3.4.2. Xác định các dạng phân tử của phân lớp phospholipid
3.4.2.1. Dạng phân tử phosphatic acid (PA)
CTPT: CxHyO8P
Đầu phân cực PA chứa gốc axit phosphoric (-H2PO4). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PA được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của PA căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (3,5- 5,6) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, khơng cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+Na]+. (iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằmtrong khoảng m/z 600 - 1000.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O8P hoặc -O7P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 01 dạng phân tử PA duy nhất tại thời
gian lưu (Retention Time (Rt)):
Rt 4,37 phút: PA 40:8; MS- m/z 743,4609 [M-H]-; MS2- m/z 457,2260 [M-H- C20H30O]-, 439,2215 [M-H-C20H32O2]- và 303,2243 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx. khơng cĩ dạng phân tử PA.
3.4.2.2. Dạng phân tử phosphatidylglycerol (PG)
CTPT: CxHyO10P
CTCT: Dạng diacyl của phân tử phosphatidylglycerol
Đầu phân cực PG chứa nhĩm glycerolphosphat (C3H8O6P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để xác địnhdạng phân tử của PG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (5,4 – 6,8) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion âm [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, khơng cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+Na]+. (iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 600 - 900.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O10P hoặc -O9P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 22 dạng phân tử PG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 6,89: PG 30:1; MS- m/z 691,4524 [M-H]-; MS2- m/z 455,2423 [M-H- C16H28O]- và 253,21 [C16H29O2]-. Rt 6,59: PG 30:0; MS- m/z 693,4960 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]- và 227,2023 [C14H27O2]-. Rt 6,62: PG 32:2; MS- m/z 717,4698 [M-H]-; MS2- m/z 253,2223 [C16H29O2]-, 481,2521 [M-H-C16H28O]- và 509,2823 [M-H-C14H24O]-. Rt 6,38: PG 32:1; MS- m/z 719,4851 [M-H]-; MS2- m/z 255,2412 [C16H31O2]-, 391,2311 [M-H-C16H28O-C3H8O3]- và 483,2682 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,08: PG 32:0; MS- m/z 721,5006 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]-. Rt 6,71: PG 34:4; MS- m/z 741,4682 [M-H]-; MS2- m/z 277,2223 [C18H29O2]- và 505,2612 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,41: PG 34:3; MS- m/z 743,4833 [M-H]-; MS2- m/z 255,2304 [C16H31O2]-, 279,2325[C18H31O2]-; 281,2525 [C18H33O2]-, 415,2311 [[M-H-C16H28O-C3H8O3]- và 507,2712 [M-H-C16H28O]-.
Rt 6,08: PG 34:2; MS- m/z 745,4985 [M-H]-; MS2- m/z 253,2137 [C16H29O2]-, 279,2349 [C18H31O2]-, 281,2485 [C18H33O2]-, 417,2395 [M-H-C16H26O-C3H8O3]-, 491,2738 [M-H-C16H32O2]- và 509,2958 [M-H-C16H26O]-.
Rt 5,9: PG 34:1; MS- m/z 747,5158 [M-H]-; MS2- m/z 255,2311 [C16H31O2]-, 281,2521 [C18H33O2]-, 391,2322 [M-H-C18H32O-C3H8O3]-, 417,2412 [M-H- C16H30O- C3H8O3]-, 465,2711 [M-H-C18H34O2]-, 491,2845 [M-H-C16H32O2]- và 511,3131 [M-H-C16H28O]-.
Rt 6,62: PG 36:6; MS- m/z 765,4675 [M-H]-; MS2- m/z 257,2312 [C20H29O2- CO2]-, 301,2228 [C20H29O2]-, 437,2123 [M-H-C16H26O-C3H8O3]- và 529,2622 [M- H-C16H26O]-. Rt 6,41: PG 36:5; MS- m/z 767,4820 [M-H]-; MS2- m/z 255,2312 [C16H31O2]-, 257,2334 [C19H29]-, 259,2523 [C19H31]- (20:4), 303,2411 [C20H31O2]-, 437,2142 [M- H-C16H28O-C3H8O3]-, 439,2334 [M-H-C16H26O-C3H8O3]- và 531,2745 [M-H- C16H26O]-. Rt 6,11: PG 36:4; MS- m/z 769,4938 [M-H]-; MS2- m/z 303,2256 [C20H31O2]- và 533,2911 [M-H-C16H28O]-.
Rt 5,9: PG 36:3; MS- m/z 771,5138 [M-H]-; MS2- m/z 305,2423 [C20H33O2]-. Rt 5,78: PG 36:2; MS- m/z 773,5316 [M-H]-; MS2- m/z 281,2823 [C18H33O2]-, 417,2411[M-H-C3H8O3-C18H30O]-, 491,2812[M-H-C18H34O2]-, 509,2923 [M-H- C18H32O]-
Rt 6,26: PG 38:6; MS- m/z 793,4985 [M-H]-; MS2- m/z 281,2531 [C18H33O2]-. + Lồi rong Lục Halimeda incrassata Lamx.: cĩ 04 dạng phân tử PG xác địnhtheo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 6,99: PG 32:2; MS- m/z 717,4591 [M-H]-; MS2- m/z 481,2523 [M-H- C16H28O]- và 253,2112 [C16H29O2]-. Rt 7,08: PG 34:4; MS- m/z 741,4642 [M-H]-; MS2- m/z 505,2500 [M-H- C16H28O]-. Rt 6,72: PG 34:3; MS- m/z 743,4772 [M-H]-; MS2- m/z 279,2294 [C18H31O2]-, 415,2241 [M-H-C3H8O3-C16H28O]- và 507,2671 [M-H-C16H28O]-. Rt 6,54: PG 34:2; MS- m/z 745,4902 [M-H]-; MS2- m/z 281,2523 [C18H33O2]-, 417,2467 [M-H-C3H8O3-C16H28O]- và 509,2812 [M-H-C16H28O]-. 3.4.2.3. Dạng phân tử phosphatidylcholine (PC) CTPT: CxHyNO8P
CTCT: Dạng diacyl của phân tử PC
Đầu phân cực PC chứa gốc cholinephosphat (C5H13NO4P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PC được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của PC căn cứ vào 6 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (7,5 - 11,5) n phút.
(ii) Trên event 3 khơng xuất hiện ion âm [M-H]-, thay vào đĩ là các ion [M+HCOO]-, [M+CH3COO]- và [M-CH3]- với m/z là số chẵn.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+H]+ với cường độ peak lớn nhất và m/z là số chẵn.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 650 - 850.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -NO8P hoặc -NO7P.
(vi) Trên MS2-của ion [M+HCOO]- thường xuất hiện peak [M-CH3]- cách nhau 60 u.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 14 dạng phân tử PC xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 11,38: PC 28:0; MS- m/z 678,5056 [M+H]+, m/z 722,4901 [M+HCOO]-, m/z 662,4712 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 227,2042 [C14H27O2]-. Rt 10,30: PC 30:0; MS- m/z 706,5375 [M+H]+, m/z 750,5226 [M+HCOO]-, m/z 690,5025 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 227,2042 [C14H27O2]- và 255,2262 [C16H31O2]-. Rt 9,85: PC 32:1; MS- m/z 732,5494 [M+H]+, m/z 776,5369 [M+HCOO]-, m/z 716,5145 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,2449 [C18H33O2]-, 227,2005 [C14H27O2]- và 253,2104 [C16H29O2]-, m/z 452,2690 [M-CH3-C18H32O]-.
Rt 9,4: PC 32:0; MS- m/z 734,5677 [M+H]+, m/z 778,5543 [M+HCOO]-, m/z 718,5247 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 480,3068 [M-CH3-C16H30O]- và 255,2314 [C16H31O2]-. Rt 10,21: PC 34:4; MS- m/z 754,5364 [M+H]+, m/z 798,5217 [M+HCOO]- và m/z 738,5033 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 452,2713 [M-CH3-C20H30O]- và 303,225 [C20H31O2]-. Rt 9,91: PC 34:3; MS- m/z 756,5515 [M+H]+, m/z 800,5418 [M+HCOO]-, m/z 740,5082 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 305,2434 [C20H33O2]-. Rt 9,25: PC 34:2; MS- m/z 758,5678 [M+H]+, m/z 802,5605 [M+HCOO]- và m/z 742,5293 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 279,2314 [C18H31O2]-. Rt 9,01: PC 34:1; MS- m/z 760,5819 [M+H]+, m/z 804,5687 [M+HCOO]-, m/z 744,5522 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,2412 [C18H33O2]- và 255,2316 [C16H31O2]-. Rt 8,65: PC 34:0; MS- m/z 762,6003 [M+H]+, m/z 806,5817 [M+HCOO]-, m/z 746,5542 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 311,2960 [C20H39O2]-. Rt 9,25: PC 36:4; MS- m/z 782,5719 [M+H]+, m/z 826,5533 [M+HCOO]- và m/z 766,5321 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 255,2271 [C16H31O2]-, 303,2243 [C20H31O2]-.
Rt 9,07: PC 36:3; MS- m/z 784,5839 [M+H]+, m/z 828,5682[M +HCOO]-, m/z 768,5552 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 305,2423 [C20H33O2]- và 255,2316 [C16H31O2]-. Rt 8,74: PC 36:2; MS- m/z 786,5978 [M+H]+, m/z 830,5841 [M+HCOO]- và m/z 770,5715 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 307,2693 [C20H35O2]-. Rt 9,01: PC 38:5; MS- m/z 808,5837 [M+H]+, m/z 852,5666 [M+HCOO]-, m/z 792,5555 [M-CH3]-; MS2- [M-CH3]- m/z 281,248 [C18H33O2]- và 303,2316 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: khơng cĩ dạng phân tử PC.
3.4.2.4. Dạng phosphatidyl inositol (PI)
CTPT: CxHyO13P CTCT: Dạng diacyl
Đầu phân cực PI chứa gốc inositolphotphat (C6H12O9P). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, PI được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl hoặc ankenyl acyl. Để nhận dạng phân tử của PI căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (16,5 - 20) n phút.
(ii) Trên event 3 xuất hiện ion [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+HCOO]+, tuy nhiên cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử PI cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 800 - 1200.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O13P hoặc -O12P.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 11 dạng phân tử PI xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 19,7: PI 30:0; MS- m/z 781,4797 [M-H]-; MS2- m/z 255,2349 [C16H31O2]- và 525,2413 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,76: PI 32:2; MS- m/z 805,4831 [M-H]-; MS2- m/z 577,2709 [M-H-
C14H28O2]-.
Rt 19,52: PI 32:1; MS- m/z 807,4966 [M-H]-; MS2- m/z 281,2425 [C18H33O2]-
297,0423 [C9H14O9P]-, 363,1915 [M-H-C18H34O2-C6H10O5]-, 391,2280 [M-H- C16H30O2-C6H10O5]-, 525,2423 [M-H-C18H34O2]- và 543,2551 [M-H-C18H32O]-.
Rt 19,31: PI 32:0; MS- m/z 809,5144 [M-H]-; MS2- m/z 255,2322 [C16H31O2]- , 391,2225 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2821 [M-H-C16H32O2]- và 571,2910 [M- H-C16H30O]-. Rt 19,52: PI 34:3; MS- m/z 831,4957 [M-H]-; MS2- m/z 553,2712 [M-H- C18H30O2]-. Rt 19,34: PI 34:2; MS- m/z 833,5120 [M-H]-; MS2- m/z 255,2360 [C16H31O2]-
, 279,2291 [C18H31O2]- , 297,0378 [C9H14O9P]-, 391,2260 [M-H-C18H32O2-C6H10O5- ]-, 415,2191 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2740 [M-H-C18H32O2]- và 577,2821 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,04: PI 34:1; MS- m/z 835,5283 [M-H]-; MS2- m/z 255,2338 [C16H31O2]-
281,2471 [C18H33O2]-, 297,0334 [C9H14O9P]-, 391,2226 [M-H-C18H34O2-C6H10O5]-, 409,2304 [M-H-C18H32O-C6H10O5]-, 417,2373 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]-, 553,2744 [M-H-C18H34O2]-, 571,2832 [M-H-C18H32O]- và 579,2906 [M-H-C16H32O2]-.
Rt 19,49: PI 36:5; MS- m/z 855,4971 [M-H]-; MS2- m/z 391,2280 [M-H-
C20H30O2-C6H10O5]- và 553,2671 [M-H-C20H30O2]-.
Rt 19,25: PI 36:4; MS- m/z 857,5103 [M-H]-; MS2- m/z 255,2330 [C16H31O2]-
297,0311 [C9H14O9P]-, 303,2352 [C20H31O2]-, 391,2239 [M-H-C20H32O2-C6H10O5]-, 553,2751 [M-H-C20H32O2]-, 571,2760 [M-H-C20H30O]- và 601,2703 [M-H- C16H32O2]-.
Rt 18,83: PI 36:3; MS- m/z 859,5269 [M-H]-; MS2- m/z 571,2859 [M-H-
C20H32O]-, 553,2741 [M-H-C20H34O2]-, 391,2257 [M-H-C20H34O2-C6H10O5]-, 305,2382 [C20H33O2]- và 297,0298 [C9H14O9P]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: cĩ 03 dạng phân tử PI xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 18,09: PI 32:0; MS- m/z 809,5076 [M-H]-; MS2- m/z 553,2717 [M-H-
Rt 17,39: PI 34:0; MS- m/z 837,5479 [M-H]-; MS2- m/z 581,2859 [M-H-
C16H32O]-, 419,2523 [M-H-C16H32O2-C6H10O5]- và 391,2233 [M-H-C18H36O2- C6H10O5]-.
Rt 16,68: PI 36:4; MS- m/z 857,4986 [M-H]-; MS2- m/z 601,2548 [M-H-
C16H32O2]-.
3.4.3. Xác định các dạng phân tử của phân lớp glycolipid
3.4.3.1. Dạng phân tử monogalactosyldiacylglycerol (MGDG)
CTPT: CxHyO10
CTCT: Dạng diacyl của phân tử MGDG
Đầu phân cực MGDG chứa gốc monogalactosyl (-C6H11O6). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, MGDG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của MGDG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (2,5 - 3,5) n phút.
(ii) Trên event 3, xuất hiện các ion âm [M-H]- và dạng adduct [M+HCOO]-
với m/z là số lẻ.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+Na]+ với cường độ peak lớn và ion [M+NH4]+với cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử MGDG cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 700 - 900.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O10 hoặc -O9.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 09 dạng phân tử MGDG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 2,96: MGDG 32:1; MS- m/z 727,5375 [M-H]-, m/z 773,5388 [M+HCOO]-
và m/z 751,5297 [M+Na]+; MS2- [M-H]- m/z 281,2423 [C18H33O2]-, MS2-
[M+HCOO]- m/z 727,5412 [M-H]- và 281,2422 [C18H33O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z
Rt 2,78: MGDG 34:1; MS- m/z 755,5666 [M-H]-, m/z 801,5678 [M+HCOO]-
và m/z 779,5654 [M+Na]+; MS2- [M-H]- m/z 255,2423 (16:0), MS2- [M+HCOO]- m/z
775,5622 [M-H]- và 281,2581 [C18H33O2]-, MS2-[M+Na]+ m/z 523,3234 [M+Na-
C16H32O2]+ và 497,3112 [M+Na-C18H34O2]+.
Rt 2,96: MGDG 36:5; MS- m/z 775,5346 [M-H]-, m/z 821,5364 [M+HCOO]-
và m/z 799,5326 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 301,2118 [C20H29O2]-.
Rt 3,26: MGDG 38:9; MS- m/z 795,5046 [M-H]-, m/z 841,5021 [M+HCOO]-
và m/z 819,5023 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 537,2978, 513,2974, 275,2023 [C18H27O2]- và 301,2171 [C20H29O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z 543,2932 [M+Na-
C18H28O2]+, 541,2822 [M+Na-C18H26O2]+, 519,2942 [M+Na-C20H28O2]+ và 517,2795 [M+Na-C20H30O2]+.
Rt 3,14: MGDG 38:8; MS- m/z 797,5267 [M-H]-, m/z 843,5168 [M+HCOO]- và m/z 821,5147 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 797,5212, 515,3222, 301,2112
[C20H29O2]- và 277,2115 [C18H29O2]-, MS2- [M+Na]+ m/z 543,3312 [M+Na-
C18H30O2]+, 519,3232 [M+Na-C20H30O2]+ và 517,2822 [M+Na-C20H32O2]+.
Rt 3,02: MGDG 38:7; MS- m/z 799,0121 [M-H]-, m/z 845,5315 [M+HCOO]-
m/z 823,5270 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 800,5399 và 303,2324 [C20H31O2]-. Rt 2,93: MGDG 38:6; MS- m/z 801,0110 [M-H]-, m/z 847,5482 [M+HCOO]- và m/z 825,555 [M+Na]+; MS2- [M+HCOO]- m/z 801,5512 và 301,2113 [C20H29O2]-
Rt 2,90: MGDG 40:8; MS- m/z 825,5567 [M-H]-, m/z 871,5517 [M+HCOO]-; MS2- [M+HCOO]- m/z 303,2324 [C20H31O2]-.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: cĩ 12 dạng phân tử MGDG (3 dạng là đồng phân)xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 3,11: MGDG 30:2; MS- m/z 721,4803 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
467,3534 và 254,1303 [C16H30O2].
Rt 2,92: MGDG 30:0; MS- m/z 725,5139 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
497,3108 [M+Na-C14H28O2]+ và 469,2757 [M+Na-C16H32O2]+.
Rt 3,14: MGDG 32:4; MS- m/z 745,4813 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
495,3112 [M+Na-C16H26O2]+, 491,2704 [M+Na-C16H30O2]+, 467,2707 [M+Na- C18H30O2]+.
Rt 2,96: MGDG 32:2; MS- m/z 749,5127 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
521,2823 [M+Na-C14H28O2]+, 495,3333 [M+Na-C16H30O2]+ và 469,2728 [M+Na- C18H32O2]+.
Rt 2,78: MGDG 32:0; MS- m/z 753,5542 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 497,3132 [M+Na-C16H32O2]+. Rt 3,21: MGDG 34:6; MS- m/z 769,4804 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 491,2522 [M+Na-C18H30O2]+. Rt 3,08: MGDG 34:5; MS- m/z 771,4951 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 521,2322 [M+Na-C16H26O2]+ và 491,2622 [M+Na-C18H32O2]+. Rt 2,91: MGDG 34:3; MS- m/z 775,5240 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 521,2910 [M+Na-C16H30O2]+ và 495,2812 [M+Na-C18H32O2]+. Rt 2,81: MGDG 36:4; MS- m/z 801,5442 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 545,3112 [M+Na-C16H32O2]+ và 497,3113 [M+Na-C20H32O2]+. 3.4.3.2. Dạng phân tử digalactosyldiacylglycerol (DGDG) CTPT: CxHyO15
CTCT: Dạng diacyl của phân tử DGDG
Đầu phân cực DGDG chứa gốc digalactosyl (-C12H21O11). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, DGDG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của DGDG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (8,5 - 14) n phút.
(ii) Trên event 3, xuất hiện các ion âm [M-H]- với m/z là số lẻ và dạng adduct [M+HCOO]- cĩ cường độ peak khơng lớn nên khơng thấy xuất hiện với hàm lượng thấp.
(iii) Trên event 1, xuất hiện ion dương [M+Na]+ cĩ cường độ peak lớn nhất với m/z là số lẻ và ion [M+NH4]+ cĩ cường độ peak khơng lớn nên với những phân tử DGDG cĩ hàm lượng ít thì khơng xuất hiện.
(iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 850 - 1000.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O15 hoặc -O14.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 01 dạng phân tử DGDG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 13,43: DGDG 34:1; MS- m/z 917,6080 [M-H]-, m/z 941,6144 [M+Na]+; MS2- [M-H]- m/z 661,3696 [M+Na-C16H32O2]+, 635,3551 [M+Na-C18H34O2]+ và 379,1174, MS2- [M+Na]+ m/z 685,3731 [M+Na-C16H32O2]+, 659,3628 [M+Na- C18H34O2]+, 523,3231, 497,3087 và 347,1026.
+ Lồi rong Lục Halimeda incrasata Lamx.: cĩ 11 dạng phân tử DGDG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 10,34: DGDG 30:0; MS- m/z 887,5625 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 659,3632 [M+Na-C14H28O2]+, 631,3233 [M+Na-C16H32O2]+, 497,3112, 469,2711 và 405,1511. Rt 10,58: DGDG 32:2; MS- m/z 911,5639 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 683,3533 [M+Na-C14H28O2]+, 631,3235 [M+Na-C18H32O2]+, 469,2678 và 405,1232. Rt 10,04: DGDG 32:1; MS- m/z 913,5801 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
659,3422 [M+Na-C14H28O2]+, 659,3411 [M+Na-C16H30O2]+, 657,3237 [M+Na- C16H32O2]+, 631,3212 [M+Na-C18H34O2]+, 523,3301, 497,3125, 469,2756 và 347,0928.
Rt 9,51: DGDG 32:0; MS- m/z 915,5892 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z
687,3843 [M+Na-C14H28O2]+, 659,3557 [M+Na-C16H32O2]+, 631,3311 [M+Na- C18H36O2]+, 525,3334 [M+Na-C6H10O5-C14H28O2]+, 497,3040 [M+Na-C6H10O5- C16H32O2]+, 469,2772 [M+Na-C6H10O5-C18H36O2]+, 405,1391 [M+Na-C14H27O2- C18H35O2]+, 365,0992 [C12H22O11Na]+ và 347,0975 [C12H20O10Na]+.
Rt 9,71: DGDG 34:2; MS- m/z 939,5965 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 683,3553 [M+Na-C16H32O2]+, 659,35 [M+Na-C18H32O2]+, 521,3212, 497,3133, 405,1457 và 347,0908. Rt 9,23: DGDG 34:1; MS- m/z 941,6083 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 685,3738 [M+Na-C16H32O2]+, 659,3537 [M+Na-C18H34O2]+, 523,3156, 497,3113, 405,1556. Rt 8,78: DGDG 34:0; MS- m/z 943,6282 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 687,3839 [M+Na-C16H32O2]+, 659,3635 [M+Na-C18H36O2]+, 525,3211, 497,3738, 405,1412, 347,0902. Rt 8,57: DGDG 36:1; MS- m/z 969,6405 [M+Na]+; MS2- [M+Na]+ m/z 713,4456 [M+Na-C16H32O2]+, 685,3733 [M+Na-C18H36O2]+, 659,3767, 497,2845.
3.4.3.3. Dạng phân tử sulfoquinovosyldiacylglycerol (SQDG)
CTPT: CxHyO12S
CTCT: Dạng diacyl của phân tử SQDG
Đầu phân cực SQDG chứa gốc sulfoquinovosyl (-C6H11O8S). Tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, SQDG được chia thành 3 loại: diacyl, ankyl acyl, ankenyl acyl. Để xác định dạng phân tử của SQDG căn cứ vào 5 dấu hiệu:
(i) Thời gian lưu dự kiến: (10 - 16) n phút.
ii) Trên event 3 xuất hiện ion âm [M-H]-, theo quy tắc nitrogen, m/z của ion này là số lẻ.
(iii) Trên event 1, khơng cĩ ion dương [M+H]+ và dạng adduct [M+Na]+. (iv) Khối lượng phân tử tùy thuộc vào cấu tạo của đuơi khơng phân cực, thường nằm trong khoảng m/z 700 - 950.
(v) Cơng thức phân tử tương ứng cĩ dạng -O12S hoặc -O11S.
Các dữ kiện phổ khối:
+ Lồi rong Nâu Lobophora sp.: cĩ 36 dạng phân tử SQDG xác định theo giá trị khối lượng tăng dần và thời gian lưu:
Rt 15,95: SQDG 28:0; MS- m/z 737,4474 [M-H]-; MS2- m/z 537,2665 [M-H- C12H24O2]-, 509,2356 [M-H-C14H28O2]-. Rt 15,56: SQDG 29:0; MS- m/z 751,4631 [M-H]-; MS2- m/z 523,2522 [M-H- C14H28O2]-, 509,2511 [M-H-C15H30O2]-. Rt 15,62: SQDG 30:1; MS- m/z 763,4619 [M-H]-; MS2- m/z 535,2517 [M-H- C14H28O2]-. Rt 15,17: SQDG 30:0; MS- m/z 765,4771 [M-H]-; MS2- m/z 555,2890 [M-H- C14H26O]-, 537,2709 [M-H-C14H28O2]-, 509,2393 [M-H-C16H32O2]-, 255,2416 [C16H31O2]-.
Rt 14,77: SQDG 31:0; MS- m/z 779,4909 [M-H]-; MS2- m/z 537,2743 [M-H- C15H30O2]-.
Rt 15,35: SQDG 32:2; MS- m/z 789,4757 [M-H]-; MS2- m/z 561,2592 [M-H- C14H28O2]-, 509,2511 [M-H-C18H34O2]-.
Rt 14,78: SQDG 32:1; MS- m/z 791,4931 [M-H]-; MS2- m/z 563,2819 [M-H- C14H28O2]-, 537,2668 [C16H32O2+C9H13O8S]-, 535,2642 [C16H30O2+C9H13O8S]-, 509,2381[C14H28O2+C9H13O8S]-, 281,2517 [C18H33O2]-.
Rt 14,42: SQDG 32:0; MS- m/z 793,5107 [M-H]-; MS2- m/z 537,2689
[C16H32O2+C9H13O8S]-, 255,2291 [C16H31O2]-.
Rt 14,9: SQDG 34:3; MS- m/z 815,4871 [M-H]-; MS2- m/z 587,2838
[C20H34O2+C9H13O8S]-, 559,2662 [C18H30O2+C9H13O8S]-, 537,2739 [C16H32O2+ C9H13O8S]-.
Rt 14,54: SQDG 34:2; MS- m/z 817,5065 [M-H]-; MS2- m/z 561,2734 [M-H- C16H32O2]-, 563,2875 [M-H-C16H30O2]-, 537,2734 [M-H-C18H32O2]-.
Rt 14,3: SQDG 34:1; MS- m/z 819,5162 [M-H]-; MS2- m/z 581,2991[M-H-
C16H30O]- , 563,2831 [M-H-C16H32O2]-, 555,2891 [M-H-C18H32O]-, 537,2698 [M- H- C18H34O2]-, 281,2444 [C18H33O2]-, 255,2338 [C16H31O2]-.
Rt 13,61: SQDG 34:0; MS- m/z 821,5376 [M-H]-; MS2- m/z 593,9968 [M-H- C14H28O2]-, 565,3011 [M-H-C16H32O2]-, 555,2890 [M-H-C18H34O]-, 537,2673 [M- H-C18H36O2]-, 509,2406 [M-H-C20H40O2]-, 283,2657 [C18H35O2]-.
Rt 13,61: SQDG 35:1; MS- m/z 833,5376 [M-H]-; MS2- m/z 577,3041 [M-H-