RNAi: small RNA kích thước 1925 Nu, có khả năng tham gia vào phiên mã và dịch mã, giúp kiểm soát gene đang hoạt động. Có mục đích Điều hoà biểu hiện gen và Bảo vệ tế bào chống lại gen ký sinh, virus và các yếu tố gene nhảy (Transposon)Phân loại RNA interference, cơ chế hoạt động, ứng dụng của RNA interference
TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHIỆP THỰC PHẨM TP HCM KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG BÀI THUYẾT TRÌNH RNA INTERFERENCE VÀ ỨNG DỤNG CHUYÊN NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC TRẦN THỊ HỒI THU Sunday, July 09, 2023 NỘI DUNG TRÌNH BÀY Tổng quan RNAi Cơ chế RNAi Ứng dụng RNAi - - Thành phần tham gia - Cơ chế - Trong Y Tế - Trong Nông nghiệp GiớI thiệu Chức Lịch sử nghiên cứu Ý nghĩa KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU 01 Tổng quan RNAi KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU TỔNG QUAN RNAI Chức RNA tRNA Vận chuyển aa tương ứng tới ribôxôm (nơi tổng hợp protein) rRNA Thành phần cấu tạo nên ribôxôm mRNA truyền đạt thông tin di truyền từ ADN (gen cấu trúc) tới ribơxơm RNA interference Điều hồ biểu gene RNA KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU TỔNG QUAN RNAI Giới thiệu "RNA can thiệp" (RNAi- RNA interference) RNAi: small RNA kích thước 19-25 Nu, có khả tham gia vào phiên mã dịch mã, giúp kiểm soát gene hoạt động KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU TỔNG QUAN RNAI Chức RNAi Điều hoà biểu gen Bảo vệ tế bào chống lại gen ký sinh, virus yếu tố gene nhảy (Transposon) KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU TỔNG QUAN RNAI Lịch sử nghiên cứu Năm 2006 Tuschl cộng Lần RNAi mơ tả tế bào động vật có vú Năm 2001 Richard Cathew Fire Giải thích điều nghịch lý thí nghiệm tuyến trùng C elegans Năm 2000 Năm 1998 Guo Kemphues Năm 1995 Cogoni cộng Thí nghiệm tăng màu cam nấm Neurospor crassa 1984 phát hiện tượng RNAi loài ruồi giấm ProSophila Năm1994 Đầu năm 1990 chứng tuyến trùng Caenorhabditis elegans rằng: Phân tử RNA chiều thuận (sense RNA) gây ức chế gene Napoli cộng sự, Vander cộng công bố kết nghiên cứu tạp chí quốc tế Pesthea cộng nghiên cứu kỹ thuật Antiense-RNA vi khuẩn Escherichia Coli KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU TỔNG QUAN RNAI Ý NGHĨA VIỆC PHÁT HIỆN RNAI Chống lại nhiễm virus Bảo đảm ổn định hệ gen Như chế kiểm sốt q trình tổng hợp protein điều khiển phát triển Cống hiến phương pháp để kiềm chế gen chuyên biệt Đề xuất giải pháp hiệu điều trị bệnh di truyền tương lai KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG 02 CƠ CHẾ RNAI KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU CƠ CHẾ RNAI KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU CƠ CHẾ RNAI Dicer + Là loại enzyme endonuclease (Ribonuclease III) + chịu trách nhiệm hoàn thiện sợi dsRNA KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU CƠ CHẾ RNAI Phức hệ RISC (RNA – incluced silencing complex) + Phức hệ tắt gene kích ứng RNA + có chứa enzyme helicase số protein quan trọng protein thuộc họ Agronaut (liên kết RNA) hoạt động endonuclea cắt mRNA KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU CƠ CHẾ RNAI • Argo Chức quan trọng Argo nhận guide strand, tách mạch mRNA đích, huy động protein cho việc im lặng gen KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU CƠ CHẾ RNAI miRNA (RNA ngắn khoảng từ 19 –24 nucleotide, không tham gia vào trình tổng hợp protein) Pri- mRNA (primary- mRNA) + chuỗi mRNA nguyên thủy, dài hàng nghìn nu mang đầu 5’CAP, poly A + chứa hay nhiều vịng kẹp tóc (hairpin) vịng dài khoảng 70 nucleotide Phức hệ RISC Hai enzyme cắt + Drosha nhân tế bào + Dicer ngồi tế bào chất KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU CƠ CHẾ RNAI Hai đường RNAi KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU CƠ CHẾ RNAI Sự khác miRNA siRNA Đặc điểm Vị trí hình thành Nguồn gốc miRNA Trong nhân tế bào chất Tiền miRNA (Pre-miRNA) có cấu trúc dạng thân vịng (stem-loop) hay dạng kẹp tóc (hairpin) Chiều dài 19 – 25 nu Bắt cặp bổ sung với gen mục tiêu Bắt cặp bổ sung khơng hồn tồn gen mục tiêu siRNA Tế bào chất Từ dsRNA có cấu trúc chuỗi xoắn kép 21 – 22 nu Bắt cặp bổ sung hoàn toàn với gen mục tiêu KHOA SINH HỌC VÀ MÔI TRƯỜNG TRẦN THỊ HOÀI THU CƠ CHẾ RNAI Sự khác miRNA siRNA siRNA miRNA KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU 03 Ứng dụng RNAi KHOA SINH HỌC VÀ MƠI TRƯỜNG TRẦN THỊ HỒI THU