. -t ngt ống tn Ờ proteasome
4.2. Hệ thống khảo sát định hướng mô UAS-GAL
Hệ thống GAL4 là một công cụ cho phép biểu hiện bất kì một trình tự nào, kể cả trình tự mã hóa cho protein hay ch mã hóa cho RNA (như RN i . Thế mạnh của hệ thống GAL4 là nó có tắnh linh hoạt cao, với nhiều biến đổi và cải thiện trên bộ gen Drosophila cung cấp cho người sử dụng một lượng lớn các dịng ruồi có thể biểu hiện protein mục tiêu ở các mô, cơ quan chuyên biệt. [7].
Hệ thống này bao gồm hai phần: UAS (upstream activation sequence) là trình tự hoạt hóa được thiết kế nằm trước gen mục tiêu và GAL4 là protein hoạt hóa phiên mã, được thiết kế nằm sau promoter biểu hiện định hướng mô. Promoter này sẽvbiểu hiện GAL4 ở một mô hay cơ quan chuyên biệt cho promoter đó, protein GAL4 sinh ra sẽ bám vào vùng UAS và kắch hoạt q trình phiên mã gen mục tiêu ở mơ hay cơ quan chuyên biệt đó, nhờ vậy mà protein mục tiêu được biểu hiện. Bình thường gene GAL4 và phức hợp UAS-gene mục tiêu sẽ được chứa trong hai dòng riêng rẽ nhằm mục đ ch kiểm soát được thời điểm biểu hiện protein mục tiêu. Khi nào hai dòng chứa hai yếu tố này được lai với nhau thì protein mục tiêu sẽ được biểu hiện ở đời con, còn ở đời bố mẹ sẽ khơng biểu hiện (hình 8). Khi protein mục tiêu là những protein gây độc cho tế bào hệ thống này rất hiệu quả để bảo vệ dịng mang gen độc, vì ch biểu hiện ở đời con nên sẽ không làm giảm sức sống của bố mẹ.
- 20 -
Hình 6. H thống UAS-GAL4 và cách thức hoạt động
Ngoài chức năng biểu hiện vượt mức một protein, hệ thống cũng có thể sử dụng để tạo ra kiểu hình mất hay giảm biểu hiện của một gen (dùng RN i để tìm ra chức năng của gen đó.