Nghien cuu danh gia cac dac tinh nong sinh hoc va 11538

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN ĐẠI HỌC MỞ HÀ NỘI KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC    Vũ Thị Lan - Lớp: CNSH 07 - 02 KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: NGHIÊN CỨU ĐÁNH GIÁ CÁC ĐẶC TÍNH NƠNG SINH HỌC VÀ KHẢ NĂNG KHÁNG VIRUS CỦA CON LAI SOMA KHOAI TÂY (DUNG HỢP TẾ BÀO TRẦN) Giáo viên hướng dẫn : GS.TS Nguyễn Quang Thạch KS.Vũ Thị Hằng Sinh viên thực : Vũ Thị Lan Lớp : KSCNSH0702 – K14 HÀ NỘI - 2011 Khóa luận tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc kính trọng tới GS TS Nguyễn Quang Thạch, người tạo điều kiện cho thực đề tài Viện sinh học nông nghiệp Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cán phịng Thí nghiệm CNSH Khoai tây - Viện Sinh học Nông nghiệp – Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, đặc biệt KS Vũ Thị Hằng nhiệt tình hướng dẫn tạo điều kiện thuận lợi cho thời gian thực tập Xin cảm ơn sâu sắc thầy cô giáo Viện Đại học Mở Hà Nội, đặc biệt thầy cô khoa Công nghệ sinh học trang bị cho tơi kiến thức vơ bổ ích, giúp tơi có tảng thực tốt đề tài Cuối cùng, tơi xin dành lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè luôn bên, động viên, an ủi tơi q trình tơi thực đề tài Hà nội, ngày 25 tháng năm 2011 Sinh viên Vũ Thị Lan Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp CÁC KÍ TỰ VIẾT TẮT  AFLP-Amplified Fragment length polymorphism  BC (Back cross)  NST Nhiễm sắc thể  PLRV Potato leafroll luteovirus PLRV  PVA Potato A potyvirus  PVM Potato M carlavirus  PVM Potato M carlavirus  PVS Potato S carlavirus  PVV Potato V potyvirus  PVX Potato X potexvirus  PVY.Potato Y potyvirus MỤC LỤC Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp Lời cảm ơn .i Các kí tự viết tắt ii Mục lục iii Danh mục bảng vi Danh mục đồ thị viii Danh mục hình ix MỞ ĐẦU I Đặt vấn đề .1 II Mục đích yêu cầu Mục đích 2 Yêu cầu PHẦN I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung khoai tây 1.1.1 Nguồn gốc 1.1.2 Phân loại 1.1.4 Yêu cầu điều kiện ngoại cảnh khoai tây 1.1.5 Giá trị dinh dưỡng khoai tây 1.2 Tình hình sản xuất, tiêu thụ khoai tây giới Việt nam 1.3 Bệnh virus khoai tây 11 1.3.1 Tìm hiểu virus hại khoai tây hậu virus gây 11 1.3.2 Giải pháp khắc phục 16 1.4 Tình hình nghiên cứu ngồi nước 19 1.4.1 Tình hình nghiên cứu giới 19 1.4.2 Một số nghiên cứu dung hợp tế bào trần đối tượng khoai tây Việt Nam 21 PHẦN II VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp 2.1 Đối tượng, vật liệu, địa điểm thời gian nghiên cứu 23 2.1.1 Đối tượng .23 2.1.2 Vật liệu 23 2.1.3 Địa điểm 23 2.1.4 Thời gian nghiên cứu .23 2.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu .24 2.2.1 Đánh giá độ bội số dòng tái sinh 24 2.2.2 Các thí nghiệm đánh giá sinh trưởng, phát triển hình thành suất điều kiện chậu vại khả hình thành suất hai điều kiện trồng trọt (khí canh địa canh) 24 2.2.3 .Đánh giá khả kháng virus PVY thông qua lây nhiễm nhân tạo, test ELISA thị phân tử (PCR) 26 2.2.4 Đánh giá tiêu hóa sinh 28 2.2.5 Xử lý số liệu 30 PHẦN III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 31 3.1 Kết đánh giá độ bội dòng tái sinh .31 3.2 Kết đánh giá khả sinh trưởng phát triển dòng bố mẹ lai soma điều kiện chậu vai khả hình thành suất hai điều kiện trồng trọt (khí canh địa canh) 33 3.2.1 Đánh giá khả sinh trưởng phát triển dòng bố mẹ lai soma điều kiện chậu vại 33 3.2.2 Đánh gía suất hai dòng lai triển vọng H76 H79 điều kiện khí canh đất 52 3.3 Kết đánh giá khả kháng virus PVY thông qua phương pháp lây nhiễm nhân tạo, test ELISA thị phân tử 57 3.3.1 Phương pháp lây nhiễm nhân tạo test ELISA 57 3.3.2 Phương pháp thị phân tử 61 3.4 Phân tích số tiêu hóa sinh đánh giá chất lượng củ tổ hợp PA41+PA15/H76 H79 .63 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 66 Kết luận 66 Đề nghị 67 TÀI LIỆU THAM KHẢO 68 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1: Sản lượng khoai tây giới, 1991-2007 Bảng 1.2: Diện tích , sản lượng suất khoai tây châu lục năm 2006-2007 Bảng 1.3: Diện tích, suất, sản lượng khoai tây giống Việt Nam 10 Bảng 1.4: Nhóm virus hại khoai tây (Beemster DeBokx 1987; Burton 1989; Brunt et al 1996) .13 Bảng 3.1: Chiều cao trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai H76 H79 34 Bảng 3.2: Chiều cao trung bình qua thời kỳ theo dõi tổ hợp PB208+ PB186/ H21-1 36 Bảng 3.3: Chiều cao trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp PA16+ PB186/ H81-2 37 Bảng 3.4: Số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA41+PA15/ H79 H76 39 Bảng 3.5: Số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PB208+PB186/ H21-1.40 Bảng 3.6: Số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA16+PB186/ H81-2 .41 Bảng 3.7: Đường kính thân trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA41+PA15/H76 H79 43 Bảng 3.8: Đường kính thân trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PB208+PB186/H21-1 .44 Bảng 3.9: Đường kính thân trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA16+PB186/H81-2 44 Bảng 3.10: Năng suất yếu tố hình thành suất dòng khảo sát .46 Bảng 3.11: Phân loại cấp củ sau thu hoạch với giống khoai tây khảo sát 49 Bảng 3.12 : Đặc điểm hình thái củ 50 Bảng 3.13: Năng suất yếu tố cấu thành suất 53 Bảng 3.14: Đặc điểm hình thái củ phân loại cấp củ 54 Bảng 3.15: Năng suất yếu tố cấu thành suất 55 Bảng 3.16: Đặc điểm hình thái củ phân loại củ 56 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp Bảng 3.17: Kết test Elisa kiểm tra tính kháng virus PVX lai bố mẹ trước lây nhiễm nhân tạo 57 Bảng 3.18: Trình tự xếp mẫu khoai tây vào giếng ELISA 58 Bảng 3.19: Kết test Elisa kiểm tra tính kháng virus PVY dòng lai bố mẹ trước lây nhiễm nhân tạo .59 Bảng 3.20: Trình tự xếp mẫu khoai tây vào giếng ELISA 59 Bảng 3.21: Trình tự xếp mẫu khoai tây vào giếng ELISA 60 Bảng 3.22: Bảng tóm tắt đặc tính kháng virus PVY dịng lai “bố mẹ” .63 Bảng 3.23: Các tiêu hóa sinh 64 DANH MỤC CÁC ĐỒ THỊ Đồ thị 3.1: Kết xác định độ bội mẫu nhị bội A15 (2n=2x=24) 32 Đồ thị 3.2: Kết độ bội dòng tái sinh (2n=4x=48) 32 Đồ thị 3.3: Biểu đồ thể chiều cao trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA41+PA15/H76 H79 34 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp Đồ thị 3.4: Biểu đồ thể chiều cao trung bình qua thời kỳ theo dõi tổ hợp PB208+ PB186/ H21-1 .36 Đồ thị 3.5: Biểu đồ thể chiều cao trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp PA16+ PB186/ H81-2 38 Đồ thị 3.6: Biểu đồ thể số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA41+PA15/ H79 H76 40 Đồ thị 3.7: Biểu đồ thể số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PB208+PB186/ H21-1 41 Đồ thị 3.8: Biểu đồ thể số trung bình thời kỳ theo dõi tổ hợp lai PA16+PB186/ H81-2 .42 Đồ thị 3.9: Biểu đồ thể động thái tăng trưởng đường kính thân dịng khảo sát 45 Đồ thị 3.10: Biểu đồ thể yếu tố cấu thành suất giống khoai tây khảo sát 48 Đồ thị 3.11: Biểu đồ thể tỷ lệ cấp củ giống khoai 49 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02 Khóa luận tốt nghiệp DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1: Chiều cao tổ hợp lai PA41+PA15/H76 H79 35 Hình 2: Chiều cao tổ hợp PB208+ PB186/ H21-1 37 Hình 3.3: Chiều cao tổ hợp PA16+ PB186/ H81-2 38 Hình 4: Hình ảnh củ thu hoạch tổ lai 47 Hình 3.5 : Củ tổ hợp lai điều kiện chậu vại 51 Hình 3.6: Sự sinh trưởng khả tạo củ lai H79 H76 điều kiện khí canh 53 Hình 3.7 Kết test ELISA kiểm tra virus PVX 58 Hình 3.8 Kết ELISA kiểm tra virus PVY 60 Hình 3.9 Kết ELISA kiểm tra virus PVY 61 Hình 3.10: Kết chạy PCR 62 Vũ Thị Lan Lớp: CNSH 07 - 02