KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc
... 28S sa lắng ở tận giữa ống.
7) Chuyển từng phân đoạn, mỗi phân đoạn 0 ,4 ml, sang ống Eppendorf
(được khoảng 30 phân đoạn).
8) Thêm vào mỗi phân đoạn 40 µl sodium acetate (pH 5,1) 3M và một
lượng ...
lượng dCTP, 350 là phân tử lượng bình quân của các dNTP. Thông thường
khoảng 20 - 40 % cDNA được tổng hợp từ mRNA.
3 .4. Kiểm định độ dài cDNA
1) Cho 0,5 g agarose vào 45 ml n...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx
... thực hiện phân tích được RNA.
Trong S1 mapping mẫu dò DNA chỉ được đánh dấu ở đầu mút,
nhưng trong trường hợp riboprobe mapping thì RNA mẫu dò được đánh
dấu suốt chiều dài phân tử trong quá ... 2.000 v/ph trong 10
phút, loại bỏ nước mặt.
3) Quay li tâm 16.000 v/ph (rotor RT 20 Hitachi, Sorvall ) trong 20 phút,
lấy phần cặn là phân đoạn nhân tế bào.
4) Hòa phân đoạn n...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 2 docx
... với DNA đã biết nồng độ được pha loãng
26
Chương 2
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNA
I. Điều chế DNA plasmid
Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn
plasmid nhưng với ... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân
tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này
vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf
... method) 40
3. Đánh dấu đầu mút 41
3.1. Đánh dấu đầu 5' 41
3.2. Đánh dấu đầu 3' 41
4. Lọc gel 41
4. 1. Sephadex 41
4. 2. Phương pháp spin column (cột li tâm) (bằng Bio-Gel P-60) 42
5. Phương ... nucleic (DNA và RNA) 24
1. Phương pháp quang học 24
2. Phương pháp định lượng bằng điện di 24
3. Phương pháp nhỏ giọt định lượng acid nucleic 25
Chương 2. Kỹ thuật cơ...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 9 potx
... biết.
Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng
quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử
nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết.
1
2
3
4
5
6
7
XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạo
Để phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như
promoter, enhancer cũng như các...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 8 pptx
... cần thiết phải phân tích protein. Những công việc phải tiếp cận thường
là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự
thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli ... chuyển trong điện trường về phía anode nhưng với
tốc độ khác nhau phụ thuộc vào độ lớn của phân tử (phân tử lượng). Gel
SDS-polyacrylamide cấu tạo từ hai phần: gel tập trung...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6 pdf
... 105, để trên
nước đá 40 phút.
3) Xử lý nhiệt 2 phút ở 42 ºC hoặc ở 50 ºC trong 50 giây (gây sốc nhiệt).
4) Để lại trong nước đá (khoảng 5 phút).
5) Rót agarose (0,6 - 0,7%) trong TY 2× vào ống ... BPB 0 ,4% , XC 0 ,4% , hấp cao áp tiệt trùng.
5) Ngâm gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần.
6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút.
7) Ngâm g...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 5 potx
... khuẩn E. coli là một trong
nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ
thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao
trong thu nhận DNA ... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform.
2) Ủ 1 đêm ở 4 °C.
3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào
72
Chương 3
KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx
... Chờ nguội thì cho
thêm blocking reagent 10×. Bảo quản ở 4 ºC.
47
IV. Phương pháp đánh dấu DNA
Ban đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và
RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) ... không cần các phòng thí nghiệm
chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dưới đây mô tả kỹ thuật đánh
dấu mẫu dò bằng đồng vị phóng xạ và kỹ thuật phi phóng xạ sử dụ...
KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf
... HỒNG SƠN
Giáo trình
KỸ THUẬT CƠ BẢN
TRONG
SINH HỌC PHÂN TỬ
Nhà xuất bản Đại học Huế
2006
II. Điện di
Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân
li (phân đoạn) DNA, RNA, ... thực hiện trong sinh học phân tử.
Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp
người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển...