i VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT lu an NGUYỄN THỊ LINH ĐAM n va p ie gh tn to NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR TRONG CHỌN d oa nl w GIỐNG BẠCH ĐÀN LAI (EUCALYPTUS UROPHYLLA x E EXSERTA) ll u nf va an lu oi m LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC z at nh z m co l gm @ an Lu Hà Nội, 2017 n va ac th si ii VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM VIỆN SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT NGUYỄN THỊ LINH ĐAM lu an va n NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG CHỈ THỊ PHÂN TỬ SSR TRONG CHỌN to p ie gh tn GIỐNG BẠCH ĐÀN LAI (EUCALYPTUS UROPHYLLA x E EXSERTA) d oa nl w LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC an lu u nf va Chuyên ngành: Sinh học thực nghiệm Mã số: 60 42 01 14 ll oi m \ z at nh z NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC @ m co l gm TS Nguyễn Việt Cƣờng an Lu n va Hà Nội, 2017 ac th si i LỜI CẢM ƠN Tôi xin tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS Nguyễn Việt Cường – Trưởng môn Lai giống sinh học hạt phấn trực tiếp hướng dẫn, giúp đỡ hoàn thành luận văn Xin chân thành cảm ơn lãnh đạo Viện Nghiên cứu Giống Công nghệ sinh học Lâm nghiệp, phòng đào tạo sau đại học Viện sinh thái Tài nguyên sinh vật – Viện hàn lâm khoa học công nghệ Việt Nam, thầy giáo tồn thể anh chị em đồng nghiệp tạo điều kiện cho tơi hồn thành tốt lu an chương trình học luận văn n va Cuối cùng, tơi xin tỏ lịng biết ơn đến gia đình, bạn bè đơn vị tn to cơng tác giúp đỡ tơi q trình thực luận văn Hà Nội, ngày p ie gh Tôi xin trân trọng cảm ơn! tháng năm 2017 d oa nl w Học viên va an lu ll u nf Nguyễn Thị Linh Đam oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN………………………………………………………… …….i MỤC LỤC ii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT iv DANH MỤC HÌNH ẢNH v DANH MỤC BẢNG BIỂU vi ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU lu A Ngoài nƣớc an n va 1.1 Những nghiên cứu chọn giống bạch đàn 1.2.1 Giới thiệu thị SSR (Simple Sequence Repeat) gh tn to 1.2 Giới thiệu thị SSR số ứng dụng chọn giống p ie 1.2.2 Ưu điểm chọn giống thị phân tử w 1.2.3 Một số ứng dụng thị phân tử chọn giống oa nl B Trong nƣớc 15 d 1.3 Những nghiên cứu chọn giống bạch đàn Việt Nam 15 lu an 1.4 Ứng dụng thị phân tử chọn giống Việt Nam 17 u nf va CHƢƠNG II MỤC TIÊU, NỘI DUNG, VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP ll NGHIÊN CỨU 20 m oi 2.1 Mục tiêu 20 z at nh 2.2 Nội dung 20 2.3 Vật liệu nghiên cứu 20 z gm @ 2.3.1 Vật liệu sử dụng để sàng lọc cặp mồi SSR đa hình 20 2.3.2 Vật liệu sử dụng để phân tích liên quan cặp mồi SSR với l m co tính trạng sinh trưởng bạch đàn lai 21 2.3.3 Các cặp mồi SSR sử dụng nghiên cứu 24 an Lu 2.4 Hóa chất thiết bị 24 n va ac th si iii 2.4.1 Hóa chất 24 2.4.2 Thiết bị 25 2.5 Phương pháp nghiên cứu 25 2.5.1 Phương pháp tách chiết ADN tổng số từ mẫu 25 2.5.2.Phương pháp đo nồng độ quang phổ kế 26 2.5.3 Phương pháp PCR (Polymerase Chain Reaction) 26 2.5.4 Phương pháp điện di gel agarose 1% 27 2.5.5 Phương pháp điện di gel polyacrylamide 5% 27 2.5.6 Phương pháp phân tích xử lý số liệu 29 lu an CHƢƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 32 n va 3.1 Thu thập thơng tin trình tự từ mồi SSR có liên quan đến lồi bạch tn to đàn 32 gh 3.2 Sàng lọc cặp mồi SSR để tìm cặp mồi SSR đa hình 34 p ie 3.2.1 Tách chiết ADN tổng số điện di kiểm tra 34 w 3.2.2 Xác định điều kiện PCR tối ưu cho việc nhân đoạn SSR 36 oa nl 3.2.3 Kết phân tích đa hình điện di gel polyacrylamide 38 d 3.3 Xác định cặp mồi SSR liên quan đến sinh trưởng nhanh 47 lu va an 3.4 Kiểm chứng thị có liên quan đến tính trạng sinh trưởng 53 u nf CHƢƠNG IV KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 59 ll Kết luận 59 m oi Kiến nghị 59 z at nh PHỤ LỤC 67 z m co l gm @ an Lu n va ac th si iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT an Giải thích ADN Acid Deoxyribonucleic AFLP Amplified Fragments Length Polymorphism ARN Acid Ribonucleotide bp Cặp base (base pair) C:I Chloroform : Isoamyl Alcolhol CTAB Cetyl trimethylammonium bromide dNTPs Deoxynucleotide triphosphate EDTA Ethylene Diamin Tetra Acetate OD Optical density 10 PCR Polymerase Chain Reaction RAPD n va Chữ viết tắt ie lu TT gh tn to p 11 Quantative trait locus RFLP Restriction Fragment Length Polymorphism 14 Simple sequence repead 15 TAE 16 TBE 17 UV ll 18 UC Bạch đàn lai Uro Camal 19 UE Bạch đàn lai Uro Eserta oa nl 13 w QTL d 12 Random Amplified Polymorphic ADN Tris acetic EDTA Tris boric EDTA u nf va an lu SSR oi m Tia tử ngoại (Ultraviolet) z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si v DANH MỤC HÌNH ẢNH Bảng Nội dung Trang Hình 3.1 Kết điện di ADN tổng số mẫu bạch đàn lai 35 Hình 3.2 Kết điện di sản phẩm PCR với cặp mồi SSR 56°C 37 Hình 3.3 Kết điện di sản phẩm PCR với cặp mồi SSR 58°C 37 Hình 3.4 Mức độ đa hình số cặp mồi EMBRA 39 Kết điện di sản phẩm PCR mẫu với thị Hình 3.5 46 lu EMBRA39 an Hình 3.6 Kết điện di dịng bạch đàn lai với EMBRA229 55 n va Kết điện di dòng bạch đàn lai với EMBRA78 gel polyacrylamide 5% gh tn to Hình 3.7 ie Kết điện di dòng bạch đàn lai với EMBRA209 p Hình 3.8 56 56 d oa nl w gel polyacrylamide 5% ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si vi DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng Nội dung Trang 2.1 Danh mục 22 mẫu sử dụng để sàng lọc cặp mồi SSR đa hình 20 Các dịng bạch đàn lai sinh trưởng nhanh chậm Bầu Bàng 2.2 21 Bình Dương (2002-2012) 2.3 Các dòng bạch đàn lai sử dụng nghiên cứu 22 2.4 Thành phần phản ứng PCR 26 3.1 Kết đo OD mẫu ADN tổng số 35 lu Nhiệt độ bắt cặp 205 cặp mồi EMBRA sau tối ưu sử dụng an 3.2 n va Số alen hệ số PIC 106 cặp mồi có đa hình tn to 3.3 40 gh 53 thị SSR có độ đa hình cao sử dụng để sàng lọc thị 3.4 p ie 42 SSR liên kết với sinh trưởng nhanh Các kiểu gen 104 phân tích thị EMBRA39 3.5 38 nghiên cứu (chi tiết phụ lục 2) 43 w Kết điện di cặp mồi liên quan đến sinh trưởng với 60 dòng 47 3.7 Tương quan cặp mồi EMBRA với suất bạch đàn lai 50 d oa nl 3.6 lu 54 va trường khảo nghiệm Bầu Bàng Bình Dương (2002-2010) u nf Sự liên kết thị SSR với tính trạng (NS - suất) 54 ll oi m 3.9 Các dòng bạch đàn lai thể suất cao thấp an 3.8 z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si ĐẶT VẤN ĐỀ Cải thiện sinh trưởng (năng suất) rừng mục tiêu chọn giống quan trọng nhiều chương trình nghiên cứu lâm nghiệp, nhiên suất có hệ số di truyền thấp Năng suất tính trạng số lượng phức tạp thể qua thơng số đường kính chiều cao, tổng hợp nhiều tính trạng khác nhau, ảnh hưởng lớn yếu tố môi trường Sự khác biệt suất phân li hai gen mà phân li nhiều gen, với ảnh hưởng gen nhỏ Tính trạng số lượng khơng phân li thành nhóm cụ thể, ta lu an đơn giản sử dụng nguyên lí di truyền Mendel để nghiên cứu n va Các nghiên cứu chọn giống trồng lâm nghiệp nước quốc tn to tế có trợ giúp cơng nghệ sinh học có thành công định, gh nghiên cứu ứng dụng thị phân tử chọn giống bạch đàn (E p ie globulus, E nitens) Bundock cộng 2008; Freeman cộng w 2009 cho thấy thị SSRs, RAPDs có tương quan đến sinh trưởng oa nl đường kính với mức đóng góp biến dị kiểu hình từ 3,8 đến 17,9%, ngồi d tác giả số tính trạng chất lượng mật độ gỗ, hàm lu va an lượng xenlulơ, lignin đóng góp cho mức biến dị từ 5,6 - 12,3% [20] [28] u nf Theo Brondani cộng sự, (2006) đồ liên kết cho loài E ll grandis, số 172 thị có 153 (89%) thị giữ ngun vị trí m oi đồ chung cho Eucalyptus Trong đồ liên kết cho lồi E z at nh urophylla có 140 152 (92%) thị giữ nguyên vị trí đồ chung [19] z Anand Raj Kumar Kullan cộng (2012) nghiên cứu di gm @ truyền tính trạng tăng trưởng, tỷ trọng gỗ biểu gen l hai gia đình lai trở lại lồi Bạch đàn urơ Bạch đàn grandis xác định m co QTL đường kính thân 12 QTL cho tỷ trọng gỗ Các QTLs cho an Lu đường kính tỷ trọng gỗ cho thấy mức đóng góp biến đổi kiểu hình 3,1 - n va ac th si 12,2% Như tính trạng chất lượng lẫn số lượng nghiên cứu đóng góp 18% biến dị cho tính trạng nghiên cứu Một gợi ý Bala R Thumma cộng 2010 nghiên cứu chọn giống truyền thống có trợ giúp cơng nghệ sinh học (chỉ thị phân tử liên kết với tính trạng sinh trưởng) để tăng hiệu lựa chọn cho tính trạng số lượng có di truyền thấp, suất cách tiếp cận có hiệu Đây hướng đề tài“ Nghiên cứu ứng dụng thị phân tử SSR chọn giống bạch đàn lai (E urophylla x E exserta)” đề xuất thực [41] lu an Luận văn phần đề tài “Nghiên cứu chọn giống bạch đàn n va lai thị phân tử” giai đoạn 2012-2016, TS Nguyễn Việt Cường p ie gh tn to làm chủ nhiệm đề tài cộng tác viên đề tài d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 85 Phụ lục 02: Nhiệt độ bắt cặp cặp mồi EMBRA sau tối ƣu sử dụng nghiên cứu 205 cặp mồi Mồi Trình tự lặp lại EMBRA2 Trình tự mồi (5' đến 3') (AG)15 CgTgACACCAggACATTAC Nhiệt độ Kích Nhóm gắn mồi thƣớc liên (ºC) (bp) kết 56 121 11 56 88 56 98 56 115 56 127 56 94 56 95 10 56 97 56 98 56 109 56 97 56 315 56 120 11 56 135 56 178 56 204 11 58 138 58 148 56 65 ACAAATgCAAATTCAAATgA EMBRA5 (AG)22 ATgCTggTCCAACTAAgATT ACAAATgCAAATTCAAATgA EMBRA6 (AG)19 AgAgAATTgCTCTTCATggA gAAAAgTCTgCAAAgTCTgC EMBRA7 (AG)15 CACACCgTgTCAgTTAgC AATAAggAggATTCCATgg lu EMBRA8 (AG)21 CACAACTAAAAATCAAAACCC an AAAgAgCAgATTATTACAgAAgC va EMBRA9 (AGA)3(AG)28 AgTgAgAgAgATATTCgCgT n tn to CCAATACAATCATCAATCCA EMBRA10 EMBRA11 (CCT)3(AG)14 gTAAAgACATAgTgAAgACATTCC gh AgACAgTACgTTCTCTAgCTC gCTTAgAATTTgCCTAAACC p ie (AG)4GG(AG)13 gTAAAATCCATgggCAAg EMBRA12 (AG)22 AggATTTgTggggCAAgT w CATgATTCATCCCACTCCTC (AG)19 gTgAgTgggTATCCATCg gCTggAACTggTCTTgAg va (AG)27TAG (AG)4 TCATCAggTTCgCTCgTT u nf EMBRA25 gCCTCAAACCAATTCAAAT an 12 EMBRA20 (AG)8AAC(AG)25 lu 11 EMBRA14 d 10 oa nl gTTCCCCATTTTCATgTCC ll AgTTgAgTgAACACgCgg EMBRA26 (AG)19 CCCACAACAAAAggAAAg oi m 13 AgAggTgTTCgATTCAATTC EMBRA27 (AG)24 z at nh 14 ATAACCACACCAATCTgCA TATAgCTCgAACgCTCAAC EMBRA28 (AG)25 CAAgACATgCATTTCgTAgT z 15 16 EMBRA29 (AG)18AGA (AG)18 gm @ ACTCTTgATgTgACgAgACA CTTCgCTCACATCAgTCTC EMBRA30 (AG)22 TTAgTTgAATCCAACCATTg m co 17 l CAATCgAgTCAATAACATTC TATATAAggTgCAAATAATAAACg EMBRA31 (AG)6TTTCCC(AG)19 AATTgCCCgAgTCAAAATAC ggAACAATgTggTTTggg EMBRA32 (AG)22 ATCAgCCTCCACgTTCTA n va 19 an Lu 18 ac th si 86 ggAgAAggAAggTgTATCAA 20 EMBRA33 (AG)19 CAATTTgCATgTCCAgTTTg 58 122 10 56 104 56 205 56 155 56 124 56 126 10 56 146 11 56 141 10 56 198 56 127 56 145 56 208 56 102 56 106 56 132 58 115 56 130 56 144 58 149 56 115 143 gCAgAAgTTgATTgAAAgCA 21 EMBRA34 (AG)21 TCAAAACCCTCTCTCTCAT AATAAACATTTTCTTTgAACAgA 22 EMBRA35 (AG)24(TCC)9 ATTTTTgAgAgAAAAATCTTATCC gTggTgTgAACgAACgAT 23 EMBRA36 (AG)29 TTATCgTCAATTCTTgCTTg AATTCAgCTCAAgATTTggT 24 EMBRA37 (AG)16 CACCTCTCCAAACTACACAA CTCCTCTCTCTTCACCATTC 25 EMBRA38 (AG)11(TA)4 ggTTCTCTAgTgAAAATgTCg ATACATCCATCAAAgCACAA lu 26 EMBRA39 (AG)9(CA)11 gCATTCgTACTCATTTTCAA an gCATCgAgAgTggATTAgTT va 27 EMBRA40 (AG)19(CA)4 AAAgTATCTTCACgCTTCAT n TCCCAATCATgATCTTCAg EMBRA41 (AG)13 ATgATTTTgTgCgTggAC tn to 28 TCAggTgAAAggATggAg gh 29 EMBRA42 (AG)15 gAgTAAAAATTggTTTTgAgTg ie p CCCTCTTTTCATTTTgTCTT EMBRA43 (AG)14 30 TCCAggTTCATATTCACATC EMBRA44 (AG)16 ggggTTTgTTCTgCTTAg CAAAAgAgTTCAgCTgTg d oa 31 nl w CATCTCAAgTTCCTCCCT gTCATTTgCACACAgTTTTC AgTTCATAgAATgCAgAAAATg (AG)24 AgAACCCTCTATAAAACCCC u nf va EMBRA47 (AG)18 an 33 EMBRA45 lu 32 EMBRA49 (AG)20 ll 34 gggCTAgACATgATggAg ATTATTggTTCATATTgAAAACC (AG)20 gATgCATTCCTTTTTTTCC z at nh EMBRA51 oi m 35 AgATAgAgATTgAgTgAgACCC CATTCTCTTgCATCTggAC 36 EMBRA53 (AG)17GT(AG)5 ATTAgCTTTTCTgTAACCCg z gAATggACAAgCTCTgATg (AG)17 TgTATgAggTACATCCgg gm EMBRA54 @ 37 CAATCgAgTCAATAACATTC EMBRA56 (AG)23(CA)8 l 38 TCATTgACATgCTgACTgT m co ACTAACAgTTgAAAAggTAAAgC 39 EMBRA57 (AG)28 CCTTCTCTCTCTTggAATAC 40 EMBRA58 (AG)20 CACCAACTggTACTATgAggAT an Lu ATAgCCAgTgAAAgTgAgg 56 n va ac th si 87 TTggCTTAgggTAgAACACT 41 EMBRA59 (GA)6GG(GA)3AA(GA)9 gTTgTgCATgggCCTCTTg 56 106 56 139 11 56 121 56 110 58 107 56 70 58 105 56 65 56 58 56 223 56 96 11 56 197 11 56 84 56 288 56 178 58 106 58 89 56 195 58 98 10 160 10 CgACggCCAgTgAATTgTAA 42 EMBRA62 (AG)18 TAggACCTACAggACCAT gTTATACTgCggTgAAggCT 43 EMBRA69 (AG)5TT(AG)19 ACCTTgTgATggATgAAgC CCCgACAAggATgAgAAA 44 EMBRA71 (AG)39 gCgAATTTgCTAACAACC gACACACCTCTACACACACC 45 EMBRA78 (TC)24 TATTATCCAAAACgTCATTAgC TAgAggCAggTgTTAgCTg 46 EMBRA81 (CT)21 CATgAgTTACTgCAAgAAAAg ACAgCCAAAAACCAAATC lu 47 EMBRA82 (GA)27 ggAgACAgACATTTTgTCg an TAAgATTCCTTgAATgCACA va 48 EMBRA83 (CT)23 TggCTTCTATATCCTCCTTC n ATggTgATCgAgTgAgTTg EMBRA84 (CT)24 AATgACgACgCAAATAgAATAAT tn to 49 TACgCTCAgTTTTTCAgggT gh (CT)3CCCCTCCCC(CT)8 EMBRA85 ie 50 p CCgATgTCCAATgACTCC EMBRA86 (GA)25 CTATACTgCgAATCAAAgCA nl w 51 TgATCCATAATTAgggTTACACA C(CT)9 (CT)17AGA (CT)18 CTTCgCTCACATCAgTCTC d EMBRA87 oa 52 CATCAgATAATCAAgCAAgC 53 EMBRA88 an lu CATCAgATAATCAAgCAAgC (TC)21 gCCCTTTATTAgTTTgCAAC va EMBRA89 (CT)17 u nf 54 AAAgAATTTgAAAATCgAgTg AACAgTTTCgATTTgAAggT ll (GA)24 CCCAACTTAgAAACCCTAAA oi EMBRA92 m 55 gAgATTgTggAggAATCAAT 56 EMBRA97 (CT)21 z at nh AAgAAgTggTAggAAgAATAgg TgCAAgAAAAgCATAAAgAA CAgACTTCAggATTTCATTTC EMBRA99 (GA)24 z 57 CTAATCATgAgggggAAg @ CTTTCTCTCAgACggTCAC EMBRA100 (CT)26 gm 58 TgTgTTCTCggTTTCAAAACT l TgTgAAgTgATgCgAAgC EMBRA101 (AG)12A(AG)8 m co 59 TgATAgAgAggTACATggAgC TAAgACTCATgTgAACTAATTgg EMBRA102 (CT)29 ggCTAgTgATCCAAACATg gTCTCTCTCgCgTATgACA an Lu 60 56 n va ac th si 88 61 EMBRA104 (CT)11 CACCgATCTCCACTATgC 56 99 58 92 56 123 10 56 123 58 73 11 56 130 56 n.a 58 90 10 56 132 58 99 56 100 10 58 109 56 78 58 232 56 215 10 56 116 56 115 10 58 273 56 185 58 218 176 TTTTTTCAAggCAAAAgTg 62 EMBRA105 (CT)21 ggAACgCATgTTCTTTTC TgTCTgCTTTggAATgTg 63 EMBRA107 (GA)n AATACAATTgAggggTCTC ACCAAAAACAAATgTCgT 64 EMBRA111 (AG)15A(AG)16 CACAATggACCCAgCATA gCATCgAgAgTggATTAgTT 65 EMBRA113 (TC)22 TAAgATAACgggAAgCCA TgTTATCTgACTgATCAAgg 66 EMBRA114 (GA)26 AggCgATgACTgTTATCAA ACTTCCAAAATTCCCCAC 70 EMBRA120 (TC)17 TgTCATTTTCAAgAACTTgC lu TCAggTgAAAggATggAg an 71 EMBRA124 (TC)34 TgTggACATgATAgATgAAgT va AATTATTTCgATAgAAACggA n 72 EMBRA125 (CT)29 TTCAAgAAATCATCgACAAA to TCgCATCATAgAAgTCgTC tn 73 EMBRA126 (TCCTC)4TCC (CT)18 gTAgTCCCTgACgCAAAC gh EMBRA127 p (CT)16CGG (TC)15 CAAgCTgTAgggTTCCTTT gTATAAgACCCAAAgACCCA EMBRA129 (TC)22 AAATgCTCgTCCTATTTgAT nl w 75 ie 74 AgTACgATATTTTCgCgAgT (TG)9GGTGTATA(TG)15 ACTTAACATCTATACATATTTg d EMBRA131 oa 76 AgATATAggTCAAATCCCTCC 77 EMBRA132 an lu TgTCCTATCTggCTCA (TG)13 gAACgCTATTCCTCggATgA va EMBRA133 (TG)28 u nf 78 CATgATTACgCCAgCTCg CggTCgTTgTCggAATCTC ll (AG)15AAT (AG)10 CTgACTTggCCggTACATA oi EMBRA135 m 79 AgTTgggTAACgCCAggTTT 80 EMBRA136 (TC)26CC(TC)3 z at nh AgTTCATAgAATgCAgAAAATg gTTATgTTTggTTgAAAggAg AgACACCATgTCCCCAgg EMBRA137 (AG)n z 81 CTCgTCTTgCACgCTCTCTT @ 82 EMBRA138 (AG)n gm gAgAgTgTgTTCATgCggCT TCTggTTCgTCgACAATC l AAAgTTATCAgCgAgAgTTC EMBRA139 (GA)32 m co 83 CCAATgCAAgCCATAATgT ggATCCggCTTCACTCTT EMBRA140 (CT)15 ggTTTgATAggTggATTggg ggTTgATgACTgAgAgATgAAgg an Lu 84 56 n va ac th si 89 85 EMBRA142 (CT)28 gAAgCCgTATgCCTACTgTT 56 259 56 189 56 107 56 204 56 218 56 114 56 146 58 165 56 122 56 215 10 56 247 1.6 56 144 10 56 146 56 150 56 89 58 175 56 129 11 56 102 56 124 55 82 127 ATgTgCgAgTgggAgATg 86 EMBRA143 (GA)20 CCgTgAggATgTggATgT gAACCCACAgTTATTTCC 87 EMBRA146 (GA)n gAATCCTCTTggAgCACTAC CCATTAggCCgAgTAgAA 88 EMBRA147 (AG)n gCACggTACTCgATCATAgA TgAgATAggATTgCgCgT 89 EMBRA148 (TC)26 gATTACAAgCCACACCgT AgCCAAgTTgTATCAgAACC 90 EMBRA149 (AG)n ggAgAgATTgAAgggAAA ACTCATCAAgCCATAgCTC 91 EMBRA150 (AG)n CgTCACTgAgAAgAgATAA lu TCACTACTgAgAAgACTAgg an 92 EMBRA151 (AG)n gTCAgTTgACggCgTAAg va CCATTCggTTgAgAgAgA n 93 EMBRA152 (AC)24 TCTCCTCTggCTCTTCTA to AgCTCCCTTCACAgTgTA tn 94 EMBRA153 (CT)24 CACACTTCTAgTCCATCC gh EMBRA154 (CT)19 p TggATggTCAACggCgTA CATgCATTggCCATTggT EMBRA155 (TC)n ggTTgTCggTTCACTCTTgT nl w 96 ie 95 ggAgTATAgAACgATTgTg d EMBRA156 oa 97 ATAggATTgCgTCATgAAgC (GA)25 gTCAgATTggATCTATgC 98 EMBRA157 an lu gAACAAgTAgATCCTCgTA (GT)16 TgCCAgAATgTATCgTCC va EMBRA160 (GA)12 u nf 99 TCTggCTTCTTTCTTgTTg ggTTgAACAAgTTggTCT ll ATCATCATTggAgggAA (GA)22 TgTCACCATACTTAgCAAgg oi EMBRA162 m 100 101 EMBRA165 (CT)2C(CT)23 z at nh ggTACTTCTCATTTgCACg AAgAACATgCAgCggAgA CTgCAATACATATCTTCTCC EMBRA166 (GA)19 z 102 AACgTgAACgTAggTAg @ 103 EMBRA167 (TC)19 gm ACAgATCAAAgTCTCTCTC ggAgAAgTCTCTACTgCT l ATggCCTTTgTCACCTCT EMBRA168 (GA)12 m co 104 ggAgTgAAgACggTAAAT gATTCAATATgTgTgCTTgg EMBRA169 (CT)17 TgCTTCTgACACCgATCT AgTCAATAACATTCAAgACTgC an Lu 105 58 n va ac th si 90 106 EMBRA170 (GA)20 CgAgTggCATCgCgAATA 56 124 54 105 55 102 54 81 60 138 11 60 154 56 134 56 77 59 211 58 158 56 186 56 180 56 143 56 114 - 56 207 11 56 145 52 250 56 146 10 58 272 57 279 264 CTCTTCCTCggCCCTgAAT 107 EMBRA171 (GA)4AA(GA)19 AATggTgCCAgATTgAA CAACTCAgTggCTCAgTg 108 EMBRA173 (GA)20 CTgTCAATACACACgCAC ggATTCACTTgTTAgCTg 109 EMBRA175 (CT)16 CAACAACTggATgAATgg ACgTTAATggCAgACACC 110 EMBRA176 (GA)19 CCgAACTgAACATCTgTgAC ggTCCTTgTCCAACTCTCTC 111 EMBRA177 (CT)7CC(CT)7 CCTCACTTggCCgAATAC CTTgCATgTCCTCCAACAC 112 EMBRA179 (GA)9 gTCggCTCACAgCATgAA lu gCCTCCAgTAgTTAACAgACg an 113 EMBRA180 (GA)16 ATCAACgACACATATgCAgC n va ggATgCTTgggTgATTgT 114 EMBRA182 (GA)22 gCATACTTAgCAAggAATAg to gCTAAggAAATATCCAgg tn 115 EMBRA185 (GA)18 gACgTACATTACgTTCTATTCC gh EMBRA186 (GA)27 p ggAAggCTTTgAgATAAC ACCgAgACCAgTTgAgAg EMBRA188 (CT)25 gAgCgAgATCTAATCTTC nl w 117 ie 116 TACACATTAAggCCCgTC (CT)17A(CA)14 CgTgCTTTTgAggCTCT d EMBRA189 oa 118 AAAAgTTTggCTgATggg 119 EMBRA190 an lu gATTgAggATgAgTggTC (TC)20 TTgTCTCTTCCTgCCTCCC va EMBRA191 u nf 120 gAgACCTTgCTCAAgCTCC (CT)23(CATA)5 gATCCAgCTgTgTACATC ll (CT)22CCT(TC)5 oi EMBRA192 m 121 CTTCgTgCTATAATCAggTC ggATgCAgTTCTAgAgAg 122 EMBRA193 (TC)15 z at nh gAgCgAgATCTAATCTTC TTCgCCATCgTCgTAgTC gAgAgATATTCgCgTgCAg EMBRA194 (CT)17 z 123 AAgATAggTggCgCTTgAg @ 124 EMBRA196 (GA)46 gm gggCATgTAgAAACTCTTCg gTgAAgCTCAACCTgTTgTCT l gTgACCgATCATgTgTggACT EMBRA197 (TC)21 m co 125 gCAgCAACgTCTACCTCTTCC CTACTgTACgTTgAgCgAAgC EMBRA198 (GA)40 gTAAgAgCAATATTATCAgC CggTCCATTCAATACTATC an Lu 126 58 n va ac th si 91 127 EMBRA199 (GA)17 gCgTggACATTAggCAAg 56 105 57 348 56 147 57 182 57 316 58 225 58 116 56 153 57 213 56 232 56 151 56 128 57 217 2.1 57 268 58 157 58 200 56 164 56 310 56 181 56 173 104 CCgCCTCCAACATTCTCT 129 EMBRA203 (TC)21 CAgCAACgTCTACCTCTTCC TgATCCAgTTCCgACTAgTg 130 EMBRA204 (TC)25 CTCgTgTggTTATgTgAACT gCTTgTCTACTATgCACATgA 131 EMBRA205 (GA)21 AggAAggCggATTgATgAgg gAACggACggAggTgAgCTA 132 EMBRA206 (GA)8AA(GA)11 gAACAgCTACTCgTCgATTC gTAACCAggCTTggACgAT 133 EMBRA207 (CT)12 gATATTCCTCggTCTCTCTg TCCTCTTgTTgTCgCCTC 134 EMBRA208 (CT)28 AAgCTATTggTgTCACCgAA lu AAAgAggAggggAATTACTC an 135 EMBRA209 (TC)22 TgCCTTCCACTTCTTCAg n va AAATCTAgTCggTCTCAAAgC 136 EMBRA210 (TC)25 CgTgTggTTATgTgAACT to CCTAACAATgCATAAgCTC tn 137 EMBRA213 (CT)17 AgTgAATgCTgTggAgAACC gh EMBRA214 (TC)22 p CCTTCCACTTCTTCAggT AgAgCAACACACggAggT EMBRA217 (TC)25 CgTgTggTTATgTgAACT nl w 141 ie 139 ggAgAAgCAAgACCAggAgT d EMBRA218 oa 142 ATgAgTATATgCCTgTgg (TC)17 TCAgTAATCAgATTTgCgCT 143 EMBRA219 an lu CTCTCAggCgATTgATggT (GA)17 gATTCCACTgCggCCAgACA va EMBRA223 u nf 144 CgAACgTAAgACTAggTCCgAAgA (GA)16GG(GA)4 TggATgTgAAgggAgAgTg ll (GA)20 TAAgATAgAgACgggCCAgC oi EMBRA224 m 145 gAgTgCTgTgTCgTAggCT 146 EMBRA225 (GA)5GT(GA)8 z at nh TgCAATACAAgTCTgAgAgCCA AgTgCAgCATTgAgTTCC AAgAggTggCTCCAgAAg EMBRA227 (GA)13 z 147 CgAATgCCATAgATTgTCAg @ 148 EMBRA229 (GA)20 gm CAggCATCTCgTACgTggA AgAACgTTAACTCCTAAggT l gCATgTACACTAACgACg EMBRA230 (GA)30 m co 149 gTACTTAATCTgTggCAATC gATCCTTgCATTATCgAC EMBRA232 (AG)12 TCCTTATCgTCAATTCTTgC ggTCTAgCgTgATTCATCCT an Lu 150 56 n va ac th si 92 151 EMBRA233 (AG)14 gATgCACTTATCTCCACCAA 56 160 56 123 56 185 58 189 56 97 11 56 172 n.s 60 165 n.s 58 158 n.s 58 208 n.s 56 94 n.s 56 155 n.s 60 112 n.s 56 214 n.s 56 178 n.s 60 115 n.s 56 311 n.s 56 348 n.s 56 271 n.s 54 262 n.s 56 348 n.s 150 n.s TgTAgCACCAgAATgTCAgg 152 EMBRA237 (GA)25 TgCCAAgAACCTATTAATCg ATCATCATTggAgggAA 153 EMBRA238 (GA)35 TgAgTATgCAggCAAgTCTAgC TTAgggATgTCggCATCAC 155 EMBRA241 (CT)19 AAgAAgTACCTCTCTCTCTC TgACgTgATATCTCAgTTg 156 EMBRA236 (GA)28 CCCTAATAgTgTgACCTTgA ggTCCTTgTCCAACTCTCTC 157 EMBRA257 (CT)28 CCTTCTCTCTCTTggAATAC CACCTAgAATAgCCAgTgA 158 EMBRA258 (AG)15 CTgACTTggCCggTACAT lu TCTAgTCggTCTCAAggCA an 159 EMBRA263 (GA)n CTTCgAATCAAgCCgTC n va TTCAggAggTggAggAg 160 EMBRA269 (TC)15(AC)16 TCAACTgCAATCCTTACC to CCTgCAgTgTCAgTgTgT tn 161 EMBRA277 (TC)23 CTACCAATgCATCTCgTC gh EMBRA278 (AG)18 p CCTTCAgACgACATTACTATC CCgCATCATTgAAgTCAT EMBRA288 (GA)22 AAgTCCgAACgTgAgAgA nl w 163 ie 162 gTAgCgTAACTCAACgTg d EMBRA290 oa 164 AgCgAggAAgATgAACAg (GA)15 CggCAATATCgTgAATgg 165 EMBRA291 an lu TCACgTTgAgTTAggCTACC (GA)24 CAAACAACgTggACgAAgAAA va EMBRA292 (GA)20 u nf 166 TCggTTTCggCAACATgg TTCCTgTgCCTggTgA ll (CT)21 ACAATgAgATAAgCAgCTCC ACTggTggCATgTCATgg z at nh EMBRA298 (CT)23 oi 168 EMBRA296 m 167 TgCCAgAAgTCCTCTCTC CAgCAACgTCTACCTCTTCC TgATCCAgTTCCgACTAgTg EMBRA303 (CT)20 z 169 gCgACTgCgTAgCATgTATCT @ 170 EMBRA304 (GA)35(GGA)4 gm AgCTgCAAATgCCATCAA gTCCTACTTCAATCACAgAg l CAggAggTgAACATCgAg EMBRA313 (GA)26 m co 171 TgATCAATATCTAACCAgC gAgCgATgAgAgATTgAg EMBRA318 (GA)28 CCCTCCATTATCgACACAAA gCCATTATTAgCTgCCgT an Lu 172 56 n va ac th si 93 173 EMBRA321 (TC)20 ggACAAgTCCAgCAgATATg 56 230 n.s 56 166 n.s 54 356 n.s 56 218 n.s 52 189 n.s 56 276 n.s 54 148 n.s 54 217 n.s 56 97 n.s 58 98 n.s 58 83 n.s 58 72 n.s 56 132 58 96 n.s 58 200 n.s 58 322 n.s 56 n.a n.s 56 91 n.s 54 109 n.s 56 119 n.s 98 n.s CgATCAgAgAAgATAggCgA 174 EMBRA324 (TC)20 gCAAgAgACTTTgTgACACC CCTAgATCAACCgTCATCg 176 EMBRA332 (GA)11 TggTCCATggTgTTgTTgAg CTTCATgCAgACATACCgTg 177 EMBRA333 (TC)7AG(TC)5 CTATTAgCCTgCAgTTgACC ggATgTTCATgTgACCTCCA 178 EMBRA337 (TC)20 AgTAgAAgTAAATCgTgCggT CAgCAgATCAATAAgCCTCg 180 EMBRA341 (TC)22 CCTCACACTCCACgAACACg CTgTgTTTCgATggTgATgC 183 EMBRA351 (GA)26 CTAggTgAgggAAATgAAA lu CCAgACAACAAgAAgAAAgT an 184 EMBRA352 (GA)24 CATACgTTgTACCTTgCTCC n va AgAACCAAgAgCTgTgAgTC 185 EMBRA356 (CT)35 gCTTCATCTATAACATTACTCAgA to AgAAgAATCCATAgTTgTTTCC tn 186 EMBRA358 (CT)31 TgATggTTgAATATgACCC gh EMBRA359 (CT)19 p TAgAATgTTgCCCTTTTTTT ATCCTCCATAATTCTTTgTTg EMBRA360 (GA)13 ACATCAAggTCAAAATAgTgg nl w 188 ie 187 ATggCgTTATTTATAgAgTgTg d EMBRA361 oa 189 gAggAAAAgTCATgTCACg (AG)14 gTTCgCCATCgTCgTAgT 190 EMBRA362 an lu ATCATCCgTATCAgCCgA (TC)3TT(TC)18(AC)13 TgCCTgTggTTCAAgTTA va EMBRA363 (AG)29 u nf 191 ACATTTggTgTgTgTgTgT ACAAgCCATgATTgATCTg ll (TC)40 TTTTggTgAgCTACgTACA oi EMBRA364 m 192 AgTgTgAAAAgggCACAg 195 EMBRA369 (CT)6TT(CT)9TT(CT) z at nh TggAggAggAAATATATACATATA gATTTTgggATCAATACCAC TTggAgCTTTCAAAAAATg EMBRA372 (AG)18 z 197 ACTTTggATTACCCgCTATA @ 198 EMBRA374 (GA)29 gm CATTCTgATTCCACCgTATA TTTAAAgAAATggTCATAATTTg l AAgCACACAgACgTCATC EMBRA375 (AG)18 m co 199 CggTTACTTgCTTCATTCg gTACggATgggTggACAC EMBRA377 (TC)24 CCTATCACAAgCACCgTAg CCTAAgACATgAggTCgC an Lu 200 58 n va ac th si 94 201 EMBRA378 (TC)24 ACTTTgTggCATTCATCA 56 190 n.s 56 239 n.s 58 85 n.s 56 166 n.s 58 212 n.s TgACgAgAggAgAAAACC 202 EMBRA379 (AG)17 TCTgAATggAggAgATgg AAATAATTTCCTTgCCCAT 203 EMBRA382 (CT)17 AgTCATTACgTAgCCACgg TCTgCAgATgCTgTTgCT 204 EMBRA385 (CT)31 TCATCTTCCATgTTACTCACA TggATgTCgAgAAgAgTAAA 205 EMBRA386 (TC)24AAA (TC)24 CCAAACACTCTTCCCATAT CCATAAACCAATCAAATCA lu an n va p ie gh tn to d oa nl w ll u nf va an lu oi m z at nh z m co l gm @ an Lu n va ac th si 95 Phụ lục 03 : Sinh trƣởng dòng bạch đàn lai Bầu Bàng Bình Dƣơng (8/2002 - 8/2006) C«ng TT D1.3 (cm) thøc Xtb Sd V(dm3/C©y) Hvn (m) V% Xtb Sd V% Xtb Sd Năng suất V% Tỷ lệ (m3/ha/năm) sèng(%) lu an n va UE3 13.07 1.52 11.63 14.27 0.53 3.71 98.50 6.77 6.87 27.09 86.7 UC1 13.02 1.71 13.13 13.25 1.02 7.70 93.00 7.11 7.65 25.58 90.0 PN2 13.05 2.43 18.60 12.20 1.58 12.93 91.50 7.77 8.49 25.16 56.7 UE27 12.59 1.73 13.74 13.88 0.95 6.82 91.00 7.15 7.86 25.03 56.7 UC90 13.14 1.64 12.48 12.53 1.22 9.74 88.70 6.68 7.53 24.39 86.7 UE33 12.29 1.32 10.74 12.56 0.58 4.62 76.50 6.17 8.07 21.04 76.7 UE24 11.59 1.19 10.26 13.38 0.50 3.71 74.00 6.02 8.14 20.35 76.6 U6 12.09 1.37 11.33 12.15 0.64 5.27 73.70 6.35 8.62 20.27 46.7 UU9 12.13 0.69 12.57 1.07 8.51 72.50 4.87 6.72 19.94 13.3 11.55 1.48 12.80 12.72 0.89 7.03 69.20 6.60 9.54 19.03 33.3 11 UE85 11.51 1.17 10.16 12.71 1.89 14.87 69.20 5.81 8.40 19.03 76.7 12 PN14 12.15 1.07 10 UE30 5.65 6.83 69.10 5.52 7.99 19.00 33.3 13 UE26 11.38 1.32 11.58 12.52 0.94 7.49 66.60 6.22 9.34 18.32 76.7 14 UE86 10.89 0.56 13.56 0.59 4.35 64.10 3.80 5.93 17.63 23.3 15 UE59 11.67 1.98 16.97 11.02 0.59 5.35 63.10 6.48 10.27 17.35 33.3 16 UE73 10.85 1.23 11.37 12.73 0.54 4.24 61.10 5.79 9.48 16.80 80.0 17 UU15 10.58 1.22 11.53 11.80 0.77 6.53 60.70 5.36 8.83 16.69 26.7 18 UC77 10.43 0.73 an 12.31 0.53 4.31 59.10 4.73 8.00 16.25 70.0 19 UC2 11.07 0.70 6.31 12.05 0.28 2.32 58.60 4.88 8.33 16.12 76.7 20 UE31 10.52 1.49 14.16 12.60 0.89 7.06 57.50 6.31 10.97 15.81 76.7 21 UE25 10.41 1.26 12.06 12.82 0.85 6.59 56.50 5.93 10.50 15.54 20.0 22 UE35 10.26 1.68 16.37 12.00 0.23 1.94 56.50 6.34 11.22 15.54 36.7 23 UE23 10.16 1.91 18.83 12.00 1.30 10.80 55.90 6.78 12.13 15.37 50.0 24 UE34 10.08 1.10 10.93 12.73 0.95 7.46 14.88 53.3 25 UU16 10.48 1.00 9.54 11.41 0.47 4.12 26 UE5 10.25 0.94 9.13 12.30 0.67 5.45 27 UE84 10.03 1.14 11.34 12.71 0.67 28 UU11 p ie gh 11.56 0.79 w tn to 8.80 5.11 d oa nl lu 6.95 ll u nf va oi m z at nh 54.10 5.68 10.50 z 7.48 14.74 53.3 52.70 5.26 9.98 14.49 86.7 5.27 52.10 5.22 10.02 14.33 56.7 10.16 1.81 17.80 11.30 0.17 1.50 48.20 5.90 12.24 13.26 33.3 29 UC80 9.43 1.17 12.41 11.48 0.81 7.06 47.90 5.31 11.09 13.17 90.0 30 UU8 9.73 1.94 19.94 31 GU 94 9.32 1.72 18.44 10.60 1.00 m co l gm an Lu 9.67 @ 53.60 4.01 1.98 20.48 41.00 6.51 15.88 9.43 40.40 6.14 15.20 11.28 16.7 11.11 56.7 n va ac th si 96 32 UC78 9.41 0.55 5.89 11.41 0.69 6.05 40.30 4.42 10.97 11.08 90.0 33 GU 92 9.38 1.22 12.99 10.67 0.91 8.57 39.80 4.62 11.61 10.95 46.7 34 UE4 9.23 0.97 10.47 11.44 0.64 5.59 39.70 4.87 12.27 10.92 86.7 35 UC81 8.27 0.97 11.73 11.12 0.79 7.10 30.90 4.69 15.18 8.50 73.3 36 UC18 7.69 1.54 20.03 1.26 13.03 25.30 5.54 21.90 6.96 73.3 9.67 Fpr