 11 Exp Biol., 47(3): 176-181 Banerjee, S.K.; Maulik, S.K Effect of garlic on cardiovascular disorders: an Lu A review Nutr J 2002, 1, 1–14 n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 41 12 Boyd, O., P Weng, X Sun, T Alberico, M Laslo et al., 2011 Nectarine promotes longevity in Drosophila melanogaster Free Radical Bio Med., 50(11): 669-1678 13 Sook Choi, Han Sam Cha and Young Soon Lee, 2014 Physicochemical and Antioxidant Properties of Black Garlic Molecules 2014, 19, 1681116823 14 Corzo-Martínez, M.; Corzo, N.; Villamiel, M Biological properties of onions and garlic Trends Food Sci Technol 2007, 18, 609–625 15 Colin-Gonzalez, A.L.; Santana, R.A.; Silva-Islas, C.A.; Chanez- a lu Cardenas, M.E.; Santamaria, A.; Maldonad, P.D The antioxidant n n va mechanisms underlying the aged garlic extract- and S-allylcystein-induced tn to protection Oxidative Med Cell Longev 2012, 2012, 1–16 16 Chao, L.F., H Guo and Z Li, 2012 Research progress in the nutritional p ie gh value and health effects of black garlic Sci Technol Food Ind., 33(13): Ejaz S, Woong LC, Ejaz A (2003) Extract of garlic (Allium sativum) in oa nl w 17 429-432 cancer chemopreventions Exp Oncol., 24: 93-97 d EL KZ, Rasheed W, Ramzy T, Hussein J, Agaiby M, Morsy S, Morsy F, a lu 18 f an nv Shaffie N (2010) Protective effect of garlic oil against liver injury in experimental animals J Med Plants Res., 4(22): 2359-2369 ul Folch J, Lees M, Sloan SGH (1957) A simple method for isolation and oi lm 19 purification of total lipids from animal tissues J Biol Chem., 226: 497-509 nh Ichikawa, M.; Ryu, K.; Yoshida, J.; Ide, N.; Yoshida, S.; Sasaoka, T.; at 20 z Sumi, S.I Antioxidant effects of tetrahydro-β-carboline derivatives z 21 gm @ identified in aged garlic extract BioFactors 2002, 16, 57–72 Ichikawa, M.; Yoshida, J.; Ide, N.; Sasaoka, T.; Yamaguchi, H.; Ono, K properties J Nutr 2006, 136, 726S–731S om l.c Tetrahydro-β-carboline derivatives in aged garlic extract show antioxidant an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 42 22 Inhye Kim1,2*, Jin-Young Kim1, Yu-Jin Hwang1, Kyung-A Hwang1, Ae-Son Om2, Jae-Hyun Kim1 and Kang-Jin Cho1 The beneficial effects of aged black garlic extract on obesity and hyperlipidemia in rats fed a high-fat diet (Journal of Medicinal Plants Research Vol 5(14), pp 3159-3168, 18 July, 2011) 23 Kim, J.H., S.H Nam, C.W Rico and M.Y Kang, 2012 A comparative study on the antioxidative and antiallergic activities of fresh and aged black garlic extracts Int J Food Sci Tech., 47: 1176-1182 24 Kim, M.H.; Kim, M.J.; Lee, J.H.; Han, L.J.; Kim, J.H.; Sok, D.E.; Kim, a lu M.R Hepatoproective effect of aged black garlic on chronic alcohol- n n va induced liver injury in rats J Med Food 2011, 14, 732–738 Kim, I.; Kim, J.Y.; Hwang, Y.J.; Hwang, K.A.; Om, A.S.; Kim, J.H.; Cho, K.J The beneficial effects of aged black garlic extract on obesity and p ie gh tn to 25 hyperlipidemia in rats fed a high-fat diet J Med Plants Res 2011, 5, Kim JY, Kwon O (2009) Garlic intake and cancer risk: an analysis using oa nl w 26 3159–3168 the food and drug administration’s evidence-based review system for the d Lee YM, Gweon OC, Seo YJ, Im J, Kang MJ, Kim MJ, Kim JI (2009) f an nv 27 a lu scientific evaluation of health claims Am J Clin Nutr., 89: 257264 Antioxidant effect of garlic and aged black garlic in animal model of type ul 28 oi lm diabetes mellitus Nutr Res Pract., 3(2): 156-161 Mengmeng Lei, Mengying Xu, Zesheng Zhang, Min Zhang and nh at Yunfeng The Analysis of Saccharide in Black Garlic and its Antioxidant z Activity Gao Key Laboratory of Food Nutrition and Safety, Tianjin z gm @ University of Science and Technology, Ministry of Education, Tianjin 300457, P.R Chin(Advance Journal of Food Science and Technology om l.c 6(6): 755-760, 2014) an Lu n va ac th 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99 si 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.2237.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.66 37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.99

Ngày đăng: 25/09/2023, 18:41

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan