KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx

... đánh dấu DNA Ban đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) dùng để xác nhận sự hiện diện của yếu tố đặc hiệu của sinh vật đích, thường bằng ... các kỹ thuật đánh dấu phi phóng xạ đã phát triển giúp cho việc ứng dụng mẫu dò rộng rải hơn mà không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dướ...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... dung khuẩn 33 2.2. Điều chế lượng nhỏ DNA phage 33 3. Điều chế lượng lớn DNA phage 34 3. 1. Phương pháp chế dịch phage dung khuẩn 34 3. 2. Điều chế DNA 35 III. Điều chế DNA tế bào động vật 37 IV. Phương ... 130 2.1. Chế tác gel SDS-polyacrylamide 131 2.2. Điều chế mẫu, điện di và nhuộm 131 3. Phương pháp thẩm Western 133 3. 1. Blotting 133 3. 2. Nhuộm bằng kháng thể 134 XI....

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... biết. Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết. 1 2 3 4 5 6 7 XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạo Để phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... 0 ,35 M. Cụ thể là trong 100 µl dịch phản ứng chứa khoảng 1 ng dịch phân đoạn DNA đánh dấu (5 - 20×10 3 cpm) (bước 1.), 0, 03 mg protein chiết xuất từ dịch toàn tế bào của tế bào FM 3A (pha trong ... là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần n...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... [α- 32 P]UTP 100μCi (3. 000 Ci/mM). 2) Thêm DNase I cho đạt 20 µg/ml rồi để 10 phút ở 30 ºC cho phản ứng (phân giải DNA) xảy ra. 3) Thêm 200 µl (lượng tương đương) dung dịch dừng phản ứng, ủ 30 ... nhất hai vị trí trong 50 µl NaOH 1 2 3 nối dài mồi được nhận thấy trong gel là DNA sợi đơn, vì vậy cần lưu ý khi so sánh phân tử lượng sản phẩm này với DNA MW marker sợi đôi. 3...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... Mix, - 3 - 6 µl Template DNA, - 3, 2 pmol Primer và - nước cất q.s. 20 µl. Trong đó, Template DNA có thể là ssDNA 0,1 µg hoặc dsDNA 0 ,3 - 0,5 µg, hay sản phẩm PCR (10 - 30 ng/µl) 3 - 6 µl. 1 ... thực: ATGCGGTACTTCCGTACGTATAGGCCCGTATGCAAATCGGCCTTCGTT Trong đó, các đoạn lặp là các trình tự giúp ta đọc được toàn bộ độ dài của phân tử DNA. Kỹ thuật giải trình tiến bộ nhất...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform. 2) Ủ 1 đêm ở 4 °C. 3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào 72 Chương 3 KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬ...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... 1,5M trong khoảng 30 - 60 giây, 2) Tris-HCl (pH 7,5) 0,5M và NaCl 1,5M trong 3 - 5 phút, và 3) SSC 2× trong 3 - 5 phút. Do sau khi xử lý dung dịch thứ nhất (trên giấy thấm) tế bào đã phân giải ... của arm-DNA (DNA đã tổ hợp có khối lượng phân tử bằng tổng khối lượng phân tử của arm-DNA và cDNA còn sót lại). 3. 10. in vitro packaging (lắp ráp phage trong ống nghiệm)...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... với DNA đã biết nồng độ được pha loãng 26 Chương 2 KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNA I. Điều chế DNA plasmid Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn plasmid nhưng với ... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... cao áp tiệt trùng. 3) EDTA 0,5M (pH 8,0): pha 93, 05 g Na 2 EDTA.2H 2 O vào trong khoảng 5 TS. PHẠM HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế Năm 2006 400 ... HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế 2006 II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân li...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20