LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cô giáo Ngô Thị Hải Yến, cô đã tận tình hƣớng dẫn và giúp đỡ em trong suốt quá trình thực hiện khóa luận này với đề tài “Nghiên cứu khả năng hấp thụ thu[.]
LỜI CẢM ƠN Em xin gửi lời cảm ơn chân thành tới cô giáo Ngô Thị Hải Yến, cô tận tình hƣớng dẫn giúp đỡ em suốt q trình thực khóa luận với đề tài: “Nghiên cứu khả hấp thụ thuốc omeprazole natri vật liệu cellulose tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trƣờng chuẩn” Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy giáo, cô giáo khoa Sinh - KTNN thầy cô Viện Nghiên cứu Khoa học Ứng dụng tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ cho em trình làm thực nghiệm nghiên cứu để em hồn thành khóa luận Cuối em muốn gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè ln bên giúp đỡ em suốt q trình học tập hồn thành khóa luận Đây bƣớc đầu em tham gia nghiên cứu khoa học, kiến thức kĩ cịn hạn chế nên khơng tránh khỏi thiếu sót mong nhận đƣợc góp ý thầy bạn để khóa luận tốt nghiệp em đƣợc hoàn thiện Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội,ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Huân LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài tơi thực dƣới hƣớng dẫn ThS Ngô Thị Hải Yến Tất trích dẫn khóa luận lấy từ cơng bố thức có ghi rõ ràng Các số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực khơng trùng lặp với kết công bố Nếu sai xin hoàn toàn chịu trách nhiệm Hà Nội, ngày 20 tháng 05 năm 2019 Sinh viên Trần Thị Huân MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu Đối tƣợng phạm vi nghiên cứu Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cellulose vi khuẩn (CVK) sinh vật tổng hợp cellulose 1.1.1 Cellulose vi khuẩn (CVK) Hình 1.1 Cấu trúc cellulose vi khuẩn Hình 1.2 Cấu trúc sợi cellulose màng CVK 1.1.2 Vi sinh vật tổng hợp cellulose Bảng 1.1 Các vi sinh vật có khả tổng hợp cellulose 1.1.3 Môi trường nuôi cấy G xylinus 1.2 Tổng quan thuốc Omeprazole natri 1.2.1 Công thức cấu tạo Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo Omeprazole 1.2.2 Loại thuốc Dạng thuốc 1.2.3 Tính chất lý hóa Omeprazole natri 1.2.4 Dược lý chế tác dụng 1.2.5 Dược động học 1.2.6 Tác dụng hạn chế thuốc 10 1.3 Tình hình nghiên cứu nƣớc 10 Chƣơng VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Vật liệu nghiên cứu 12 2.1.1 Hóa chất dung mơi sử dụng nghiên cứu 12 2.1.2 Thiết bị sử dụng nghiên cứu 12 2.1.3 Vật liệu làm môi trường nuôi cấy vi sinh vật tạo màng CVK 12 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 12 2.2.1 Chuẩn bị màng CVK 12 Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng chuẩn tạo màng CVK 13 Hình 2.1 Quy trình tạo màng CVK tinh khiết 14 2.2.2 Quét phổ hấp thụ thuốc Omeprazole natri 15 2.2.3 Chế tạo màng CVK nạp thuốc Omeprazole natri 15 Bảng 2.2 Các trƣờng hợp hấp thụ thuốc Omeprazole natri 15 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 18 3.1 Thu màng CVK thô tạo CVK tinh khiết 18 3.1.1 Thu màng CVK thô 18 Hình 3.1 Màng CVK thô lên men từ môi trƣờng chuẩn 19 3.1.2 Tạo màng CVK tinh khiết 19 Hình 3.2 Màng CVK tinh khiết 19 Hình 3.3 Thí nghiệm kiểm tra độ tinh màng 20 3.2 Phổ hấp thụ tử ngoại thuốc Omeprazole natri 20 Hình 3.4 Phổ hấp thụ tử ngoại thuốc Omeprazole natri 21 3.3 Đƣờng chuẩn hấp thụ thuốc Omeprazole natri 21 Bảng 3.1 Mật độ quang dung dịch Omeprazole natri nồng độ (n = 3) 21 Hình 3.5 Phƣơng trình đƣờng chuẩn Omeprazole natri dung mơi NaOH 0,1M 22 3.4 Khối lƣợng thuốc Omeprazole natri hấp thụ đƣợc vào màng CVK 22 Bảng 3.2 Giá trị OD trung bình dung dịch Omeprazole natri ngâm màng CVK 2h (n = 3) 23 Bảng 3.3 Lƣợng thuốc hấp thụ Omeprazole natri qua màng CVK TH1 (n = 3) 24 Bảng 3.4 Lƣợng thuốc hấp thụ Omeprazole natri qua màng CVK TH2 (n = 3) 25 Hình 3.5 Phƣơng trình đƣờng chuẩn Omeprazole natri dung mơi NaOH 0,1M 23 Hình 3.6 Khối lƣợng thuốc Omeprazole natri hấp thụ trƣờng hợp 25 Hình 3.7 hiệu suất hấp thụ thuốc Omeprazole natri trƣờng hợp 25 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 28 Kết luận 28 Kiến nghị 28 TÀI LIỆU THAM KHẢO 30 Tài liệu tiếng việt 30 Tài liệu nƣớc 30 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CVK G xylinus Cellulose vi khuẩn Gluconacetobacter xylinus TH1 Trƣờng hợp TH2 Trƣờng hợp MT1 Môi trƣờng (môi trƣờng chuẩn) DANH MỤC BẢNG Bảng 1.1 Các vi sinh vật có khả tổng hợp cellulose Bảng 2.1 Thành phần môi trƣờng chuẩn tạo màng CVK 14 Bảng 2.2 Các trƣờng hợp hấp thụ thuốc Omeprazole natri 16 Bảng 3.1 Mật độ quang dung dịch Omeprazole natri nồng độ (n = 3) 22 Bảng 3.2 Giá trị OD trung bình dung dịch Omeprazole natri ngâm màng CVK 2h (n = 3) 24 Bảng 3.3 Lƣợng thuốc hấp thụ Omeprazole natri qua màng CVK TH1 (n = 3) 24 Bảng 3.4 Lƣợng thuốc hấp thụ Omeprazole natri qua màng CVK TH2 (n = 3) 25 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc cellulose vi khuẩn Hình 1.2 Cấu trúc sợi cellulose màng CVK Hình 1.3 Cơng thức cấu tạo Omeprazole natri Hình 2.1 Quy trình tạo màng CVK tinh khiết 15 Hình 3.1 Màng CVK thơ lên mên từ môi trƣờng chuẩn 19 Hình 3.2 Màng CVK tinh khiết 20 Hình 3.3 Thí nghiệm kiểm tra độ tinh màng 21 Hình 3.4 Phổ hấp thụ tử ngoại thuốc Omeprazole natri 22 Hình 3.5 Phƣơng trình đƣờng chuẩn Omeprazole natri dung mơi NaOH 0,1M 23 Hình 3.6 Khối lƣợng thuốc Omeprazole natri hấp thụ trƣờng hợp 25 Hình 3.7 Hiệu suất hấp thụ thuốc trƣờng hợp 25 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Theo y học đại bệnh dày, tá tràng kết cân bên yếu tố phá hủy bên yếu tố bảo vệ niêm mạc dày, tá tràng Bệnh có nhiều nguyên nhân gây nên nhƣ: chế độ ăn uống, thuốc,… Bệnh viêm loét dày, tá tràng gây nhiều biến chứng vơ nguy hiểm nhƣ: xuất huyết, viêm teo niêm mạc, thủng dày, nguy hiểm dẫn tới ung thƣ dày Đây bệnh phổ biến có chiều hƣớng gia tăng nƣớc phát triển Hiện nay, giới nhƣ Việt Nam, bệnh chiếm tỉ lệ cao khoảng 30%, đứng đầu bệnh tiêu hóa Omeprazole natri loại thuốc đƣờng tiêu hóa với sinh khả dụng thấp Omeprazol natri đƣợc dùng điều trị bệnh đau dày, trào ngƣợc dày - thực quản; loét dày – tá tràng; hội chứng Zollinger – Ellison Omeprazol natri dƣợc chất thuộc nhóm ức chế bơm proton đƣợc sử dụng sớm rộng rãi việc điều trị viêm loét dày tá tràng, đạt hiệu cao Omeprazol natri dễ bị thủy phân mơi trƣờng axit chế phẩm có chứa omperazol natri dùng đƣờng uống chủ yếu đƣợc điều chế dƣới dạng viên nén hay nang cứng pellet bao tan ruột [10] Cellulose vi khuẩn (CVK) đƣợc tạo vi khuẩn Gluconacetobecter xylinus có cấu trúc hóa học giống với cellulose thực vật, có tiềm nhƣ hệ thống vận chuyển phân phối thuốc có cấu trúc mạng siêu mảnh cỡ nano hệ mạng lƣới cấu trúc CVK đƣợc nạp Omeprazole natri tạo hệ trị liệu phóng thích kéo dài nhằm làm tăng sinh khả dụng thuốc Nghiên cứu nhằm tăng hiệu suất hấp thụ thuốc Omeprazole natri vật liệu CVK lên men từ môi trƣờng chuẩn Kết nghiên cứu khác cho thấy CVK đƣợc lên men từ mơi trƣờng chuẩn có tiềm làm hệ vận tải phân phối thuốc qua đƣờng uống [20] Nhờ vào đặc tính vơ độc đáo CVK nhằm tăng khả hấp thụ thuốc có kiểm soát tăng sinh khả dụng thuốc omeprazole natri điều trị bệnh nên định chọn đề tài: “Nghiên cứu khả hấp thụ thuốc Omeprazole natri vật liệu cellulose tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trƣờng chuẩn” Mục đích nghiên cứu - Đánh giá khả hấp thụ Omeprazole natri vật liệu cenllulose tạo từ Gluconacetobacter xylinus mơi trƣờng chuẩn, từ ứng dụng vào y học chữa bệnh nhằm tăng khả hấp thụ thuốc Omeprazole natri, tăng hiệu chữa bệnh - Tạo đƣợc màng CVK nạp thuốc Omeprazole natri từ môi trƣờng chuẩn - Xây dựng hệ thống CVK hấp thụ thuốc Omeprazole natri Đối tƣợng , phạm vi nghiên cứu - Đối tƣợng nghiên cứu: Khả hấp thụ thuốc omeprazole natri màng CVK đƣợc lên men từ mơi trƣờng chuẩn - Phạm vi nghiên cứu: Q trình nghiên cứu đƣợc thực quy mơ phịng thí nghiệm trƣờng Đại học Sƣ phạm Hà Nội Ý nghĩa khoa học ý nghĩa thực tiễn * Ý nghĩa khoa học - Tiếp tục nghiên cứu khả màng CVK việc hấp thụ thuốc chỗ Việc nghiên cứu hấp thụ thuốc Omeprazole natri vào màng CVK giải khắc phục hạn chế thuốc Omeprazole natri, để đạt đƣợc hiệu cao dùng thuốc để điều trị bệnh lý - Đánh giá tiềm màng CVK hấp thụ Omeprazole natri để từ đƣa hƣớng nghiên cứu loại thuốc khác * Ý nghĩa thực tiễn - Trong nghiên cứu, sử dụng màng CVK tạo hệ thống hấp thụ thuốc omeprazole natri định hƣớng để làm nên hệ thống khắc phục hạn chế việc điều trị thuốc omeprazole natri thị trƣờng - Nhằm nâng cao hiệu sử dụng thuốc omeprazole natri - Từ kết nghiên cứu đƣợc ứng dụng vào đời sống thực tiễn NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cellulose vi khuẩn (CVK) sinh vật tổng hợp cellulose 1.1.1 Cellulose vi khuẩn (CVK) 1.1.1.1 Đặc điểm Cellulose vi khuẩn Cellulose vi khuẩn chuỗi polymer glucopyranose nối với liên kết β-1,4-glucan Cấu trúc CVK phụ thuộc chặt chẽ vào điều kiện nuôi cấy CVK có tính chất đặc biệt mơi trƣờng nuôi cấy tĩnh nhƣ: độ tinh khiết cao, khả đàn hồi tốt, độ kết tinh độ bền học cao, bị phân hủy sinh học, không độc hại không gây dị ứng, có khả chịu nhiệt tốt, đặc biệt khả cản khuẩn [4] Cấu trúc CVK đƣợc thấy dõ hình 1.1 Hình 1.1 Cấu trúc cellulose vi khuẩn 1.1.1.2 Cấu trúc kết tinh cellulose vi khuẩn Ngày nhờ vào kỹ thuật công nghệ đại nhƣ phổ hồng ngoại, phổ Raman, phổ cộng hƣởng từ hạt nhân… Mà xác định đƣợc cấu trúc cellulose vi khuẩn, giúp xác định đƣợc dạng kết tinh cellulose CVK đƣợc cấu tạo hai loại cấu trúc tinh thể cellulose Iα Iβ Trong sợi nhỏ cellulose có tham gia hai loại cấu trúc tinh thể Hầu hết tinh thể Iβ tinh khiết thu đƣợc từ cellulose thực vật nhƣng chƣa tìm cách để thu nhận đƣợc tinh thể Iα tinh khiết từ nguồn Cấu trúc CVK chứa nhiều tinh thể Iα cấu trúc màng cellulose thực vật Tỉ lệ dao động khoảng 64%, đến 71% tuỳ vào loại vi sinh vật nhiệt độ môi trƣờng Ở cellulose thực vật, Iα chiếm khoảng 20% [12] ... hấp thụ thuốc Omeprazole natri vật liệu cellulose tạo từ Gluconacetobacter xylinus nuôi cấy môi trƣờng chuẩn? ?? Mục đích nghiên cứu - Đánh giá khả hấp thụ Omeprazole natri vật liệu cenllulose tạo. .. từ môi trƣờng chuẩn - Xây dựng hệ thống CVK hấp thụ thuốc Omeprazole natri Đối tƣợng , phạm vi nghiên cứu - Đối tƣợng nghiên cứu: Khả hấp thụ thuốc omeprazole natri màng CVK đƣợc lên men từ môi. .. tăng sinh khả dụng thuốc Nghiên cứu nhằm tăng hiệu suất hấp thụ thuốc Omeprazole natri vật liệu CVK lên men từ môi trƣờng chuẩn Kết nghiên cứu khác cho thấy CVK đƣợc lên men từ môi trƣờng chuẩn có