KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx

... ứng trong 4 phút ở 90 ºC. 2) Thêm 150 µl acetic acid, 5 µl tRNA (1 mg/ml) và 75 0 µl ethanol 70 % đã làm lạnh, trộn kỹ, để ở 70 ºC trong 15 phút. 3) Quay li tâm 10 phút, lấy tủa, hòa tan tủa trong ... tủa, hòa tan tủa trong 250 µl sodium citrate 0,3M. 5) Thêm 75 0 µl ethanol đã làm lạnh, trộn đều và để 15 phút ở 70 ºC. 6) Quay li tâm 10 phút, tráng tủa 2 lần trong ethanol 7...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... với DNA đã biết nồng độ được pha loãng 26 Chương 2 KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNA I. Điều chế DNA plasmid Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn plasmid nhưng với ... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... X. Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) 81 1. Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota 81 2. CAT assay 82 Chương 3. Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử 84 I. Kỹ ... Vector phage 67 2. Vector plasmid và cosmid 71 VIII. Tạo tế bào khả biến hay chịu di nạp (competent cell) 75 1. Phương pháp CaCl 2 75 2. Phương pháp Hanahan 76 3. Sử dụng tế...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... biết. Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết. 1 2 3 4 5 6 7 XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạo Để phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần này chỉ giới hạn trong ... gel phân tách đã hóa rắn thì thực hiện đổ gel tập trung. Nồng độ của gel phân tách phụ thuộc vào độ lớn của protein cần phân tách. Nồng độ acrylamide càng cao thì phân tách...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần. 6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút. 7) Ngâm gel 10 phút trong Tris-HCl 0,1M pH 7, 5. 8) Ngâm gel 20 phút trong ... thực: ATGCGGTACTTCCGTACGTATAGGCCCGTATGCAAATCGGCCTTCGTT Trong đó, các đoạn lặp là các trình tự giúp ta đọc được toàn bộ độ dài của phân tử DNA. Kỹ thuật giải trình tiến bộ nhất...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform. 2) Ủ 1 đêm ở 4 °C. 3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào 72 Chương 3 KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống. 7) Chuyển từng phân ... hóa ở 37 °C trong 4 giờ. 3) Chiết xuất bằng phenol-chloroform (1:1) rồi kết tủa bằng cách thêm 10 µl NaCl 5M và 500 µl ethanol rồi li tâm thu tủa và rửa tủa trong ethanol 70 %, làm kh...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... đánh dấu DNA Ban đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) dùng để xác nhận sự hiện diện của yếu tố đặc hiệu của sinh vật đích, thường bằng ... các kỹ thuật đánh dấu phi phóng xạ đã phát triển giúp cho việc ứng dụng mẫu dò rộng rải hơn mà không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dướ...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20

... HỒNG SƠN Giáo trình KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ Nhà xuất bản Đại học Huế 2006 II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân li (phân đoạn) DNA, RNA, ... thực hiện trong sinh học phân tử. Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển...

Ngày tải lên: 01/08/2014, 00:20