Luận án tiến sĩ sinh học nghiên cứu cơ sở khoa học phục vụ cho việc sinh sản nhân tạo cá nác boleophthalmus pectinirostris (linnaeus, 1758

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN VIỆN NGHIÊN CỨU HẢI SẢN ĐẶNG MINH DŨNG NGHIÊN CỨU CƠ SỞ KHOA HỌC PHỤC VỤ CHO VIỆC SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ NÁC [BOLEOPHTHALMUS PECTINIROSTRIS (LINNAEUS, 1758)] LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC HẢI PHÒNG - 2022 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PHÁT TRIỂN NÔNG THÔN VIỆN NGHIÊN CỨU HẢI SẢN ĐẶNG MINH DŨNG NGHIÊN CỨU CƠ SỞ KHOA HỌC PHỤC VỤ CHO VIỆC SINH SẢN NHÂN TẠO CÁ NÁC [BOLEOPHTHALMUS PECTINIROSTRIS (LINNAEUS, 1758)] Chuyên ngành: Thủy sinh vật học Mã số: 9420108 LUẬN ÁN TIẾN SĨ SINH HỌC Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Đỗ Văn Khương HẢI PHỊNG - 2022 LỜI CAM ÐOAN Tơi Đặng Minh Dũng, nghiên cứu sinh (NCS) Hội đồng Khoa học Ðào tạo, Viện nghiên cứu Hải sản, chuyên ngành Thủy sinh vật học, mã số: 9420108, khóa 2014 – 2019 (được gia hạn năm), xin cam đoan: Ðề tài luận án tiến sĩ sinh học công trình nghiên cứu riêng tơi, nội dung kết nghiên cứu, phân tích, đánh giá thực sở nguồn số liệu thu thập đuợc Các số liệu sử dụng luận án đuợc Viện Nghiên cứu Hải sản quan chủ trì thực cho phép NCS sử dụng Các tài liệu tham khảo luận án với mục đích tổng quan làm sở lý luận, so sánh, phân tích thảo luận đuợc trích dẫn đầy đủ theo quy định Toàn nội dung kết luận án đảm bảo tính tin cậy, khơng trùng lặp NCS cơng bố tạp chí chuyên ngành Nghiên cứu sinh Đặng Minh Dũng i LỜI CẢM ƠN Ðể hoàn thành luận án tiến sĩ này, trước hết nghiên cứu sinh (NCS) xin chân thành cảm ơn PGS.TS Đỗ Văn Khương người thầy hướng dẫn tận tâm dẫn giúp đỡ NCS suốt thời gian thực đề tài luận án NCS xin cảm ơn Hội đồng Khoa học Ðào tạo Viện nghiên cứu Hải sản, thầy, nhà khoa học góp ý cho thảo luận án Xin chân thành cảm ơn Ban lãnh đạo Viện Nghiên cứu Hải sản, cán Trung tâm Phát triển nghề cá Vịnh Bắc Bộ - Viện nghiên cứu Hải sản hỗ trợ triển khai thí nghiệm, phân tích mẫu để NCS thực nội dung nghiên cứu luận án Nghiên cứu sinh xin cảm ơn sở sản xuất giống thủy sản Bàng La - quận Đồ Sơn - thành phố Hải Phịng, Phịng thí nghiệm Khoa học biển - Viện Nghiên cứu Hải sản, hỗ trợ điều kiện cần thiết cho NCS triển khai thí nghiệm Nghiên cứu sinh xin cảm ơn gia đình, người thân, bạn bè, đồng nghiệp động viên, khích lệ sẵn sàng giúp đỡ suốt năm tháng thực luận án Xin trân trọng cảm ơn! Nghiên cứu sinh Đặng Minh Dũng ii MỤC LỤC Trang KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG viii DANH MỤC HÌNH .ix MỞ ĐẦU 1 Tính cấp thiết nghiên cứu Mục tiêu nội dung nghiên cứu đề tài luận án 2.1 Mục tiêu luận án .2 2.2 Nội dung nghiên cứu luận án .2 Ý nghĩa khoa học thực tiễn luận án Tính luận án CHƯƠNG TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan tình hình nghiên cứu cá nác giới .5 1.1.1 Hệ thống phân loại .5 1.1.2 Đặc điểm hình thái .5 1.1.3 Phân bố 1.1.4 Tập tính sống 1.1.5 Đặc điểm dinh dưỡng 10 1.1.6 Đặc điểm sinh sản sinh sản nhân tạo 11 1.1.6.1 Đặc điểm sinh sản .11 1.1.6.2 Nghiên cứu sinh sản nhân tạo 13 1.2.7 Nghiên cứu sinh học khác 15 1.2.8 Tình hình ni thương phẩm cá nác 16 1.3 Tình hình nghiên cứu cá nác Việt nam 17 1.3.1 Nghiên cứu đặc điểm sinh học sinh sản cá nác 17 1.3.2 Một số nghiên cứu sinh học, sinh sản loài họ cá nác 19 1.3.3 Các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu sản xuất giống nhân tạo cá biển 23 1.3.3.1 Ảnh hưởng hormone kích thích sinh sản đến khả sinh sản cá 23 1.3.3.2 Ảnh hưởng mật độ ương 25 1.3.3.3 Thức ăn chế độ cho ăn 26 1.3.3.4 Một số loại thức ăn phổ biến sử dụng ương ấu trùng cá biển 26 iii CHƯƠNG 2: TÀI LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 33 2.1 Đối tượng, thời gian, địa điểm vật liệu nghiên cứu 33 2.2 Phương pháp nghiên cứu 34 2.2.1 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản cá nác .34 2.2.1.1 Phương pháp xác định môi trường sống, phân bố tuần suất bắt gặp cá nác tự nhiên .34 2.2.1.2 Nghiên cứu số đặc điểm sinh học sinh sản 35 2.2.2 Nghiên cứu sinh sản cá nác điều kiện nhân tạo 39 2.2.3 Phương pháp đề xuất số giải pháp kỹ thuật dự thảo quy trình sản xuất giống nhân tạo cá nác 49 2.2.4 Phương pháp thu thập xử lý số liệu 49 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 51 3.1 Một số đặc điểm sinh học sinh sản cá nác 51 3.1.1 Phân bố tần suất bắt gặp cá nác tự nhiên 51 3.1.2 Mùa vụ xuất 51 3.1.3 Đặc điểm dinh dưỡng cá nác 52 3.1.4 Mùa vụ sinh sản 54 3.1.5 Đặc điểm phân biệt giới tính .54 3.1.6 Cấu trúc tuổi 55 3.1.7 Tần suất bắt gặp cá tham gia sinh sản 57 3.1.8 Đặc điểm phát triển tuyến sinh dục cá nác 59 3.1.9 Độ béo cá nác 69 3.1.9.1 Độ béo cá nác 69 3.1.9.2 Độ béo cá nác đực 70 3.1.10 Biến động hệ số thành thục cá nác 70 3.1.11 Sức sinh sản .74 3.1.12 Quá trình phát triển phôi biến thái ấu trùng cá nác 75 3.2 Kết nghiên cứu sinh sản cá nác điều kiện nhân tạo 78 3.2.1 Kết nghiên cứu nuôi vỗ thành thục cá bố mẹ .78 3.2.1.1 Một số yếu tố môi trường bể nuôi vỗ thành thục 78 3.2.1.2 Kết nghiên cứu lựa chọn chất đáy nuôi vỗ thành thục cá bố mẹ .80 3.2.1.3 Kết nghiên cứu lựa chọn chế độ dinh dưỡng nuôi vỗ cá nác bố mẹ 81 iv 3.2.1.4 Sức sinh sản cá điều kiện nuôi vỗ .82 3.2.2 Kết nghiên cứu kích thích sinh sản nhân tạo cá nác kích dục tố 83 3.2.2.1 Thời gian hiệu ứng thuốc kích dục tố .83 3.2.2.2 Tỷ lệ trứng thụ tinh 84 3.2.3 Ảnh hưởng nhiệt độ, độ muối đến tỷ lệ sống phát triển giai đoạn phát triển sớm ấu trùng cá nác 86 3.2.3.1 Ảnh hưởng nhiệt độ đến trình phát triển phôi cá nác 86 3.2.3.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến tỷ lệ nở trứng cá nác 87 3.2.2.3 Ảnh hưởng độ muối đến tỷ lệ nở trứng cá nác 88 3.2.4 Ảnh hưởng mật độ ương lên tốc độ sinh trưởng tỷ lệ sống cá nác từ cá bột lên cá hương 89 3.2.4.1 Ảnh hưởng mật độ ương lên tốc độ sinh trưởng chiều dài cá nác giai đoạn từ cá bột lên cá hương 89 3.2.4.2 Ảnh hưởng mật độ lên tỷ lệ sống ấu trùng giai đoạn từ cá bột lên cá hương .90 3.2.5 Ảnh hưởng thức ăn lên tỷ lệ sống sinh trưởng ấu trùng giai đoạn từ cá bột lên cá hương 92 3.2.5.1 Ảnh hưởng thức ăn lên tỷ lệ sống ấu trùng giai đoạn từ cá bột lên cá hương .92 3.2.5.2 Ảnh hưởng thức ăn lên tốc độ sinh trưởng chiều dài cá nác giai đoạn từ cá bột lên cá hương 93 3.2.6 Kết nghiên cứu lựa chọn chế độ dinh dưỡng ương nuôi cá nác giai đoạn cá hương lên cá giống 94 3.2.6.1 Ảnh hưởng thức ăn lên tỷ lệ sống giai đoạn từ cá hương lên cá giống 94 3.2.6.2 Ảnh hưởng thức ăn lên tốc độ sinh trưởng chiều dài cá nác giai đoạn từ cá hương lên cá giống 96 3.3 Đề xuất số giải pháp kỹ thuật dự thảo quy trình sản xuất giống nhân tạo cá nác 97 3.3.1 Đề xuất số giải pháp kỹ thuật sản xuất giống nhân tạo cá nác .97 3.3.2 Dự thảo quy trình sản xuất giống nhân tạo cá nác 98 3.3.2.1 Tên quy trình 98 3.3.2.2 Xuất xứ quy trình 98 v 3.3.2.3 Đối tượng phạm vi áp dụng 98 3.3.2.4 Các yêu cầu chung 98 3.3.2.5 Quy trình 100 KẾT LUẬN VÀ KHUYẾN NGHỊ 104 Kết luận 104 Khuyến nghị 105 DANH MỤC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 106 TÀI LIỆU THAM KHẢO 107 Tài liệu tiếng việt 107 Tài liệu tiếng nước .109 PHỤ LỤC - Phụ lục 1: Số liệu thu mẫu sinh học cá nác - Phụ lục 2: Mẫu phiếu điều tra vấn - 24 Phụ lục 3: Quy trình làm tiêu tổ chức học tuyến sinh dục cá nác - 26 Phụ lục 4: Một số hình ảnh trình thực luận án - 28 - vi KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT CMSD Chín muồi sinh dục Ct Cá thể CS Cộng DOM Domperidon - Thuốc điều trị chống buồn nôn nôn GSI Gonadosomatic index - Hệ số thành thục HCG Human chorionic gonadotropin - Kích dục tố màng đệm thai KDT Kích dục tố LRHa Luteinizing Hormone-Releasing Hormone Analog – hormone gây phóng thích kích dục tố NCS Nghiên cứu sinh Nt Nhuyễn thể S‰ Tỷ lệ phần nghìn độ muối SSS Sức sinh sản TSD Tuyến sinh dục FAO Food and Agriculture Organization - Tổ chức nông, lương Liên hiệp quốc vii DANH MỤC BẢNG Trang Bảng 2.1: Liều lượng kích dục tố kích thích cá sinh sản 41 Bảng 2.2: Thức ăn thời điểm cho ấu trùng ăn 45 Bảng 2.3: Tỷ lệ lượng thức ăn cho ấu trùng cá 45 Bảng 3.1 Đặc điểm môi trường phân bố tần suất bắt gặp cá nác .51 Bảng 3.2: Sự phân bố cá nác theo lứa tuổi, vùng địa lý thời gian năm 52 Bảng 3.3: Phân biệt cá nác đực cá nác .55 Bảng 3.4: Tương quan chiều dài khối lượng cá .57 Bảng 3.5: Sức sinh sản cá nác 74 Bảng 3.6: Biến động môi trường bể nuôi vỗ sinh sản cá nác 79 Bảng 3.7: Kết lựa chọn chất đáy nuôi vỗ thành thục cá nác 80 Bảng 3.8: Kết lựa chọn chế độ dinh dưỡng nuôi vỗ cá nác bố mẹ 81 Bảng 3.9: Sức sinh sản cá nác điều kiện muôi vỗ 82 Bảng 3.10: Hiệu ứng kích dục tố tới khả đẻ cá nác 84 Bảng 3.11: Tỷ lệ thụ tinh tỷ lệ nở trứng cá nác 84 Bảng 3.12: Thời gian phát triển phôi cá nác nhiệt độ khác 86 Bảng 3.13: Ảnh hưởng thức ăn đến tốc độ tăng trưởng chiều dài cá nác giai đoạn từ cá bột lên cá hương 93 Bảng 3.14: Ảnh hưởng thức ăn đến tỷ lệ sống giai đoạn cá hương lên cá giống 95 Bảng 3.15: Ảnh hưởng thức ăn đến tốc độ tăng trưởng chiều dài cá nác từ cá hương lên cá giống 96 Bảng 3.16 Chế độ cho cá ăn quản lý bể nuôi 101 Bảng 3.17 Một số yếu tố môi trường nước thích hợp cho bể ương 102 viii TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 TB Ltt (mm) 8,74 8,67 9,61 9,84 9,84 10,41 10,28 10,32 9,33 9,71 9,6 10,31 11,9 10 10,88 10,7 9,08 8,1 11,6 11,4 11,21 7,84 7,84 Lbỏ đuôi (mm) 8,56 8,49 9,43 9,66 9,66 10,23 10,1 10,14 9,15 9,53 9,42 10,13 11,72 9,82 10,7 10,52 8,9 7,92 11,42 11,22 11,03 7,66 7,46 Wtt (gr) 7,45 7,26 7,69 8,27 8,9 10,61 10,2 10,33 7,54 8,54 7,54 9,43 14,74 8,57 11,15 10,58 6,34 5,12 11,94 12,9 12,05 4,13 4,13 Số liệu điều tra cá nác đực tháng Độ béo Wbỏ đuôi (gr) Fullton Clack 6,66 1,12 0,998 6,58 1,11 1,010 7,19 0,87 0,810 7,6 0,87 0,798 8,22 0,93 0,863 9,93 0,94 0,880 9,53 0,94 0,877 9,71 0,94 0,883 6,91 0,93 0,851 7,9 0,93 0,863 6,9 0,85 0,780 8,77 0,86 0,800 14,07 0,87 0,835 7,9 0,86 0,790 10,53 0,87 0,818 9,96 0,86 0,813 5,71 0,85 0,763 4,45 0,96 0,837 11,31 0,76 0,725 12,25 0,87 0,827 11,37 0,86 0,807 3,5 0,86 0,726 3,52 0,86 0,730 0,90 0,83 - 21 - Tuổi 1+ 1+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 3+ 2+ 3+ 2+ 1+ 1+ 2+ 2+ 2+ 1+ 1+ Khối lượng TSD (gr) 0,15 0,14 0,16 0,19 0,22 0,24 0,22 0,26 0,18 0,19 0,25 0,26 0,26 0,24 0,25 0,26 0,18 0,16 0,28 0,29 0,32 0,18 0,16 HSTT (%) 0,020 0,019 0,021 0,023 0,025 0,023 0,022 0,025 0,024 0,022 0,033 0,028 0,018 0,028 0,022 0,025 0,028 0,031 0,023 0,022 0,027 0,044 0,039 0,026 Giai đoạn TSD Lbỏ đuôi (mm) Ltt (mm) TT 8,89 Số liệu điều tra cá nác đực tháng 10 Độ béo Wbỏ đuôi Tuổi (gr) Fullton Clack Wtt (gr) 8,04 7,93 8,16 7,85 7,44 7,12 1,119 1,117 Khối lượng TSD (gr) HSTT (%) 1,021 2+ 0,16 0,020 1,013 + 0,19 0,024 + 9,24 8,28 6,8 6,06 0,862 0,768 0,22 0,032 9,7 8,74 7,91 7,17 0,867 0,786 2+ 0,24 0,030 0,850 + 0,22 0,026 + 9,72 8,76 8,57 7,81 0,933 9,86 8,9 8,96 8,19 0,935 0,854 0,26 0,029 10,98 10,02 12,53 11,75 0,947 0,888 2+ 0,18 0,014 0,863 + 0,19 0,020 + 0,15 0,013 + 10,04 10,79 9,08 9,83 9,48 11,87 8,73 11,08 0,937 0,945 0,882 10 10,62 9,66 11,29 10,58 0,943 0,883 0,16 0,014 11 9,38 8,42 7,02 6,29 0,851 0,762 2+ 0,16 0,023 0,835 + 0,24 0,016 + 12 12,06 11,1 15,37 14,64 0,876 13 11,84 10,88 14,51 13,77 0,874 0,830 0,21 0,014 14 11,21 10,25 12,24 11,48 0,869 0,815 3+ 0,12 0,010 0,823 + 0,18 0,013 + 0,16 0,018 + 15 16 11,62 10,08 10,66 9,12 13,69 8,78 12,92 8,01 0,873 0,857 0,782 17 8,2 7,24 5,32 4,55 0,965 0,825 0,24 0,045 18 11,8 10,84 12,59 11,81 0,766 0,719 3+ 0,19 0,015 0,785 + 0,22 0,025 + 0,11 0,023 19 20 TB 10,07 8,26 9,11 7,3 8,76 4,87 8,02 4,16 0,858 0,864 0,738 0,913 0,836 - 22 - 0,021 Giai đoạn TSD Số liệu điều tra cá nác đực tháng 11 Ltt (mm) TT Lbỏ đuôi Wtt Wbỏ đuôi (mm) (gr) (gr) Độ béo Fullton Clack Khối lượng TSD (gr) HSTT (%) Tuổi 9,46 8,81 9,53 8,86 1,126 1,047 2+ 0,18 0,019 9,26 8,58 6,85 6,17 0,863 0,777 2+ 0,15 0,022 9,34 8,69 7,56 6,89 0,928 0,846 2+ 0,15 0,020 10,24 9,57 10,08 9,45 0,939 0,880 2+ 0,21 0,021 + 10,84 10,17 12,04 11,35 0,945 0,891 0,18 0,015 9,31 8,64 6,86 6,17 0,850 0,765 2+ 0,18 0,026 12,01 11,34 14,17 12,46 0,818 0,719 3+ 0,25 0,018 11,84 11,18 14,51 12,79 0,874 0,771 3+ 0,16 0,011 11,04 10,39 11,67 10,95 0,867 0,814 3+ 0,18 0,015 + 10 8,37 7,74 5,68 4,95 0,969 0,844 0,16 0,028 11 11,64 11,02 12,76 10,46 0,809 0,663 3+ 0,16 0,013 12 11,01 10,4 10,15 9,43 0,761 0,707 2+ 0,19 0,019 13 8,84 8,19 6,01 5,24 0,870 0,759 2+ 0,12 0,020 14 9,46 8,81 9,53 8,86 1,126 1,047 2+ 0,14 0,015 0,910 0,823 TB - 23 - 0,019 Giai đoạn TSD TT 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 TB Ltt (mm) 8,59 8,02 9,65 9,2 10,22 10,21 10,62 10,08 9,84 9,61 9,54 10,12 11 11,28 9,04 8,27 8,12 9,34 11,76 12,04 11,65 7,9 Lbỏ đuôi (mm) 8,49 7,92 9,56 9,11 10,15 10,12 10,55 10,03 9,75 9,54 9,47 10,03 10,9 11,19 8,95 7,45 8,03 9,27 11,71 11,95 11,58 7,84 Wtt (gr) 7,06 5,7 7,79 6,81 10,02 9,99 11,29 9,6 8,9 8,28 7,4 8,89 10,54 12,48 6,25 5,07 5,16 7,99 12,46 13,41 12,74 4,23 Số liệu điều tra cá nác đực tháng 12 Độ béo Wbỏ đuôi Tuổi (gr) Fullton Clack 6,67 1,114 1,052 2+ 5,32 1,105 1,031 1+ 7,44 0,867 0,828 2+ 6,45 0,875 0,828 1+ 9,68 0,939 0,907 2+ 9,62 0,939 0,904 1+ 10,9 0,943 0,910 2+ 9,2 0,937 0,898 2+ 8,17 0,934 0,858 2+ 7,15 0,933 0,806 2+ 7,05 0,852 0,812 2+ 8,1 0,858 0,782 2+ 9,19 0,792 0,690 3+ 10,13 0,870 0,706 3+ 5,08 0,846 0,688 1+ 4,31 0,896 0,762 1+ 4,08 0,964 0,762 1+ 7,07 0,981 0,868 2+ 10,24 0,766 0,630 1+ 11,03 0,768 0,632 3+ 10,37 0,806 0,656 3+ 3,88 0,858 0,787 1+ 0,902 0,809 - 24 - Khối lượng TSD (gr) HSTT (%) 0,1 0,014 0,11 0,019 0,12 0,015 0,11 0,016 0,15 0,015 0,16 0,016 0,16 0,014 0,15 0,016 0,12 0,013 0,14 0,017 0,11 0,015 0,12 0,013 0,14 0,013 0,18 0,014 0,13 0,021 0,1 0,020 0,12 0,023 0,13 0,016 0,12 0,010 0,14 0,010 0,15 0,012 0,1 0,024 0,016 Giai đoạn TSD Phụ lục 2: Mẫu phiếu điều tra vấn I THÔNG TIN CHUNG Mẫu số: Họ tên người vấn: Ngày vấn: Họ tên người vấn: Địa chỉ: II HIỆN TRẠNG KHAI THÁC Ngư cụ khai thác ☐ Câu tay ☐ Đơm lờ ☐ Bắt tay ☐ Hình thức khác Khu vực khai thác: ☐ Vùng bãi triều ☐ Vùng bãi bồi ☐ Vùng rừng ngập mặn ☐ Hải đảo ☐ Vùng cửa sông ☐ Khác: Thời gian khai thác ngày ☐ Buổi sáng ☐ Buổi tối ☐ Buổi chiều Thời điểm khai thác ☐ Thủy triều lên ☐ Con nước lớn ☐ Thủy triều xuống ☐ Con nước ròng 10 Sản lượng khai thác: - Bao nhiêu kg/người/ngày: - Bao nhiêu kg/người/tháng: 11 Mùa mùa vụ khai thác năm ☐ Quanh năm ☐ Mùa Xuân ☐ Mùa hè ☐ Mùa thu ☐ Mùa đơng 12 Kích thước cá khai thác chủ yếu - 24 - - Cá - cm ☐ Có ☐ Khơng - Cá - cm ☐ Có ☐ Khơng - Cá 10 -15 cm ☐ Có ☐ Khơng - Cá > 15 cm ☐ Có ☐ Không 13 Thông môi trường vùng khai thác - Độ sâu TB: (m) - Cao triều: (m) - Thấp triều: - Độ muối TB: (‰) - Cao: (‰) - Thấp: (‰) - Nhiệt độ TB: (⁰C) - Cao: (⁰C) - Thấp: (⁰C) - pH TB: - Cao: (m) - Thấp: 14 Chất đáy địa điểm khai thác - Bùn pha sét ☐ Nhiều ≥ con/m2 ☐ Trung bình 1-2 con/m2 ☐ ≤ con/m2 ☐ Khơng có ☐ Trung bình 1-2 con/m2 ☐ ≤ con/m2 ☐ Khơng có ☐ Trung bình 1-2 con/m2 ☐ ≤ con/m2 ☐ Khơng có - Bùn cát ☐ Nhiều ≥ con/m2 - Bùn đen ☐ Nhiều ≥ con/m2 II NHỮNG QUAN ĐIỂM VỀ CUỘC SỐNG Thu nhập Anh/Chị so với năm trước ☐ Lớn ☐ Bằng ☐ Nhỏ Tại sao? Anh/Chị có nghĩ nghề khai thác cá nác đảm bảo sống tương lai cho khơng? ☐ Có ☐ Khơng Anh/Chị có ý định chuyển nghề khơng? ☐ Cịn tuỳ ☐ Có ☐ Khơng ☐ Cịn tuỳ Anh/Chị định chuyển sang nghề gì: Anh/Chị có ý định cho tiếp tục theo nghề khai thác khơng? ☐ Có ☐ Khơng ☐ Cịn tuỳ Người vấn - 25 - Phụ lục 3: Quy trình làm tiêu tổ chức học tuyến sinh dục cá nác - Xử lý mẫu tuyến sinh dục quan sát tổ chức mô phôi học Bao gồm bước sau - Cố định mẫu tuyến sinh dục: chất định hình Bouin có cơng thức sau: + 750 ml dung dịch acid picric bão hoà + 250 ml formalin 40 % + 50 ml acid axetic đậm đặc + Định hình mẫu 24h sau ngâm nước từ -3h - Khử nước mẫu cố định: Lần lượt đưa mẫu qua cồn Etluylic với nồng độ khác tăng dần + Cồn 70% : lần từ 30 - 60 phút + Cồn 95% : lần lần 30 - 60 phút + Cồn 100% : lần, lần 30 - 60 phút - Làm mẫu: Mẫu khử nước làm xylen + Xylen lần I : 30 phút + Xylen lần II : 30 phút - Thấm Parafin: mẫu làm chuyển vào Parafin đun nóng nhiệt độ từ 56 - 580C, 4h - Đúc Parafin: + Sử dụng máy để đổ Parafin nóng chảy vào khn có mẫu, sau đặt khuôn lên dàn lạnh cho Parafin đông lại tạo khối Parafin chứa mẫu Nên giữ mẫu chung mặt khuôn để cắt thuận tiện + Cắt gọt khối Parafin chứa mẫu: Dùng dao mỏng cắt gọt bỏ phần Parafin thừa mặt khối mẫu sâu vào - 5µm - Cắt lát mẫu + Gắn khối Parafin chứa mẫu vào máy Microtom + Tiến hành cắt lát độ dày lát cắt từ - µm - 26 - + Đưa lát cắt vào nước ấm (40 - 500C) khoảng - phút để lát cắt giãn, không bị nhăn + Dùng slide (lam) để lấy lát cắt khỏi nước có miết qua albumin + Đặt lên máy sấy slide nhiệt độ 40 – 600C thời gian – 4h - Nhuộm Hematocylin Eosin + Loại bỏ Parafin lát cắt Xilen I: phút, Xylen II: phút + Làm no mẫu nước: • Cồn 100% lần I : - phút • Cồn 100% lần II : - phút • Cồn 95% lần I : - phút • Cồn 95% lần II : - phút • Cồn 80% lần I : - phút • Cồn 80% lần II : - phút • Cồn 50% : - phút + Nhúng mẫu nước - lần + Nhuộm Hematocylin - Mayer: - phút + Rửa qua nước chảy nhẹ : - phút + Nhuộm Eosin : - phút + Làm nước mẫu: • Cồn 95% I: 10 lần nhúng • Cồn 95% II: 10 lần nhúng • Cồn 100% I: 10 lần nhúng • Cồn 100% II: 10 lần nhúng + Làm mẫu: Xilen I: - phút; Xilen II: - phút + Dùng lamen dán lên lam mẫu keo bomcanada để bảo quản quan sát mẫu kính hiển vi - 27 - Phụ lục 4: Một số hình ảnh trình thực luận án Miệng tổ cá nác tự nhiên Cá nác phân bố bãi triều Cơ sở thu mua cá nác thương phẩm - 28 - Kiểm tra thu mẫu cá nác chợ đầu mối Kiểm tra thu mẫu cá nác chợ đầu mối Kiểm tra chiều dài mẫu cá nác - 29 - Mổ kiểm tra tuyến sinh dục Chiều dài ruột cá nác Buồng trứng cá nác - 30 - Chọn cá cho đẻ Thí nghiệm cho cá cho đẻ giai lưới Cá kết đôi trước đẻ trứng - 31 - Trứng bám vật bám Theo dõi giai đoạn phát triển phơi cá nác Nhà xưởng thí nghiệm ương nuôi cá bột lên cá giống - 32 - Bể thí nghiệm cho cá đẻ Kiểm tra cá đẻ Phôi cá nác 72 - 33 - Ấu trùng cá nác ngày tuổi Cá nác giống 2,5cm Cá nác sau tháng nuôi - 34 -