Hội chứng rối loạn hô hấp và sinh sản (PRRS) ở lợn con sau cai sữa và lợn choai bằng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang 6 Đặc điểm bệnh lý Hội chứng rối sinh sản và loạn hô hấp và (PRRS) ở lợn con sau cai[.]
Đặc điểm bệnh lý Hội chứng rối sinh sản loạn hô hấp (PRRS) lợn sau cai sữa lợn choai xác định kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang Nguyễn Thị Lan Dương Thị Minh Huyền Đại học Nơng Nghiệp Hà Nội TĨM TẮT Triệu chứng hai loại lợn sốt, bỏ ăn, mẩn đỏ da chảy nước mũi Với lợn sau cai sữa triệu chứng điển hình táo bón tiêu chảy tím tai Cịn với lợn choai triệu chứng đặc trưng thở khó, ho, tiêu chảy, tai xanh Biến đổi đại thể chủ yếu hai loại lợn xảy phổI: phổi viêm hoại tử, đặc, có màu đỏ xám, mặt cắt lồi khô Biến đổi thấy số quan khác: ruột viêm, xuất huyết, hạch lâm ba xuất huyết, tim nhão, gan sưng Bệnh tích vi thể chủ yếu phổi thâm nhiễm tế bào viêm, lòng phế nang chứa đầy dịch rỉ viêm; thận tập trung nhiều hồng cầu bạch cầu; vách ngăn lách đứt nát, thâm nhiễm hồng cầu lan tràn nhu mô lách, niêm mạc ruột bong tróc, lơng nhung đứt nát Kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang khẳng định có mặt PRRS quan, tổ chức lợn nghiên cứu, từ giúp cho việc xác định xác PRRS có biện pháp xử lý kịp thời, giảm thiệt hại cho người chăn nuôi Từ khóa: Lợn sau cai sữa, Lợn choai , PRRS, Chản đoán , Miễn dịch huỳnh quang Pathological characteristics of the PRRS in the weaner and grower pigs and its identification by the immunofluorescent assay Nguyen Thi Lan and Dương Thi Minh Huyen Summary The first clinical signs of the PRRS observed in both categories of pigs (weaner and grower) were fever, anorexia, skin erubescense (erythema) and rhinorea In the weaners, the typical signs were constipation or diarhea and purpled ears meanwhile in the growers, they were the dyspnea, coughing, diarrhea and purpled ears The macroscopic lesions in both categories of pigs were observed in the lung: necrosis, hepatization, dark red colored ,the cutted surface was convex and dry In other organs, the lesions observed were inflammation and hemorrhage in the intestines, hemorrhages in the lymph nodes, flacid heart, swollen liver The microscopic lesions found in the lungs were the infiltration of the inflammatory cells, exudates in the alveols; numerous red and white blood cells in the kidneys; the spleen septa were found broken with infiltration of red blood cells in the parenchima; errosion of the enteric mucosa with the destruction of the villi The immunofluorescent assay has helped to confirm the presence the PRRS pathogen in the organs of the affected pigs, hence has helped to correctly identify the disease and to timely apply the right measures to reduce the loss of the farmers Key words: Weaner, Grower, PRRS, Diagnosis, IFA ĐẶT VẤN ĐỀ: Ngành chăn nuôi lợn nước ta ngày chiếm vị trí quan trọng cấu kinh tế đất nước hiệu cao mà mang lại Tuy nhiên, ngành chăn nuôi lợn luôn chịu mối đe dọa lớn từ loại dịch bệnh Hội chứng rối loạn sinh sản hơ hấp lợn cịn gọi bệnh “tai xanh” (Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome - PRRS) bệnh phát gây thiệt hại vô to lớn cho ngành chăn nuôi lợn Theo Neumann cs (2005) hàng năm ước tính tiêu phí ngành cơng nghiệp chăn ni lợn Mỹ 560 triệu USD cho PRRS Ở nước ta, theo Bộ Nơng nghiệp&PTNT số lên tới nhiều chục tỉ đồng Bệnh gây rối loạn hô hấp lợn con, suy giảm khả sinh sản nghiêm trọng lợn nái, ảnh hưởng rõ rệt đến sức khỏe lợn sau cai sữa lợn choai gây chết Do đó, việc chẩn đốn xác lợn mắc PRRS cần thiết để kịp thời có biện pháp xử lý nhằm giảm thiểu thiệt hại kinh tế Hiện có nhiều phương pháp chẩn đốn PRRS phương pháp ELISA, RTPCR, hóa mơ miễn dịch… Nhưng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang (Immuno Fluoerescent test IF) kỹ thuật sử dụng hứa hẹn đem lại hiệu cao cho việc chẩn đoán lợn mắc PRRS Trong nghiên cứu này, ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang để chẩn đốn hội chứng rối loạn sinh sản hơ hấp đàn lợn sau cai sữa lợn choai II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: 2.1 Nguyên liệu: - Mẫu bệnh phẩm sử dụng nghiên cứu là: phổi, hạch phổi, tim, gan, lách, thận…của lợn sau cai sữa lợn choai nghi mắc PRRS số địa phương Hưng Yên, Vĩnh Phúc, Bắc Giang (Bảng 1) Bảng 1.Nguồn gốc lợn sau cai sữa lợn choai nghiên cứu ST T Lợn Kí hiệu Tiêm vacxin phòng Lợn sau cai sữa A1 Lợn sau cai sữa A2 Lợn choai A3 Lợn choai Lợn choai A4 A5 bệnh đỏ lợn, suyễn lợn Dịch tả lợn, sảy thai truyền nhiếm, bệnh đỏ lợn, sảy thai truyền nhiễm bệnh đỏ lợn, giả dại bệnh đỏ lợn Vĩnh Phúc Móng Cái Lứa tuổi (ngày) 60 Bắc Giang Yorkshire 75 Hưng Yên Vĩnh Phúc Hưng Yên Landrace Móng Cái Móng Cái 120 135 180 Địa phương lấy mẫu Giống -Thiết bị, dụng cụ hóa chất phịng thí nghiệm vi sinh vật - Kháng thể kháng PRRS chế thỏ chuột (Dako envision TM System Labelled Polymer - USA), kháng kháng thể thỏ chuột (HRP anti-mouse and anti-rabbit - Dako Corporation – USA) 2.2 Phương pháp nghiên cứu: - Quan sát triệu chứng lâm sàng lợn sau cai sữa lợn choai nghi mắc PRRS từ lợn xuất dấu hiệu Đồng thời kết hợp đặc điểm dịch tễ địa phương với việc thu thập thông tin từ chủ gia súc cán thú y để tăng độ tin cậy cho chẩn đoán - Quan sát biến đổi đại thể thông qua việc mổ khám lợn sau cai sữa lợn choai có triệu chứng lâm sàng PRRS - Phương pháp làm tiêu vi thể: Biến đổi vi thể xác định việc thu mẫu từ quan: phổi, tim, gan, lách, thận, máu, não đem phịng thí nghiệm làm tiêu để chẩn đốn - Phương pháp miễn dịch huỳnh quang: Q trình chẩn đốn xác lợn mắc PRRS phương pháp miễn dịch huỳnh quang Quan sát với kính hiển vi huỳnh quang (ánh sáng tia tử ngoại) đọc kết III KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN: 3.1 Triệu chứng lâm sàng lợn sau cai sữa lợn choai nghi mắc PRRS: Kết trình bày Bảng Hình 1, 2, Bảng Triệu chứng lâm sàng lợn sau cai sữa lợn choai nghi mắc PRRS Triệu chứng lâm sàng Chảy STT Kí hiệu Bỏ Mẩn Khó Tím Sốt nước Ho ăn đỏ da thở Tai mũi Lợn sau cai sữa +++ +++ ++ +++ + +++ Lợn sau cai sữa ++ +++ ++ ++ ++ Lợn choai +++ ++ + ++ ++ + Lợn choai +++ +++ + ++ ++ ++ ++ Lợn choai ++ ++ ++ + +++ +++ +++ Nặng ++Trung bình + Nhẹ - Khơng biểu Hình Lợn nghi mắc PRRS có hiện tượng chảy nước mũi Tiêu chảy Táo bón + ++ - ++ +++ + Hì nh Da lợn nghi mắc PRRS bị mẩn đỏ Hình Lợn nghi mắc PRRS bị tím tai Qua Bảng hình cho thấy hai loại lợn có triệu chứng chủ yếu chung là: sốt, bỏ ăn, chảy nước mũi, mẩn đỏ da, tím tai, thở khó, tiêu chảy táo bón Trong đó, sốt bỏ ăn thể rõ hai loại lợn triệu chứng chung bệnh truyền nhiễm Các triệu chứng cịn lại tùy thuộc vào loại lợn mà có mức độ nặng nhẹ khác Đối với lợn sau cai sữa, triệu chứng táo bón, mẩn đỏ da, chảy nước mũi tím tai có biểu từ mức trung bình đến nặng Đối với lợn choai triệu chứng thở khó, chảy nước mũi, mẩn đỏ da, ho lại triệu chứng đặc trưng xuất với mức độ cao Kết nghiên cứu phù hợp với kết nghiên cứu số tác Phạm Ngọc Thạch cs, năm 2007 SH Done cs, năm 1995 3.2 Kết nhuộm miễn dịch huỳnh quang xác định lợn mắc virut PRRS Sau có kết luận triệu chứng lâm sàng, biến đổi bệnh lý đại thể vi thể lợn sau cai sữa lợn choai nghi mắc PRRS nghiên cứu, tiếp tục tiến hành làm kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang để khẳng định chắn cho có mặt PRRS tổ chức lợn Với lợn nghiên cứu chọn quan (phổi, hạch phổi, lách), quan lợn, chọn block vùng có tổn thương đại thể để làm miễn dịch huỳnh quang Kết trình bày bảng hình 4,5 Bảng Kết làm miễn dịch huỳnh quang xác định virut PRRS STT Kí hiệu Lợn sau cai sữa Lợn sau cai sữa Lợn choai Lợn choai Lợn choai + Có virut , - Khơng có virut, Phổi Block Block + + + + + + + Hạch phổi Block Block + + + + + + Lách Block Block + + + + + 0 0 0: Không kiểm tra Kết bảng cho thấy, tất lợn nghiên cứu bao gồm lợn sau cai sữa lợn choai cho kết miễn dịch huỳnh quang dương tính với PRRS, thể đám tổ chức bắt màu xanh lá mạ tiêu vi thể phổi lợn mắc PRRS Qua bảng thấy, quan lợn bệnh có block cho kết dương tính, có block cho kết âm tính với miễn dịch huỳnh quang Điều chứng tỏ virut phân bố khơng tổ chức Hình Virut tập trung đại thực bào phổi (IFx10) Hình Virut tập trung đại thực bào phổi (IFx40) 3.3 Biến đổi bệnh lý lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS: 3.3.1 Bệnh tích đại thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS Kết xem bảng Bảng Bệnh tích đại thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS S T T Kí hiệu Lợn sau cai sữa Lợn sau cai sữa Lợn choai Lợn choai Lợn choai Cơ quan Thận Hạch lâm ba Phổi Ruột Cơ quan khác Sung huyết, màu đỏ tím Sưng to, xuất huyết Viêm, xuất huyết bề mặt Viêm, hoại tử, xuất huyết Viêm, hạch màng treo ruột sưng to Xuất huyết Lách nhồi huyết, gan sưng, xuất huyết Xoang bao tim tích nước gan sưng Não sung huyết, amidan sưng Cơ tim nhão, gan sưng, xuất huyết Khơng có bệnh tích Viêm, tụ huyết lòng phế quản chứa nhiều dịch nhầy Xuất huyết điểm lan tràn Viêm màu đỏ xám có mủ Có điểm hoại tử Xuất huyết điểm Xuất huyết, viêm phổi hoại tử đặc, viêm phế quản phổi có mủ bề mặt thùy đỉnh Viêm phổi màu đỏ xám, mặt cắt lồi khô, xuất huyết phổi Tụ máu Sưng to, mặt cắt lồi Xuất huyết điểm đầu đinh ghim Khơng có bệnh tích Thuỷ thũng, thâm tím Sưng to Viêm màu đỏ xám, nhục hóa phổi, dịch viêm lịng phế quản Hoại tử, Xuất huyết Bảng cho thấy biến đổi đại thể lợn mắc PRRS chủ yếu xảy phổi Phổi tất lợn có biến đổi bệnh lý Tuy nhiên, biến đổi khác mức độ nặng nhẹ phụ thuộc vào cá thể kế phát bệnh khác Phổi lợn bệnh bị viêm hoại tử gây đặc, nhục hóa phổi Các vùng phổi bị bệnh có màu đỏ xám có mủ, mặt cắt lồi khơ, viêm phế quản phổi có mủ mặt thùy đỉnh (Hình ) Ruột lợn chủ yếu viêm xuất huyết, hach màng treo ruột sưng to (Hình 8) Tuy nhiên lợn sau cai sữa lợn choai có tượng thành ruột mỏng, bên chứa đầy hơi, rong ruột già có chứa phân dạng cục, cứng bao phủ lớp dịch nhầy màu trắng đục Hạch lâm ba có tượng sưng to, phù nề, kích thước tăng so với bình thường, xuất huyết lấm bề mặt (Hình 9) Khi bổ thấy có đám xuất huyết loang lổ mặt cắt hạch giống vân đá hoa cương, có tượng thối hóa.Các quan khác có biến đổi tùy thuộc vào tiến triển bệnh kế phát bệnh khác Những quan sát chúng tơi có kết giống với kết quả nghiên c ứu tác giả Bùi Quang Anh cs (2008), Nguyễn Hữu Nam Nguyễn Thị Lan (2007), Lê Văn Năm (2007) cơng bố Hình Phổi của lợn mắc PRRS bị đặc Hì nh Thận của lợn mắc PRRS bị xuất huyết 10 Hình Hạch màng treo ruột của lợn mắc PRRS sưng to Hì nh Hạch lâm ba lợn mắc PRRS sưng, xuất huyết 3.3.2 Bệnh tích vi thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS Két xem bảng Bảng Bệnh tích vi thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS Phổi TT Lợn Xuất huyết Lợn sau cai +++ sữa Lợn sau cai ++ sữa Lợn choai ++ Lợn choai +++ Lợn choai + Ghi chú: + Có bệnh tích Cơ quan Hạch lâm Lách ba Viêm Hoại Nhồi Xuất tử huyết huyết Ruột Thận Lông nhung đứt nát Xuất huyết, viêm cầu thận Phế nang đứt nát Phế quản phế viêm ++ ++ +++ - ++ ++ + + + ++ - - + + + ++ + ++ ++ + + +++ ++ + + - + - + - + + + - Khơng có bệnh tích Từ kết bảng cho thấy:Phổi tất lợn bệnh có bệnh tích vi thể chủ yếu thâm nhiễm viêm, lòng phế nang chứa đầy dịch rỉ viêm, tế bào viêm, thâm nhiễm phế bào II, phế nang bị nhăn, hình thành tế bào khổng lồ nhiều nhân đại thực bào bị phân hủy phế nang (Hình 10) Trong nang lâm ba có nhiều tế bào hồng cầu, xuất nhiều tế bào viêm (Hình 11) Thận thâm nhiễm tế bào viêm, tế bào thận bị thoái hoá, hoại tử, kẽ thận xuất huyết, tập trung nhiều hồng cầu bạch cầu… Cầu thận viêm có chứa dịch rỉ viêm, tế bào ống thận teo nhỏ, lòng ống rộng Lách nhồi huyết hoại tử, vách lách đứt nát, có xen kẽ tế bào thối hóa tế bào lành (Hình 12) Ruột xuất huyết, niêm mạc ruột bong tróc, lơng nhung đứt nát, xuất nhiều hồng cầu tổ chức ruột (Hình 13) 11 Hình 10 Vách phế nang ở phổi của lợn mắc PRRS bị đứt nát xuất huyết (HE x 10) Hình 12 Lách của lợn mắc PRRS bị xuất huyết, hoại tử (HE x 10) Hì nh 11 Nang lâm ba của lợn mắc PRRS bị hoại tử, thâm nhiễm tế bào viêm (HE x 20) Hì nh 15 Ruột của lợn mắc PRRS bị viêm, hoại tử, lông nhung đứt nát (HE x 40) IV KẾT LUẬN: Kết nghiên cứu chúng tơi góp phần khẳng định làm rõ thêm biến đổi bệnh lý lợn sau cai sữa lợn choai bị nhiễm PRRS Cũng giống bệnh truyền nhiễm khác, lợn mắc PRRS có triệu chứng sốt cao bỏ ăn Đối với lợn sau cai sữa, triệu chứng táo bón, mẩn đỏ da, chảy nước mũi tím tai triệu chứng có tỷ lệ nhiễm cao Cịn thở khó, chảy nước mũi, tím tai ho lại triệu chứng điển hình lợn choai mắc PRRS Những biến đổi bệnh lý đại thể lợn sau cai sữa lợn choai nhiễm PRRS xuất chủ yếu phổi Phổi viêm hoại tử gây đặc, nhục hóa, phổi có màu đỏ xám, mặt cắt lồi khô Biến đổi đại thể quan khác: ruột viêm, xuất huyết, hạch lâm ba sưng to gấp nhiều lần bình thường, xuất huyết lấm bề mặt Bệnh tích vi thể chủ yếu phổi thâm nhiễm tế bào viêm, vách phế nang nhăn; thận tập trung nhiều hồng cầu bạch cầu, cầu thận có nhiều dịch rỉ viêm; vách lách đứt nát, niêm mạc ruột bong tróc, lơng nhung đứt nát Ngồi cịn nhiều biến đổi bệnh lý nhiều quan khác, phụ thuộc vào tình trạng bệnh Các lợn sau cai sữa và lợn choai dùng nghiên cứu đã được chẩn đoán mắc PRRS bằng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang 12 TÀI LIỆU THAM KHẢO: Đàm Văn Phải (2008), “Nghiên cứu đặc điểm bệnh lý Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp lợn-PRRS”, Luận văn tốt nghiệp Thạc sỹ khoa học nông nghiệp Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Lê Văn Năm (2007), “Kết khảo sát bước đầu biểu lâm sàng bệnh tích đại thể bệnh PRRS số địa phương thuộc Đồng Bắc Việt Nam” Hội thảo PRRS bệnh liên cầu gây lợn 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội, tr 64-tr77 Nguyễn Hữu Nam, Nguyễn Thị Lan (2007), “Hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp”, Hội thảo PRRS bệnh liên cầu gây lợn 10/2007, Trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội Phạm Ngọc Thạch, Đàm Văn Phải (2007), “Một số tiêu lâm sàng, tiêu máu lợn mắc hội chứng rố loạn sinh sản hô hấp (bệnh tai xanh) số đàn lợn tỉnh Hải Dương Hưng Yên”, Hội thảo PRRS bệnh liên cầu khuẩn lợn, ngày 11/10/2007, ĐH Nông Nghiệp Hà Nội 5.Neumann EJ, Kliebenstein JB, Johnson CD, Mabry JW, Seilzinger AH, Green AL, Zimmerman JJ (2005) „„Assessmment of the economic impact of porcine reproductive and respiratory syndrome swine production in the United States”, J.Am.Vet.Med Assoss,227, pp 385- 392 6.Ropp, SL., Wees, C.E., Fang, Y., Nelson, E.A., Rossow, K.D., Bien, M., Arndt, B., Preszler, S., Steen, P., Christopher-Hennings, J., Collins, J.E., Benfield, D.A., Faaberg, K.S., 2004 “Characterization of emerging European-like porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates in the United States” Journal of Virology 78, 3684–3703 SH Done and DJ Paton (1995) “Porcine reproductive and respiratory syndrome: clinical disease, pathology and immunosuppression” Veterinary record 1995 Địa liên hệ: lanjp2000@yahoo.com 13 ... để làm miễn dịch huỳnh quang Kết trình bày bảng hình 4,5 Bảng Kết làm miễn dịch huỳnh quang xác định virut PRRS STT Kí hiệu Lợn sau cai sữa Lợn sau cai sữa Lợn choai Lợn choai Lợn choai + Có virut... lý lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS: 3.3.1 Bệnh tích đại thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS Kết xem bảng Bảng Bệnh tích đại thể lợn sau cai sữa lợn choai mắc PRRS S T T Kí hiệu Lợn sau cai. .. Trong nghiên cứu này, ứng dụng kỹ thuật miễn dịch huỳnh quang để chẩn đoán hội chứng rối loạn sinh sản hô hấp đàn lợn sau cai sữa lợn choai II VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU: 2.1 Nguyên liệu: