KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf
... như bảng sau: Base Bước sóng (nm) Hệ số hấp thụ quang (của mỗi) mol ε (M -1 cm -1 ) 10 -3 A 259 15 ,4 T 253 13 ,7 G 2 71 9 ,1 C 16 0 7,4 U 16 2 10 ,0 Bảo quản ở −20 ºC. 10 ) TBE 20×: Tris 12 1 ,1 g, ... HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế 2006 II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phâ...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf
... (primer) 11 0 1. S1 mapping 11 0 2. Phương pháp nối dài mồi 11 1 2 .1. Phương pháp sử dụng DNA hai sợi 11 1 2.2. Phương pháp sử dụng primer tổng hợp 11 2 3. Mapping bằng riboprobe (riboprobe mapping) 11 3 V. ... phiên mã in vitro 11 5 1. Phương pháp điều chế dịch chiết thô tế bào HeLa 11 5 1. 1. Dịch chiết xuất toàn tế bào 11 5 1. 2. Dịch chiết xuất S -10 0 11 6 1. 3. Dịch chiế...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6 pdf
... tắc tương tự nhưng với những cải tiến dễ áp dụng hơn. 1. 1. Điều chế DNA khuôn 1. 1 .1. Phage hệ M 13 mp *Tái tạo dòng trong phage hệ M 13 mp: 1) Bằng T4 DNA ligase ta kết nối (ligate) đoạn DNA cần ... polyacrylamide 40% (ml)* 12 ,5 15 20 30 50 Nước, pha cho đủ (qs) (ml) qs 10 0 qs 10 0 qs 10 0 qs 10 0 qs 10 0 *Dịch polyacrylamide 40% được chế bằng cách trộn 19 0 g acrylamide...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 9 potx
... biết. Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết. 1 2 3 4 5 6 7 XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạo Để phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 8 pptx
... MgCl 2 12 ,5mM, DTT 1mM, glycerol 20% và Nonident P-40 0 ,1% . 1 4 0 ứng là 15 mM và 1% ). Để cho phản ứng ở 60 ºC trong 10 phút. 9) Sau phản ứng,chuyển dịch phản ứng (khoảng 1 ml) sang ống loại 10 ml. ... bằng 10 ml Tris-HCl 0,1M (pH 8,0), 3 lần bằng 10 ml sodium phosphate (pH 8,2) 0,1M, 3 lần bằng 10 ml hỗn hợp NaCl 1, 5M và Tris-HCl (pH 8,0) 10 mM và cuối cùng 3 lần bằn...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx
... tâm 10 phút, tráng tủa 2 lần trong ethanol 70%. 7) Làm khô bằng máy hút chân không. 2 .1. 2. A>C 1) Thêm 10 0 µl dung dịch NaOH 1, 2N - EDTA 1mM, cho phản ứng trong 4 phút ở 90 ºC. 2) Thêm 15 0 ... primer, 10 mM Tris-HCl (pH 8,3), và 0,25 M KCl. 2) Để ở 60 ºC trong 1 giờ rồi ở nhiệt độ phòng trong 1, 5 giờ để lai. 3) Pha sẵn (cho 10 phản ứng) 600 µl hỗn hợp chứa 10 µl...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 5 potx
... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... 72 Chương 3 KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN PHÂN TỬ I. Kỹ thuật lai Southern (Southern hybridization) Kỹ thuật chuyển/lai Southern (hay phương pháp Southern transfer/hybr...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc
... vào vector 1) Xác định trước khối lượng phân tử của cDNA. Làm phản ứng tổ hợp vào vector trong 3 ống. Trộn 1 µg DNA λgt 10 hoặc λgt 11 gắn đầu dính (arm-DNA λgt 10 , arm-DNA λgt 11 ) với một ... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18 S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống. 7...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx
... 0,5-5,0 μl 0 ,1- 1,0 μM DNA eukaryote (10 0 ng/μl) 1, 0 μl 1, 0 μl 10 0 ng DNA prokaryote (10 ng/μl) 1, 0 μl 1, 0 μl 10 ng Taq polymerase (1 U/μl) 1 μl 2 μl 2 U /10 0 μl Nước q.s. 50 μl q.s. 10 0 μl Dùng ... Tris 10 mM (pH 7,5) và MgSO 4 10 mM trong 3 giờ. 11 ) Nếu tổng lượng là 1 ml thì cho vào đó 10 µl SDS 10 %, 10 0 µl NaCl 5M, 500 µl phenol và 500 µl chloroform, trộn...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 2 docx
... độ phòng. 10 ) Quay li tâm 12 .000 v/ph trong 5 phút, bỏ hết phần dịch lỏng. 11 ) Rửa phần cặn bằng ethanol 70%, rồi hòa tan phần cặn trong 50 µl TE. 12 ) Thêm 0,5 µl RNase A nồng độ 1, 0 mg/ml (DNase-free), ... solution) để yên 1 phút, rồi quay li tâm 1 phút ở tốc độ tối đa (thường 10 .000 ×g hay 13 .000 v/ph). Chú ý: dung dịch DNA trong nước cần ở pH 7,0 - 8,0, và dễ bị p...
Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20