PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU

Một phần của tài liệu Phát hiện sớm ung thư cổ tử cung bằng kháng thể đơn dòng và aptame (Trang 31 - 36)

1. Thiết kế nghiên cứu: quan sát phân tích. 2. Thời gian thực hiện: 1/5/2012-30/5/2013.

3. Các bước tiến hành nghiên cứu

Tiến hành theo 4 bước.

Bước 1. Xây dựng công thức dựa trên nhu cầu khuyến nghị cho người bệnh trưởng

thành. Sử dụng phần mềm Eiyokun để ước lượng thành phần dưỡng chất của công thức sữa và mục tiêu là với 1500 ml đáp ứng đủ nhu cầu.

Bước 2. Gởi 3 mẫu sữa đến phòng xét nghiệm để phân tích thành phần dưỡng chất. Bước 3. So sánh thành phần dưỡng chất của 3 loại sữa với nhu cầu nuôi dưỡng bệnh

nhân trưởng thành theo khuyến nghị

Bước 4. Điều chỉnh công thức dung dịch sữa pha cho phù hợp với nhu cầu nuôi dưỡng

bệnh nhân trưởng thành theo khuyến nghị.

SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU

Khuyến nghị về nhu cầu nuôi dưỡng

bệnh nhân trưởng thành

Xây dựng công thức

(mục tiêu 1500 ml đáp ứng đủ nhu cầu)

Gởi mẫu sữa xét nghiệm

thành phần dưỡng chất

So sánh thành phần dưỡng chất với

mức khuyến nghị

Điều chỉnh công thức

(mục tiêu 1500 ml đáp ứng đủ nhu cầu)

Ước tính

Số thực

25

3. Biến số nghiên cứu

a. Nhu cầu nuôi dưỡng một ngày cho bệnh nhân nặng trưởng thành theo khuyến nghị nghị

Vì chưa có hướng dẫn cụ thể và đầy đủ về nhu cầu nuôi dưỡng cho bệnh nhân nặng, chúng tôi phải tham khảo từ nhiều nguồn chủ yếu là từ FDA 2013 (FDA 2013) và

Dietary Reference Intakes 2009 (DRIs 2009) khi khơng tìm thấy khuyến nghị riêng cho

bệnh nhân nặng.

Năng lượng: ngày1-2: 15-20 kcal/kg/ngày, ngày3: 35 kcal/kg/ngày (Kreymann 2006). Cho 1 người 50-60kg khoảng 1500-1800 kcal.

Đạm: 1,5g/kg thay đổi từ 1,2-2g/kg, tối đa 2,5g/kg ở người đang lọc thận (McClave

2009). Cho 1 người 50-60 kg khoảng 75-90g.

Dịch: 30-40 ml/kg (Weissman, 1999). Một người 46-54kg khoảng 1400-2100 ml

Carbohydrate:130g, < 50% tổng năng lượng. Xơ 19-27g ở nam, 15-21g ở nữ (Satoshi 2008).

Béo: 70-80g; Transfat 0; Monounsaturate fat 29-34g; Polyunsaturate fat 16-21g;

Saturate fat 20-30g; Omega 6 14-18g; Omega 3 2,2-27g. Cholesterol <750mg ở nam, <

600mg ở nữ (Satoshi, 2008).

Sinh tố: sinh tố D3 (cholecalciferol) 600-800 IU, tối đa 4000 IU; sinh tố E

(tocopherol) 16,5-22,5 IU, tối đa 1500 IU; sinh tố K 75-120 µg, sinh tố C 75-90mg, tối

đa 2000mg; sinh tố B12 2,4µg; sinh tố B1 (thiamine) 0,9-1,2mg; sinh tố B2

(riboflavin) 0,9-1,3mg; sinh tố B6 1,3-1,7mg, tối đa 100 mg; sinh tố B5 (panthotenic)

5mg; sinh tố B7 (biotin) 25-30 µg; sinh tố B9 (folate) 400-1200µg, tối đa 1000 mg; sinh tố B3 (PP, niacin) 14-16mg, tối đa 35mg. Sinh tố A (retinol) 2970 đơn vị, tối đa

9900 đơn vị (Kannan 2008). Carotene 6-15 mg (Nature-healing.com).

Vi Khống: kẽm 25mg, tối đa 50mg; đồng 900 µg, tối đa 10000 µg; Mangan 1,8-2,3 mg, tối đa 11 mg; sắt 8-18 mg, tối đa 45 mg; iode 150 µg, tối đa 1100 µg; fluour 3-4

mg, tối đa 10 mg (Anil 2011). Selen 115 µg, tối đa 400 µg, bệnh nặng > 500-1000

µg/ngày (William 2012).

Khống: natri 23mg/kg hay 1200-1500mg, tối đa 2300mg; kali 39mg/kg hay 2000- 4700mg, suy thận< 1500 mg; canxi 4-8mg/kg hay 1000-1300mg/ngày, tối đa 3000

mg/ngày; phosphorous 6-15mg/kg hay 700-1250mg/ngày, tối đa 4000mg/ngày

(Satoshi 2008, Weissman, 1999).

b. Xét nghiệm thành phần dưỡng chất

Mẫu xét nghiệm năng lượng, đạm, thành phần acid amin, béo, transfat, monounsaturate fat, polyunsaturate fat, saturate fat, omega 3, omega 6, cholesterol, carbohydrate, glucose, lactose và fluoride được gởi thực hiện tại Trung tâm dịch vụ phân tích thí nghiệm thành phố Hồ Chí Minh (Case: Center of analytical services and experimentiation Hồ Chí Minh city).

26

Mẫu xét nghiệm glucose, xơ tiêu hóa, magne, mangan, canxi, phốt pho, natri, kali, sắt, đồng được gởi thực hiện tại Trung tâm kỹ thuật tiêu chuẩn đo lường chất lượng 3 (Quatest 3: Quality assurance and testing center 3).

Mẫu xét nghiệm sinh tố A, E, D3, PP, C, B1, B2, B5, B6, B7, B9, B12, K, Beta

Caroten, kẽm, selen, iod được gởi thực hiện tại Công ty cổ phần dịch vụ khoa học công

nghệ Sắc Ký Hải Đăng (Sắc Ký Hải Đăng science-technology services joint-stock company).

c. Cách tính giá trị sinh học của dưỡng chất

Chỉ số kháng viêm (Philip, 2009) (IF: Inflammatory Index Score) IF = Tổng (dưỡng chất/ngày × hệ số viêm từng loại)

Hệ số viêm của dưỡng chất

Dưỡng chất Hệ số viêm Đơn vị tính/ngày

Năng lượng -0,23 kcal

Carbohydrate -0,346 g Xơ 0,52 g Omega 3 3,84 g Omega 6 -0,16 g Monounsaturate fat -0,05 g Saturate fat -0,25 g Cholesterol -0,21 mg Sinh tố A 0,0058 µg Sinh tố B1 0,05 mg Sinh tố B2 (Riboflavin) 0,16 mg Sinh tố B3 (Niacin, PP) 0,26 mg Sinh tố B6 0,286 mg

Sinh tố B9 (Folic acid) 0,214 µg

Sinh tố B12 -0,09 µg Sinh tố C 0,367 mg Sinh tố D 0,342 µg Sinh tố E 0,401 mg β-caroten 0,00725 µg Magnesium 0,905 mg Kẽm 0,316 mg Sắt 0,029 mg Selenium 0,021 mg Giá trị đánh giá ≥ 200 Kháng viêm mạnh 101-200 Kháng viêm trung bình 1-100 Kháng viêm nhẹ -1 đến -100 Gây viêm nhẹ

-101 đến -200Gây viêm trung bình

27

Giá trị sinh học của thành phần acid amin

Amino acid score (WHO, 2007)

Chuẩn > 100 Cách tính

Lượng acid amin (mg) chuẩn/1g protein

Tên mg acid amin/g Protein

Leucine 55 Isoleucine 25 Valine 32 Tryptophan 07 Threonine 27 Methionin +Cystein 25 Phenylalanine +Tyrosine 47 Lysine 51 Histidine 18

Amino acid rating (WHO 2007)

Amino acid rating = Amino acid score × protein (g/100 kcal)

Tỷ lệ acid amin nhánh (WHO 2007)

Lượng Lysin, Isoleucin, Leucin (g)/ 100g acid amin × 100

d. Nguồn nguyên liệu thử nghiệm

Sữa đậu nành giàu đạm không đường: Gold soy của công ty cổ phần sữa Việt

nam-Vinamilk có bảng cơng bố chất lượng sản phẩm.

Sữa bột nguyên kem: sữa bột nguyên kem không đường, NZMP của công ty cổ

phần Đại Tân Việt, nhập từ công ty Fonterra Co-Operative Group LTD, 9 Princes Street, Auckland, New Zealand.

Isocal: sản phẩm nuôi ăn qua sonde của công ty TNHH Neslé Việt nam.

Probiotics: từ nghiên cứu của John (John 1999) Lactobacillus acidophilus liều 2×1010

, Bifidobacterium longum liều 8×109

(He 2008) có cải thiện tình trạng kém

hấp thu lactose. Ngồi ra Streptococcus faecalis liều 45×107

(Buydens 1996) giảm

tần suất tiêu chảy cấp ở người lớn vào ngày thứ ba từ 66% xuống 8%. Hỗn hợp

Bifidobacterium longum liều >10x109

/g, Lactobacillus acidophilus liều >100 x 109/g đã giảm 50% tần suất tiêu chảy khi nuôi ăn qua sonde bệnh nhân nặng

(Terence 2010). Các probiotics này khơng có các báo cáo về kết quả âm tính như

làm tăng nhiễm trùng huyết, nhiễm trùng catheter, viêm phổi, vì vậy chúng tơi chọn

sản phẩm Lactobamin, là 1 loại probiotics đơng khơ, gồm có 3 chủng Lactobacillus

acidophilus, Bifidobacterium longum, Streptococcus faecalis có hàm lượng vi Amino acid (mg) /1g protein test

28

khuẩn là 300 triệu hay 3×108/gói được sản xuất tại nhà máy Sanford Pharma USA,

công ty cổ phần đầu tư liên doanh Việt Anh. Các nghiên cứu trên có liều tác dụng với chỉ 1 loại khuẩn sống, cịn Lactobamin là hỡn hợp khuẩn sống, chúng tôi kỳ vọng là với liều thấp hơn vẫn có thể có tác dụng, vì vậy chúng tơi chọn liều 6×3×108 hay 6 gói mỡi ngày để can thiệp. Lactobamin được sản xuất bằng công nghệ bao nang giúp vi khuẩn ổn định trong khí hậu nhiệt đới và không bị phân hủy bởi dịch vị dạ dày và đến được ruột với toàn vẹn số lượng.

Để có sự cân bằng về dưỡng chất và năng lượng giữa các nhóm dung dịch ni ăn với dung dịch chuẩn là Isocal, đồng thời đạt đủ nhu cầu dinh dưỡng theo khuyến nghị khi nuôi 1500 ml dung dịch mỡi ngày, chúng tơi có bổ sung các chất sau vào dung dịch nuôi ăn:

Vana-Blanca 35C Non-dairy creamer là 1 loại béo nhũ tương, nguồn gốc thực vật của công ty Specialty Ingredient Management LLC.

Vana-Sana MCT IF là triglyceride chuổi trung bình, nguồn gốc thực vật của cơng ty Specialty Ingredient Management LLC.

Milk protein concentrate 70 là 1 loại đạm whey tinh chế có 70% protein do cơng ty cổ phần Đại Tân Việt nhập khẩu từ công ty Fonterra, New Zealand.

Whey demin 40% là 1 loại đạm whey tinh chế có > 11% protein do cơng ty cổ phần Đại Tân Việt nhập khẩu từ công ty Cooperative Nacional De Productores De Leche, Uruguay.

Vitaral là đa sinh tố mỡi ml có 1500 IU vitamin A, 150 IU vitamin D2, 1mg vitamin

E, 1mg vitamin B1, 0,75mg vitamin B2, 2mg vitamin B5, 1mg vitamin B6, 5mg

vitamin PP, 25mg vitamin C của công ty cổ phần dược phẩm dược liệu Pharmedic.

Nutrozinc 10mg kẽm/5 ml của công ty General Pharmaceutical Ltd, Bangladesh.

Frutafit, Fructose Oligo Saccharide, của công ty Specialty Ingredient Management LLC, Netherlands, 1 loại xơ tan.

Zincelen có 1250 IU vitamin A, 150 mg vitamin C, 100 mg vitamin E, 25 µg

selenium, 5 mg kẽm nguyên tố.

Fogyma-Plus có 50mg sắt III hydroxide, 500µg sinh tố B9 (acid folic), 0,5µg sinh tố B12 của cơng ty trách nhiệm hữu hạn một thành viên Dược phẩm trung ương 1.

29

Một phần của tài liệu Phát hiện sớm ung thư cổ tử cung bằng kháng thể đơn dòng và aptame (Trang 31 - 36)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(132 trang)