Nghiên cứu thành phần hóa học và hoạt tính gây độc tế bào của cây Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis) Việt Nam1152

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI Đinh Thị Phương Anh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA CÂY BẠCH TRINH BIỂN (HYMENOCALLIS LITTORALIS) VIỆT NAM LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÓA HỌC Hà Nội - 2014  TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI Đinh Thị Phương Anh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA CÂY BẠCH TRINH BIỂN (HYMENOCALLIS LITTORALIS) VIỆT NAM  :  62440114    PGS TS  TS  - 2014 LỜI CAM ĐOAN Tơi xin cam đoan cơng trình nghiên cứu riêng Các s ố liệu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác TÁC GIẢ Đinh Thị Phương Anh LỜI CẢM ƠN Đầu tiên tơi xin bày t ỏ lịng biết ơn chân thành sâu sắc tới tập thể cán hướng dẫn khoa học PGS.TS Vũ Đình Hồng TS Trần Bạch Dương Đây người gợi mở cho ý tưởng khoa học, hướng dẫn suốt thời gian nghiên cứu luận án tất tâm huyết quan tâm người thầ y Đặc biệt cám ơn thầy giáo, cô giáo, anh, chị, em Bộ môn Công nghệ Hóa dược & BVTV, Viện K ỹ thuật Hóa học, Trường Đại h ọc Bách khoa Hà Nội Trung tâm Hóa dược, Viện Hóa học Cơng nghiệp giúp đỡ r ất nhiều sở vật chất, trang thiết bị thí nghiệm, kỹ thu ật chiết xuất phân lập, k ỹ thuật phân tích, kiến thức thực nghiệm, … để tơi hồn thành tốt cơng trình nghiên cứu Tơi xin chân thành c ảm ơn thầ y, cô, anh, chị bạn đồng nghiệp thuộc Bộ môn Hóa H ữu cơ, Viện Kỹ thuật Hóa học, Trường Đại học Bách khoa Hà Nội tạo điều kiện giúp đỡ để tơi hồn thành cơng trình nghiên cứu Cám ơn em sinh viên học viên cao h ọc ngành Cơng nghệ Hóa dược & BVTV, Trường ĐHBKHN thuộc nhóm nghiên cứu PGS TS Vũ Đình Hồng giúp đỡ tơi nhi ều nghiên cứu làm thực nghiệm cho luậ n án Cuối cùng, xin chân thành c ảm ơn gia đình, người thân ln động viên tinh thần, thời gian vật ch ất để tơi có động lực công vi ệc nghiên cứu khoa học TÁC GIẢ Đinh Thị Phương Anh MỤC LỤC MỞ ĐẦU CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 Thực vật họ Thủy tiên (Amaryllidaceae), chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 1.1.1 Thực vật họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) 1.1.2 Thực vật chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis(Jacq.) Sablis.) 1.2 Thành phần hóa học họ Thủy tiên (Amaryllidaceae), chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 1.2.1 Thành phần hóa học họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) 1.2.2 Thành phần hóa học chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 11 1.3 Hoạt tính sinh học họ Thủy tiên (Amaryllidaceae), chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 27 1.3.1 Hoạt tính sinh học họ Thủy tiên (Amaryllidaceae) 27 1.3.2.Hoạt tính sinh học chi Bạch trinh (Hymenocallis) loài Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 30 CHƯƠNG 2: THỰC NGHIỆM 33 2.1 Mẫu thực vật 33 2.2 Phương pháp phân lập hợp chất 33 2.2.1 Sắc ký lớp mỏng (TLC) 33 2.2.2 Sắc ký cột (CC) 33 2.2.3 Sắc ký lỏng hiệu cao (HPLC) 33 2.3 Phương pháp xác định cấu trúc hợp chất 33 2.3.1 Phổ hồng ngoại (FT-IR) 34 2.3.2 Phổ khối lượng (ESI-MS) 34 2.3.3 Phổ khối lượng phân giải cao (FT-ICR- MS) 34 2.3.4 Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR) 34 2.3.5 Điểm nóng chảy 34 2.3.6 Độ quay cực riêng 34 2.4 Phương pháp thử hoạt tính sinh học 35 2.5 Phân lập hợp chất 35 2.5.1 Xử lý mẫu thực vật chiết tách Bạch trinh biển 35 2.5.2 Phân lập hợp chất từ cặn HLF 36 2.5.2.1 Phân lập hợp chất HLB2, HLB4, HLB5 từ cặn HLF 36 2.5.2.2 Phân lập hợp chất HLB1, HL53, HLB12, HLB13 HLB14 38 2.5.3 Phân lập hợp chất 41 2.5.3.1 Phân lập hợp chất HLB8, HLB9, HLB10 HL22 41 3.5.3.2 Phân lập hợp chất HLB6, HLB7, HLB11 HLB17 42 2.6 Chuyển hóa số alkaloid 44 2.6.1 Axetyl hóa tazettine 44 2.6.2 Axetyl hóa lycorine 45 2.6.3.Axetyl hóa haemanthamine 45 2.7 Hằng số vật lý liệu phổ hợp chất phân lập 46 2.7.1 Hợp chất HLB1 46 2.7.2 Hợp chất HLB2 47 2.7.3 Hợp chất HLB4 47 2.7.4 Hợp chất HLB13 48 2.7.5 Hợp chất HL53 49 2.7.6 Hợp chất HLB5 49 2.7.7 Hợp chất HLB12 50 2.7.8 Hợp chất HLB14 50 2.7.9 Hợp chất HLB6 51 2.7.10 Hợp chất HLB7 51 2.7.11 Hợp chất HLB8 52 2.7.12 Hợp chất HLB9 53 2.7.13 Hợp chất HLB10 54 2.7.14 Hợp chất HLB11 54 2.7.15 Hợp chất HLB17 55 2.7.16 Hợp chất HL22 56 2.8 Hằng số vật lý liệu phổ dẫn xuất axetyl hóa alkaloid 57 2.8.1 Hợp chất TA2 57 2.8.2 Hợp chất LY1 58 2.8.3 Hợp chất LY2 58 2.8.4 Hợp chất HA1 59 2.9 Hoạt tính sinh học cặn chiết, hợp chất phân lập bán tổng hợp 60 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 63 3.1 Mẫu thực vật 63 3.2 Phân lập hợp chất 63 3.3 Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập từ Bạch trinh biển 63 3.3.1 Hợp chất HLB1 63 3.3.2 Hợp chất HLB2 66 3.3.3 Hợp chất HLB4 68 3.3.4 Hợp chất HLB13 69 3.3.5 Hợp chất HL53 (chất mới) 71 3.3.6 Hợp chất HLB5 78 3.3.7 Hợp chất HLB12 79 3.3.8 Hợp chất HLB14 81 3.3.9 Hợp chất HLB6 82 3.3.10 Hợp chất HLB7 84 3.3.11 Hợp chất HLB8 86 3.3.12 Hợp chất HLB9 88 3.3.13 Hợp chất HLB10 90 3.3.14 Hợp chất HLB11 92 3.3.15 Hợp chất HLB17 93 3.3.16 Hợp chất HL22 (chất mới) 95 3.4 Tổng hợp dẫn xuất số alkaloid phân lập từ Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis (Jacq.) Sablis.) 102 3.4.1 Hợp chất TA2 105 4.4.2.Hợp chất LY1 107 4.4.3.Hợp chất LY2 108 4.4.4.Hợp chất HA1 110 3.5 Hoạt tính gây độc tế bào Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis) 112 3.5.1 Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết, hợp chất phân lập 113 3.5.1.1 Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết 113 3.5.1.2 Hoạt tính gây độc tế bào flavonoid chromone 113 3.5.1.3 Hoạt tính gây độc tế bào alkaloid 115 3.5.2 Hoạt tính gây độc tế bào dẫn xuất axetyl hóa alkaloid 116 KẾT LUẬN 121 TÀI LIỆU THAM KHẢO 123 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CÔNG BỐ 141 PHỤ LỤC 142 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT h Giờ IC50 Nồng độ ức chế 50% đối tượng thử TBƯT Tế bào ung thư DMSO Dimethyl sunfoxide OD mật độ quang học (Optical Density) SRB Sulforhodamine B FBS Fetal bovine serum NCI National Cancer Institute TCA Trichloracetic acid MeOH Methanol EtOH Ethanol EtOAc Ethyl acetate CHCl3 Chloroform δ Độ chuyển dịch hóa học J Hằng số tương tác ĐC Đối chứng TLC Thin Layer Chromotography (Sắc ký lớp mỏng) Nuclear magnetic resonance (Phổ cộng hưởng từ hạt nhân) Infrared spectroscopy (Phổ hồng ngoại) Electrospray Ionization Mass Spectrometry (Phổ khối lượng thơng qua ion hóa điện tử) Fourier Transform Ion Cyclotron Resonance Spectrometry (Phổ khối lượng phân giải cao) NMR IR ESI-MS FT-ICR-MS UV Ultraviolet (Tử ngoại) Mass DANH MỤC HÌNH VẼ, SƠ ĐỒ Hình 1.1 Cây Bạch trinh biển Sơ đồ 2.1: Sơ đồ chiết mẫu Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis) 36 Sơ đồ 2.2: Sơ đồ phân lập HLB2, HLB4 HLB5 37 Sơ đồ 2.3: Sơ đồ phân lập HLB1, HLB53, HLB12, HLB13 HLB14 39 Sơ đồ 2.4: Sơ đồ phân lập HLB8, HLB9, HLB10 HL22 41 Sơ đồ 2.5: Sơ đồ phân lập HLB6, HLB7, HLB11 HLB17 43 Sơ đồ 2.6: Sơ đồ phản ứng axetyl hóa tazettine 44 Sơ đồ 2.7: Sơ đồ phản ứng axetyl hóa lycorine 45 Sơ đồ 2.8: Sơ đồ phản ứng axetyl hóa haemanthamine 46 Hình 3.1: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB1 64 Hình 3.2: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB2 66 Hình 3.3: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB4 68 Hình 3.4: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB13 70 Hình 3.5: Phổ khối lượng ESI-MS HL53 71 Hình 3.6: Phổ khối lượng FT-CIR-MS HL53 72 Hình 3.7: Phổ 1H NMR HL53 73 Hình 3.8: Phổ 13C NMR HL53 74 Hình 3.9: Phổ HSQC HL53 74 Hình 3.10: Phổ HMBC HL53 75 Hình 3.11: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HL53 76 Hình 3.13: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB5 78 Hình 3.14: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB12 80 Hình 3.15: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB14 81 Hình 3.16: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB6 83 Hình 3.17: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB7 84 Hình 3.18: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB8 86 Hình 3.20: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB10 90 Hình 3.21: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB11 92 Hình 3.22: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HLB17 94 Hình 3.23: Phổ khối lượng FT-CIR-MS HL22 96 Hình 3.24: Phổ 1H NMR hợp chất HL22 97 Hình 3.25: Phổ 1C NMR hợp chất HL22 98 Hình 3.26: Phổ DEPT hợp chất HL22 98 Hình 3.27: Phổ HSQC hợp chất HL22 99 Hình 3.28: Phổ HMBC hợp chất HLB9 100 Hình 3.29: Phổ HMBC hợp chất HL22 100 Hình 3.30: Tương tác xa HMBC (H→C) cấu trúc hóa học HL22 101 Sơ đồ 3.1 Phản ứng axetyl hóa haemanthamine, tazettine lycorine 104 Sơ đồ 3.2 Cơ chế phản ứng axetyl hóa 104 Hình 3.31: Cấu trúc hóa học TA2 105 Hình 3.32: Cấu trúc hóa học LY1 107 Hình 3.33: Cấu trúc hóa học LY2 109 Hình 3.34: Cấu trúc hóa học HA1 111 57 E Furusawa, R H Lockwood, S Furusawa, M K M Lum, J Y B Lee (1979) Therapeutic activity of pretazettine, a narcissus alkaloid, on spontaneous AKR leukemi Chemotherapy, 25(5), pp 308-315 58 E Furusawa, H Irie, D Combs, W C Wildman (1980) Therapeutic activity of pretazettine on Rauscher leukemia: comparison with the related Amaryllidaceae alkaloids Chemotherapy, 26(1), pp 36-45 59 E Furusawa, M K M Lum, S Furusawa (1981) Therapeutic activity of pretazettine on Ehrlich ascites carcinoma: adjuvant effect on standard drugs in ABC regime Chemotherapy, 27(4), pp 277-286 60 E Furusawa, S Furusawa, L Sokugawa (1983) Therapeutic activity of pretazettine, standard drugs, and the combinations on intraperitoneally implanted Lewis lung carcinoma in mice Chemotherapy, 29(4), pp 294-302 61 E.Furusawa, S Furusawa (1986) Therapeutic potentials of pretazettine, standard anticancer drugs, and combinations on subcutaneously implanted Lewis lung carcinoma Chemotherapy, 32(6), pp 521-529 62 E Furusawa, S Furusawa (1988) Effect of pretazettine and viva- natural, a dietary seaweed extract, on spontaneous AKR leukemia in comparison with standard drugs Oncology, 45(3), pp 180-186 63 L.De Gara, C Paciolla, F Tommasi, R Liso, O Arrigoni (1994) In vitro inhibition of galactono-γ-lactone conversion to ascobate by lycorine J Plant Physiol., 144, pp 649-653 64 S Ghosal, Y Kumar, S P Singh (1984) Glucosyloxy alkaloids from Pancratium biflorum Phytochemistry, 23, pp 1167-1171 65 S Ghosal, K S Saini, S Razdan (1985) Crinum alkaloids: their chemistry and biology Phytochemistry, 24(10), pp 2141- 2156 66 S Ghosal, A Shanthy, A Kumar, Y Kumar (1985) Palmilycorine and lycoriside: axyloxy and alkaloids from Crinum asiaticum Phytochemistry, 24(11), pp 27032076 129 67 S Ghosal, S Saini Kulwant, R Sushma (1985) Crinum alkaloid: their chemistry and biology Phytochemistry, 24(10), pp 2141-2156 68 A G Gonz´alez, F Le´on, L S´anchez-Pinto, J.I Padr´on, J Bermejo (2000) Phenolic compounds of Dragon’s blood from Dracaena draco J Nat Prod., 63, pp 1297-1299 69 A G Gonz´alez, F Le´on, J.C Hern´andez, J.I Padr´on, L S´anchez-Pinto, J Bermejo (2004) Flavans of dragon’s blood from Dracaena draco and Dracaena tamaranae Biochem System Ecol., 32, pp 179-184 70 C Griffin, N Sharda, D Sood, J J Nair, J McNulty, S Pandey (2007) Selective cytotoxicity of pancratistatin-related natural Amaryllidaceae alkaloids: evaluation of the activity of two new compounds Cancer Cell Int., 7, pp 10 71 C Griffin, A Karnik, J McNulty, S Pandey (2011) Pancratistatine Selectively Target Cancer Cell Mitochondria and reduces growth of human conlon tumor xenografts Molecul Cancer Therapeut., 10(1), pp 57-68 72 C Griffin, C Hamm, J McNulty, S Pandey (2010) Pancratistatin induces apoptosis in clinical leukemia samples with minimal effect on non-cancerous peripheral blood mononuclear cells Cancer Cell Int., Canada, 10, pp 73 M F Grundon (1982) The alkaloids The Royal Society of Chemistry, 12, pp 300 74 M F Grundon (1987) Amaryllidaceae alkaloids Nat Pro Rep., 4, pp 89-94 75 H M Hammoda, A H Abou-Donia, S M Toaima, E A Shwaky (2011) Acetylcholinesterase inhibitory activity of some Amaryllidaceae plant extracts and their alkaloidal isolates Alex J Pharm Sci., 25, pp 26-28 76 A Hans, S Markus, A C Manuel (1988) Flavonoid and other constituents of Bauhinia manca Phytochemistry, 27(6), pp 1835-1841 130 77 R D Haugwitz, P.W Jeffs, E Wenkert (1965) Proton Magnetic Resonance Spectral Studies of Some Amaryllidaceae Alkaloids of the 5,10b-Ethanophenanthridine Series and of Criwelline and Tazettine J Chem Soc., pp 2001-2009 78 M R Herrera, A K Machocho, R Brun, F Viladomat, C Codina, J Bastida (2001) Crinane and lycorane type alkaloids from Zephyranthes citrine Planta Med., 67(2), pp 191-193 79 J Hohmann, P Forgo, J Molnar, K Wolfard, A Molnar, T Thalhammer, I Mathe, D Sharples (2002) Antiproliferative Amaryllidaceae alkaloids isolated from the bubls of Sprekelia formosissima and Hymenocallis x festalis Planta Med., 68 (5), pp 454-457 80 D H Hua, S Saha, D J substituted Takemoto (1997) Anticancer activities of 2,5,8,9- 6-oxo-1,2,3,4,5,6-hexahydrophenanthridines on multi-drug-resistant phenotype cells Anticancer Res., 17(4A), pp 2435-2441 81 T Hudlicky, U Rinner, D Gonzalez, H Akgun, S Schilling, P Sciengalewic, T A Martinot and G R Pettit (2002) Total synthesis and biological evaluation of Amaryllidaceae alakaloids, Narcilasine, ent -7-deoxypancratistatin, and Truncated derivatives J Org Chem, 67, pp 8726-8743 82 M Ieven, D A VandenBerghe, I Mertens, A J Vlietinck, E Lammens (1979) Screening of higher plants for biological activities I Antimicrobial activity Planta Med., 36, pp 311-321 83 T Imai, S Karita, G Shiratori, M Hattori, T Nunome, K Ôba, M Hirai (1998) L Galactono-γ-lactone dehydrogenase from sweet potato: purification and cDNA sequence analysis Plant Cell Physiol.,39, pp 1350-1358 84 L Ingrassia, F Lefranc, V Mathieu, F Daro, R Kiss (2008) Amaryllidaceae Isocarbostyril Alkaloid and Their Derivatives as Promising Antitumor Agents Translat Oncol., 1(1), pp 1-13 85 B Jaume, B Strahil, T Laura, B Pigni Jean Paulo de Andrade Natalia, M Vanessa, C Carles, V Francesc (2011) Chemical and biological aspects of Amaryllidaceae 131 alkaloids Recent advances in Pharmarceutical Sciences (Transworld Research Network), pp 65-100 86 B Jaume, V Francesc, M Llabres Jose, C Carles, F Miguel, R Mario (1987) Alkaloid from Narcissus confusus Phytochemistry, 26(5), pp 1519-1524 87 A Jimenez, A Santos, G Alonso, D Vázquez (1976) Inhibitors of protein synthesis in eukarytic cells Comparative effects of some amaryllidaceae alkaloids Biochim Biophys Acta., 425(3), pp 342-348 88 C.C Juan, G David, F Ninoska, G R Asngel, E.- B Ana (2012) Synthesis and antimalarial activity of new haemanthamine- type derivatives Bioorg Med Chem., 20, pp 5464-5472 89 H Karadeniz, B Gulmez, F Sahinci, A Erdem, G I Kaya, N Unver, B Kivcak, M Ozsoz (2003) Disposable electrochemical biosensor for the detection of the interaction between DNA and lycorine based on guanine and adenine signals J Pharm Biomed Anal 32(2), 295-302 90 L B S Kardono, C K Angerhofer, S Tsauri, K Padmawinata, J M Pezzuto, A D Kinghorn (1991) Cytotoxic and antimalarial constituents of the roots of Eurycoma longifolia J Nat Prod., 5(54), pp 1360-1367 91 M Kihara, T Koike, Y Imakura, K Kida, T Shingu, S Kobayashi (1987) Alkaloidal constituents of Hymenocallis rotata Herb (Amaryllidaceae) Chem Pharm Bull., 35(3), pp 1070-1075 92 N Kushida, S Atsumi, T Koyano, K Umezawa (1997) Induction of flat morphology in K-ras-transformed fibroblasts by lycorine, an alkaloid isolated from the tropical plant Eucharis grandiflora Drug Exp Clin Res., 23(5-6), pp 151-155 93 E Kuzniak (2004) Ascorbate and ascorbate-dependent enzymes in detached tomato leaves under conditions modulating the ascorbate pool Acta Physiol Plant., 26, pp 327-333 132 94 J Labrãna, G Choy, X Solans, M Font-Bardia, G de la Fuente (1999) Alkaloids from Narcissus bujei (Amaryllidaceae) Phytochemistry, 50(1), pp 183-188 95 D Lamoral-Theys, A Andolfi, A Evidente (2009) Lycorine, the main phenathridine Amaryllidaceae alkaloid, exhibits significant anti-tumor activity in cancer cells that display resistance to proapoptotic stimuli: an investigation of structure-activity relationship and mechanistic insight J Med Chem., 52(20), pp 6244-6256 96 P De Leo, G Dalessandro, A De Santis, O Arigoni (1973) Metabolic responses to lycorine in plants Plant Cell Physiol 14, pp 487-496 97 J R Lewis (1990) Amaryllidaceae alkaloids Nat Pro Rep., 7, pp 549-556 98 J R Lewis (1998) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids Nat Prod Rep., 15, pp 107-110 99 J R Lewis (2001) Amaryllidaceae, Sceletium, imidazole, oxazole, thiazole, peptide and miscellaneous alkaloids Nat Prod Rep., 19, pp 95-128 100 Y Li, J Liu, L J Tang, Y W Shi, W Ren, W X Hu (2007) Apoptosis induced by lycorine in KM3 cells is associated with the G0/G1 cell cycle arrest Oncol Rep., 17(2), pp 377-384 101 L-Z Lin, S-F Hu, H- B Chai, T Pengsuparp, J M Pezzuto, G A Cordell, N Ruangrungsi (1995) Lycorine alkaloids from Hymenocallis littoralis Phytochemistry, 40(4), pp 1295-1298 102 K Likhitwitayawuid, C K Angerhofer, H Chai, J M Pezzuto, G A Cordell and N Ruangrungsi (1993) Cytotoxic and antimalarial alkaloids from the bulbs of Crinum amabile J Nat Prod., 56(8), pp 1331-1338 103 J Liu, W-X Hu, L-F He, M Ye, Y Li (2004) Effects of lycorine on HL-60 cells via arresting cell cycle and inducing apoptosis FEBS Lett., 578(3), pp 245-250 104 C A M Louw, T J C Regnier, L J Korsten (2002) Ethnopharmaco 82, pp 147 133 105 M Masaoud, H Ripperger, A Porzel, G Adam (1995) Cinnabarone, abioflavonoid from Dragon’s blood of Dracaena cinnabari Phytochemistry, 38, pp 751-753 106 A McLachlan, N Kekre, J McNulty, S Pandey (2005) Pancratistatin: a natural anti-cancer compound that targets mitochondria specifically in cancer cells to induce apoptosis Apoptosis, 10(3), pp 619-630 107 J McNulty, J J Nair, J Bastida, S Pandey, C Griffin (2009) Structure-activity studies on the lycorine pharmacophore: A potent inducer of apoptosis in human leukemia cells Phytochemistry, 70(7), pp 913-919 108 J McNulty, J J Nair, J R L Little, J D Brennan, J Bastida (2010) Structureactivity studies on acetylcholinesterase inhibition in the lycorine series of Amaryllidaceae alkaloids, Bioorg Med Chem Lett., 20(17), pp 5290-5294 109 A W Meerow, C.L Guy, Q Li & J.R Claiton (2002) Phylogeny of the tribe Hymenocallideae (Amaryllidaceae) based on morphology and molecular characters Ann Missouri Bot Gard, 89(3), pp 400-413 110 K H Michel, F Sandberg (1968) Occurrence of tyramine and N-methyltyramine in Haloxylon salicornicum (Moq.-Tand.) Boiss Acta Pharm Suec., 5(2), 67-70 111 M Mikami, M Kitahara, M Kitano, Y Ariki, Y Mimaki, Y Sashida, M.Yamazaki, S Yui (1999) Suppressive activity of lycoricidinol (narciclasine) against cytotoxicity of neutrophil-derived calprotectin, and its suppressive effect on rat adjuvant arthritis model Biol Pharm Bull., 22(7), pp 674-678 112 B S Min, J J Gao, N Nakamura, Y H Kim, M Hattori (2001) Cytotoxic alkaloids and a flavan from the bulbs of Crinum asiaticum var Japonicum Chem Pharm Bull., 49(9), 1217-1219 113 W Ming -Chun, P Chien-Fang, C Ih-Sheng, T Ian-Lih (2011) Antitubercular Chromones and Flavonoids from Pisonia aculeate J Nat Prod., 74, pp 976-982 134 114 A Monks, D Scudiero, P Skehan, R Shoemake, K Paull, D Vistica, C Hose, J Langley, P Cronise, H Campbell, J Mayo, M Boyd (1991) Feasibility of a highflux anticancer drug screen using a diverse panel of cultured human tumor cell lines J Nat Can Ins., 11(83), pp 757-766 115 J J Nair, W E Campbell, D W Gammon, C F Albrecht, F Viladomat, C Codina, J Bastida (1998) Alkaloids from Crinum delagoense Phytochemistry, 49(8), pp 2539-2543 116 G Newton (1985) Hymenocallis from seed Herbertia, 41, pp 83-85 117 M Nikolova, R Gevrenova (2005) Determination of Phenolic Acids in Amaryllidaceae Species by High Performance Liquid Chromatography Pharm Biol., 43(3), pp 289-291 118 S Nocentini (1976) Inhibition and recovery of ribosomal RNA synthesis in ultraviolet-irradiation mammalian cells Biochim Biophys Acta., 454(1), pp.114128 119 Y Ohtsuri, K Shibata, K Yamashita, M Tsukaycima, Y Kawamura (1998) 13 C NMR spectral assigment of A-ring of polyoxygenated Phytochemistry, 47(5), pp 865-874 120 E J Osorio, S M Robledo, J Bastida (2008) Alkaloids with antiprotozoal activity Alkaloids Chem Biol., 66, pp 113-190 121 J Houghton Peter, M Osibogun Ibironke, Z Woldemariam Tibebe, Jones Keith (1995) Heteronclear NMR Studies of the Chromone Alkaloids and the Revision of the Structure of Some Piperidino-Chromone Alkaloids Planta Med., 61, pp 154-157 122 G R Pettit, V Gaddamidi, G M Cragg, D L Herald, Y Sagawa (1984) Isolation and structure of pancratistatin J Chem Soc Chem Commun., 24, pp 1693-1694 123 G R Pettit, V Gaddamidi, A Goswami, G M Cragg (1984) Antineoplastic agents, 99 Amaryllis belladonna J Nat Prod., 47(5), pp 796-801 135 124 G R Pettit, G R Pettit III, G Groszek, R A Backhaus, D L Donbek, R J Barr and A W Meerow (1995) Antineoplastic agents 301 An investigation of the genus Hymenocallis salibury (Amaryllidaceae) J Nat Prod., 58, pp 756-759 125 K D Preuss (2003) Spider lilies for the South Bulbs, 4(2), pp 27-31 126 Atta-ur-Rahman (2005) Studies in Natural Products Chemistry Eksevier, 31(Part A), pp 3-1362 127 M Rainer (1997) Clinical studies with galanthamine Drugs Today, 33, pp 273279 128 M Ramadan, M Kamel, K Ohtani, R Kasai, K Yamasaki (2000) Minor flavonoids from Crimun bulbispertum bulbs Phytochemistry, 54, pp 891-896 129 E V Rao, M V Devi, R V Krishna Rao (1969) Occurrence of tazettine and haemanthamine in the bulbs of Hymenocallis Concinna Backer Current Sci (Letter to the Editor), 38 (14), pp 341 130 S M Razavi, S Zahri, G Zarini, H Nazemiyeh, S Mohammadi (2009) Biological activity of quercetin-3-O-glucoside, a known plant flavonoid Russ J Bioor Chem., 35(3), pp 414-416 131 J Renard-Nozaki, T Kim, Y Imakura, M Kihara, S Kobayashi (1989) Effect of alkaloids isolated from Amaryllidaceae on herpes simplex virus Res.Virol., 140(2), pp 115-128 132 N Rivero, M Gómez, J D Medina (2004) Search for bioactive alkaloids in Hymenocallis species Pharm Biol., 42, pp 280-285 133 T Robinson (1981) The Biochemistry of Alkaloids (2nd edn) Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, pp.225 134 D A Scudiero, R H Shoemaker, K D Paull, A Monks, S Tierney, T H Nofziger, M J Currens, D Seniff, M R Boyd (1988) Evaluation of a soluble 136 Tetrazolium/Formazan assay for cell growth and drug sensivity in culture using human and other tumor cell lines Cancer Research 48, pp 4827-4833 135 C E Seaforth (1998) Folk healing plants used in the Caribbean Al Falaah, Trincity, Trinidad 136 G Schmeda- Hirschmann, L Astudillo, J Bastida, F Viladomat, C Codina (2000) DNA binding activity of Amaryllidaceae alkaloids Bol Soc Chil Quím., 45, 515518 137 A G Schultz, M A Holoboski, M S Smyth (1996) The First Asymmetric Total Syntheses of (+)-Lycorine and (+)-1-Deoxylycorine J Am Chem Soc.,118 (26), pp 6210-6219 138 B Sener, S Konukol, C Kruk, U Pandit (1994) Alkaloids of Amaryllidaceae II Alkaloids from the bulbs of Pancratium maritimum J.Chem Soc Pak., 16, pp 275279 139 B Sener, S Konukol, C Kruk, U Pandit (1998) Alkaloids of Amaryllidaceae III Alkaloids from the bulbs of Pancratium maritimum, Nat Prod Sci., 4, pp 148-152 140 B Sener, M Koyuncu, F Bingöl, F Muhtar (1999) Production of Bioactive Alkaloids from Turkish Geophytes IUPAC International Conference on Biodiversity and Bioresources: Conservation and Utilization Phuket, Thailand, pp 1-6 141 B Sener, I Orham, J Satayavivad (2003) Antimalarial activity screening of some alkaloids and the plant extracts from Amaryllidaceae Phytother Res., 17(10), pp 1220-1223 142 R H Shoemaker, D A Scudiero, E A Suasville (2002) Application of highthroughput, molecular - targeted screening to anticancer drug discovery Curr Top Med Chem., 2(3), pp 229-246 143 J Jr Sleznick (1996) Hymenocallis ‘Sulphur Queen’ Herbertia, 51, pp 126-127 144 P F Stevens (2001) Angiosperm Amaryllidacea 137 Phylogeny Website: Asparagales: 145 R Suau, I G Ana, R Rodrigo (1990) Ismine and related alkaloids from Lapiedra maritinezii Phytochemistry, 29(5), pp 1710-1712 146 N Suzuki, S Tani, S Furusawa, E Furusawa (1974) Therapeutic activity of narcissus alkaloids on Rauscher leukemia: antiviral effect in vitro and rational drug combination in vivo Proc Soc Exp Biol Med., 145(3), pp 771-777 147 L Szlávik, A J Guyris, A Gyuris, J Minárovits, F Peter, J Molnár, J Hohmann (2004) Alkaloids from Leucojum vernum and antiretroviral activity of Amaryllidaceae alkaloids Planta Med., 70, pp 871-873 148 M Tanker, G Çitoglu, B Gumusel, B Sener (1996) Alkaloids of Sternbergia clusiana and their analgesic effects Int J Pharmacogn., 34(3), pp 194-197 149 P Tato, L Castedo, R Riguera (1988) New alkaloids from Pancratium maritimum, Heterocycles, 27, pp 2833-2838 150 Y Toriizuka, E Kinoshita, N Kogure, M Kitajima, A Ishiyama, K Otoguro, H Yamada, S Omura, H Takayama (2008) New lycorine-type alkaloid from Lycoris traubii and evaluation of antitrypanosomal and antimalarial activities of lycorine derivatives Bioorg Med Chem., 16(24), pp 10182-10189 151 H P Traub (1962) Key to the subgenera, alliances and species of Hymenocallis Plant Life, 18, pp 55-72 152 Y Tsuda, S Uyeo (1961) The structure of products derived from tazettine with acetic anhydride and sunfuric acid J Chem Soc., pp 1055-1065 153 M C De Tullio, L De Gara, C Paciolla, O Arrigoni (1998) Dehydroascorbate reducing proteins in maize are induced by the ascorbate biosynthesis inhibitor lycorine Plant Physiol Biochem., 36, pp 433-440 154 L G Wade (2006) Organic Chemistry Pearson Education, Inc., sixth edition, pp 983 155 B Weniger, L Italiano, J P Beck, J Bastida, S Bergoñon, C Codina, A Lobstein, R Anton (1995) Cytotoxic activity of Amaryllidaceae alkaloids Planta Med., 61(1), pp 77-79 138 156 G Wilcock, D Wilkinson (1997) Galanthamine hydrobromide: Interim of a group comparative, placebo-controlled studry of efficacy ad safety in patients with a diagnosis of senile dementia of the Alzheimer in K Iqbal, B Winblad, T Nishimura, M Takeda, and H M Wisniewski (eds.) Alzheimer's Disease: Biology, Diagnosis and Therapeutics, John Wiley & Sons, West Sussex, p 661- 664 157 E C William, J N Jerald, W G David, B Jaume, C Caries, V Francesc, J S Peter, F A Carl (1998) Cytotoxic and Antimalarial Alkaloids from Brunsvigia littoralis Planta Med., 64, pp 91-93 158 J J Williams, G Schubert Bernice (1961) Alkaloid bering plants and their contained alkaloids Tech Bull., 1234, pp 15-16 159 T Wing-Yan, D Brown Geoffrey (1996) Chromones and chromanones from Baeckea frutescens Phytochemistry, 43(4), pp 871-876 160 M S Wu, C F Peng, I S Chen, I L Tsai (2011) Antitubercular chromones and flavonoids from Pisonia aculeate J Nat Prod., 74(5), pp 976-982 161 D T A Youssef, A Frahm (1998) Alkaloids of the flowers of Pancratium maritimum Planta Med., 64, pp 669-670 162 D T A Yousseff, M A Ramadan, et al (1998) Acetophenones, a chalcone, a chromone and flavonoids from Pancratium maritimum Phytochemistry Oxford, 49(8), pp 2579-2583 163 D T A Youssef (1999) Further alkaloids from the flowers of Pancratium maritimum, Pharmazie., 54, pp 535-537 164 S Yui, M Mikami, M Kitahara, M Yamazaki (1998) The inhibitory effect of lycorine on tumor cell apoptosis induced by polymorphonuclear leukocyte-derived calprotectin Immunopharmacology, 40(2), pp 151-162 165 S Yui, M Mikami, Y Mikami, Y Sashida, M Yamazaki (2001) Inhibition effect of Amaryllidaceae alkaloids, lycorine and lycoricidinol on macrophage TNF-alpha production Yakugaku Zasshi, 121(2), pp 167-171 139 166 W Yue-Hu, W Qin- Li, G Cheng-Ding, L Huai-Rong, L Chun-Lin (2012) Synthesis and biological evaluation of lycorine derivatives as dual inhibitors of human acetylcholinesterase and butyrylcholinesterase Chem Cent J., 6(96), pp 1-6 167 J Zhong (2003) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids, Nat Pro Rep., 20, pp 606-614 168 J Zhong (2007) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids Nat Pro Rep., 24, pp 886-905 169 J Zhong (2009) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids Nat Pro Rep., 26, pp 363-381 170 J Zhong (2011) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids Nat Prod Rep., 28, pp 1126-1142 171 J Zhong (2013) Amaryllidaceae and Sceletium alkaloids Nat Prod Rep., 30, pp 849-868 172 J Zhong, Xu Xiao-Hua (2013) Amaryllidaceae Alkaloids Nat Pro Rep., pp 497522 140 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH ĐÃ CƠNG BỐ LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN Dinh Thi Phuong Anh, Nguyen Thi Nga, Tran Bach Duong, Vu Dinh Hoang, Ba Thi Cham, Tran Viet Hung (2012) Study on alkaloid constiutuents of Hymenocallis littoralis Tạp chí Hóa học, 50(5A), pp 373-376 Dinh Thi Phuong Anh, Tran Bach Duong, Vu Dinh Hoang (2012) Study on flavonoid constiutuents of Hymenocallis littoralis Tạp chí Khoa học Cơng nghệ Trường Đại học Kỹ thuật, 87(A), pp 27-30 Dinh Thi Phuong Anh, Nguyen Quoc Dat, Tran Bach Duong, Vu Dinh Hoang (2013) Futher study on alkaloid constituents of Hymenocallis littoralis Tạp chí Hóa học, 51(6), pp 791-794 Dinh Thi Phuong Anh, Tran Bach Duong, Vu Dinh Hoang (2014) Synthesis and cytotoxicity of some acetylated alkaloids of Hymenocallis littoralis Tạp chí Hóa học, 52(2), pp 152-156 Dinh Thi Phuong Anh, Tran Bach Duong, Vu Dinh Hoang (2014) A new chromen from Hymenocallis littoralis (Amaryllidaceae) Natural Product Research, [submitted] 141 PHỤ LỤC Phụ lục 3.1: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB1 Phụ lục 3.2: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB2 Phụ lục 3.3: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB4 Phụ lục 3.4: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB13 Phụ lục 3.5: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HL53 Phụ lục 3.6: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB5 Phụ lục 3.7: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB12 Phụ lục 3.8: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB14 Phụ lục 3.9: Phổ IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB6 10 Phụ lục 3.10: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB7 11 Phụ lục 3.11: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB8 12 Phụ lục 3.12: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB9 13 Phụ lục 3.13: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB10 142 14 Phụ lục 3.14: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB11 15 Phụ lục 3.15: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HLB17 16 Phụ lục 3.16: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HL22 17 Phụ lục 3.17: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất TA2 18 Phụ lục 3.18: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất LY1 19 Phụ lục 3.19: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất LY2 20 Phụ lục 3.20: Phổ IR, 1H-NMR, 13 C-NMR, DEPT 135, DEPT 90, HSQC, HMBC hợp chất HA1 21 Phụ lục 3.21: Kết thử hoạt tính gây độc tế bào 143 ... 110 3.5 Hoạt tính gây độc tế bào Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis) 112 3.5.1 Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết, hợp chất phân lập 113 3.5.1.1 Hoạt tính gây độc tế bào dịch chiết... TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA HÀ NỘI Đinh Thị Phương Anh NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH GÂY ĐỘC TẾ BÀO CỦA CÂY BẠCH TRINH BIỂN (HYMENOCALLIS LITTORALIS) VIỆT NAM ... alkaloid thành phần hóa học khác từ lồi Bạch trinh biển (Hymenocallis littoralis) Việt Nam; • Khảo sát hoạt tính gây độc tế bào cặn chiết tổng alkaloid thành phần hóa học khác; • Phân lập thành phần