Bai giang mon hoa dung342 1 6683

PHƯƠNG PHÁPPHÁP PHÂN PHÂN TÍCH CƠNG CỤ PHƯƠNG TÍCH DỤNG CỤ Mục tiêu học tập *Kiến thức 1.Trình bày sở lý thuyết phát biểu định luật Lambert-Beer 2.Trình bày nguyên tắc phương pháp đo quang phổ hấp thụ UV-VIS phương pháp sắc ký * Kỹ Định lượng hàm lượng số mẫu theo phương pháp đường chuẩn, thêm chuẩn phương pháp đo phổ UV – VIS Phân tích số ứng dụng phương pháp sắc ký y, dược * Năng lực tự chủ trách nhiệm Thể tính tích cực học tập Sử dụng tốt công nghệ thông tin để tự nghiên cứu, giải tập Phối hợp tốt với thành viên nhóm TỔNG KẾT KẾT QUẢ TỰ HỌC CÓ HƯỚNG DẪN - KQ kiểm tra trắc nghiệm link: Lớp/ Sĩ số Kiểm tra kiến thức Đạt (n/ %) Kiểm tra thực kĩ Chưa đạt (n/ %) Đạt (n/ %) Chưa đạt (n/ %) CÂU HỎI THẮC MẮC CỦA SV VỀ NỘI DUNG BÀI HỌC NỘI DUNG Phương pháp phổ hấp thụ UV-VIS Phương pháp sắc kí + Sắc ký lớp mỏng + Sắc ký cột + Sắc ký lỏng hiệu cao HPLC Các phư ơng phápphântíc hdụ ng c ụ ã 1.Phư ơng phápquang phổ hấpthụ UV.VIS Io Io =Ih+Ip+Il Io  = Ih + Il  Ip Il Ih Vùng phổ hấp thụ tử ngoại –khả kiến ? Vùng UV vùng tử ngoại +Vùng tử ngoại xa, bước sóng < 200nm + Vùng tử ngoại gần, bước sóng từ 200400nm Vùng VIS vùng ánh sáng nhìn thấy Bước sóng 400-800nm Phổ hấp thụ phân tử UV-VIS phổ đám (phổ băng)  ĐÞnh luËt Lam b e rt ­ Be e r  Lo g arit c đa tØ s è  g iữ a c ­ê ng  ®é ánhs tớiI0 c ng độ ánhs lóIltỉlệthuậnvớinồng độ dung dịc hCvàbềdàylớpdung dịc hLmàánhs   truyÒn qua                           1             I0 A= D= lg ­­­­­ =   lg  ­­­­­­ = K.C.L T Il D E1%1c m= L.C E1%1c m đư ợc   g äi  lµ  hƯ  s è   hÊp  thơ riêng , đặc tr ưng c ho từ ng c hất S ựtác hs ắc kývàs ắc  ®å  PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỎNG HIỆU NĂNG CAO -HPLC KHÁI NIỆM THẾ NÀO LÀ HPLC? HPLC tên viết tắt phương pháp Sắc ký lỏng hiệu cao tên tiếng Anh là: High-performance liquid chromatography, hay gọi Sắc ký lỏng áp suất cao HPLC kỹ thuật hóa phân tích dùng để tách, nhận biết, định lượng thành phần hỗn hợp Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) đời sở phát triển cải tiến từ phương pháp sắc ký cột cổ điển ĐỊNH LƯỢNG DƯỢC CHẤT BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC O S CH3O O N CH3 HBr H2O CONH OH N PIROXICAM Giảm đau chứng thấp khớp có viêm thối hố, viêm cứng cột sống, chứng thấp khớp bệnh gút cấp N CH3 DEXTROMETHORPHAN HYDROBROMID Được dùng điều trị ho nhiều nguyên nhân ho kích ứng, viêm nhiễm đường hô hấp, phản xạ, dùng để chuẩn bị cho việc soi phế quản ỨNG DỤNG PHƯƠNG PHÁP HPLC TRONG NGÀNH DƯỢC Dược phẩm Để kiểm nghiệm kiểm soát ổn định thuốc Nghiên cứu dược động học dạng bào chế dược phẩm Kiểm soát chất lượng dược phẩm Định lượng dược chất dược liệu Ứng dụng xét nghiệm Định lượng thuốc mẫu sinh học Xác định steroid máu, nước tiểu, Phân tích thuốc nhuộm ngành dệt Xác định cocaine loại thuốc khác máu, nước tiểu… Nguyên tắc hoạt động pp HPLC HPLC kĩ thuật tách chất phân tích khỏi chúng di chuyển theo pha động qua cột chứa hạt pha tĩnh Chất phân tích Pha tĩnh Pha động Nguyên tắc hoạt động máy HPLC Mẫu tiêm vào cột chứa pha động 2) Sự phân tách thực di chuyển khác chất dung môi Kim phun Bơm cao áp Cột sắc kí (Pha động) 3) Đầu dị phát chất khỏi cột Bộ phận ghi tín hiệu Pha động Ghi tín hiệu Thời gian Ưu điểm phương pháp có độ nhạy cảm cao, có khả định lượng tốt, mức độ xác cao, đặc biệt thích hợp để tách chất khó bay chất dễ bị phân hủy nhiệt nên sử dụng nhiều cho mục đích sản xuất, nghiên cứu thí nghiệm, pháp lý y dược Câu hỏi Em mô tả dụng cụ, thiết bị cần có để thực phép đo mẫu phương pháp sắc ký lớp mỏng phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao? Câu hỏi Một bước kỹ thuật phân tích alcaloid độc (koumin, kouninidin, kouminin, kouminixin)của ngón thực sắc ký lớp mỏng chất mẫu so với chất chuẩn Cách làm sau: - Pha dung môi khai triển Toluen- Aceton- Ethanol- Amoniac với tỉ lệ tương đương 45:45:7:3 lắc đổ vào bình triển khai, đậy nắp lại để dung mơi hồ trộn trước đặt sắc ký vào 15 phút - Dùng đầu nhỏ chấm khoảng 15µL mẫu thử lên mỏng Đồng thời chấm mẫu chuẩn đối chiếu cách mẫu thử khoảng 1cm Chú ý chấm cách mép mỏng khoảng 1cm vết chấm gọn tốt, vừa chấm ta vừa sấy khô - Đặt mỏng vào bình triển khai có sẵn dung mơi Chờ dung mơi ngấm dần lên tới cách mép 1cm ta nhấc mỏng Có thể để khơ tự nhiên sấy khô - Soi qua đèn tử ngoại để nhận biết sơ - Phun thuốc thủ màu Dragendoff đầu phun sương Sau tăng độ nhậy acid sulfuric 10% Để khô tự nhiên sấy khơ Kết quả: Mẫu thử Lá ngón cho vết màu vàng mỏng có Rf tương đương với mẫu chuẩn Hãy cho biết: Đâu pha động, đâu pha tĩnh quy trình trên? Câu hỏi 10: ĐỊNH TÍNH PHOSPHO HỮU CƠ TRONG NƯỚC TIỂU Phospho hữu chất ức chế mạnh carboxylic ester hydrolase bao gồm: cetylcholinesterase Pseudocholinesterase huyết tương, dẫn đến tích tụ cetylcholin synap thần kinh Trên lâm sàng thường gặp hội chứng liên quan đến ngộ độc Phospho hữu cơ: hội chứng Muscarin, hội chứng Nicotin hội chứng Thần kinh trung ương Phospho hữu hấp thụ vào thể qua đường tiêu hóa, đường hơ hấp, đường da niêm mạc Muốn định tính Phospho hữu có nước tiểu dịch rửa dày dùng phương pháp sắc ký lớp mỏng Giả sử, tiến hành chấm điểm mỏng, điểm mẫu chuẩn, điểm mẫu nước tiểu dịch dày Sau chạy thu sắc đồ sau (vạch vàng) Hãy quan sát sắc đồ cuối đánh giá xem mẫu nước tiểu mẫu dịch dày có chứa phospho hay khơng? Giải thích sao? TỔNG KẾT BÀI HƯỚNG DẪN TỰ HỌC BÀI 11 "XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN!"