BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOẠI CAO CHIẾT NƯỚC TỪ THỰC VẬT TẠI VƯỜN QUỐC GIA BIDOUP NÚI BÀ, TỈNH LÂM ĐỒN[.]
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC CÔNG NGHỆ TP HỒ CHÍ MINH ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP ĐÁNH GIÁ HOẠT TÍNH KHÁNG KHUẨN CỦA MỘT SỐ LOẠI CAO CHIẾT NƯỚC TỪ THỰC VẬT TẠI VƯỜN QUỐC GIA BIDOUP NÚI BÀ, TỈ NH LÂM ĐỒNG Ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Chuyên ngành: CÔNG NGHỆ SINH HỌC Giảng viên hướng dẫn : Th.S Pha ̣m Minh Nhựt Sinh viên thực : Trầ n Thi ̣Tú Vy MSSV: 1211100244 Lớp: 12DSH01 TP Hồ Chí Minh, 2016 Đồ án tốt nghiệp LỜI CAM KẾT Tôi xin cam đoan nội dung viết đồ án thực hướng dẫn khoa học ThS Phạm Minh Nhựt khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm – Môi trường Các nội dung nghiên cứu, kết đề tài trung thực chưa công bố hình thức trước Những số liệu bảng biểu phục vụ cho việc phân tích, nhận xét, đánh giá thu thập từ nguồn khác có ghi rõ phần tài liệu tham khảo Ngồi ra, đồ án cịn sử dụng số nhận xét, đánh số liệu tác giả khác, quan tổ chức khác có trích dẫn thích nguồn gốc Nếu phát có gian lận tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung luận văn Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng Sinh viên Trần Thị Tú Vy năm 2016 Đồ án tốt nghiệp LỜI CẢM ƠN Đầu tiên, với lòng biết ơn sâu sắc, em xin gửi lời tri ân đến thầy Phạm Minh Nhựt tận tình dạy em suốt trình thực đồ án Xin cảm ơn thầy buổi học lớp, buổi nói chuyện, thảo luận, nhờ em củng cố thêm đam mê định hướng nghiên cứu khoa học Ngồi ra, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô Khoa Công nghệ sinh học – Thực phẩm – Môi trường tận tình truyền đạt kiến thức kinh nghiệm cho em suốt quãng thời gian học tập Trường Đại học Công Nghệ TP.HCM Những kiến thức kinh nghiệm không giúp em thực đồ án tốt nghiệp mà tảng kiến thức cho công việc sau Em xin cảm ơn thật nhiều giúp đỡ hỗ trợ từ bạn thực đề tài phịng thí nghiệm – người ln sát cánh, động viên em hồn thành đồ án tốt nghiệp Cuối cùng, em xin cảm ơn thầy cô Hội đồng phản biện dành thời gian đọc nhận xét đồ án Em xin gửi lời chúc sức khỏe đến thầy cô Do kiến thức kinh nghiệm hạn chế nên đồ án tốt nghiệp em có nhiều sơ sót, mong thầy bảo để em hồn thiện đồ án thật tốt củng cố kiến thức cho cơng việc sau Tp Hồ Chí Minh, ngày tháng Sinh viên Trần Thị Tú Vy năm 2016 Đồ án tốt nghiệp MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Đă ̣t vấ n đề Tın ̀ h hın ̀ h nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu Nội dung nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu Kế t cấ u của Đồ án tố t nghiêp ̣ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vai trò thuốc dân gian đời sống 1.1.1 Vai trò của thuố c nam đời số ng 1.1.2 Lơ ̣i ı́ch của viê ̣c sử du ̣ng thuố c 1.1.3 Tı̀nh hı̀nh sử du ̣ng thuố c nam Thành phần hóa học thực vật 1.2 1.2.1 Carbohydrate 1.2.1.1 Khái niệm 1.2.1.2 Tính chất 1.2.1.3 Vai trò 1.2.2 Amino acid 1.2.2.1 Khái niệm 1.2.2.2 Tính chất 1.2.2.3 Vai trò 1.2.3 Glycosides 1.2.3.1 Khái niệm 1.2.3.2 Tính chất 10 1.2.3.3 Tác du ̣ng 11 1.2.4 Alkaloid 11 1.2.4.1 Khái niệm 11 1.2.4.2 Tính chất 11 1.2.4.3 Vai trò 12 1.2.5 Steroids 12 1.2.5.1 Khái niệm 12 i Đồ án tốt nghiệp 1.2.5.2 Tính chất 12 1.2.5.3 Vai trò 12 1.2.6 Tannin 14 1.2.6.1 Khái niệm 14 1.2.6.2 Tın ́ h chấ t 14 1.2.6.3 Vai trò 15 1.2.7 Isoprenoid (Terpene) 15 1.2.7.1 Khái niệm 15 1.2.7.2 Tính chất 16 1.2.7.3 Vai trò 16 1.3 Tổng quan kháng khuẩn thực vật 16 1.3.1 Khái niệm 16 1.3.2 Cơ chế kháng khuẩn 16 1.3.3 Một số hợp chất kháng khuẩn thực vật 18 1.3.3.1 Alkaloids 18 1.3.3.2 Terpenoids tinh dầu 20 1.3.3.3 Phenol đơn acid phenolic 21 1.3.3.4 Saponin 24 1.3.3.5 Lectin polypeptide 25 1.4 1.4.1 Một số vi sinh vật gây bệnh điển hình 25 Nhóm vi sinh vật gây bệnh tiêu chảy 25 1.4.1.1 Escherichia coli 25 1.4.1.2 Shigella 26 1.4.1.3 Salmonella 27 1.4.1.4 Vibrio 28 1.4.1.5 Listeria 29 1.4.2 Nhóm vi sinh vật gây bệnh hội da 30 1.4.2.1 Pseudomonas aeruginosa 30 1.4.2.2 Staphylococcus aureus 32 1.4.2.3 Enterococcus feacalis 33 CHƯƠNG 2: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 34 ii Đồ án tốt nghiệp 2.1 Địa điểm thời gian 34 2.1.1 Địa diểm 34 2.1.2 Thời gian 34 2.2 Vật liệu 34 2.2.1 Nguồn mẫu phân tích 34 2.2.2 Vi sinh vật thị 35 2.2.3 Hóa chất, mơi trường 36 2.2.4 Dụng cụ, thiết bị 36 2.3 Phương pháp nghiên cứu 37 2.3.1 Phương pháp thu xử lý nguồn mẫu 37 2.3.2 Phương pháp tăng sinh VSV chı̉ thi 37 ̣ 2.3.3 Phương pháp định lượng tế bào vi sinh vật phương pháp đo OD 38 2.3.4 Phương pháp bảo quản giữ giống 39 2.3.5 Phương pháp tách chiết cao 39 2.3.6 Chuẩ n bi dung dich ̣ ̣ cao thuố c kháng sinh 39 2.3.7 Phương pháp khuếch tán giếng thạch (agar well diffusion method) 39 2.3.8 Phương pháp xác định thành phần hóa học 41 2.3.8.1 Carbohydrate 41 2.3.8.2 Alkaloid 41 2.3.8.3 Saponin (thử nghiệm Foam) 42 2.3.8.4 Cardiac glycosides 42 2.3.8.5 Anthaquinone glycosides (thử nghiệm Bontrager) 43 2.3.8.6 Flavonoid 43 2.3.8.7 Phenolic 43 2.3.8.8 Tannin 45 2.3.8.9 Steroid 45 2.3.8.10 Amino acid 45 2.3.9 Phương pháp xử lý số liệu 46 2.4 Sơ đồ bố trı́ thı́ nghiêm ̣ tổ ng quát 47 2.4.1 Thí nghiệm 1: Đánh giá hiê ̣u quả chiế t cao chủa dung môi nước đố i với các mẫu 48 2.4.2 Thí nghiệm 2: Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nước 50 iii Đồ án tốt nghiệp 2.4.2.1 Thuyết minh quy trình 51 2.4.2.2 Đọc kết 51 2.4.3 Thí nghiệm 3: Xác định thành phần hóa học cao chiết 52 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 54 3.1 Kết khảo sát ảnh hưởng dung môi đến hiệu suất tách chiết cao 54 3.2 Kết đánh giá hoạt tính kháng khuẩn các mẫu cao chiế t nước 55 3.2.1 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n E coli 55 3.2.2 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n Listeria 37 3.2.3 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n Salmonella 39 3.2.4 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n Shigella 40 3.2.5 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n Vibrio 42 3.2.6 Kế t quả đánh giá hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n đố i với nhóm vi khuẩ n gây bệnh hô ̣i da 44 3.2.7 Tổ ng hơ ̣p kế t quả các kế t quả kháng khuẩ n 45 3.3 Kết thử nghiêm ̣ đinh ̣ tı́nh xác định thành phần hóa học của các mẫu cao chiế t nước 48 CHƯƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 52 4.1 Kết luận 52 4.2 Đề nghị 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO 53 iv Đồ án tốt nghiệp DANH SÁCH CÁC CHỮ VIẾT TẮT Aco: thuố c Acorus sp Cal: thuố c Calamus sp CIP 8: kháng sinh Cirproflaxacin 8mg/ml CIP 500: kháng sinh Cirproflaxacin 500mg/ml Ele: thuố c Elephatopus sp Euo: thuố c Euodia sp Eup: Eupatorium sp Lan: thuố c Lantana sp Med: thuố c Medinilla sp Pod: thuố c Podocarpus sp Pol: thuố c Polygala sp Ste: thuố c Streptocaulon sp Xid: thuố c Xidi klung VSV: vi sinh vâ ̣t v Đồ án tốt nghiệp DANH SÁCH CÁC BẢNG Bảng 1.1 Mô ̣t số Glycoside phổ biế n Bảng 3.1 Kết kháng khuẩn cao chiết khác tổng số 20 chủng vi sinh vật khảo sát 47 Bảng 3.2 Bảng kế t quả thành phầ n hóa ho ̣c của các mẫu cao chiế t nước 49 vi Đồ án tốt nghiệp DANH SÁCH HÌNH VÀ ĐỜ THI ̣ Hình 1.1 Một số thuốc nam phổ biến Hình 1.2 Cấu trúc phân tử loại Carbonhydrate Hı̀nh 1.3 Alanine – Mô ̣t amino acid Hı̀nh 1.4 Cardenolic và Bufadiennolid 11 Hı̀nh 1.5 Ephedrin và Hyoscyamin 11 Hı̀nh 1.6Testosteron 12 Hı̀nh 1.7 Mô ̣t số tannin 14 Hı̀nh 1.8 Limonene và Ocimene 15 Hình 1.9 Các chế kháng sinh 17 Hình 1.10 Solamargine 19 Hình 1.11 Berberine 20 Hình 1.12 Một số Terpenenes Terpenoid 21 Hình 1.13 Một số Quinones thông thường 22 Hình 1.14 Gallotannin và Gallic acid 23 Hình 1.15 Một số Flavonoid 24 Hı̀nh 1.16 Saponin 24 Hı̀nh 1.17 Các cấ u trúc của peptide 25 Hình 1.18 Hình ảnh Escherichia coli O157: H7 kính hiển vi 26 Hình 1.19 Hı̀nh ảnh của Shigella sp 27 Hình 1.20 Hình ảnh Salmonella typhii và Salmonella typhimurium 28 Hình 1.21 Hình ảnh vi khuẩ n Vibrio cholerae và Vibrio harveyi 29 Hình 1.22 Hình ảnh của Listeria monocytogenes 30 Hình 1.23 Hình ảnh Pseudomonas aeruginosa 31 Hình 1.24 Cấu trúc hiển vi Staphylococcus aureus 32 Hı̀nh 2.1 Mô ̣t số du ̣ng cu ̣ và thiế t bi thı ̣ ́ nghiê ̣m 36 Hình 2.2 Quy trình xử lý mẫu 37 Hı̀nh 2.3 Hın ̀ h ảnh về kế t quả kháng khuẩ n của mô ̣t mẫu vi khuẩ n chı̉ thi ̣(bên trái là không có kế t quả kháng khuẩ n và và bên phải là có kế t quả kháng khuẩ n) 41 Hình 2.4 Sơ đồ bố trí thí nghiệm tổng quát 47 vii Đồ án tốt nghiệp Hình 2.5 Quy trình khảo đánh giá hiê ̣u quả chiế t cao của dung môi nước đố i với các mẫu 49 Hình 2.6 Dịch lọc qua lần ngâm của các mẫu Xidi klung 49 Hình 2.7 Quy trình khảo sát hoạt tính kháng khuẩn hoạt tính kháng khuẩn 50 Hình 2.8 Quy trình xác định thành phần hóa học 52 Hı̀nh 3.1 Hiê ̣u suấ t tách chiế t các cao chiế t nước 54 Hı̀nh 3.2 Kế t quả hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t đố i với nhóm vi khuẩ n nhóm Escherichia coli 37 Hı̀nh 3.3 Kế t quả hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t đố i với nhóm vi khuẩ n nhóm Listeria spp 38 Hı̀nh 3.4 Kế t quả hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t đố i với nhóm vi khuẩ n nhóm Salmonella spp 39 Hı̀nh 3.5 Kế t quả hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t đố i với nhóm vi khuẩ n nhóm Shigella spp 41 Hı̀nh 3.6 Kế t quả hoa ̣t tın ́ h kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t đố i với nhóm vi khuẩ n nhóm Vibrio spp 43 Hı̀nh 3.7 Kế t quả hoa ̣t tı́nh kháng khuẩ n của các loa ̣i cao chiế t nước đố i với các vi khuẩ n gây bê ̣nh về da 44 viii Đồ án tốt nghiệp ix Đồ án tốt nghiệp MỞ ĐẦU Đă ̣t vấ n đề Được đánh giá bước ngoặc lịch sử Y học điều trị bệnh nhiễm khuẩn, kháng sinh đời không sử dụng y học mà sử dụng rộng rãi trồng trọt, chăn nuôi gia súc, gia cầm thủy sản nhằm mục đích tăng trưởng Việc sử dụng kháng sinh cần thiết để điều trị cho người bệnh Tuy nhiên, việc sử dụng kháng sinh không hợp lý, lạm dụng kháng sinh, điều trị kháng sinh không mắc bệnh lý nhiễm khuẩn… làm gia tăng tình trạng kháng thuốc vi khuẩn gây bệnh Viê ̣c la ̣m du ̣ng thuố c kháng sinh để la ̣i các tác ̣i rấ t lớn Mô ̣t những tác ̣i lớn nhấ t đó là các VSV không còn nha ̣y cảm với thuố c, dẫn đế n viê ̣c điề u tri ̣ ngày càng khó khăn Ngoài ra, viêc̣ sử du ̣ng kháng sinh liề u cao mô ̣t thời gian dài se ̃ làm ảnh hưởng đế n chức của các quan thể , chẳ ng ̣n sử du ̣ng chloraphicol với liề u cao sẽ gây suy tủy Thực tế, kháng sinh có phổ rộng tiêu diệt vi khuẩn xấu tốt dùng khơng hướng dẫn, lạm dụng tiêu diệt khuẩn có lợi có đường ruột, làm cân mang tính tự nhiên thể Một bị cân bằng, khuẩn xấu hoành hành, dễ phát sinh nhiều bệnh nan y, rối loạn dày, làm cho chứng bệnh nghiêm trọng làm giảm hiệu thuốc kháng sinh Vấn đề thực trạng kháng kháng sinh mang tính tồn cầu đặc biệt trội nước phát triển với gánh nặng bệnh nhiễm khuẩn chi phí bắt buộc cho việc thay kháng sinh cũ kháng sinh mới, đắt tiền Các bệnh nhiễm khuẩn đường tiêu hố, đường hơ hấp, bệnh lây truyền qua đường tình dục nhiễm khuẩn bệnh viện nguyên nhân hàng đầu có tỉ lệ mắc tỉ lệ tử vong cao nước phát triển Việc kiểm soát loại bệnh chịu tác động bất lợi phát triển lan truyền tình trạng kháng kháng sinh vi khuẩn Có thể nói rằng, vi khuẩn phơi nhiễm nhiều với kháng sinh “sức ép thuốc” lớn chủng kháng thuốc có nhiều hội để phát triển lây lan Đă ̣c biê ̣t ở Viê ̣t Nam, tình trạng kháng thuốc diễn Đồ án tốt nghiệp trầm trọng việc sử dụng kháng sinh tùy tiện khơng có đơn bác sỹ, người dân tự ý mua kháng sinh hiệu thuốc Khơng dược sỹ bán thuốc không quy định, bác sỹ điều trị kê đơn thuốc lạm dụng kháng sinh, định kháng sinh khơng phù hợp Do việc phát hợp chất kháng khuẩn có nguồn gốc tự nhiên để thay thế kháng sinh tổ ng hơ ̣p trở thành hướng nghiên cứu đáng quan tâm Vận dụng điều đó, chúng tơi tiến hành đề tài: “Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn số loại cao chiết nước từ thực vật vườn quốc gia Bidoup Núi Bà, tı̉nh Lâm Đồng” Tın ̀ h hıǹ h nghiên cứu Từ thời xa xưa, cao chiế t nước đã đươ ̣c người dân sử du ̣ng rô ̣ng raĩ các bài thuố c tri ̣ bê ̣nh dân gian Tuy nhiên, những bài thuố c dân gian đó chı̉ dư ̣a kinh nghiê ̣m trải qua nhiề u đời, chưa đươ ̣c chứng minh bằ ng thực nghiê ̣m khoa ho ̣c Thời gian gầ n đây, nhu cầ u tı̀m kiế m về mô ̣t hơ ̣p chấ t kháng sinh mới đã thúc đẩ y sư ̣ nghiên cứu về các công du ̣ng của các thuố c dân gian ngày càng nhiề u Đã có rấ t nhiề u công trın ̀ h nghiên cứu về tác du ̣ng ức chế VSV của các cao chiế t nước Parekh và ctv (2006) đã thực hiê ̣n công trın ̀ h nghiên cứu về tiề m của mô ̣t số mẫu cao chiế t nước từ thuố c truyề n thố ng ở Ấn Đô ̣ để làm thuố c kháng khuẩ n và từ kế t quả nghiên cứu đã cho ̣n đươ ̣c Bauhinia variegata tiế p tu ̣c nghiên cứu ta ̣o thành chế phẩ m thuố c Bassam Abu-Shanneb và ctv (2006) đã cũng đã nghiên cứu về khả ức chế chủng Staphylococcus aureus kháng methicillin của cao chiế t nước từ thuố c dân gian ở Palestine Ngoài ra, mô ̣t số công trı̀nh nghiên cứu khác về khả kháng khuẩ n của cao chiế t nước của Antara Sen và Amila Batra (2012); Akinvemi và ctv (2006),… Mục tiêu nghiên cứu - Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn số thuốc dân gian với dung môi nước Đồ án tốt nghiệp - Xác định thành phần hóa học có số loại cao chiết nước từ thuốc dân gian Nội dung nghiên cứu - Đánh giá ảnh hưởng dung môi nước đến hiệu suất thu hồi từ thuốc dân gian - Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nước thuốc dân gian - Xác định thành phần hóa học cao chiết nước số thuốc dân gian Phạm vi nghiên cứu Tiến hành thử nghiệm khảo sát số mẫu thuốc dân gian đươ ̣c lấ y từ vườn quố c gia Bidoup, Núi Bà, tın ̉ h Lâm Đồ ng Nô ̣i dung Đồ án tố t nghiêp̣ Nô ̣i dung Đồ án tố t nghiê ̣p gồ m có chương: Chương 1: Tổng quan – Tóm tắ t tài liê ̣u có liên quan đế n đồ án tố t nghiê ̣p Chương 2: Phương pháp và nội dung nghiên cứu Chương 3: Kế t quả và thảo luận Chương 4: Kế t luận và đề nghi ̣ Đồ án tốt nghiệp CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Vai trò thuốc dân gian đời sống 1.1.1 Vai trò của thuố c nam đời số ng Thuốc nam coi di sản quý báu dân tộc Việt Nam, danh y Tuệ Tĩnh nói “Nam dược trị nam nhân” (thuốc nam chữa bệnh cho người Nam) Từ xa xưa, thuốc nam gắn liền với sống gia đình người Việt có giá trị quý báu điều trị bệnh Chỉ cỏ gần gũi thân quen xung quanh người sử dụng làm thuốc chữa bệnh đơn giản, thông thường cho người Việt Nam Ví dụ, ban đầu củ gừng, củ tỏi dùng với mục đích nấu nướng để làm thay đổi đa dạng hóa mùi vị, tạo thức ăn ngon miệng, sau người ta nhận thấy chúng cịn có khả làm ấm bụng dễ tiêu, làm hết lỏng ăn phải đồ sống lạnh , Hình 1.1 Một số thuốc nam phổ biến (từ trái sáng, xuống: lơ hội, atiso, tía tơ, mã đề) Đồ án tốt nghiệp Trong dân gian thuốc nam có từ 3.000 năm trước, với phát triển y học cổ truyền Nước ta có nhiều dược liệu, kể cỏ cây, động vật khoáng vật, có thứ quý, cần sưu tầm nghiên cứu sử dụng để phòng bệnh, chữa bệnh cho nhân dân Trải qua kinh nghiệm quý báu cha ơng, thuốc nam có tác dụng chữa bệnh lưu truyền từ đời sang đời khác áp dụng hiệu 1.1.2 Lợi ı́ch của viê ̣c sử dụng thuố c Trái với Tây y, Đơng y xem tồn thân thể người hệ thống hoàn chỉnh Học thuyết kinh lạc, tử ngọ lưu đồ, học thuyết âm dương ngũ hành, nhấn mạnh vào chỉnh thể Từ góc nhìn ấy, Đông y tinh vi Tây y Tất khái quát lại lợi ích trọng yếu sau: - Trị bệnh theo thuốc Đông y, thời gian khỏi bệnh có tiến triển chậm hơn, khỏi bệnh tỷ lệ tái phát thấp so với phương pháp khác - Chữa bệnh Đông y trị bệnh từ gốc, Tây y trị bệnh - Tây y dùng chiết xuất từ dược liệu tự nhiên thành phần chủ yếu tinh chất hàm lượng lớn nguyên liệu Trong đó, hoạt chất tồn thuốc Đông y phức hợp liều lượng phù hợp Vì vậy, dùng thuốc từ cỏ hoa tự nhiên tác dụng chữa bệnh phản ứng phụ gây hại cho người - Không gây tổn hại gan, thận thuốc Tây thuốc Đông y không sản sinh độc tố nên gây tổn hại cho thể - Nền y học phương Tây có nhiều tiến châu Á châu Phi, khả đề kháng với loại bệnh tật họ lại yếu người hai châu lục Điều chứng tỏ thói quen dùng thuốc Tây làm giảm khả miễn dịch thể Còn dùng thuốc từ cỏ hoa giúp cho hệ miễn dịch tốt Đồ án tốt nghiệp - Người dùng thuốc Tây nhiều có khả bị ung thư cao gần 10 lần so với người có thói quen dùng thuốc Đông y - Thuốc Tây tiện lợi thời gian sử dụng hữu hạn Thuốc Đông y dễ trồng, dễ tìm: Xung quanh thuốc, vị thuốc hữu ích 1.1.3 Tı̀nh hı̀nh sử dụng thuố c nam Ngay từ thời xa xưa người sống xã hội nguyên thủy, người ta biết lựa chọn sử dụng loại cỏ sẵn có để làm thuốc chữa bệnh bảo vệ sức khỏe Vốn kinh nghiệm ngày tích lũy, sàng lọc bổ sung thêm để tạo dựng nên Y – Dược học cổ truyền có sắc riêng cộng đồng dân tộc Việt Nam Và thực tế, Y học cổ truyền (YHCT) đảm nhận vai trị chăm sóc bảo vệ sức khỏe nhân dân đồng hành có Y học đại (YHHĐ) du nhập vào nước ta Việt Nam nằm khu vực nhiệt đới gió mùa, thích hợp cho phát triển trồng nói chung Một số vùng cao lại có khí hậu nhiệt đới, phù hợp với việc trồng thuốc ưa khí hậu mát Đất đai miền núi nước ta, đặc biệt dãy Trường Sơn rộng lớn, nhiều đất hoang chưa khai thác sử dụng để phát triển kinh tế Theo N.B Hoạt (2002), đất chưa sử dụng huyện Sa Pa (Lào Cai) 40.463 (chiếm 59,7% diện tích), có 8.874 đất có độ dốc 200 khai thác cho sản xuất nông nghiệp, 25.766 đất đồi núi chưa sử dụng Từ trước đến nay, nhiều địa phương nước ta có truyền thống trồng thuốc, Quế (ở Yên Bái, Thanh Hoá, Quảng Nam, Quảng Ngãi…), Hồi (ở Lạng Sơn, Cao Bằng, Hà Giang, Lai Châu), H (ở Thái Bình) Có làng chun trồng thuốc Đại Yên (Hà Nội), Nghĩa Trai (Văn Lâm, Hưng Yên) Gần đây, nhiều loài thuốc ngắn ngày trồng thành công quy mô lớn Ác ti sô, Bạc hà, Cúc hoa, Địa liền, Gấc, Hương nhu, Ích mẫu, Kim tiền thảo, Mã đề, Sả, Thanh cao hoa vàng, Ý dĩ, vv Những số liệu cho thấy việc phát triển trồng thuốc nước ta có nhiều tiềm cho hiệu kinh tế cao Cần giúp cho người dân biết cách chuyển đổi Đồ án tốt nghiệp cấu trồng, kết hợp trồng rừng với trồng thuốc nơi có khí hậu đất đai phù hợp, để nâng cao thu nhập, cải thiện đời sống, góp phần tích cực việc xố đói giảm nghèo cho người dân vùng núi Theo kinh nghiệm Sa Pa, thu nhập từ trồng thuốc đạt 14-24 triệu đồng/ha/năm, thu nhập từ lương thực đạt 2,4-4,8 triệu đồng/ha/năm (N.B Hoạt, 2002) 1.2 Thành phần hóa học thực vật 1.2.1 Carbohydrate 1.2.1.1Khái niệm Carbohydrate phân tử sinh học gồm nguyên tử carbon (C), hydro (H) oxy (O), thường tỷ lệ nguyên tử hydro-oxy phân tử carbonhydrate là 2:1, công thức thực nghiệm Cm(H2O)n (thường m = n) Một số trường hợp ngoại lệ tồn tại; ví dụ, deoxyribose, thành phần đường DNA, có cơng thức C5H10O4 (John M Coulter, C R Barnes, H C Cowles, 1930) Ở thực vật carbohydrate tập trung chủ yếu thành tế bào, mơ nâng đỡ mơ dự trữ Carbohydrate chia thành nhóm: - Monosaccharide: glucose, fructose - Disaccharide: saccharose, lactose, maltose - Oligosaccharide: raffinose, kestose,, stachyose - Polysaccharide: tinh bột, cellulose 1.2.1.2 Tính chất Chúng có đặc tính chung dễ hồ tan nước, đồng hố sử dụng nhanh để tạo glycogen Các carbohydrate đơn giản có vị ngọt, vào thể xuất tương đối nhanh máu Đồ án tốt nghiệp Hình 1.2 Cấu trúc phân tử loại Carbonhydrate 1.2.1.3Vai trò - Cung cấp lượng cho tế bào thể thực vật - Vai trò cấu trúc, tạo hình (Cellulose,…) - Bảo vệ (Mucopolysaccharide) - Chống tạo thể cetone (mang tính acid gây độc cho thể) 1.2.2 Amino acid 1.2.2.1Khái niệm Amino acid phân tử chứa nhóm amin carboxylate Cơng thức chung: (H2N)x – R – (COOH)y Hın ̀ h 1.3 Alanine – Mô ̣t amino acid ... tiến hành đề tài: ? ?Đánh giá hoạt tính kháng khuẩn số loại cao chiết nước từ thực vật vườn quốc gia Bidoup Núi Bà, tı̉nh Lâm Đồng? ?? Tın ̀ h hıǹ h nghiên cứu Từ thời xa xưa, cao chiế t nước... Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn số thuốc dân gian với dung môi nước Đồ án tốt nghiệp - Xác định thành phần hóa học có số loại cao chiết nước từ thuốc dân gian Nội dung nghiên cứu - Đánh giá ảnh... hưởng dung môi nước đến hiệu suất thu hồi từ thuốc dân gian - Khảo sát hoạt tính kháng khuẩn cao chiết nước thuốc dân gian - Xác định thành phần hóa học cao chiết nước số thuốc dân gian Phạm vi