TỔNG QUAN về sắc ký LỎNG TƯƠNG tác THÂN nước HILIC

BỘ Y TẾ BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - ĐINH THÙY LINH 1201319 TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC-HILIC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2017 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI - - ĐINH THÙY LINH 1201319 TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC-HILIC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: PGS.TS Phạm Thị Thanh Hà ThS Vũ Ngân Bình Nơi thực hiện: Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất HÀ NỘI - 2017 TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com LỜI CẢM ƠN Để hồn thành khố luận này, nhận nhiều giúp đỡ từ thầy cơ, gia đình bạn bè Cho đến khố luận hồn thiện, tơi xin N Ơ H Đầu tiên, xin phép được gửi lời cảm ơn chân thành tới PGS.TS N Phạm Thị Thanh Hà ThS Vũ Ngân Bình- Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất Y U Trường Đại học Dược Hà Nội, người cô tận tình hướng dẫn, Qbảo, P Tơi động viên tơi suốt chặng đường khó khăn thực khóa luận T xin cảm ơn PGS.TS Vũ Đặng Hồng - Bộ mơn Hóa phân tích Độc chất thầy O dành thời gian tra cứu giúp đỡ tơi q trình tìm tài liệu Ạ Đ Tôi xin cảm ơn thầy cô Bộ mơn Hóa phân tích vàG N Độc chất tạo điều kiện cung cấp cho tài liệu cần thiết để giúp tơi hồnƯ thành khóa luận H Tôi xin cảm ơn Ban giám hiệu,Ncác phịng ban, thầy giáo Ầ Hà Nội-những người dạy bảo cán nhân viên trường Đại học Dược R T trang bị cho kiến thức khoa học tảng suốt năm học qua B mái trường 0 Và cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn thân thương đến ba mẹ, gia đình, bạn bè A Ó cảm ơn tập thể lớp M1K67 quan tâm, giúp đỡ nhiều thời H - khóa luận gian học tập thực Í L Một lần- nữa, xin chân thành cảm ơn tất tình cảm giúp đỡ mà N thầy cơ,Ágia đình, bạn bè dành tặng cho tơi suốt thời gian khó khăn vừa qua TO N À Đ www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN phép bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc chân thành đến họ N Ễ I D Hà Nội, ngày 18 tháng năm 2017 Sinh viên Đinh Thùy Linh www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com MỤC LỤC DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT N Ơ DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ H ĐẶT VẤN ĐỀ N Y U CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC Q P 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước T O 1.2 Nguyên lý sắc ký lỏng tương tác thân nước Ạ Đ 1.2.1 Pha động G N 1.2.2 Pha tĩnh Ư H 1.2.3 Cơ chế tách yếu tố ảnh hưởng .15 N Ầ 1.2.4 Hệ thống phát (Detector)R .20 T 1.3 Ưu nhược điểm HILIC 22 B 0 1.3.1 Ưu điểm 22 A 1.3.2 Nhược điểm 24 Ó HDỤNG THỰC TẾ CỦA SẮC KÝ HILIC 25 CHƯƠNG 2: ỨNG Í L 2.1 Ứng dụng - HILIC phân tích acid amin, peptid protein .25 2.2 Ứng ÁNdụng HILIC phân tích kháng sinh 27 2.3 TOỨng dụng HILIC phân tích nucleotid, nucleosid, nucleobase 28 N 2.4 Ứng dụng HILIC phân tích phospholipid .29 À Đ www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN DANH MỤC CÁC BẢNG N Ễ I D 2.5 Ứng dụng HILIC phân tích carbohydrat .30 2.6 Ứng dụng HILIC phân tích chất dẫn truyền thần kinh 31 2.7 Ứng dụng HILIC đối tượng phân tích khác .32 2.8 Thực tế ứng dụng HILIC Việt Nam 32 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 34 Kết luận .34 N Ơ H N TÀI LIỆU THAM KHẢO UY PHỤ LỤC www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Q NG B 0 A N Ễ I N À Đ TO ÁN Í -L HĨ 10 T N Ầ R HƯ O Ạ Đ P T DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Đề xuất 34 D www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT Tên tiếng Việt ACN Acetonitrile Acetonitril APCI Atmospheric Pressure Ion hóa áp suất khí www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Chemical Ionization N Ễ I D CAD Charged Aerosol Detector Detector Aerosol tích điện DMF Dimethyl Formamide Dimethyl Formamid SPE Solid Phase Extraction Chiết pha rắn UHPLC Utra-High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu siêu cao UY Q P ELSD Evaporative Light Scattering Detector tán xạ ánh sáng bay T Detector O Ạ ESI Electrospray Ionization Ion hóa phun điện tử Đ HILIC Hydrophilic Interaction Sắc ký lỏngG tương tác thân nước N Chromatgraphy Ư H HPLC High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu cao N Ầ Chromatography LOD Limit of Detection TR Giới hạn phát LOQ Limit of Quantitation 0B Giới hạn định lượng MP Mobile Phase Pha động MS Mass Spectrometry Khối phổ A Ó Liquid NPLC Normal Phase Sắc ký lỏng pha thuận H Chromatography Í RID Refrective Detector số khúc xạ - L Index Detector RPLC NReversed Phase Liquid Sắc ký lỏng pha đảo Á Chromatography O T TFA Trifluoroacetic acid Acid triflouroacetic N Tetrahydrofurane Tetrahydrofuran ĐÀ THF N Ơ H N DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Tên tiếng Anh Chromatography www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Các cấu trúc khác pha tĩnh áp dụng cho việc phân tách HILIC www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN N Bảng 1.2 Các loại tương tác chất phân tích, pha tĩnh pha động 16 Ơ NH UY Q P T O Ạ Đ NG HƯ N Ầ TR B 0 A Ĩ H Í L ÁN TO N À Đ N Ễ I D www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ Hình 1.1 Cơ chế phân tách hệ thống HILIC 18 N Ơ H N www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Q UY NG B 0 A N Ễ I N À Đ TO ÁN Í -L HĨ 10 T N Ầ R HƯ O Ạ Đ P T DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Hình 1.2 Lớp điện tích kép bề mặt pha tĩnh liên kết 20 D www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com ĐẶT VẤN ĐỀ Trong nhiều năm gần đây, kỹ thuật sắc ký nói chung sắc ký lỏng nói riêng N Ơ trường, phân tích thuốc, lâm sàng Trong số kỹ thuật sắc ký lỏng, sắc ký phân H N bố kỹ thuật thông dụng chia làm hai loại dựa độ phânYcực Uliquid tương đối pha tĩnh pha động: sắc ký pha thuận - NPLC (normal phase Q P chromatography) sắc ký pha đảo - RPLC (reverse phase chromatography) Tuy T nhiên có thêm nhiều kỹ thuật sắc ký lỏng khác O nghiên cứu, sử Ạ dụng để mở rộng ứng dụng nhiều đối tượng phân tíchĐvà khắc phục nhược điểm kỹ thuật sắc ký truyền thống Một NG số kỹ thuật sắc ký lỏng tương tác thân nước - HILIC (hydrophilic interaction liquid Ư H chromatography) HILIC lần đềNxuất Alpert vào năm 1990 Kỹ thuật sắc kí sử dụng pha tĩnh phân cực Ầ với dung môi pha động phân cực R So với NPLC, HILIC cải thiện khả năngThịa tan chất phân tích nhờ sử dụng pha 0Bcơ sắc ký pha thuận So với RPLC, HILIC động chứa nước so với pha động hữu phân tích chất phân1cực, không lưu giữ cột sắc ký pha đảo Nhờ ưu điểm A mà HILIC ngày nhận nhiều quan tâm Ó H giới Tuy nhiên kĩ thuật số lượng dần trở nên phổ biến Í nước cịn Vì vậy, việc có hiểu biết đầy đủ kỹ thuật nghiên cứu L cầnNthiết để áp dụng kĩ thuật HILIC cách phù hợp hiệu Á TO N Vậy nên, khóa luận thực với mong muốn đem đến nhìn À Đ tổng quan HILIC, cung cấp hiểu biết khả ứng dụng www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN áp dụng nhiều lĩnh vực khác hóa sinh, sinh học, phân tích mơi N Ễ I D phân tích đặc biệt nghành Dược, nhằm tạo tảng cho việc ứng dụng kỹ thuật sắc ký HILIC điều kiện thực tế Việt Nam Khóa luận thực hiên với ba mục tiêu sau: Tìm hiểu nguyên lý, chế tách sắc ký HILIC www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Phân tích ưu nhược điểm phương pháp HILIC so với phương pháp sắc ký khác www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Q UY NG B 0 A N Ễ I N À Đ TO ÁN Í -L HÓ N Ầ R T 10 HƯ O Ạ Đ P T N Ơ H N DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN Tổng quan nghiên cứu ứng dụng HILIC ngành Dược D www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Nucleobase, nucleosid, nucleotid acetic/ACN ACN amoni acetat 12 nucleobase nucleosid ACN Nước tiểu Dịch chiết vi sinh vật 16 nucleosid nucleobase biển 10 Nucleosid nucleotid B 0 A Geosaurus Leech 14 nucleosid nucleobase ÁN 11 12 N À Đ TO Quả Ziziphus (Z jujuba, Z jujuba var spinosa and Z N Ễ DI HĨ 10 - Í L N Ầ R UY Acetonitril /nước acetonitrilvà đệm (0,20% acid formic 20 mmol/L amoni acetat) acetonitril 10 mM dung dịch acid ammoni acetat ACN T nucleosid dẫn xuất (hydroxyl hóa methyl hóa) 20 nucleobase, nucleosid A: 0,8% acetic nucleotid acid 10 mM amoni Q P zwitterionic MS silica-based monolithic capillary s (140 mm × 0,1 mm) amid pentahydroxy functionalized silica SP XBridge Amid UV NG HƯ N Ơ H N O Ạ Đ [109] T [136] [118] Venusil HILIC ESI(250 x 4,6 mm, TOF/M μm) S LOD 0,6130,0 ng/mL [52] TSKgel Amid80 (150 mm x 2,0 mm, 3,0 μm) ZIC-HILIC 0,07-30,49 ng/mL 0,26-60,98 ng/mL [60] ACQUITY MS UPLC BEH Amid (2,1 mm 0,11–3.12 ng.mL-1 and 0,29–12.48 [120] [75] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-16 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com mauritiana) 13 14 Hỗn hợp 27 oligonucleotid chuẩn acetattrong nước B: 0,1% acetic acid acetonitril A: mM amoni format (pH 5) 90/10 acetonitril Oligonucleotid Mẫu sinh học cytosine (Cyt) , methylcytosine (5mC), 5hydroxymethylcytosine (5hmC) B 0 A 15 16 Sữa bột trẻ sơ sinh công thức dinh dưỡng dành cho người lớn / trẻ em DI ỄN N À Đ - T ng.mL-1 T O Ạ 50 mm Đ × 4,6 mm ID × µm (100A˚ pore NG size) Ascentis Silica (BEH) HILIC (100 × 2,1 mm id, 1,7 µm) ESI-MS MS 10 nucleotid sau: adenosin 5'monophosphat (AMP), guanosin 5'-monophosphat (GMP), uridin 5'monophosphat (UMP), cytidin 5'-monophosphat (CMP) inosin 5'monophosphat (IMP) nucleotid (AMP, ADP, ÁN TO Í L HĨ N Ầ R A: amoni format 2,5 mM nước B: acetonitril Q P x 100 mm, 1,7 µm) HƯ UY N Ơ H N Amoni format (30 mmol/L) nước (pH 2,5 điều chỉnh acid formic) TSK-gel NH2100 MS ACN đệm bare TiO2 UV [94] pg/mL, pg/mL Cyt, 45 pg/ml, 90 pg/mL cho 5mC, 57 pg/ml, 100 pg/mL 5hmC LOD LOQ dung dịch chuẩn 0,005-0,01 0,010,03 μg/mL [50] [82] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn [147] PL-17 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Na phosphat ATP, UMP, UDP, UTP, GMP, GDP, GTP , CMP CTP) chất trung gian chúng (NAD, NADH, UDP-Glu UDPGluNAc) Oligonucleotid: acid polythymidylic có độ dài khác (10, 15, 20 30 nucleotid) 17 18 Purin, pyrimidin nucleosid 19 Mô gan 20 Isatidis Radix N Ễ DI 10 B 0 A Ó Xác định số H lượng nucleosid triphosphat Í biến đổi - L 2'-C ÁN N À Đ TO 16 nucleosid nơ-ron N Ầ R Q P (150 mm × 4,6 mm I.D., 3µm) NG O Ạ Đ UY N Ơ H N T MS HƯ T ACN, amoni format ACN ACN / nước (5:95 v/v) với 20 mM amoni acetat pH 9,45 ZIC-HILIC 150 x 2,1 mm, microm cột aminopropyl (100 mm x 2,0 mm, μm) Acquity UPLC ACN (0,1% acidacetic) nước BEH Amid (0,8% acid acetic 10 LOD 1,69 pmol, 1,21 pmol, 1,0 pmol 0,55 pmol cho 10, 15, 20 30 mer [10] MS [29] LC-MS / MS [38] LOQ: 0,0598.18 ng mL-1 [35] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-18 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com UY www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com mmol.L-1amoni acetat) NG B 0 A ÁN N Ễ DI N À Đ - Í L HĨ 10 TO T N Ầ R HƯ O Ạ Đ T Q P N Ơ H N DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-19 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Bảng 2.4 Ứng dụng HILIC phân tích phospholipid www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com STT Nền mẫu Đối tượng phân tích Pha động Phospholipid gốc oxy Sản phẩm trình oxy hóa hóa lipit chiết xuất từ đậu nành dầu thực vật, chất béo động vật dầu tảo Phospholipid A: acetonitril/nước 10% (v/v) 2,5 mmol/L amoni acetat B: methanol/nước 10% (v/v) 2,5 mmol/L amoni acetat O Ạ Đ Q P T Detector SupelcoESI-MS Ascentis (Supelco, Bellefonte, PA, USA) silica (15 cm ì 2,1 mm, àm), A: acetonitril/nước Sequant ZIC– ESI-MS (95:5) với 6,5 mM amoni cHILIC (150 format mm ì 2,1 mm, B: 2-propanol/nc àm, (50:50) với 6,5 mM amoni format B 0 N Ầ R NG LOD, LOQ Tham khảo [102] HƯ T [138] 10 Í L A Ĩ H A: acetonitril Khối u thận mơ bình thường Lipid Tảo xanh Jaoa bullata, Peridinium cinctum Vitis vinifera glycerophospholipid, glycosphyngolipid, glycolipid chất betain lipid N Ễ DI Pha tĩnh UY N Ơ H N ÁN N À Đ TO - B: mmol/L amoni acetat 10 mm amoni acetat/acetonitril Spherisorb Si (250 × 4,6 mm, µm) ESI-MS [62] DIOL MS [54] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-20 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com corvina Lipoprotein tỷ trọng thấp Sữa www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com UY phospholipid (Lysophosphatidylethanola min, Phosphatidylethanolamin, Phosphatidylcholin, Sphingomyelin, Lysophosphatidylcholin) Lipid phân cực Phospholipid: phosphatidylglycerol, phosphatidylethanolamin, phosphatidylinostol, phosphatidylcholin, phosphatidylserin, sphingomyelin lysophosphatidylcholin Phospholipid ÁN Sữa Nãothiênnga N Ễ DI N À Đ TO Phospholipid - Í L Silica HƯAscentis Express HILIC, A: acetonitril-amoni format (9:1, v/v; pH=5.5) B: acetonitril-methanolamoni format (55:35:10, v/v/v; pH=5.5) acetonitril, nước, amoni format acid formic B 0 A HÓ N Ầ R NG O Ạ Đ T T Q P ELSD N Ơ H N 10 ng 30 ng [73] MS [40] diol MS [150] partially porous (150 mm × 2,1 mm I.D., 2.7 m d.p) Silica(250mmì 3mm; 5àm) IT-TOF MS [67] MS [127] 150×4,6 mm I.D., 2.7 μm 10 nước/acetonitril acetonitril, methanol,amoniacetat 10 mM (55:35:10) DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-21 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com UY Các tế bào tiền nhân prokaryotic Các chất chuyển hóa lipid www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 10 A: acetonitril B: 10 mM amoni acetat/nước điều chỉnh pH với acid formic 50 mm×2,1 mm Kinetex 2,6 μm HILIC NG B 0 A ÁN N Ễ DI N À Đ - Í L HĨ 10 TO T N Ầ R HƯ O Ạ Đ T Q P MS N Ơ H N [11] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-22 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com UY Q P www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Bảng 2,5 Ứng dụng HILIC phân tích carbohydrat STT Nền mẫu Đối tượng phân tích Pha động Pha tĩnh Heparin Oligosaccharid A: 50 mM amoni acetat pH 9.0 với NH4OH B: ACN acetonitril Nước (30-85% acetonitril nước, v/v) thêm 0,1% Acid acetic, amoni acetat (5, 10, 20 30 mmol L-1) XBridge Amid 3,5µm (4,6 × 250 mm) Cột amid oligosaccharid có nguồn gốc tự nhiên dẫn xuất huỳnh quang maltooligosaccharid không dẫn xuất dẫn xuất với 2aminobenzoic acid, 2aminobenzamid, 2aminopyridin 8aminonaaphthalen1,3,6-trisulfonic acid Sữa non dê Các oligosaccharid acetonitril: nước với carbohydrat 0,1% amoni hydroxit B 0 A Í- ÁN N Ễ DI N À Đ -L HÓ NG O Ạ Đ LOD, LOQ Huỳnh quang MS HƯ MS BEH X-Bridge ); 150 mm × 4,6 mm; 3,5µm) MS N Ầ R T Detector N Ơ H N Tham khảo [70] [57] T 10 TO 140 đến 315 mg L-1 oligosacchar id trung tính từ 83 đến 251 mg L-1 oligosacchar [106] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-23 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com N Ơ H N UYid acid www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Sản phẩm trình biến đổi sinh học glycerol iminosugar carbohydrat phân tử Dịch chiết lượng thấp Aglaonema sp glycerol, arabitol mannitol Penicillium sp N Ễ DI A: nước, 0,05% trifluoroacetic acid B: acetonitril, 0,05% trifluoroacetic acid NG acetonitril: nước với mM amoni acetat B 0 ACQUITY ELSD BEH (Ethylene Bridged Hybrid) amid HILIC (2,1 150 mm, 1,7 mm, (XBridge MS (BEH); 150 mm × 4,6 mm, 3,5 µm, 135A˚ pore size N Ầ R T Các Glycosaminogly mmol/L NH4Ac A Oligosaccharid Ó H dextran A: nước:acetonitril oligosaccharid Í (5:95, v/v) 10 mM L acetat - amoni B:Nước 10 mM N amoni acetat Á SaccharidO ACN/Nước T N Galactooligosaccharid acetonitril: nước với À 0,1% ammoni hydroxit Đ O Ạ Đ HƯ T Q P 5,0 đến 8,0 13,0 đến 18,0 ng [12] [122] diol-HILIC MS [72] ACQUITY UPLC BEH GlyACN (2,1 × 150 mm, 1,7 μm TSKgel NH2100 BEH amid MS [48] IR [58] [77] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-24 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com 10 11 12 Tế bào thực vật Mô Arabidopsi s thaliana www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com Oligosaccharide Các chất chuyển hóa liên quan đến carbohydrat: hợp chất có chứa glucose (gluc), sucrose (Suc), raffinose, verbascose, mannitol, maltitol, glucose-6-phosphate (Glc6P) trehalose6-phosphate (Tre6P ) Disaccharid Heparan sulfate (HS) chondroitin sulfate / dermatan sulfate (CS / DS) glycosamin oglyACNs (GAGs) Chất làm aspartam (ASP), nhân alitame (ALI), neotam ÁN 13 ACN/Nước N Ễ DI N À Đ - n Acquity UPLC BEH Amid (1àm, 2,1 mm ì 150 mm) zwitterionic ZIC-HILIC (3,5 μm, 150 mm 2,1 mm) Acetonitril / nước (95: 5, v/v) B 0 NG N Ầ R Q ELSD-MS HƯ A: amoni format, pH 4,4 B: A trong90% acetonitril Amid (150 mm MS × 2,1 mm, 1,9 μm) amoni format pH 3,5methanol-acetonitril silica A Í L HÓ TP O Ạ ĐESI-MS T 10 UY N Ơ H N (LODs) từ 0,2 μM cho đường trung tính, 1,0 μM rượu đường 2,0 μM cho đường phosphates tích điện âm [93] [2] [72] TO DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn [22] PL-25 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com tạo 14 www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com (NEO), acesulfam (ACS), saccharin (SAC), cyclamat (CYC), sucralos (SCL) Neohesperidin dihydrochalcon (NHDC) carbohydrat Bia UY ethanol, isopropanol aceton B 0 A ÁN N Ễ DI N À Đ - Í L HĨ 10 TO N Ầ R T HƯ NG cột Asahipak NH2P-504E O Ạ Đ CAD N Ơ H N Q P T [81] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-26 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com UY N Ơ H N Q P www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Bảng 2,6 Ứng dụng HILIC phân tích chất dẫn truyền thần kinh STT Nền mẫu Đối tượng phân tích Pha động Pha tĩnh Nước tiểu người Chất dẫn truyền thần kinh monoamin (dopamin, norepinephrin, epinephrin serotonin) với tiền chất chất chuyển hóa tương ứng chúng Acid glutamic, glutamin, acid pyroglutamic, GABA theanin Chất dẫn truyền thần kinh monoamin nội sinh serotonin, dopamin, epinephrin norepinephrin A: 10 mM đệm amoni format nước pH 3,0 B: 10 mM đệm amoni format acetonitril A: 0,1% acid formic/nước B: 0,1% acid formic/ACN A: 0,1% acid formic nước–acetonitril (95:5, v/v) với mM NH4OAC B: 0,1% acid formic 95% acetonitril–nước (95:5, v/v) với1 mM NH4OAC ACN : H2O (90:10 v/v) 10 mM NH4COOH XBridge Amid™ BEH (3,0 × 100 mm, 3,5 μm) Mô não chuột Não chuột ÁN Dịch ốc sên Lymnaea stagnalis N Ễ DI N À Đ TO - Í L 0B A HÓ 20 hợp chất bao gồm chất dẫn truyền thần kinh, tiền chất chất chuyển 0 NG Tham khảo [92] MS [20] O MS Ạ Đ HƯ NTSKgel AmidẦ R 80 (2,0 μm, 2,0 T T Detector LOD, LOQ × 150 mm) BEH Amid APCIMS ZIC-cHILIC MS LOD: 0,3 nM đến 3,0 nM [148] [33] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-27 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Mẫu sinh học www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com hóa Acetylcholin, serotonin, dopamin, norepinephrin, glutamat, GABA glycin UY methanol nước (55:45, v/v, 20 mM ammoni format điều chỉnh pH 3,0 acid formic) Merck ZICHILIC (2,1 mm 100 mm, 3μm) NG MS O Ạ Đ HƯ Các chất dẫn truyền thần kinh monoamin Não chuột Thực phẩm Acetylcholin nội sinh ỄN Mơ người DI Ĩ (30:70, v/v) H - acetylcholin, betain, cholin, glycerophosphocholin, lysophosphatidylethanolam in, phosphatidylcholin, phosphatidylethanolamin, phosphatidylinositol, phosphocholin sphingomyelin Acetylcholine, cholin ÁN Í L - N À Đ TO N Ầ nước: acetonitrilR XBridge BEH đệm amoniT Amid XP format B 0 ammoni Atlantis HILIC 20 mM Silica (2,1 mm Aformat nước–acetonitril × 150 mm, A: acetonitril B:10 mM ammoni format pH 3,0 điều chỉnh acid formic A:20 mM N Ơ H N T QLOD: pg đối P với acetylcholin, serotonin, and glutamat, 10 pg dopamin, norepinephrin, GABA glycin MS MS μm) Ascentis MS Express (150 × 2,1 mm HILIC , 2,7 μm) Polyhydroxethy MS [132] [63] LLOD 0,2 ng / mL [116] [145] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn [142] PL-28 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com butyrobetain, (3carboxypropyl) trimethylammoni) 10 11 12 Microdialys ate mô da Acetylcholine Tế bào nuôi cấy Acetylcholine Dịc ngoại bào từ nao khỉ chất dẫn truyền thần kinh: acetylcholin, serotonin, dopamin, acid γaminobutyric (GABA), glutamat aspartat ÁN N Ễ DI N À Đ - Í L ammoni format với 0,1% acid formic (v/v) B: ACN 10 mM dd ammoni format nước (điều chỉnh pH 4.0 acid formic) /ACN (30:70, v/v) (10 mM) ammoni format/ACN (35/75, v/v) A: 10 mM ammoni acetat/ACN (10 + 90) pH 7,3 B: 30 mM ammoni acetat/ACN (80 + 20) pH 7,3 B 0 A HÓ 10 TO UY Q P l T ZIC-HILIC (150 2,1 mm, 3,5 µm) NG O ESI-MS Ạ Đ 0,075 fmol 0,25 fmol [13] (LOD) 1,5 fmol (0,3 nmol / L) LOD acetylcholin, serotonin, dopamin, GABA, glutamat aspartat tương ứng 0,015, 0,15, 0,3, 1,2, 15 femtomoles, [125] HƯ Nzwitterionic Ầ R ZIC-HILIC T N Ơ H N ZIC-HILIC (150 mm × 1.0 mm I.D.) MS MS [142] DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn PL-29 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial www.facebook.com/daykem.quynhon www.daykemquynhon.blogspot.com www.daykemquynhon.ucoz.com MailBox : nguyenthanhtuteacher@hotmail.com Q UY NG B 0 A N Ễ I N À Đ TO ÁN Í -L HĨ N Ầ R T 10 HƯ O Ạ Đ P T N Ơ H N DẠY KÈM QUY NHƠN OFFICIAL ST> : Đ/C 1000B TRẦN HƯNG ĐẠO TP.QUY NHƠN www.twitter.com/daykemquynhon https://plus.google.com/+DạyKèmQuyNhơn D PL-30 www.facebook.com/daykemquynhonofficial TIEU LUAN MOI download : skknchat123@gmail.com moi nhat Đóng góp PDF GV Nguyễn Thanh Tú www.facebook.com/boiduonghoahocquynhonofficial ... CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước N Ơ khác chế tách người ta chia sắc ký lỏng thành nhiều loại sắc ký H N phân bố, sắc ký hấp phụ, sắc. .. N Y U CHƯƠNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỎNG TƯƠNG TÁC THÂN NƯỚC Q P 1.1 Giới thiệu sắc ký lỏng tương tác thân nước T O 1.2 Nguyên lý sắc ký lỏng tương tác thân nước Ạ Đ 1.2.1 Pha... thuật sắc ký truyền thống Một NG số kỹ thuật sắc ký lỏng tương tác thân nước - HILIC (hydrophilic interaction liquid Ư H chromatography) HILIC lần đềNxuất Alpert vào năm 1990 Kỹ thuật sắc kí