(Luận văn) nghiên cứu hoạt tính kháng ung thư của cao chiết cây lan kim tuyến (anoectochilus roxburghii) trong điều kiện in vitro

TRẦN XUÂN ĐẠT BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - n va SINH HỌC n THỰC NGHIỆM a lu p ie gh tn to Trần Xuân Đạt d oa nl w NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus roxburghii) TRONG ĐIỀU KIỆN INVITRO a nv a lu ll u nf m n oi LUẬN VĂN THẠC SĨ: SINH HỌC THỰC NGHIỆM tz z m co l gm @ NĂM 2021 an Lu Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 n va ac th si BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - a lu n Trần Xuân Đạt n va p ie gh tn to d oa nl w NGHIÊN CỨU HOẠT TÍNH KHÁNG UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY LAN KIM TUYẾN (Anoectochilus roxburghii) TRONG ĐIỀU KIỆN INVITRO Mã số: 8420114 a nv a lu Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm ll u nf m LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC THỰC NGHIỆM tz n oi NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC : z gm @ Hướng dẫn 1: PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo Hướng dẫn 2: TS Đồn Chính Chung m co l an Lu Thành phố Hồ Chí Minh - 2021 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tác giả xin cam đoan luận văn cơng trình nghiên cứu cá nhân tác giả thực hướng dẫn PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo TS Đồn Chính Chung, Học viện Khoa học Công nghệ Số liệu, kết nghiên cứu kết luận luận văn hoàn toàn trung thực Tp Hồ Chí Minh, tháng 04 năm 2021 a lu Tác giả n n va tn to p ie gh Trần Xuân Đạt d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th si LỜI CẢM ƠN Tác giả xin chân thành cảm ơn Gia đình ln ủng hộ tinh thần tạo điều kiện thuận lợi suốt quãng đường học tập Gia đình nguồn động lực lớn để tác giả cố gắng học tập hoàn thiện thân ngày Tác giả xin chân thành cảm ơn Quý Thầy/Cô Học viện Khoa học Cơng nghệ tận tình dạy trang bị cho tác giả kiến thức cần thiết suốt thời gian vừa qua để luận văn hồn thành cách tốt a lu n n va p ie gh tn to Tác giả xin trân trọng cảm ơn PGS TS Nguyễn Thị Phương Thảo TS Đồn Chính Chung tận tình giúp đỡ, định hướng tư cách làm việc khoa học Đó góp ý quý báu khơng q trình thực luận văn mà hành trang tiếp bước cho tác giá trình học tập lập nghiệp sau d oa nl w Trong trình thực nghiệm viết báo cáo luận văn khó tránh khỏi sai sót, mong Q Thầy/Cơ đọc giả thơng cảm Đồng thời, trình độ kiến thức kinh nghiệm thực tiễn hạn chế nên luận văn cịn thiếu sót, tác giả mong nhận ý kiến đóng góp để hồn thiện a lu a nv Chân thành cảm ơn! ll u nf Tác giả m Trần Xuân Đạt tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th si MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC DANH MỤC BẢNG DANH MỤC HÌNH MỞ ĐẦU CHƯƠNG TỔNG QUAN NGHIÊN CỨU 1.1 TỔNG QUAN TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU NGỒI NƯỚC a lu n 1.1.1 Tình hình sử dụng dược liệu hỗ trợ điều trị bệnh ung thư va n 1.1.2 Các nghiên cứu thành phần hóa học Lan Kim Tuyến 11 tn to p ie gh 1.2 CÁC NGHIÊN CỨU VỀ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA CÂY LAN KIM TUYẾN 14 1.3 KỸ THUẬT CHIẾT XUẤT DƯỢC LIỆU 16 oa nl w 1.3.1 Nguyên liệu chiết xuất 18 1.3.2 Dung môi chiết xuất 18 d a nv a lu 1.3.3 Quá trình chiết xuất 19 1.4 MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP CHIẾT XUẤT DƯỢC LIỆU HIỆN NAY 20 u nf ll 1.4.1 Phương pháp ngâm chiết 20 m n oi 1.4.2 Phương pháp ngấm kiệt 20 tz 1.4.3 Phương pháp chiết hồi lưu cất kéo nước 20 1.4.4 Phương pháp chiết Soxhlet 21 z gm @ 1.4.5 Phương pháp chiết siêu âm 21 l 1.4.6 Phương pháp chiết siêu tới hạn 22 m co 1.5 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG NƯỚC 23 an Lu CHƯƠNG VẬT LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 27 n va 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU 27 ac th si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 2.1.1 Cây Lan Kim Tuyến 27 2.1.2 Các dòng tế bào sử dụng 27 2.1.3 Các kit sử dụng 27 2.1.4 Các môi trường hóa chất 28 2.2 DỤNG CỤ VÀ THIẾT BỊ SỬ DỤNG 28 2.2.1 Dụng cụ 28 2.2.2 Thiết bị 29 2.3 PHƯƠNG PHÁP SỬ DỤNG TRONG NGHIÊN CỨU 30 2.3.1 Phương pháp thu nhận cao chiết Lan Kim Tuyến 30 a lu n 2.3.2 Phương pháp phân tích sơ hợp chất cao chiết 30 va n 2.3.3 Phương pháp xác định hàm lượng flavonoid tổng 31 p ie gh tn to 2.3.4 Phương pháp giải đông nuôi cấy tăng sinh tế bào 32 2.3.5 Phương pháp xác định độc tính tế bào hay ức chế tăng sinh tế bào in vitro 32 d oa nl w 2.3.6 Phương pháp đánh giá ảnh hưởng dịch chiết lên ức chế hình thành bào lạc tế bào 33 a lu 2.3.7 Phương pháp đánh giá thay đổi hình thái tế bào 34 a nv 2.3.8 Phương pháp nhuộm 4’,6-Diamidino-2-phenylindole (DAPI) 34 u nf ll 2.3.9 Phương pháp xác định chuyển dịch phân tử PS apoptosis tế bào 34 m n oi 2.3.10 Phân tích thống kê 35 tz CHƯƠNG KẾT QUẢ-BÀN LUẬN 36 z l gm @ 3.1 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH SƠ BỘ THÀNH PHẦN CÁC NHÓM CHẤT TRONG CÂY LAN KIM TUYẾN 36 co 3.1.1 Kết phân tích thử tinh khiết 36 m 3.1.2 Kết phân tích sơ thành phần hóa học 37 Lu an 3.2 KẾT QUẢ THU NHẬN CAO CHIẾT TỪ CÂY LAN KIM TUYẾN 41 n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 3.3 KẾT QUẢ ĐÁNH GIÁ KHẢ NĂNG ỨC CHẾ TĂNG SINH TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CAO CHIẾT CÂY LAN KIM TUYẾN 43 3.3.1 Ảnh hưởng cao tổng lên tăng sinh tế bào ung thư vú 43 3.3.2 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hàm lượng enzyme LDH giải phóng từ tế bào ung thư vú 46 3.3.3 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hình thái tế bào ung thư vú 48 3.3.4 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hình thành bào lạc tế bào ung thư vú 50 a lu 3.3.5 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên tăng sinh nguyên bào sợi 51 n n va 3.4.1 Ảnh hưởng cao chiết lên hình thái nhân tế bào ung thư 54 p ie gh tn to 3.4 ẢNH HƯỞNG CỦA CAO CHIẾT LAN KIM TUYẾN LÊN SỰ CẢM ỨNG APOPTOSIS CỦA TẾ BÀO UNG THƯ VÚ 54 3.4.2 Ảnh hưởng cao chiết lên tỉ lệ apoptosis tế bào ung thư 55 oa nl w CHƯƠNG KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ 58 4.1 KẾT LUẬN 58 d a nv a lu 4.2 KIẾN NGHỊ 58 TÀI LIỆU THAM KHẢO 59 ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC BẢNG a lu n n va p ie gh tn to Bảng 1.1 Dung môi khác dùng chiết xuất nhóm hoạt chất từ dược liệu 19 Bảng 2.1 Danh sách dụng cụ sử dụng 28 Bảng 2.2 Các thiết bị sử dụng 29 Bảng 2.3 Các thuốc thử dùng để phân tích sơ thành phần hóa học 30 Bảng 3.1 Độ ẩm mẫu Lan Kim Tuyến 36 Bảng 3.2 Tro toàn phần mẫu thử Lan Kim Tuyến 36 Bảng 3.3 Số liệu phân tích sơ thử tinh khiết mẫu thử Lan Kim Tuyến 36 Bảng 3.4 Bảng phân tích sơ thành phần hóa thực vật mẫu dược liệu Lan Kim Tuyến 39 Bảng 3.5 Kết kiểm tra độ ẩm cao chiết hiệu suất tách chiết dung môi khác 41 Bảng 3.6 Kết định tính hợp chất có cao chiết Lan Kim Tuyến 41 Bảng 3.7 Kết định lượng hàm lượng flavonoid tổng cao chiết 42 d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an DANH MỤC HÌNH a lu n n va p ie gh tn to Hình 1.1 Mẫu Lan Kim Tuyến (Anoectochilus setaceus) 12 Hình 3.1 Phương trình đường chuẩn quercetin sử dụng định lượng flavonoid tổng 42 Hình 3.2 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên tăng sinh tế bào ung thư vú 45 Hình 3.3 Ảnh hưởng của cao chiết Lan Kim Tuyến lên hàm lượng enzyme LDH giải phóng mơi trường ni cấy từ tế bào 47 Hình 3.4 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hình thái tế bào ung thư vú 49 Hình 3.5 Ảnh hưởng của cao chiết Lan Kim Tuyến lên hình thành bào lạc tế bào ung thư vú 51 Hình 3.6 Ảnh hưởng cao chiết lên tăng sinh nguyên bào sợi 52 Hình 3.7 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hình thái nhân tế bào ung thư vú MCF7 54 Hình 3.8 Ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên cảm ứng apoptosis tế bào ung thư vú 56 d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an MỞ ĐẦU a lu n n va tn to Theo thống kê Cơ quan Nghiên cứu Ung thư Quốc tế (International Agency for Research on Cancer – IARC ) năm 2018, tồn giới có 18,08 triệu người mắc ung thư, có 9,5 triệu người tử vong bệnh Số ca mắc ung thư Việt Nam ước tính 164.671 ca số ca tử vong 114.871 ca Các loại ung thư phổ biến nam giới ung thư gan (21,5%), ung thư phổi (18,4%), dày (12,3%), đại trực tràng (8,4%) ung thư vòm họng (5%); nữ giới ung thư vú (20,6%), đại trực tràng (9,6%), ung thư phổi (9,4%), dày (8,6%) gan (7,8%) Tỷ lệ mắc ung thư chuẩn hóa theo tuổi hai giới 151,4/ 100.000 người tỉ lệ tử vong 104,4/100.000 người Tại Việt Nam, ước tính có khoảng 70% bệnh nhân ung thư chẩn đoán giai đoạn muộn (III IV), có bệnh thể sàng lọc, phát sớm nhiều phương pháp khác p ie gh Hiện nay, việc điều trị ung thư chủ yếu dựa hai phương pháp phương pháp truyền thống phương pháp đại Ở phương pháp đại, người ta sử dụng hai phương pháp là: phương pháp điều trị trúng đích (sử dụng liệu pháp kháng thể đơn dòng) phương pháp miễn dịch (sử dụng liệu pháp miễn dich liệu pháp tế bào gốc) Ngoài ra, ung thư điều trị theo phương pháp truyền thống Trong phương pháp truyền thống chủ yếu dựa ba phương pháp bản, gồm phẫu thuật cắt bỏ khối u (có thể kết hợp với hóa trị xạ trị), xạ trị (sử dụng tia xạ để tiêu diệt khối u) hóa trị (sử dụng hóa chất gây độc để tiêu diệt tế bào ung thư) Bên cạnh việc sử dụng phương pháp việc sử dụng dược liệu tự nhiên việc điều trị hay hỗ trợ điều trị ung thư hướng nghiên cứu phương pháp điều trị truyền thống Phương pháp giúp nâng cao hiệu điều trị ung thư hai khía cạnh: tăng cường đáp ứng miễn dịch thể ức chế phát triển khối u, giúp tăng khả sống sót bệnh nhân [1][2] Sự kết hợp Y học đại Y học cổ truyền điều trị ung thư phát huy mạnh thuốc có nguồn gốc từ dược liệu tự nhiên, nâng cao sức đề kháng thể, hạn chế tối đa tình trạng tái phát di khối u tác dụng không mong muốn hóa - xạ trị, nên triệu chứng lâm sàng cải thiện Do vậy, hướng nghiên cứu Y học cổ d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 57 Lan Kim Tuyến gây tượng apoptosis tế bào ung thư vú xác định cô đặc chromatin phân mảnh DNA (Hình 3.7) Ngồi ra, dịch chuyển phân tử PS bên màng tế bào phát phương pháp nhuộm kép Annexin V-FITC PI Sau đó, tỉ lệ tế bào apoptosis xác định kỹ thuật FACS (Hình 3.8) a lu n n va p ie gh tn to d oa nl w a nv a lu ll u nf m tz n oi z m co l gm @ an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 58 CHƯƠNG KẾT LUẬN - KIẾN NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN Kết phân tích sơ thành phần mẫu dược liệu Lan Kim tuyến: Đổ ẩm dược liệu: 13,27%, Độ tro dược liệu: 7,03%, Thành phần sơ số nhóm chất gồm: triterpenoid, alkaloid, flavonoid, glycosid, chất khử acid hữu a lu n n va p ie gh tn to Dung môi nước dung mơi phù hợp cho q trình chiết xuất thu nhận cao tổng từ Lan Kim Tuyến, với hiệu suất ly trích đạt 15,1 %, độ ẩm hàm lượng flavonoid tổng cao tổng đạt 18,86 % 50,85 ± 3,84 µg QE/mg Ngồi ra, nghiên cứu tiến hành chiết xuất thành công cao phân đoạn từ cao tổng nước Lan Kim Tuyến dung môi khác nhau, gồm cao phân đoạn n-hexan, cao phân đoạn etylacetat cao phân đoạn n-butanol, với độ ẩm phân đoạn cao nằm giới hạn cho phép Trong đó, cao phân đoạn etylacetat có hàm lượng flavonoid cao 61,10 ± 5,15 µg QE/mg d oa nl w Cao chiết cao chiết Lan Kim Tuyến ức chế mạnh tăng sinh tế bào ung thư vú MCF7 BT474 phụ thuộc vào nồng độ cao xử lý Giá trị IC50 cao chiết xác định tế vào MCF7 BT474 82,56 μg/ml 95,02 μg/ml sau 48 giở xử lý Các kết định lượng hàm lượng enzyme LDH, khả hình bào bào lạc, thay đổi hình thái tế bào cho kết tương tự Ngoài ra, cao tổng hay cao phân đoạn khơng gây độc gây độc dòng tế bào thường nguyên bào sợi WS1 NHDF a nv a lu ll u nf m Cao chiết Lan Kim Tuyến cảm ứng apoptosis dòng tế bào ung thư vú MCF7 Tỉ lệ tế bào apoptosis tăng theo nồng độ cao chiết xử lý tz n oi 4.2 KIẾN NGHỊ z m co l gm @ Các nghiên cứu sâu cần thực để làm rõ vai trò đơn chất cao chiết Lan Kim Tuyến việc ức chế tăng sinh tế bào ung thư mơ hình in vitro in vivo an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO Schwartsmann G., Ratain M.J., Cragg G.M., Wong J.E., Saijo N., Parkinson D.R., Fujiwara Y., Pazdur R., Newman D.J., Dagher R., Di Leone L Anticancer drug discovery and development throughout the world Journal of Clinical Oncology, 2002, 20(18): 47-59 Vickers A Botanical medicines for the treatment of cancer: rationale, overview of current data, and methodological considerations for phase I and II trials Cancer Investigation, 2002, 20(7-8): 1069-1079 Martin K.P., Geevarghese J., Joseph D and Madassery J In vitro a lu propagation of Dendrobium hybrids using flower stalk node explants, Indian J n n va Exp Biol 2005, 43: 280˗285 tn to Hu S.Y The Orchidaceae of China Quarterly Journal of the Taiwan Museum p ie gh 1971, 4: 67˗ 103 Chiu N.Y., Chang K.H Anoectochilus formosanus Hayata In: The oa nl w Illustrated Medicinal Plants of Taiwan SMC Publishing Inc., Taipei, Taiwan 1995,4: 282˗283 d Kan W.S Anoectochilus formosanus Hayata In: Pharmaceutical Botany a lu National Research Institute of Chinese Medicine Taipei, Taiwan, 1986 a nv u nf Gutierrez R.M.P Orchids: a review of uses in traditional medicine, ll its phytochemistry and pharmacology J Med Plant Res 2010, 4: 592˗638 m n oi He C.N., Wang C.L, Guo S.X., Yang J.S., Xiao P.G Study on chemical Materia Medica, 2005, 30: 761-763 tz constituents in herbs of Anoectochilus roxburghii II China Journal of Chinese z gm @ He C.N, Wang C.L, Guo S.X., Yang J.S., Xiao P.G A Novel Flavonoid m co Plant Biology, 2006, 48: 359-363 l Glucoside from Anoectochilus roxburghii (Wall.) Lindl Journal of Integrative Lu 10 Liu B., Gao Y.Q., Wang X.M., Wang Y.C., Fu L.Q Germacrone inhibits the an proliferation of glioma cells by promoting apoptosis and inducing cell cycle n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 60 arrest Mol Med Rep 2014, 10(2):1046-1050 11 Huang L, Cao Y, Xu H Chen G Separation and purification of ergosterol and stigmasterol in Anoectochilus roxburghii (wall) Lindl by high speed counter current chromatography Journal of Separation Science, 2011, 34: 385-392 12 Wan T., Xiong F Determination of kinsenoside in Anoectochilus roxburghi by HPLC-ELSD Chinese Traditional Patent Medicine, 2014, 13 Du X.M., Sub N.Y., Irino N and Shoyama Y Glycosidic constituents from in vitro Anoectochilus formosanus Chem Pharm Bull 2000, 48: 1803˗1804 14 Du X.M., Sun N.Y., Tamura T., Mohri A., Sugiura M., Yoshizawa T., Irino a lu N., Hayashi J and Shoyama Y Higher yielding isolation of Kinsenoside in n Anoectochilus and its anti-hyperliposis effect Biol Pharm Bull 2001, 24: n va 65˗69 tn to 15 Lin C.C., Huang P.C., Lin J.M Antioxidant and Hepatoprotective Effects p ie gh of Anoectochilus formosanus and Gynostemma pentaphyllum The American oa nl w Journal of Chinese Medicine 2002, 28(1): 87-96 16 Wu J.B., Lin W.L., Hsich C.C., Ho H.Y., Tsay H.S and Lin W.C The d hepatoprotective activity of kinsenoside from Anoectochilus formosanus a nv a lu Phytother Res 2007, 21: 58˗61 17 Wang S.Y., Kuo Y.H., Chang H.N., Kang P.L., Tsay H.S., Lin K.F., Yang u nf N.S., Shyur L.F Profiling and characterization antioxidant activities in ll m n oi Anoectochilus formosanus Hayata J Agric Food Chem 2002, 5:1859–1865 tz 18 Cui S.C., Yy J., Zhang X.H., Cheng M.Z., Yang L.W., Xu J.Y Antihyperglycemic and antioxidant activity of water extract from Anoectochilus roxb z 19 Zhang J.G., Liu Q., Liu Z.L., gm @ urghii in experimental diabetes Exp Toxicol Pathol 2013, 65(5):485-488 Li L., Yi L.T Anti- l co hyperglycemic activity of Anoectochilus roxburghii polysaccharose in diabetic m mice induced by high-fat diet and streptozotocin J Ethnopharmacol 2015, Lu an 164:180-185 n va 20 Wu J.B.,Chuang H.R., Yang L.C, Lin W.C A standardized aqueous extract ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 61 of Anoectochilus formosanus ameliorated thioacetamide-induced liver fibrosis in mice: The role ofKuppercells Biosci Biotechnol Biochem 2010, 74(4): 781˗ 787 21 Shih C.C., Wu Y.W., Lin W.C Aqueous extract of Anoectochilus formosanus attenuate hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats Phytomedicine 2005, 12(6-7):453-60 22 Yang Z Protective effect of Anoectochilus roxburghii polysaccharide against CCl4-induced oxidative liver damage in mice International Journal of Biological Macromolecules, 2017, 96: 442-450 a lu 23 Zhang J.G., Liu Q., Liu Z.L., Li L., Yi L.T Anti- n hyperglycemic activity of Anoectochilus roxburghii polysaccharose in diabetic n va mice induced by high-fat diet and streptozotocin J Ethnopharmacol 2015, tn to 164:180-185 p ie gh 24 Tang T., Duan X., Ke Y., Zhang L., Shen Y., Hu B., Liu A., Chen H., Li oa nl w C., Wu W., Shen L., Liu Y Antidiabetic activities of polysaccharides from Anoectochilus roxburghii and Anoectochilusformosanus in STZ-induced d diabetic mice Int J Biol Macromol 2018, 112:882-888 a nv a lu 25 Matsuda H., Ninomiya K., Morikawa T., Yoshikawa M Inhibitory effect and action mechanism of sesquiterpenes from Zedoariae rhizoma on D- u nf galactosamine/ lipopolysaccharide-induced liver injury Bioorg Med Chem ll m n oi Lett 1998, 8: 339–344 tz 26 Shyur L.F., Chen C.H., Lo C.P., Wang S.Y., Kang P.L., Sun S.J., Chang C.A., Tzeng C.M., Yang N.S Induction of apoptosis in MCF-7 human breast z Sci 2004, 11(6):928-939 l gm @ cancer cells by phytochemicals from Anoectochilus formosanus J Biomed co 27 Tseng C.C., Shang H.F., Wang L.F., Su B., Hsu C.C., Kao H.Y., Cheng K.T m Antitumor and immunostimulating effects of Anoectochilus formosanus Hayata an Lu Phytomedicine 2006, 13(5):366-70 n va 28 Hsieh W.T., Tsai C.T., Wu J.B., Hsiao H.B., Yang L.C., Lin W.C ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 62 Kinsenoside, a high yielding constituent from Anoectochilus formosanus, inhibits carbon tetrachloride induced Kupffer cells mediated liver damage J Ethnopharmacol 2011, 135(2):440-449 29 Yang Z Protective effect of Anoectochilus roxburghii polysaccharide against CCl4-induced oxidative liver damage in mice International Journal of Biological Macromolecules, 2017, 96: 442-450 30 Huang L, Cao Y, Xu H Chen G Separation and purification of ergosterol and stigmasterol in Anoectochilus roxburghii (wall) Lindl by high speed counter current chromatography Journal of Separation Science, 2011, 34: 385-392 a lu 31 Wang L, Chen Q, Zhuang S, Wen Y, Cheng W, Zeng Z, Jiang T, Tang C n Effect of Anoectochilus roxburghii flavonoids extract on H2O2 - Induced n va oxidative stress in LO2 cells and D-gal induced aging mice model J tn to Ethnopharmacol 2020 May 23;254:112670 p ie gh 32 Xiaoling Yu, Shouer Lin, Jinque Zhang, Liying Huang, Hong Yao, oa nl w Shaoguang Li Purification of polysaccharide from artificially cultivated Anoectochilus roxburghii(wall.) Lindl by high-speed counter current d chromatography and its antitumor activity Journal of Separation Science 2017 a nv a lu 33 Le Dinh Chac, Bui Bao Thinh, Ha Thi Thanh Huong, Ngo Tuan Kiet, Le Quang Huan Quantification of quercetin, isorhamnetin and ferulic acid in dry u nf extract of Anoectochilus setaceus Blume from VietNam International Journal ll m n oi of Botany Studies 2019, 4(5): 14-18 tz 34 Đỗ Thị Gấm, Hà Việt Hải, Chu Hoàng Hà, Phạm Bích Ngọc Khảo sát số đặc điểm hóa học tác dụng chống oxy hóa (antioxydant) hợp chất z @ Flavonoid chiết xuất từ số loài lan Kim tuyến Việt Nam Tạp chí Khoa l gm học ĐHQGHN: Khoa học Tự nhiên Công nghệ, 2017, 33(1S): 104-113 co 35 Tran Minh Hoi, Tran Van Thai, Chu Thi Thu Ha, Ha Thi Van Anh, Phan m Xuan Binh Minh and Nguyen Tien Dat Flavonoids from Anoectochilus their Anti-inflammatory Product ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn Natural n va Communications 2016, 11(5): 613-614 Activity an and Lu annamensis si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 63 36 Geran RI, Greenberg NH, Macdonald MM, Shumacher AM, Abbott BJ Protocols for screening chemical agents and natural products against animal tumors and other biological systems (3rd edition) Cancer Chemoth Rep 1972; 3: 1–91 37 Ho Y., Chen Y.F., Wang L.H., Hsu K.Y., Chin Y.T., Yang Y.S.H., Wang S.H., Chen Y.R., et al Inhibitory Effect of Anoectochilus formosanus Extract on Hyperglycemia-Related PD-L1Expression and Cancer Proliferation Front Pharmacol 2018, 9:807 38 Weng, X.H., Wang, C.L., Yuan, X., Chen, W.J., 2011 Inhibitory effect of a lu Anoectochilus formosanus polysaccharide on human prostate cancer PC-3 cell n in vitro Chin J Hosp Pharm 31, 1083–1087 n va 39 Jue, W.C., 2011 The extraction of volatile oil in Anoectochilus and its tn to inhibition effect in lung cancer cell NCI-H446 Fujian Medical University, p ie gh Fujian oa nl w 40 Shyur, L.F., Chen, C.H., Lo, C.P., Wang, S.Y., Kang, P.L., Sun, S.J., Chang, C.A., Tzeng, C.M., Yang, N.S., 2004 Induction of apoptosis in MCF-7 human d breast cancer cells by phytochemicals from Anoectochilus formosanus J a nv a lu Biomed Sci 11, 928–939 41 Elmore S Apoptosis: A Review of Programmed Cell Death Toxicologic u nf Pathology, 2007, 35(4): 495-516 ll m tz 70 n oi 42 Hanahan D., Weinberg R.A The hallmarks of cancer Cell, 2000, 100: 57- 43 Johnson V.L., Ko S.C., Holmstrom T.H., Chow S.C Effector caspases are z @ dispensable for the early nuclear morphological changes during chemical- m co l gm induced apoptosis”, Journal of Cell Science, 200, 113: 2941-2953 an Lu n va ac th Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn si C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 64 an lu va n PHỤ LỤC gh tn to Phụ lục Kết xây dựng đường chuẩn định lượng flavonoid tổng kết định lượng hàm lượng flavonoid tổng mẫu cao chiết Lan Kim Tuyến p ie w d oa nl fu an nv a lu Nồng độ OD415 nm oi Nồng độ m ll *: Ống 1, 2, 3, 4, 5, tương ứng với nồng độ kiểm tra 0, 2, 4, 6, 8, 10 µg/ml quercetin kiểm tra 0 20 0,265 40 0,577 60 0,812 80 1,124 m co 100 10 1,472 1,402 Giá trị sai số Lần Lần Lần trung bình - - - - - 0,277 0,287 0,276 0,0110 0,598 0,59 0,588 0,0106 0,831 0,815 0,819 0,0102 1,068 1,052 1,081 0,0378 1,484 1,453 0,0443 z at nh thực tế Giá trị z l gm @ an Lu n va Kết xác định hàm lượng flavonoid tổng số mẫu cao phân đoạn khác ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 65 an lu va Giá trị OD n Mẫu gh tn to Lân Cao ethanol ie p Cao nước Lần Nồng độ thực tế Lần Lân Lần Lần TB SS w 0,294 0,274 0,331 43,24 40,45 48,41 44,04 4,12 0,378 0,337 0,330 54,97 49,25 48,27 50.85 3.84 Tế bào MCF7 d oa nl Phụ lục Kết ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên tỉ lệ sống (%) dòng tế bào ung thư vú a lu Tỉ lệ tế bào sống (%) Sai số 24h 48h 6h 24h 48h 72h 100 100,00 100,00 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 12,5 99,02 97,79 97,74 98,22 2,37 4,48 0,45 1,50 25 98,12 99,13 98,86 99,17 1,58 4,57 3,22 4,45 50 99,02 97,88 96,30 77,38 3,02 3,62 1,83 4,96 75 95,23 96,20 89,29 61,44 2,12 2,99 2,70 5,66 100 94,23 90,06 81,57 4,02 3,28 3,75 3,72 150 92,02 84,48 68,29 20,38 2,36 2,54 5,17 2,23 200 89,16 80,45 64,96 16,89 3,10 3,22 4,56 2,23 z at nh m co 12h oi 6h m ll Nồng độ fu an nv Đơn vị tính: % z l gm @ 40,48 an Lu n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 66 an lu n va Tế bào BT474 to p ie gh tn Đơn vị tính: % Tỉ lệ tế bào sống (%) Nồng độ Sai số 12h 24h 48h 6h 24h 48h 72h 100 100,00 100,00 100,00 0,00 0,00 0,00 0,00 12,5 99,67 98,67 96,91 98,76 2,37 3,70 3,67 2,62 97,23 95,41 98,67 1,58 3,54 5,93 4,69 w 6h d oa nl a lu 25 98,12 nv 97,25 96,68 94,31 89,15 3,02 5,32 2,79 4,48 75 98,21 95,95 89,51 60,47 2,12 4,07 3,14 3,37 100 95,23 91,80 84,66 47,26 4,02 3,92 3,10 2,94 150 95,02 85,11 82,43 24,93 2,36 3,59 4,77 3,66 200 92,31 83,53 71,89 18,35 3,10 2,00 3,78 2,52 oi m ll fu an 50 z at nh z l gm @ m co an Lu n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 67 an lu n va Phụ lục Kết ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên tỉ lệ sống (%) nguyên bào sợi to gh tn Nguyên bào sợi WS1 p ie Đơn vị tính: % Tỉ lệ tế bào sống (%) w Nồng độ d oa nl 24h 48h 12h 24h 48h 100,00 100,00 100,00 0,00 0,00 0,00 101,65 100,20 95,88 3,81 2,36 3,54 95,42 97,27 92,23 5,64 4,55 0,44 97,28 96,42 98,89 6,12 4,55 4,83 95,13 83,55 0,66 7,50 4,39 92,62 80,57 6,81 4,46 2,42 92,22 71,67 3,01 6,33 6,62 64,62 5,16 7,50 4,09 150 90,53 200 82,41 76,39 l gm 96,21 @ 100 z 92,38 z at nh 75 oi m ll 50 12h fu an 25 nv a lu 12,5 Sai số m co an Lu n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 68 an lu n va Nguyên bào sợi NDHF to gh tn Đơn vị tính: % Tỉ lệ tế bào sống (%) p ie Nồng độ Sai số w 24h 48h 12h 24h 48h 0 100,00 100,00 100,00 0,00 0,00 12,5 12,5 98,74 99,16 95,83 3,81 2,36 25 97,49 101,57 94,29 3,64 3,55 50 98,36 100,78 94,16 2,12 4,55 75 94,45 96,17 90,14 4,66 5,50 100 100 92,71 94,35 84,28 3,81 4,46 150 150 91,97 90,35 80,25 4,01 3,33 200 200 89,88 83,73 68,34 5,16 4,50 d oa nl 12h a lu 25 oi m ll fu an 75 nv 50 z at nh z l gm @ m co an Lu n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 69 an lu n va Phụ lục Kết ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên hàm lượng LDH môi trường nuôi cấy tế bào ung gh tn to thư vú Tế bào MCF7 p ie w Đối chứng 6.25 µg/ml 12.5 µg/ml 25 µg/ml 50 µg/ml 75 µg/ml 100 µg/ml H2O2 1,03 0,94 1,26 1,42 2,40 2,63 3,00 1,00 1,02 0,98 1,77 2,18 2,24 2,84 0,94 1,11 1,27 1,50 2,22 2,45 3,21 0,99 ± 0,05 1,02 ± 0,09 TB ± SS 1,00 ± 0,00 1,17 ± 0,16 1,56 ± 0,18 2,27 ± 0,12 2,44 ± 0,20 3,02 ± 0,19 oi m ll fu an nv a lu d oa nl Lần Đơn vị tính: lần z at nh Tế bào BT474 Đơn vị tính: lần z 1,00 0,94 1,03 0,98 0,95 1,03 TB ± SS 1,00 ± 0,00 0,99 ± 0,04 0,98 ± 0,05 gm 50 µg/ml 100 µg/ml 150 µg/ml 200 µg/ml 1,28 1,68 2,04 2,10 3,56 1,18 1,79 2,30 2,34 2,96 1,24 1,48 1,86 2,20 3,30 1,23 ± 0,05 1,65 ± 0,16 2,07 ± 0,22 2,21 ± 0,12 3,27 ± 0,30 an 25 µg/ml Lu 12.5 µg/ml m co 6.25 µg/ml l Đối chứng @ Lần n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an 70 an lu n va Phụ lục Kết ảnh hưởng cao chiết Lan Kim Tuyến lên khả hình thành bào lạc tế tế bào ung thư vú to gh tn Tế bào MCF7 p ie Đơn vị tính: số bào lạc Đối chứng 50 µg/ml 75 µg/ml 100 µg/ml 458 366 232 185 435 380 242 228 a lu 442 352 208 210 445 ± 12 366 ± 14 227 ± 18 208 ± 22 w Lần d oa nl fu an nv TB ± SS oi m ll z at nh Tế bào BT474 Đơn vị tính: số bào lạc z 410 406 TB ± SS 412 ± 359 286 228 403 289 270 378 260 210 380 ± 22 278 ± 16 236 ± 30 l gm 100 µg/ml an 422 75 µg/ml Lu 50 µg/ml m co Đối chứng @ Lần n va ac th si Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn C.vT.Bg.Jy.Lj.Tai lieu Luan vT.Bg.Jy.Lj van Luan an.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an.Tai lieu Luan van Luan an Do an Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhd.vT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.LjvT.Bg.Jy.Lj.dtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn.Stt.010.Mssv.BKD002ac.email.ninhddtt@edu.gmail.com.vn.bkc19134.hmu.edu.vn