VI NHÂN GIỐNG CÂY LIM XANH
4. Tái sinh tế bào phơi soma
Mẫu nuơi cấy là tế bào soma thu nhận được qua nuơi cấy lỏng tr ên mơi trường nuơi cấy cơ bản cĩ bổ sung TDZ (1mg/l). Dịch huyền phù tế bào được trải trên mơi trường phát sinh và tái sinh phơi soma trực tiếp. Mơi trường nuơi cấy cơ bản: WPM + Cw (10%) + vitaminB1 (5mg/l) + Glycin (5mg/l) + sucrose (30g/l) và bổ sung tổ hợp các
chất điều hịa sinh trưởng TDZ (0-0.1-0.5-1-3mg/l) + ABA (0.5mg/l) hay TDZ (0.1 -0.5- 1-3mg/l) + BA (2mg/l) h ay TDZ (0.1-0.5-1-3mg/l) + kinetin (2mg/l).
Kết quả nghiên cứu cho thấy, dịch huyền phù tế bào soma biệt hĩa phơi soma sau 8 tuần (2 tháng) nuơi cấy và chuyển qua quá trình tái sinh sau 6 tháng nuơi cấy. Mơi trường
nuơi cấy cơ bản cĩ bổ sung các tổ hợp TDZ +ABA, TDZ+BA hay TDZ+kinetin đ ều cho phát sinh phơi sau 2 tháng nuơi cấy. Khi bổ sung Ki và BA vào mơi trường nuơi cấy thì tế
bào soma cĩ dạng xanh và chặt; đồng thời khi kéo dài thời gian nuơi cấy thì một phần mơ
bên dưới tiếp xúc với mặt thạch bi đen, mặt trên tạo nên một lớp mơ trắng và rời rạc. Trên
mơi trường khi cĩ bổ sung ABA mơ cĩ dạng màu xanh vàng và xốp, đỉnh phơi xuất hiện nhiều hơn. Khi nuơi cấy kéo dài mơ càng trở nên xanh hơn, mơi trường bị hĩa nâu ít hơn, và tế bào bị chết cũng ít hơn. Riêng mơi trường nuơi cấy cĩ bổ sung tổ hợp chất điều hịa
sinh trưởng TDZ (1mg/l) + ABA (0.5mg/l) xuất hiện chồi tái sinh sau 8 tháng nuơi cấy. Cây
con từ phơi được nuơi cấy trên mơi trường phát sinh rễ WPM + NAA (3mg/l) + Rhizopon
(50mg/l). Riêng mơi trường nuơi cấy cĩ bổ sung tổ hợp chất điều hịa sinh trưởng TDZ (1mg/l) + ABA (0.5mg/l) xuất hiện chồi tái sinh sau 8 tháng nuơi cấy