(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam

(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam(Luận văn thạc sĩ) Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học của lipid trong loài rong lục Việt Nam

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Thu Thanh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN, HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LOÀI RONG LỤC VIỆT NAM LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC HỮU CƠ Hà Nội – 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Thu Thanh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN, HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LỒI RONG LỤC VIỆT NAM Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 8440114 LUẬN VĂN THẠC SĨ HÓA HỌC HỮU CƠ NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS Lê Tất Thành Hà Nội – 2021 i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng tơi hướng dẫn khoa học TS Lê Tất Thành Các kết nghiên cứu thu luận văn hồn tồn trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận văn DƯƠNG THỊ THU THANH ii LỜI CẢM ƠN Với lịng biết ơn chân thành sâu sắc, tơi xin gửi lời cảm ơn tới TS Lê Tất Thành, người thầy tận tình hướng dẫn khoa học, hướng nghiên cứu cho tôi, động viên giúp đỡ tơi suốt q trình thực luận văn Tôi xin chân thành cảm ơn anh chị, bạn đồng nghiệp Trung tâm Nghiên cứu Phát triển sản phẩm thiên nhiên - Viện Hóa học hợp chất thiên nhiên Nhóm nghiên cứu phát triển Cơng nghệ sinh - dược phịng Hệ gen học chức - Viện Nghiên cứu hệ Gen, Viện Hàm lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam giúp đỡ, đóng góp nhiều ý kiến quý báu suốt q trình thực luận văn Tơi xin chân thành cảm ơn thầy cô giáo, ban lãnh đạo Học viện Khoa học Công nghệ - Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam tận tình dạy giúp đỡ tơi suốt thời gian học tập Cuối cùng, xin chân thành cảm ơn gia đình bạn bè động viên tơi hồn thành tốt luận văn Xin trân trọng cảm ơn! Tác giả luận văn DƯƠNG THỊ THU THANH iii MỤC LỤC LỜI CAM ĐOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC HÌNH, SƠ ĐỒ v DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT vii MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Rong biển 1.1.1 Giới thiệu chung 1.1.2 Rong lục 1.2 Lipid 1.2.1 Các lớp chất lipid 1.2.2 Ứng dụng phương pháp khối phổ phân tích cấu trúc lipid 1.3 Phương pháp khối phổ 10 1.3.1 Nguyên lý khối phổ 10 1.3.2 Hoạt động cấu tạo chung máy khối phổ 10 1.3.3 Ứng dụng phương pháp khối phổ phân tích lipid 16 1.4 Một số nghiên cứu lớp chất lipid rong biển 16 1.5 Hoạt tính sinh học rong biển 20 CHƯƠNG II:NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGUYÊN CỨU 24 2.1 Đối tượng nghiên cứu 24 2.2 Dụng cụ, thiết bị, hóa chất 26 2.2.1 Dụng cụ, thiết bị 26 2.2.2 Dung mơi, hóa chất 27 2.3 Phương pháp nghiên cứu 27 2.3.1 Phương pháp thu bảo quản mẫu 27 2.3.3 Xác định hàm lượng tro toàn phần 28 2.3.4 Phương pháp xác định hàm lượng protein tổng số 29 iv 2.3.5 Phương pháp xác định hàm lượng carbohydrate 31 2.3.6 Phương pháp chiết lipid tổng 31 2.3.7 Phân tích thành phần hàm lượng lớp chất lipid 32 2.3.8 Phương pháp xác định thành phần hàm lượng acid béo lipid tổng 33 2.3.9 Phương pháp xác định dạng phân tử cấu trúc hợp chất 34 2.3.10 Phương pháp xác định hoạt tính kháng viêm 39 CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 40 3.1 Thành phần hóa học mẫu rong lục 40 3.2 Kết xác định thành phần hàm lượng lớp chất lipid lipid tổng mẫu rong nghiên cứu 43 3.3 Thành phần hàm lượng acid béo lipid tổng mẫu rong lục nghiên cứu 44 3.4 Kết xác định dạng phân tử lớp chất glycolipid 48 3.4.1 Xác định dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol (MGDG) 48 3.4.2 Xác định dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol (DGDG) 50 3.4.3 Xác định dạng phân tử sulfoquinovosyldiacylglycerol (SQDG) 53 3.5 Hoạt tính kháng viêm lipid lồi rong lục Halimeda incrassata Lamx 55 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 58 Kết luận 58 Kiến nghị 59 TÀI LIỆU THAM KHẢO 60 v DANH MỤC HÌNH, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Một số loài rong biển Hình 1.2 Cấu tạo phân tử lipid Hình 1.3 Cấu tạo lipid sở glycerol Hình 1.4 Cấu tạo lipid sở sphingozine Hình 1.5 Sơ đồ cấu tạo hệ thống khối phổ 11 Hình 1.6 Sơ đồ hoạt động hệ ESI-MS/MS 12 Hình 1.7 Sơ đồ nguyên lý kỹ thuật TOF 13 Hình 1.8 Sơ đồ nguyên lý kỹ thuật Iontrap 14 Hình 1.9 Sơ đồ máy quang phổ khối tứ cực 15 Sơ đồ 2.1 Thực nghiệm chiết lipid tổng 32 Sơ đồ 2.2 Thực nghiệm phân tích thành phần hàm lượng lớp chất lipid 33 Hình 3.1 Dạng cơng thức cấu tạo monogalactosyldiacylglycerol (MGDG) 48 Hình 3.2 HPLC-HRMS phân mảnh MGDG 30:0 [C39H74O10] 50 Hình 3.3 Dạng cơng thức cấu tạo digalactosyldiacylglycerol (DGDG) 50 Hình 3.4 HPLC-HRMS phân mảnh DGDG 32:0 [C47H88O15] 52 Hình 3.5 Dạng cơng thức cấu tạo sulfoquinovosyldiacylglycerol (SQDG) 53 Hình 3.6 HPLC-HRMS phân mảnh SQDG 32:0 [C41H78O12S] 55 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Danh sách mẫu rong lục nghiên cứu 24 Bảng 3.1 Thành phần hóa học mẫu rong lục nghiên cứu 40 Bảng 3.2 Kết hàm lượng lớp chất lipid tổng 43 Bảng 3.3 Thành phần hàm lượng acid béo mẫu nghiên cứu 44 Bảng 3.4 Thành phần dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol (MGDG) 49 Bảng 3.5 Thành phần dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol (DGDG) 51 Bảng 3.6 Thành phần dạng phân tử sulfoquinovosyl diacylglycerol (SQDG) 53 Bảng 3.7 Hoạt tính kháng viêm số phân đoạn lipid loài rong lục 56 vii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT Pol Polar lipid Lipid phân cực ST Sterol Sterol FFA Free fatty acid Acid béo tự TG Triacylglycerol Triacylglycerol DG Diacylglycerol Diacylglycerol MADG Monoalkyldiacylglycerol Monoalkyldiacylglycerol HW Hydrocarbon wax Hydrocarbon sáp MUFA Monounsaturated fatty acids Acid béo không no nối đôi PUFA Polyunsaturated fatty acids Acid béo không no đa nối đôi EPA Eicosapentaenoic acid Acid Eicosapentaenoic DHA Docosahexanenoic acid Acid Docosahexanenoic GC Gas chromatography Sắc ký khí GC-MS Gas chromatography spectroscopy MGDG Monogalactosyldiacylglycerol Monogalactosyldiacylglycerol DGDG Digalactosyldiacylglycerol Digalactosyldiacylglycerol SQDG Sulfoquinovosyldiacylglycerol Sulfoquinovosyldiacylglycerol PG Phosphatidylglycerol Phosphatidylglycerol PC Phosphatidylcholine Phosphatidylcholine PI Phosphatidylinositol Phosphatidylinositol EAA Essential amino acids Axit amin thiết yếu TLC Thin layer chromatography Sắc ký lớp mỏng mass Sắc ký khí khối phổ MỞ ĐẦU Rong biển sinh vật bậc thấp sống đáy biển với độ sâu từ vài mét đến hàng chục mét Cùng với cỏ biển, chúng đóng vai trị quan trọng hệ sinh thái biển, nơi cư trú cung cấp thức ăn cho loài động vật biển, giai đoạn non Chúng sinh vật trung gian q trình đồng hóa chất dinh dưỡng từ nước biển Những đặc điểm khiến chúng quan tâm nghiên cứu suốt thời gian qua Nước ta có khí hậu nhiệt đới có bờ biển kéo dài 3260 kilomet có nguồn tài ngun biển vơ phong phú Trong đó, rong biển nguồn tài nguyên sinh học đa dạng có trữ lượng lớn Các nghiên cứu nước đối tượng đầu kỷ 19 với nhiều cơng trình cơng bố nhà khoa học nước Trước đây, rong biển thường tập trung nghiên cứu nhiều hình thái, phân bố đặc tính sinh học Tuy nhiên nhiều năm trở lại đây, với phát triển khoa học kỹ thuật, thành phần sinh hóa rong biển nghiên cứu nhiều Các thành phần rong biển bao gồm carbohydrate 10-50%, protein 2-20%, khoáng 1-3%, lipid 0,2-2% số vitamin Trong rong biển, lipid chiếm tỷ lệ nhỏ có hàm lượng acid béo đa nối đơi cao, thêm vào số PUFA/SFA omega 3/omega cân đối Do vậy, nghiên cứu lipid rong biển ngày quan tâm nghiên cứu Các nghiên cứu hoạt tính sinh học rong biển cho thấy rong biển có khả kháng khuẩn, chống oxy hóa, kháng viêm có vai trị quan trọng việc điều trị số bệnh tim mạch, xương khớp, não Điều góp phần giải thích lý rong biển sử dụng làm thực phẩm nước châu Á Nhật Bản, Trung Quốc, Hàn Quốc, Việt Nam… ngày tăng tác dụng phòng chữa bệnh chúng Một thành phần quan trọng thể hoạt tính rong biển lipid Trong đó, acid béo đa nối đôi yếu tố quan trọng định tính chất lipid rong biển Chúng chủ yếu tìm thấy lớp lipid phân cực gồm phân lớp glycolipid, phospholipid ... tài: ? ?Nghiên cứu thành phần, hoạt tính sinh học lipid loài rong lục Việt Nam? ?? nhằm bổ sung kết nghiên cứu hóa sinh đối tượng rong biển Việt Nam nói chung rong lục nói riêng Bên cạnh đó, lần thành. .. dạng phân tử có hoạt tính sinh học Các nghiên cứu thành phần lipid dạng phân tử lipid giới Việt Nam hạn chế Báo cáo kết thành phần lipid, dạng phân tử hoạt tính lipid đối tượng rong lục khiêm tốn... VIỆN HÀN LÂM KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ VIỆT NAM HỌC VIỆN KHOA HỌC VÀ CÔNG NGHỆ - Dương Thị Thu Thanh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN, HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA LỒI RONG LỤC VIỆT NAM Chun ngành: Hóa