(Luận văn) nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ và các chỉ tiêu sinh lý máu ở đàn gà mắc bệnh do ort trên địa bàn tỉnh bắc giang

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM NGUYỄN THỊ THƢƠNG lu an NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ VÀ CÁC va n CHỈ TIÊU SINH LÝ MÁU Ở ĐÀN GÀ MẮC BỆNH DO p ie gh tn to ORT TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH BẮC GIANG oa nl w Thú y Mã số : 60 64 01 01 d Chuyên ngành : nf va an lu Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Chu Đức Thắng z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2016 n va ac th si LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các số liệu, kết nêu luận văn trung thực chƣa đƣợc công bố cơng trình khác Tơi xin cam đoan thơng tin trích dẫn luận văn đƣợc rõ nguồn gốc./ Hà Nội , ngày tháng năm 2016 Tác giả luận văn lu an n va p ie gh tn to Nguyễn Thị Thƣơng d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th i si LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, cố gắng thân, nhận đƣợc quan tâm giúp đỡ quan, tổ chức, nhà khoa học, thầy cô giáo, bạn bè đồng nghiệp ngƣời thân gia đình Nhân dịp này, xin cảm ơn giúp đỡ giảng viên khoa Thú y – Học viện Nông nghiệp Việt Nam giảng dạy suốt thời gian học tập Tơi bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc hƣớng dẫn, giúp đỡ chân tình, đầy trách nhiệm hết lịng khoa học PGS TS Chu Đức Thắng; lời cảm ơn tới ngƣời thân gia đình, đồng nghiệp ln quan tâm, động viên giúp tơi hồn lu thành luận văn an Hà Nội, ngày tháng năm 2016 va n Tác giả luận văn p ie gh tn to d oa nl w Nguyễn Thị Thƣơng nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th ii si MỤC LỤC Lời cam đoan i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục từ viết tắt vi Danh mục bảng vii Danh mục hình viii Trích yếu luận văn ix Thesis abstract xi lu Phần Mở đầu an n va Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài gh tn to 1.1 Phần Tổng quan tài liệu p ie 2.1 2.1.1 Lịch sử tình hình nghiên cứu bệnh ORT Tình hình nghiên cứu ORT giới w Tình hình nghiên cứu ORT Việt Nam 2.2 Căn bệnh 2.2.1 Phân loại 2.2.2 Hình thái cấu trúc vi khu n 2.2.3 Tính chất ni cấy 2.2.4 Cấu trúc kháng nguyên độc lực 2.2.5 Định serotype phân loại chủng 2.2.6 Khả gây bệnh 2.2.7 miễn dịch vật chủ 2.2.8 Sức đề kháng 2.3 Truyền nhiễm học 10 2.3.1 Phân bố bệnh 10 2.3.2 Lứa tuổi mắc bệnh 10 2.3.3 Mùa vụ phát bệnh 10 2.3.4 Chất chứa mầm bệnh 11 d oa nl 2.1.2 nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th iii si lu 2.3.5 Phƣơng thức truyền lây 11 2.4 Triệu chứng bệnh tích 12 2.4.1 Triệu chứng gà mắc ORT 12 2.4.2 Bệnh tích gà mắc ORT 13 2.5 Ch n đoán 14 2.5.1 Ch n đoán lâm sàng 14 2.5.2 Ch n đốn ph ng thí nghiệm 14 2.5.3 Ch n đoán phân biệt 17 2.6 Biện pháp phòng trị bệnh 18 2.6.1 Ph ng bệnh 18 2.6.2 Điều trị 19 an Phần Vật liệu phƣơng pháp nghiên cứu 20 Đối tƣợng nghiên cứu 20 3.2 Địa điểm nghiên cứu 20 n va 3.1 tn to Nội dung nghiên cứu 20 gh 3.3 ột số đặc điểm dịch tễ bệnh ORT gây đàn gà 20 p ie 3.3.1 Phƣơng pháp nghiên cứu 21 nl w 3.4 Nghiên cứu xác định số tiêu sinh l máu gà mắc bệnh ORT 21 3.3.2 Phƣơng pháp quan sát triệu chứng lâm sàng 21 3.4.2 Phƣơng pháp mổ khám 21 3.4.3 Phƣơng pháp lấy mẫu bảo quản mẫu làm tiêu 21 3.4.4 Phƣơng pháp nuôi cấy phân lập vi khu n 22 3.4.5 Phƣơng pháp nhuộm Gram 23 3.4.6 Phƣơng pháp xác định tiêu huyết học 23 3.4.7 Phƣơng pháp PCR 24 3.5 Nguyên liệu nghiên cứu 25 d oa 3.4.1 nf va an lu z at nh oi lm ul ẫu bệnh ph m 25 3.5.2 áy m c 26 3.5.3 Dụng cụ 26 3.5.4 H a chất 26 z 3.5.1 co l gm @ m Phần Kết thảo luận 27 an Lu 4.1 Một số đặc điểm dịch tễ bệnh ORT gây đàn gà 27 n va ac th iv si 4.1.1 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo lứa tuổi 27 4.1.2 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo m a vụ 29 4.1.3 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo truyền thống chăn nuôi 32 4.1.4 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo phƣơng thức chăn nuôi 33 4.1.5 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo giống 35 4.1.6 Kết nghiên cứu triệu chứng lâm sàng đàn gà mắc ORT 37 4.1.7 Kết nuôi cấy phân lập vi khu n đàn gà biểu triệu chứng lâm sàng mắc ORT 43 4.2 Nghiên cứu số tiêu sinh lý máu gà mắc bệnh ORT 50 Phần Kết luận kiến nghị 53 lu an Kết luận 53 5.1.1 Đặc điểm dịch tễ đàn gà mắc ORT tỉnh Bắc Giang 53 5.1.2 Chỉ tiêu sinh lý máu gà mắc bệnh ORT 53 5.2 Kiến nghị 54 n va 5.1 tn to p ie gh Tài liệu tham khảo 55 d oa nl w nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th v si DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT lu an n va Tên đầy đủ AGP Accelerated Graphics Port BEAs Boiled Extract Antigens BHB Brain Heart Infusion Broth CBA Columbia Blood Agar cDNA Complementary Deoxyribonucleic Acid CRD Chronic Respiratory Disease DIA Dot Immunobinding Assay ELISA Enzyme-Linked Immunosorbent Assay fl fluid GAP Agar Gel Percipitation gh tn to Tên viết tắt IB Infectious Bronchitis ie Infectious Coryza p IC Infectious Laryngo Tracheitis Peroxidase - Anti Perosidase an lu PBS d PAP Ornithobacterium rhinotracheale oa ORT nl w ILT Phosphate Saline Buffer PCR nf va PGNR Pleomorphic Gram Negative Rod RNA Ribonucleic Acid rRNA Ribosomal Ribonucleic Acid RT - PCR Reverse Transcriptase-Polymerase Chain Reaction SDS Sodium Dodecyl Sulfate SPAT Standard Plate Agglutination Test Polymerase Chain Reaction z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th vi si DANH MỤC BẢNG So sánh triệu chứng, bệnh tích phân biệt với số bệnh đƣờng hơ Bảng 2.1 hấp gà thƣờng gặp 18 Bảng 4.1 Kết thu thập gà mắc bệnh ORT số huyện địa bàn tỉnh 37 Bảng 4.2 Triệu chứng lâm sàng gà mắc bệnh ORT 38 Bảng 4.3 Kết mổ khám kiểm tra bệnh tích đại thể gà mắc ORT 41 Bảng 4.4 Kết giám định có mặt vi khu n ORT kỹ thuật PCR 49 Bảng 4.5 Kết phân lập chủng vi khu n ORT từ mẫu bệnh ph m theo nhóm gà 46 lu an n va Kết phân lập vi khu n ORT từ mẫu bệnh ph m 47 Bảng 4.7 Tình hình mắc bệnh ORT theo lứa tuổi gà tỉnh Bắc Giang 27 Bảng 4.8 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo mùa vụ tỉnh Bắc Giang 29 Bảng 4.9 Tình hình mắc bệnh ORT theo thâm niên chăn nuôi 32 tn to Bảng 4.6 ie gh Bảng 4.10 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo phƣơng thức chăn nuôi tỉnh p Bắc Giang 33 Bảng 4.11 Tình hình gà mắc bệnh ORT theo giống tỉnh Bắc Giang 35 w oa nl Bảng 4.12 Kết nghiên cứu số tiêu hệ hồng cầu gà mắc bệnh ORT 50 d Bảng 4.13 Kết nghiên cứu số tiêu hệ bạch cầu gà mắc bệnh ORT 51 nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th vii si DANH MỤC HÌNH lu an n va Hình thái vi khu n ORT dƣới kính hiển vi Hình 4.1 Tình hình mắc bệnh ORT theo lứa tuổi gà tỉnh Bắc Giang 29 Hình 4.2 Tỷ lệ gà mắc bệnh ORT theo mùa vụ tỉnh Bắc Giang 30 Hình 4.3 Tỷ lệ gà chết bệnh ORT theo mùa vụ tỉnh Bắc Giang 31 Hình 4.4 Tỷ lệ gà mắc bệnh ORT theo thâm niên chăn ni 33 Hình 4.5 Tỷ lệ gà mắc bệnh ORT theo phƣơng thức chăn ni 34 Hình 4.6 Tỷ lệ gà mắc bệnh ORT theo giống 36 Hình 4.7 Kết mẫu bệnh số huyện địa bàn tỉnh 38 Hình 4.8 Triệu chứng lâm sàng gà mắc ORT 39 Hình 4.9 Triệu chứng gà mắc ORT 40 Hình 4.10 Bệnh tích gà mắc bệnh ORT 42 Hình 4.11 Kết ni cấy vi khu n ORT môi trƣờng thạch máu 43 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hóa vi khu n ORT 44 tn to Hình 2.1 Hình 4.12 gh Kết kiểm tra phản ứng Indol vi khu n ORT 44 ie Hình 4.13 p Hình thái vi khu n ORT dƣới kính hiển vi 45 Hình 4.14 Kết phân lập chủng vi khu n ORT từ mẫu bệnh ph m theo nl w Hình 4.15 oa nhóm gà 46 Kết phân lập vi khu n ORT từ mẫu bệnh ph m 47 Hình 4.17 Kết giám định có mặt vi khu n ORT kỹ thuật PCR 48 Hình 4.18 Kết giám định có mặt vi khu n ORT kỹ thuật PCR 49 Hình 4.19 Chỉ tiêu bạch cầu gà mắc bệnh ORT 52 Hình 4.20 Chỉ tiêu bạch cầu gà khoẻ 52 d Hình 4.16 nf va an lu z at nh oi lm ul z m co l gm @ an Lu n va ac th viii si TRÍCH YẾU LUẬN VĂN Tên tác giả: Nguyễn Thị Thƣơng Tên luận văn: Nghiên cứu số đặc điểm dịch tễ tiêu sinh l máu đàn gà mắc bệnh ORT địa bàn tỉnh Bắc Giang” Ngành: Thú y Mã số: 23151014 Tên sở đào tạo: Học viện Nơng nghiệp Việt Nam Mục đích nghiên cứu Xác định đƣợc biểu triệu chứng lâm sàng đặc trƣng bệnh ORT lu Xác định đƣợc tình hình mắc bệnh ORT địa bàn tỉnh Bắc Giang an Xác định biến đổi số tiêu huyết học gà mắc bệnh ORT làm sở n va cho việc ch n đoán bệnh tn to Phƣơng pháp nghiên cứu Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ đàn gà mắc ORT tỉnh Bắc Giang p ie gh Nội dung nghiên cứu w Nghiên cứu số tiêu sinh lý máu gà mắc bệnh ORT oa nl Phương pháp d - Phƣơng pháp mổ khám an lu - Phƣơng pháp lấy mẫu bảo quản mẫu nf va - Phƣơng pháp nuôi cấy phân lập vi khu n lm ul - Phƣơng pháp PCR - Phƣơng pháp kiểm tra tiêu sinh lý máu z at nh oi Kết kết luận Đặc điểm dịch tễ đàn gà mắc ORT tỉnh Bắc Giang z Gà giai đoạn - tuần tuổi chiếm tỷ lệ mắc bệnh tỷ lệ chết cao lần gm @ lƣợt 51,69% 26,12%; đến nhóm gà - 20 tuần tuổi; gà 20 tuần tuổi có tỷ lệ mắc tỷ lệ chết thấp 42,33% 18,10% l m Thu tỷ lệ mắc chết thấp 43,67% 20,86% co Vụ Đông Xuân tỷ lệ mắc chết cao chiếm 49,04% 24,71%; vụ Hè an Lu Đối với hộ c thâm niên chăn nuôi từ - năm, tỷ lệ mắc chết cao nhất, chiếm 55,65% 26,72% Hộ chăn nuôi c thâm niên từ 11 - 15 năm tỷ lệ mắc n va ac th ix si 4.1.7 Kết nuôi c y phân lập vi khu n đàn gà bi u triệu chứng lâm sàng mắc ORT Sau giám định xác gà mắc bệnh ORT kỹ thuật PCR, tiến hành lấy mẫu bệnh ph m nuôi cấy môi trƣờng thạch máu Colombia Blood Agar (có bổ sung 5% máu thỏ 10µg/ml Gentamicin), điều kiện 37oC, CO2 5% ủ thời gian 24-72 để kiểm tra có mặt vi khu n c thể Kết nuôi cấy đƣợc thể thông qua hình 4.13 lu an n va p ie gh tn to d oa nl w nf va an lu lm ul Hình 4.11 Kết ni cấy vi khuẩn ORT t n ô t ƣờng thạch máu z at nh oi z Kết hình 4.11 cho thấy: môi trƣờng CBA (Columbia Blood Agar), khu n lạc phát triển thành đám c kích thƣớc khác nhau, khu n lạc nhỏ, to đầu đinh ghim, tr n, đục, c màu xám đến xám trắng gây dung huyết yếu không gây dung huyết Kết ph hợp với nghiên cứu trƣớc đƣợc công bố (Mohammed Zahra et al.; Võ Thị Trà l gm @ An cs, 2014) co m Từ kết trên, tiến hành lấy khu n lạc đặc trƣng kiểm tra số phản ứng sinh hóa chúng (Oxidase, Catalase), kết đƣợc thể thơng an Lu qua hình 4.12 n va ac th 43 si Hình 4.12 Kết kiểm tra số đặc tính sinh hóa vi khuẩn ORT Thơng qua hình 4.12 chúng tơi nhận thấy: với khu n lạc vi lu khu n ORT môi trƣờng CBA cho kết nhƣ phản ứng Catalase âm tính (ORT khơng có men Catalase nên chúng khơng có khả phân hủy H2O2 tạo thành H2O O2 phản ứng khơng tạo bọt); phản ứng Oxidase dƣơng tính (phản ứng chuyển thành màu tím than) Kết ph hợp với nghiên an n va tn to cứu trƣớc (Mohammed Zahra et al.; Võ Thị Trà An cs, 2014) gh Chúng tiếp tục lựa chọn khu n lạc điển hình trên, tăng sinh p ie mơi trƣờng BHB, ủ 37oC thời gian 24 giờ, CO2 5% Tiến hành lấy canh d oa nl w khu n thử phản ứng Indol, kết thu đƣợc thể thơng qua hình 4.13 nf va an lu z at nh oi lm ul z l gm @ m co Hình 4.13 Kết kiểm tra phản ứn Indo vi khuẩn ORT hợp với nghiên cứu trƣớc an Lu Nhƣ vậy, phản ứng Indol cho kết âm tính (kết ph longkorn monsin et al., 1997) n va ac th 44 si Để xác định hình thái chủng vi khu n ORT phân lập đƣợc tỉnh Bắc Giang; chúng tơi tiến hành nhuộm gram theo quy trình hƣớng dẫn nhà sản xuất Kết thu đƣợc đƣợc thể thơng qua hình 4.14 lu an n va gh tn to p ie Hình 4.14 Hình thái vi khuẩn ORT dƣới kính hiển vi d oa nl w Kết hình 4.16 cho thấy: vi khu n ORT phân lập đƣợc gram âm bắt màu đỏ đa dạng kiểm tra kính hiển vi ết ph hợp với nghiên cứu trƣớc cho rằng: ORT phân lập đƣợc gram âm đa an lu dạng kiểm tra kính hiển vi Qing Pan et al., 2012) nf va Theo Nguyễn Thị an cs 2014 nguồn chứa vi khu n ORT thƣờng c phổi, túi khí, chất tiết đƣờng hô hấp nhƣ: nƣớc mũi, nƣớc mắt, dịch nhầy khí quản hai bên phế quản gia cầm mắc bệnh hi thời tiết thay đổi lm ul z gây bệnh z at nh oi đột ngột, mật độ nuôi cao, kh u phần ăn không đảm bảo vệ sinh, dụng cụ chăn nuôi không đảm bảo, hi điều kiện bất lợi đ công làm cho sức đề kháng đàn gà giảm sút tạo điều kiện thuận lợi cho vi khu n phát triển m co l gm @ ầm bệnh sau xâm nhập vào đƣờng hô hấp chúng s sinh trƣởng phát triển niêm mạc đƣờng hô hấp nhanh ch ng công đến quan đích phổi, gây bệnh tích đặc trƣng viêm phổi, viêm màng phổi, viêm túi khí, Trên sở đ , để tìm hiểu vai tr gây bệnh vi khu n gà, tiến hành nuôi cấy phân lập vi khu n ORT từ mẫu bệnh ph m khí quản, an Lu phổi, dịch swab, túi khí gan, lấy từ 50 gà lứa tuổi c triệu chứng n va ac th 45 si hô hấp mắc bệnh ORT thu thập tỉnh Bắc Giang Gà nghi nhiễm đƣợc đƣa ph ng thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học Thú y cụm II để tiến hành phân lập vi khu n 05 mẫu bệnh ph m/ Bằng phƣơng pháp lấy mẫu nuôi cấy, kết thu đƣợc sau 24-72 ni tủ ấm đƣợc trình bày bảng 4.9 Bảng 4.9 Kết phân lập chủng vi khuẩn ORT từ mẫu bệnh phẩm theo nhóm gà STT Nhóm gà M u bệnh ph m 21 Số phân lập 105 Số m u dƣơng tính 91 T lệ (%) 86,67 lu an 1-6 tuần tuổi Gà đẻ 16 80 66 82,50 Gà thịt 13 65 51 78,46 50 250 208 83,20 va Tổng n Ghi chú: m i gà lấy loại bệnh ph m (khí quản, phổi, dịch swab, túi khí tim) gh tn to Thông qua bảng 4.9 cho thấy: tổng số 250 mẫu đƣợc lựa chọn phân lập (m i lựa chọn quan/bộ phận: khí quản, phổi, dịch swab, túi khí p ie tim) có 208 mẫu cho kết dƣơng tính, chiếm tỷ lệ 83,20% Trong đ : gà 1-6 tuần tuổi chiếm tỷ lệ cao 86,67% (91 mẫu dƣơng tính/ 105 mẫu phân lập); gà đẻ chiếm tỷ lệ 82,50% (66 mẫu dƣơng tính/ 80 mẫu phân lập) cuối gà thịt chiếm tỷ lệ thấp 78,46% (51 mẫu dƣơng tính/ 65 mẫu oa nl w d phân lập) Kết đƣợc thể qua hình 4.15 ệ u dƣơng tính (%) 86,67 z at nh oi lm ul 88 nf va an lu T 82,5 84 80 78,46 z gm @ 76 72 Gà đẻ Gà thịt Nhóm gà m co l 1-6 tuần tuổi an Lu Hình 4.15 Kết phân lập chủng vi khuẩn ORT từ mẫu bệnh phẩm theo nhóm gà n va ac th 46 si Để thấy r tỷ lệ dƣơng tính với bệnh ORT tiến hành so sánh tỷ lệ dƣơng tính loại bệnh ph m khác việc so sánh đƣợc tiến hành 05 mẫu bệnh ph m, đƣợc phân lập từ m i gà có triệu chứng, bệnh tích ORT tổng số 50 Kết đƣợc thể qua bảng 4.10 Bảng 4.10 Kết phân lập vi khuẩn ORT từ mẫu bệnh phẩm STT lu Loại bệnh ph m Kết phân lập an va Số m u ki m tra Số m u dƣơng 50 50 50 50 50 50 50 47 45 16 100 100 94 90 32 250 208 83,2 Phổi Khí quản Dịch Swab Túi khí Tim n Tổng T lệ (%) tính p ie gh tn to Kết bảng 4.10 cho thấy tỷ lệ phân lập đƣợc vi khu n ORT cao phổi khí quản (100%), đ dịch swab (94%), túi khí (90%) thấp tim (32%) Tỷ lệ phân lập bình quân 05 quan 83,2% Kết hoàn toàn phù hợp với chế gây bệnh vi khu n ORT, mầm bệnh xâm nhập theo đƣờng hô hấp, sinh trƣởng phát triển niêm mạc đƣờng hô hấp sau đ đến phổi gây tƣợng viêm phổi, viêm màng phổi, viêm túi khí Vì vậy, nên phổi, khí quản, túi khí, dịch swab có tỷ lệ phân lập cao d oa nl w an lu ệ 100 80 60 94 z at nh oi u dƣơng tính (%) 100 100 lm ul T nf va quan khác Kết đƣợc thể rõ qua hình 4.16 90 z 32 20 hí quản Dịch Swab Túi khí oại bệnh ph Tim m co Phổi l gm @ 40 an Lu Hình 4.16 Kết phân lập vi khuẩn ORT từ mẫu bệnh phẩm n va ac th 47 si Theo nghiên cứu vào năm 1981, lần ngƣời ta phân lập đƣợc chủng ORT từ dịch nƣớc mũi, dịch phù mặt, mủ tơ huyết túi khí viêm gà tây ni phía Bắc nƣớc Đức Theo Du Preez thấy phân lập đƣợc vi khu n ORT đàn gà thịt thƣơng ph m Nam Phi có biểu đƣờng hơ hấp Bock et al., 1995 tìm thấy vi khu n mẫu bệnh ph m đƣờng hô hấp gia cầm Israel Từ kết nghiên cứu tác giả chúng tơi, nhận xét gà mắc bệnh mang vi khu n ORT khí quản, túi khí, phổi, dịch swab với tỷ lệ cao có mặt hầu hết quan nhƣng với tỷ lệ thấp ết lu nghiên cứu lần khẳng định vai trò gây bệnh vi khu n ORT an gà Việt Nam Kết phân lập đ c nghĩa xác ch n đốn, cho ph p xác định bệnh nhanh chóng có biện pháp phòng chữa trị hiệu n va tn to bệnh ORT, giảm thiệt hại kinh tế cho ngƣời chăn nuôi ie gh Từ kết trên, lựa chọn mẫu cho kết phân lập dƣơng tính, tiến hành chiết tách DNA vi khu n ORT tiến hành thực p phản ứng PCR với cặp mồi đặc hiệu để kiểm tra có hay khơng DNA vi khu n ORT canh khu n Kết phản ứng PCR đƣợc thể thông qua nl w d oa hình 4.17 bảng 4.9 nf va an lu z at nh oi lm ul z ơng (ONL); m 5, m u c n giám đ nh i ch ng âm; 1, 2, 3, 4, co i ch ng l er; định có mặt vi khuẩn ORT kỹ thuật PCR gm M 100 p DNA @ Hình 4.17 Kết an Lu Kết hình 4.17 cho thấy: đối chứng dƣơng lên vạch, cho sản ph m n va ac th 48 si PCR nhƣ thiết kế (sản ph m PCR thiết kế 784bp Đối chứng âm không lên vạch tƣơng đƣơng đối chứng dƣơng; chứng tỏ phản ứng hợp cách, cho độ tin cậy cao trình phân tích đánh giá kết Các mẫu cần kiểm tra cho sản ph m PCR nhỏ 800bp khoảng 784bp Nhƣ vậy, canh khu n có chứa DNA vi khu n ORT Bảng 4.11 Kết định có mặt vi khuẩn ORT kỹ thuật PCR STT Nhóm gà lu an 1-6 tuần tuổi Gà đẻ Gà thịt va Tổng Số m u ki m tra Số m u dƣơng tính T lệ (%) 42 28 22 37 24 18 88,10 85,71 81,82 92 79 86,81 n ie gh tn to Nhƣ vậy, tổng số 92 mẫu phân lập cho kết dƣơng tính với vi khu n ORT, có tới 79 mẫu cho kết với cặp mồi đặc hiệu, chiếm tỷ lệ 86,81% Trong đ , nh m gà 1-6 tuần tuổi có 37 mẫu cho kết dƣơng tính tổng số p 42 mẫu kiểm tra (chiếm tỷ lệ 88,10%); tiếp đến gà đẻ có 24 mẫu dƣơng tính tổng số 28 mẫu kiểm tra (chiếm tỷ lệ 85,71%) cuối gà thịt có 18 w oa nl mẫu dƣơng tính tổng số 22 mẫu kiểm tra (chiếm tỷ lệ 81,82%) d Kết đ thể rõ qua hình 4.18 ệ nf va u dƣơng tính (%) an lu T 88,10 z at nh oi lm ul 92 88 85,71 84 81,82 z 76 1-6 tuần tuổi Gà đẻ Gà thịt l gm @ 80 Nhóm gà m co an Lu Hình 4.18 Kết định có mặt vi khuẩn ORT kỹ thuật PCR n va ac th 49 si 4.2 NGHIÊN CỨU MỘT SỐ CHỈ TIÊU SINH LÝ MÁU TRÊN GÀ MẮC BỆNH DO ORT Nhƣ ta biết, số lƣợng hồng cầu loài tƣơng đối ổn định; nhiên, n c thay đổi phụ thuộc vào nhiều yếu tố đ c yếu tố bệnh Trên sở đ , tiến hành lấy mẫu kiểm tra tiêu hệ hồng cầu gà bị bệnh ORT phân lập đƣợc Số lƣợng hồng cầu loài tƣơng đối ổn định, nhiên n c thay đổi phụ thuộc vào nhiều yếu tố, đ c yếu tố bệnh Các tiêu hệ hồng cầu gà mắc ORT đƣợc trình bày bảng 4.12 Bảng 4.12 Kết nghiên cứu số tiêu hệ hồng cầu lu gà mắc bệnh ORT an va STT Chỉ tiêu n gh tn to (n=50); X ± SE (n=50); X ± SE Số lƣợng hồng cầu (triệu/µl) 1,84 ± 0,03 2,52 ± 0,06 Hàm lƣợng Hb (g/l) 70,4 ± 0,13 96,0 ± 0,18 22,86 ± 0,77 30,75 ± 0,88 125,41 ± 4,10 123,30 ± 4,85 Tỷ khối hồng cầu (%) Thể tích bình qn hồng cầu (fl) nl w Gà khỏe mạnh p ie Gà mắc bệnh ƣợng huyết sắc tố bình quân hồng cầu (g/l) 38,49 ± 1,05 38,62 ± 1,44 Nồng độ huyết sắc tố bình quân hồng cầu (g/l) 313,8 ± 1,37 318,4 ± 1,33 Diện tích bình qn hồng cầu (%CV) 13,0 ± 0,19 12,71 ± 0,26 d oa nf va an lu z at nh oi lm ul Bảng 4.12 cho thấy: gà mắc bệnh ORT số lƣợng hồng cầu 1,84 triệu/µl, giảm đáng kể so với gà khỏe mạnh 2,52 triệu/µl P