KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 7 docx

... ứng trong 4 phút ở 90 ºC.2) Thêm 150 µl acetic acid, 5 µl tRNA (1 mg/ml) và 75 0 µl ethanol 70 % đã làm lạnh, trộn kỹ, để ở 70 ºC trong 15 phút. 3) Quay li tâm 10 phút, lấy tủa, hòa tan tủa trong ... tủa, hòa tan tủa trong 250 µl sodium citrate 0,3M.5) Thêm 75 0 µl ethanol đã làm lạnh, trộn đều và để 15 phút ở 70 ºC.6) Quay li tâm 10 phút, tráng tủa 2 lần trong ethanol 70 %. 7) Làm khô bằng ... thực hiện phân tích được RNA. Trong S1 mapping mẫu dò DNA chỉ được đánh dấu ở đầu mút, nhưng trong trường hợp riboprobe mapping thì RNA mẫu dò được đánh dấu suốt chiều dài phân tử trong quá...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 2 docx

... với DNA đã biết nồng độ được pha loãng 26Chương 2KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG TÁI TỔ HỢP DNAI. Điều chế DNA plasmid Trong các thí nghiệm như phân tích gen thường cần lượng lớn plasmid nhưng với ... nước (v/v) thì phenol ở dạng nhũ tương gồm các phân tử phenol ở giữa với các phân tử nước vây quanh. Khi pha hỗn hợp này vào dịch tế bào, các phân tử phenol có tính kị thủy nên có khuynh hướng ... v/ph).Chú ý: dung dịch DNA trong nước cần ở pH 7, 0 - 8,0, và dễ bị phân hủy hơn trong dung dịch đệm nên cần bảo quản ở −20 °C. Dùng TE để dung xuất cũng được nhưng EDTA (trong thành phần của TE)...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 10 pdf

... X. Phân tích điều tiết phiên mã nhờ thử nghiệm CAT (CAT assay) 811. Thí nghiệm chính: di nạp gen vào tế bào eukaryota 812. CAT assay 82Chương 3. Kỹ thuật phân tích xác nhận phân tử 84I. Kỹ ... Vector phage 67 2. Vector plasmid và cosmid 71 VIII. Tạo tế bào khả biến hay chịu di nạp (competent cell) 75 1. Phương pháp CaCl2 75 2. Phương pháp Hanahan 76 3. Sử dụng tế bào khả biến 77 IX. Subcloning ... J. Bacteriol. 173 : 6 97- 70 3.1 6 52. Một số kỹ thuật mở rộng áp dụng PCR 153XV. Phương pháp "vân tay" DNA (DNA finger print) 1 57 1. Phương pháp DNA finger print 1 57 2. Phương pháp...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 9 potx

... biết.Có thể nói đây không chỉ là một kỹ thuật mà là một chiến lược tổng quát bao gồm việc vận dụng nhiều kỹ thuật cơ bản trong sinh học phân tử nhằm phân lập ra được đoạn DNA nằm kề đoạn DNA ... biết.123456 7 XIII. Phương pháp tạo thể đột biến nhân tạoĐể phân tích và xác định các miền cơ năng trong phân tử DNA như promoter, enhancer cũng như các miền cơ năng trong phân tử protein (trung ... enzyme B; 7) Điện di phân tách; 8) Di nạp DNA đích vào plasmid mới.A BABA BXV. Phương pháp "vân tay DNA" (DNA finger print) Các kỹ thuật sinh vật học phân tử cũng ảnh hưởng nhiều...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 8 pptx

... là kỹ thuật tinh chế protein, xác định phân tử lượng protein, phân tích sự thể hiện gen tổng hợp protein trong E. coli và xác nhận protein được tổng hợp in vitro. Phần này chỉ giới hạn trong ... gel phân tách đã hóa rắn thì thực hiện đổ gel tập trung. Nồng độ của gel phân tách phụ thuộc vào độ lớn của protein cần phân tách. Nồng độ acrylamide càng cao thì phân tách được các phân tử ... chuyển trong điện trường về phía anode nhưng với tốc độ khác nhau phụ thuộc vào độ lớn của phân tử (phân tử lượng). Gel SDS-polyacrylamide cấu tạo từ hai phần: gel tập trung và gel phân tách....

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 6 pdf

... gel trong nước 5 phút, khi đó thay nước một số lần.6) Ngâm gel trong dịch chứa NaOH 50mM và NaCl 10mM trong 10 phút. 7) Ngâm gel 10 phút trong Tris-HCl 0,1M pH 7, 5.8) Ngâm gel 20 phút trong ... thực:ATGCGGTACTTCCGTACGTATAGGCCCGTATGCAAATCGGCCTTCGTT Trong đó, các đoạn lặp là các trình tự giúp ta đọc được toàn bộ độ dài của phân tử DNA. Kỹ thuật giải trình tiến bộ nhất cũng chỉ cho phép xác ... màng trong NaOH 0,2N ở nhiệt phòng trong 2 giờ loại bỏ mẫu dò không có tương tác bổ sung, rửa nước cho sạch rồi trung hòa bằng dung dịch chứa 0,2 M Tris-HCl (pH 7, 2) và 0,1% SDS. Ngâm trong...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 5 potx

... khuẩn E. coli là một trong nhưng kỹ thuật trọng yếu và cơ bản của công nghệ DNA tái tổ hợp hay kỹ thuật di truyền học phân tử. Các loại vi khuẩn E. coli có năng lực tăng cao trong thu nhận DNA ... rộng kỹ, sau đó thêm mấy giọt chloroform.2) Ủ 1 đêm ở 4 °C.3) Dùng pipet hút SM trên mặt thạch, quay li tâm, lấy nước mặt, cho vào 72 Chương 3KỸ THUẬT PHÂN TÍCH XÁC NHẬN PHÂN TỬI. Kỹ thuật ... diện của DNA tương đồng trong mẫu nghiệm, là một trong những phương pháp hữu ích áp dụng trong nghiên sinh học phân tử. DNA mẫu nghiệm có thể là nguyên vẹn. Thêm vào đó, trong nhiều trường hợp,...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 4 doc

... v/ph trong 15 giờ ở 15 °C thì RNA 18S sa lắng gần tận đáy ống. Li tâm trong 5 ~ 30% đường với vận tốc 22.000 v/ph trong 16 giờ ở 15 °C thì RNA 28S sa lắng ở tận giữa ống. 7) Chuyển từng phân ... hóa ở 37 °C trong 4 giờ.3) Chiết xuất bằng phenol-chloroform (1:1) rồi kết tủa bằng cách thêm 10 µl NaCl 5M và 500 µl ethanol rồi li tâm thu tủa và rửa tủa trong ethanol 70 %, làm khô. 57 NZYM ... v/ph trong 24 giờ.6) Phân đoạn từng 1 ml. 7) Từ mỗi phân đoạn lấy một lượng nhỏ mẫu để điện di kiểm tra: lấy 5 µl mẫu hòa vào 10 µl nước và 5 µl dung dịch màu tải mẫu 6× để 10 phút ở 68 °C trong...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 3 ppsx

... đánh dấu DNABan đầu, trong kỹ thuật sinh học phân tử việc đánh dấu DNA và RNA để có các mẫu dò (hay dò, probe) dùng để xác nhận sự hiện diện của yếu tố đặc hiệu của sinh vật đích, thường bằng ... các kỹ thuật đánh dấu phi phóng xạ đã phát triển giúp cho việc ứng dụng mẫu dò rộng rải hơn mà không cần các phòng thí nghiệm chuyên biệt cho riêng kỹ thuật phóng xạ. Dưới đây mô tả kỹ thuật ... cho kỹ. 6) Thêm 2 µl chất đánh dấu (labelling reagent), trộn kỹ. 7) Thêm 10 µl dung dịch gắn kết ở nồng độ làm việc (mục 1)). Trộn kỹ, Quay li tâm nhẹ để tập trung hỗn hợp.8) Ủ phản ứng ở 37...

KỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬ part 1 pdf

... HỒNG SƠNGiáo trìnhKỸ THUẬT CƠ BẢN TRONG SINH HỌC PHÂN TỬNhà xuất bản Đại học Huế2006II. Điện di Phương pháp điện di trong gel (keo) thường được sử dụng để phân li (phân đoạn) DNA, RNA, ... thực hiện trong sinh học phân tử. Nhưng quan trọng hơn vẫn là thông qua các bước kỹ thuật cụ thể giúp người học nắm được những điểm cơ bản về nghiên cứu phát triển sinh học phân tử được các nhà ... quá trình sinh học vi mô đã trở thành cách thức chủ yếu để loài người nhận thức thế giới sinh học. Sinh học phân tử phát triển trên cơ sở kiến thức đa ngành. Có thể nói Sinh học phân tử là kết...

Xem thêm