(Luận văn) nghiên cứu tách chiết hoạt chất protodioscin từ cây bạch tật lê (tribulus terrestris l )

ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN -*** - lu VŨ QUANG THẮNG an va n to p ie gh tn NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT HOẠT CHẤT PROTODIOSCIN TỪ CÂY BẠCH TẬT LÊ (Tribulus terrestris L.) oa nl w d ul nf va an lu lm LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC oi at nh z z gm @ om l.c Lu an n va Hà Nội – 2018 ac th si ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN -*** - VŨ QUANG THẮNG NGHIÊN CỨU TÁCH CHIẾT HOẠT CHẤT PROTODIOSCIN lu TỪ CÂY BẠCH TẬT LÊ (Tribulus terrestris L.) an va n to : Sinh học thực nghiệm Mã số : 8420101.14 p ie gh tn Chuyên ngành oa nl w d ul nf va an lu LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC oi lm nh NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: at TS PHẠM HƢƠNG SƠN z z TS LÊ HỒNG ĐIỆP gm @ om l.c Lu an n va Hà Nội - 2018 ac th si LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Ban Giám hiệu, Phòng Đào tạo Sau đại học, Ban Chủ nhiệm khoa Sinh học, Bộ môn Sinh học thực nghiệm thầy cô Khoa Sinh học giảng dạy truyền đạt kiến thức cho năm tháng học tập nghiên cứu trƣờng Tơi xin đƣợc bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới TS Phạm Hƣơng Sơn – Phó viện trƣởng, Viện Ứng dụng Cơng nghệ - Bộ Khoa học Công nghệ, ngƣời hƣớng dẫn tơi Cơ giúp tơi định hƣớng nghiên cứu dành nhiều tâm huyết, thời gian, công sức, ln động viên tơi suốt q trình tơi thực đề tài Tôi xin đƣợc bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS Lê Hồng Điệp, lu an ngƣời đồng hƣớng dẫn Thầy ngƣời truyền dạy kiến thức cho tôi, giúp va định hƣớng nghiên cứu quan tâm tạo điều kiện tốt để tơi hồn n to thành nghiên cứu tn gh Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành tới Ban Giám Đốc, Khoa Hóa Sinh, p ie Trung tâm Kiểm sốt Bệnh tật tỉnh Quảng Ninh, tạo điều kiện tốt cho tơi hồn thành khóa học nl w Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn tới gia đình, bạn bè ngƣời thân, oa d ln bên, động viên cho tơi có thêm nghị lực để vƣợt qua lúc khó khăn an lu suốt thời gian qua nf va Hà Nội, tháng 11 năm 2018 ul Học viên oi lm at nh z z Vũ Quang Thắng gm @ om l.c Lu an n va ac th si MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Bạch tật Lê (Tribulus terrestris L.) 1.1.1 Đặc điểm hình thái, phân loại phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học tác dụng dƣợc lí Bạch Tật Lê 1.2 Protodioscin 14 1.2.1 Cấu trúc Protodioscin 14 lu 1.2.2 Tác dụng dƣợc lí Protodiscin 15 an va 1.3 Các phƣơng pháp tách chiết hơp chất có hoạt tính sinh học từ thực vật 22 n to gh tn 1.3.1 Các phƣơng pháp tách chiết hợp chất từ thực vật 22 1.3.2 Tách chiết Protodioscin 25 p ie CHƢƠNG VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 28 nl w oa 2.1 Vật liệu nghiên cứu 28 d an lu 2.1.1 Nguyên liệu 28 nf va 2.1.2 Hóa chất, dụng cụ thiết bị 28 ul 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 29 lm oi 2.2.1 Phƣơng pháp lựa chọn dung môi để chiết Bạch Tật Lê 29 nh at 2.2.2 Phƣơng pháp lựa chọn phƣơng pháp, nhiệt độ, thời gian chiết tổng Bạch z Tật Lê 29 z gm @ 2.2.3 Phƣơng pháp chiết phân đoạn mẫu dịch chiết tổng Bạch Tật Lê 29 2.2.4 Phƣơng pháp tách sắc ký làm giàu protodioscin 30 l.c om 2.2.5 Phƣơng pháp dựng đƣờng chuẩn định lƣợng protodioscin 30 Lu an 2.2.6 Phƣơng pháp thử nghiệm thay đổi hormon sinh dục chuột 31 n va ac th si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.2.7 Phƣơng pháp xử lý số liệu 31 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 32 3.1 Lựa chọn dung môi điều kiện chiết tổng Bạch Tật Lê 32 3.2 Lựa chọn phƣơng pháp, nhiệt độ chiết tổng Bạch Tật Lê 33 3.3 Lựa chọn thời gian chiết tổng Bạch Tật Lê 35 3.4 Nghiên cứu chiết phân đoạn dịch chiết tổng Bạch Tật Lê 37 3.5 Nghiên cứu tách sắc ký làm giàu Protodioscin 38 lu 3.6 Xây dựng quy trình tách chiết Protodioscin quy mơ phịng thí nghiệm 40 an 3.7 Nghiên cứu thay đổi hormon sinh dục chuột sử dụng dịch chiết va n chứa Protodioscin từ Bạch Tật Lê 42 to tn gh CHƢƠNG KẾT LUẬN 46 p ie KIẾN NGHỊ 46 oa nl w d ul nf va an lu oi lm at nh z z gm @ om l.c Lu an n va ac Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 So sánh phƣơng pháp tiền tách chiết 23 Bảng 1.2 So sánh phƣơng pháp tách chiết truyền thống 24 Bảng 1.3 So sánh phƣơng pháp tách chiết đại 25 Bảng 1.4 Dung môi khách dùng chiết xuất nhóm hoạt chất từ dƣợc liệu 26 Bảng 3.1 Hiệu suất chiết theo dung môi chiết khác (g cao chiết/2kg nguyên liệu, đun hồi lƣu 2h) 33 Bảng 3.2 Hiệu suất chiết theo phƣơng pháp chiết khác (g cao chiết/2 kg nguyên liệu) 34 lu an Bảng 3.3 Hiệu suất chiết theo nhiệt độ chiết khác (g cao chiết/2 kg va nguyên liệu) 35 n to Bảng 3.4 Hiệu suất chiết theo thời gian chiết khác (g cao chiết/2 kg nguyên tn gh liệu, đun hồi lƣu với 50% ethanol h) 36 p ie Bảng 3.5 Hiệu suất chiết theo điều kiện khác (g cao chiết/2 kg nguyên liệu) 36 nl w Bảng 3.6 Nồng độ hormon sinh dục chuột bình thƣờng chuột uống chiết oa d xuất chứa protodioscin từ Bạch Tật Lê 42 ul nf va an lu oi lm at nh z z gm @ om l.c Lu an n va ac Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Hình thái tồn Bạch Tật Lê (Tribulus terrestris) Hình 1.2 Đặc điểm hình thái Bạch Tật Lê (Tribulus terrestris) Hình 1.3 Các loại khung carbon saponin spiroston Bạch Tật Lê Hình 1.4 Các loại khung carbon saponin furostane Bạch Tật Lê Hình 1.5 Một số saponin có hoạt tính sinh học tách chiết từ Bạch Tật Lê Hình 1.6 Cấu trúc hóa học flavonoid tách chiết từ Bạch Tật Lê Hình 1.7 Cấu trúc alkaloid tách chiết từ Bạch Tật Lê lu Hình 1.8 Cấu trúc hóa học protodioscin 15 an Hình 1.9 Cơ chế hoạt động protodioscin cải thiện chức tình dục 19 va n Hình 2.1 Mẫu Bạch Tật Lêđƣợc phơi khô mẫu khô 28 to tn Hình 2.2 Đƣờng chuẩn định lƣợng chất chuẩn protodioscin 31 ie gh Hình 3.1 Sắc ký mỏng mẫu cao chiết tổng phân đoạn: (1) cao A, (2) cao p chiết ethyl acetate, (3) dịch chiết B Bản mỏng silica gel pha thƣờng, dung môi triển nl w khai dichloromethane-methanol 1:1 38 oa Hình 3.2 Sắc ký mỏng mẫu cao B (1), cao C (2) Bản mỏng silica gel pha d thƣờng, dung môi triển khai ethyl acetate:cồn 20:1 38 an lu Hình 3.3 Sắc ký đồ UV 210nm chất chuẩn protodioscin 39 va nf Hình 3.4 Sắc ký đồ UV 210nm mẫu Bạch Tật Lê thân 39 ul Hình 3.5 Sắc ký đồ UV 210nm mẫu Bạch Tật Lê 39 lm oi Hình 3.6 Sắc ký đồ HPLC cao D chứa protodioscin 40 at nh z z gm @ om l.c Lu an n va ac Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT lu an va n to kilodalton HepG2 Tế bào ung thƣ gan E coli Escherichia coli S aureus Staphylococcus aureus NO Nitric oxit nmol/L Nanomole/Lite Hormon LH Luteinizing Hormone Hormon FSH Follicle Stimulating Hormone Hormon GnRH Gonadotropin Releasing Hormone DHEA Dehydroepiandrosterone DNA Deoxyribonucleic acid VietGAP Vietnamese Good Agricultural Practices gh tn kDa Cyclic adenosine monophosphate p ie cAMP oa nl w d ul nf va an lu oi lm at nh z z gm @ om l.c Lu an n va ac Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an ĐẶT VẤN ĐỀ Bạch tật lê (Tribulus terrestris) loại thảo dƣợc đƣợc trồng quanh năm khu vực Địa Trung Hải vùng có khí hậu ấm Châu Âu, Châu Á, Mỹ, Châu Phi Australia Từ lâu, loại đƣợc sử dụng y học cổ truyền Trung Quốc, Ấn Độ, Iraq, Bulgari, Nam Phi Iran Bạch tật lê có nhiều thành phần có hoạt chất sinh học nhƣ steroid, saponin, flavonoid, alkaloid, acid béo khơng bão hịa, vitamin, tannin, acid aspartic acid glutamic Trong saponin đƣợc coi thành phần đặc trƣng đƣợc nghiên cứu ứng dụng từ lâu để làm tăng khả sinh sản động vật thí nghiệm ngƣời lu an Cây Bạch tật lê đƣợc dùng điều trị cho bệnh nhân nam giới vơ sinh có va tác dụng tăng số lƣợng tinh trùng khả di động tinh trùng Bên cạnh đó, n to Bạch tật lê làm cải thiện khả cƣơng cứng hành vi tình dục động tn gh vật thí nghiệm Các tác dụng Bạch tật lê có chứa thành phần protodioscin p ie saponin tăng hormon sinh dục ảnh hƣởng lên hệ thống sinh sản Protodioscin làm tăng hormon sinh dục testosterone tự máu, dihydrotrestosterone nl w (DHT), dehydroepiandrosterone (DHEA) dehydroepiandrosterone sulfat (DHEA- oa d S), đồng thời cân nồng độ estrogen, progesterone pregnenolone Chính an lu vậy, tiến hành nghiên cứu với mục tiêu: nf va Nghiên cứu điều kiện tách chiết hoạt chất protodioscin từ Bạch tật lê ul nhằm tìm hoạt chất sinh học an tồn, hiệu điều trị tăng cƣờng sinh lực oi lm nam giới at nh z z gm @ om l.c Lu an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tổng quan Bạch tật lê (Tribulus terrestris L.) 1.1.1 Đặc điểm hình thái, phân loại phân bố 1.1.1.1 Phân loại Chi Tribulus thuộc họ Zygophyllaceae bao gồm khoảng 20 loài giới, có ba lồi: Tribulus cistoides, Tribulus terrestris, Tribulus alatus xuất phổ biến Ấn Độ Trong số đó, Bạch tật lê (T terrestris) đƣợc sử dụng nhƣ dƣợc liệu quý nhằm hỗ trợ cải thiện sức khỏe ngƣời Bạch tật lê lồi bụi, đƣợc tìm thấy Địa Trung Hải, cận nhiệt đới sa mạc vùng khí hậu toàn giới nhƣ Ấn Độ, Trung Quốc, quốc gia Nam Mỹ, Mexico, Tây Ban lu an Nha, Bulgaria [16] va Phân loại n to Giới: Plantae Phân ngành: Angiospermae p ie gh tn Phân giới: Phanerogams Lớp: Dicotyledonae nl w Phân lớp: Polypetalae oa d Dòng: Disciflorae an lu Bộ: Giraniales ul Chi: Tribulus nf va Họ: Zygophyllaceae oi lm Loài: terrestris Linn [16] nh 1.1.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh thái phân bố at Trên giới Bạch tật lê đƣợc mô tả với đặc điểm nhƣ sau: Thân thấp z z nhỏ, cao 10-60 cm, tối màu Gốc hình trụ, dài 7-18 cm đƣờng kính 0,3-0,7 cm Lá @ gm kép mọc đối từ đến cặp hình elip hình trụ nhiên bất đối xứng Hoa có màu vàng Quả có nhiều hình dạng (trịn, dẹt, năm góc) thƣờng đƣợc bao phủ l.c Lu rễ nhỏ có màu nâu nhạt (Hình 1.1) [16] om màu vàng nhạt, có nhiều hạt Rễ xơ, hình trụ, thƣờng phân nhánh, mang số an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Hình 3.6 Sắc ký đồ HPLC cao D chứa protodioscin bƣớc sóng 210nm lu Từ kết trên, xác định đƣợc hàm lƣợng protodioscin từ an Bạch tật lê va n to Từ kết thu đƣợc trên, tiến hành xây dựng quy trình chiết ie gh tn 3.6 Xây dựng qui trình tách chiết protodioscin qui mơ phịng thí nghiệm p xuất làm giàu protodioscin qui mơ phịng thí nghiệm theo sơ đồ sau: nl w oa Thuyết minh qui trình: d Bƣớc 1: Phần cành Bạch tật lê đƣợc sơ chế phơi khô bóng râm sau an lu xay thành bột mịn nf va Bƣớc 2: Đun hồi lƣu 950C kg mẫu nguyên liệu bột khô lít ethanol ul 50% 2h Dịch chiết đƣợc rút kiệt bổ sung lít ethanol 50% vào chiết lm oi tiếp Sau lần ngâm chiết nhƣ vậy, dịch chiết đƣợc gom lại, lọc cất loại dung at nh môi dƣới áp suất giảm thu đƣợc 210 g cao chiết tổng, ký hiệu cao chiết A z Bƣớc 3: Thêm lít nƣớc vào cao chiết A chiết phân bố dung mơi ethyl z acetate (1lít x 3lần) Tách loại lớp dung mơi hữu cơ, dịch nƣớc đƣợc quay cịn @ gm lít để loại bỏ dung mơi hữu tồn dƣ thu đƣợc dịch B Bƣớc 4: Lọc dịch B lại bƣớc qua cột diaion HP20 Rửa giải hệ l.c om dung môi nƣớc, dung môi ethanol 80% Gom dịch rửa giải ethanol 80% cất loại Lu dung môi thu đƣợc cao chiết C an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va 41 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Bƣớc 5: Tách phân đoạn cao chiết C thu đƣợc cột sắc ký với chất hấp phụ silica gel pha thƣờng, tỷ lệ cao chiết/chất hấp phụ = 1/5 theo khối lƣợng, cột nhồi  10cm dung môi giải hấp lần lƣợt ethyl acetate, ethyl acetate:ethanol (50:1), ethyl acetate:ethanol (10:1) ethanol 95% Dịch rửa giải từ hệ ethyl acetate:ethanol (10:1) đƣợc gom lại, cất loại hết dung môi đến khô thu đƣợc cao chiết D lu an va n to p ie gh tn oa nl w d ul nf va an lu oi lm at nh z z gm @ om l.c Lu an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va 42 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an lu an va n to p ie gh tn oa nl w d ul nf va an lu oi lm at nh z 3.7 Nghiên cứu thay đổi hormon sinh dục chuột sử dụng dịch chiết z gm @ chứa protodioscin từ Bạch tật lê: Bảng 3.6 Nồng độ hormon sinh dục chuột bình thƣờng chuột sử dụng Nhóm Nhóm I Nhóm sử dụng om l.c dịch chiết xuất chứa protodioscin từ Bạch tật lê P Lu an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va 43 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an (Đối chứng) Nhóm II Nhóm III Nhóm IV Hormon ̅ ± SD ̅ ± SD ̅ ± SD ̅ ± SD LH (IU/L) < 0,1 < 0,1 < 0,1 < 0,1 FSH (IU/L) < 0,1 < 0,1 < 0,1 < 0,1 P21 = 0,75 Testosterone 1,83 ± 1,56 9,73±20,76 15,43±18,53 25,03±17,19 (ng/ml) P31= 0,03 P41 = 0,03 Từ kết bảng 3.8 ta thấy: nồng độ hai hormon sinh dục FSH LH lu thấp dƣới ngƣỡng phát nhỏ máy xét nghiệm ( 0,05) Ở hai nhóm cịn lại nhóm III gh nhóm IV nồng độ hormon sinh dục testosterone máu sau điều trị tuần cao p ie nhóm chứng, nồng độ hormon sinh dục testosterone nhóm điều trị với liều lƣợng 10 mg/kg cao 25,03±17,19 mg/mL Sự khác biệt có ý nghĩa nl w thống kê với P < 0,05 oa d Khi đánh giá ảnh hƣởng chiết xuất chứa protodioscin từ Bạch tật lê an lu lên nồng độ hormon sinh dục gonatropin thùy trƣớc tuyến n chúng tơi gặp nf va khó khăn không đánh giá đƣợc nồng độ hai hormon sinh dục FSH LH ul thấp dƣới ngƣỡng phát Lý giải kết Bệnh viện Phụ Sản Trung lm oi Ƣơng sử dụng hệ thống để định lƣợng hormon sinh dục với ngƣỡng phát at nh nhỏ FSH LH 0,1 IU/L Cho tới có nghiên cứu đánh giá ảnh hƣởng thực chiết xuất chữa protodioscin từ Bạch tật lê lên z z hormon sinh dục kết nghiên cứu khác @ gm Nghiên cứu Adaay Matta (2012) sử dụng chiết xuất chứa protodioscin từ Bạch tật lê cho thấy nồng độ hormon sinh dục FSH nhóm chuột bình thƣờng l.c om 1,34 ± 0,03 mIU/mL cịn nhóm đƣợc cho sử dụng hỗn hợp thức ăn có chứa Lu chiết xuất chữa protodioscin từ Bạch tật lê 1,98 ± 0,01 mIU/mL Giá trị an ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn n va 44 Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd 77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77t@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an C.33.44.55.54.78.65.5.43.22.2.4 22.Tai lieu Luan 66.55.77.99 van Luan an.77.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.37.99.44.45.67.22.55.77.C.33.44.55.54.78.655.43.22.2.4.55.22 Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an hormon sinh dục LH hai nhóm lần lƣợt 1,57 ± 0,01 mIU/mL 2,17 ± 0,01 mIU/mL [4] Một nghiên cứu khác Moghaddam cộng (2013) sử dụng ELISA kits (Labsystem, Finland) để định lƣợng nồng độ hormon sinh dục gonadotropin máu thu đƣợc kết nhóm chứng khoảng 0,3 mIU/mL, nhóm đƣợc sử dụng tinh chiết chứa protodioscin từ Bạch tật lê 0,271 mIU/mL, giá trị hormon sinh dục LH nhóm đối chứng khoảng 0,2 mIU/mL, nhóm dùng thuốc 0,207 mIU/mL, chuột gây nghiện 0,0125 ± 0,017 mIU/mL [39] Chứng tỏ ngƣỡng phát kit xét nghiệm có giá trị thấp kit xét nghiệm thân ngƣỡng phát kít xét nghiệm khác Nhƣng xét điều kiện kinh phí đề tài điều kiện xét nghiệm lu an Việt Nam chƣa thể sử dụng kit xét nghiệm có ngƣỡng phát thấp va hi vọng nghiên cứu sau khắc phục đƣợc nhƣợc điểm n to gh tn Khi đánh giá ảnh hƣởng chiết xuất chứa protodioscin từ Bạch tật lê lên p ie hormon sinh dục testosterone hormon có vai trị quan trọng lên q trình sinh tinh chúng tơi thu đƣợc kết nhƣ bảng 3.8 Sau tuần cho chuột sử dụng tinh nl w chiết chứa protodioscin từ Bạch tật lê với liều khác 2,5mg/kg; oa d 5,0mg/kg; 10mg/kg thấy so với nhóm khơng đƣợc dùng thuốc hai an lu nhóm dùng liều 5,0mg/kg/ngày 10mg/kg/ngày có nồng độ hormon sinh dục nf va testosterone cao với P