1.6 .Phƣơng pháp điện di mao quản sử dụng detector độ dẫn không tiếp xúc
1.6.1 .Nguyên lý hoạt động C4D
2.4. Các thông số đánh giá độ tin cậy của phƣơng pháp phân tích
2.4.1. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp phân tích
- Giới hạn phát hiện (LOD)
Đối với các quá trình sắc ký, LOD là nồng độ nhỏ nhất mà cho tín hiệu/nhiễu (S/N) bằng 3. Trong thực tế thƣờng gặp giới hạn phát hiện của thiết bị (IDL) và giới hạn phát hiện của phƣơng pháp (MDL) [10].
MDL phân tích nhóm chất bảo quản đƣợc xác định trên nền mẫu nƣớc ngọt cocacola có nền mẫu giống với mẫu thực nhƣng khơng chứa chất phân tích. Mẫu thử đƣợc chuẩn bị nhƣ sau: thêm chuẩn 50µl dung dịch chuẩn mỗi axit nồng độ 10-2M vào 5ml nƣớc ngọt cocacola, lắc Vontex và lọc dung dịch qua màng lọc 0,45µm. Pha lỗng và xác định trên thiết bị CE-C4D tới nồng độ nhỏ nhất mà thiết bị có thể phân tích đƣợc.
- Giới hạn định lƣợng (LOQ)
Thông thƣờng, giá trị LOQ đƣợc xác định theo tỉ số tín hiệu/nhiễu (S/N) bằng 10. Tƣơng tự nhƣ giới hạn phát hiện ngƣời ta cũng phân biệt giới hạn định lƣợng của thiết bị (IQL) và giới hạn định lƣợng của phƣơng pháp (MQL) [10].
2.4.2. Độ chụm của phương pháp
Độ chụm (độ lặp lại) của phƣơng pháp đƣợc xác định qua độ lệch chuẩn (SD) và độ lệch chuẩn tƣơng đối (RSD %). Cơng thức tính SD và RSD% nhƣ sau:
SD=√∑
RSD (%) =
×100 (2.2)
Trong đó:
• Si là diện tích của pic điện di thứ i
• Stb là diện tích trung bình của n lần phân tích • n là số lần phân tích lặp (n =6)
2.4.3. Độ đúng của phương pháp
Độ đúng đƣợc xác định là mức độ gần nhau giữa giá trị trung bình của một dãy lớn các kết quả thí nghiệm và các giá trị quy chiếu đƣợc chấp nhận. Do đó, thƣớc đo độ đúng thƣờng đánh giá qua sai số tƣơng đối hay bằng cách xác định độ thu hồi qua thêm chuẩn [10]. Độ thu hồi (H): H ═ lt tt C C × 100 (2.3) Trong đó:
• H là hiệu suất thu hồi (%)
• Ctt: Nồng độ thực tế của mỗi chất phân tích thu đƣợc (tính theo đƣờngchuẩn)
• Clt: Nồng độ lý thuyết của mỗi chất phân tích tính tốn từ lƣợng chuẩn thêm vào.
Nếu chất chuẩn đƣợc thêm vào mẫu từ trƣớc khi xử lý mẫu thì ta có độ đúng của phƣơng pháp.
Nếu chất chuẩn đƣợc thêm vào trƣớc khi bơm vào thiết bị ta có độ thu hồi của thiết bị.
Độ lặp lại và độ thu hồi đối với nhóm chất bảo quản đƣợc xác định trên nền mẫu nƣớc ngọt cocacola, là nền mẫu giống với mẫu thực nhƣng khơng chứa chất phân tích. Mẫu thử đƣợc chuẩn bị bằng cách thêm chuẩn hỗn hợp các chất chuẩn xitric, benzoic, sorbic ở 3 mức nồng độ 10-4; 2.10-4 và 4.10-4M đối với axit xitric, 5.10-5; 10-4 và 2.10-
phút và lọc qua màng lọc 0,45µm, pha lỗng 5 lần. Mẫu thử đƣợc đo lặp lại 6 lần và lấy giá trị trung bình.