Tổng hợp phức chất của Pd(II) với Hathacp: Pd(athacp)2

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) tổng hợp, nghiên cứu cấu tạo và thăm dò hoạt tính sinh học của phức chất Pd(II) với thiosemicacbazon axetophenon001 (Trang 37 - 42)

CHƯƠNG 1 TỔNG QUAN

c. Tổng hợp phức chất của Pd(II) với Hathacp: Pd(athacp)2

Hoà tan hoàn toàn 0,932 g (0,004 mol) Hathacp trong 30 ml etanol núng rồi

đổ từ từ vào dung dịch của 10 ml muối PdCl2 0,2M (0,002 mol) đó được điều chỉnh

mụi trường bằng NH3 đặc (pH: 9 - 10). Vừa đổ vừa khuấy đều hỗn hợp trờn mỏy

khuấy từ ở 40oC cho tới khi thấy xuất hiện kết tủa màu da cam phức của

Pd(athacp)2 thỡ khuấy tiếp 1 giờ nữa ở nhiệt độ phũng. Lọc rửa kết tủa trờn phễu lọc

đỏy thuỷ tinh xốp bằng nước, hỗn hợp etanol - nước, etanol và cuối cựng bằng đietylete. Chất rắn được làm khơ trong bỡnh hỳt ẩm đến khối lượng khụng đổi với hiệu suất tổng hợp 70% để tiến hành cỏc nghiờn cứu tiếp theo.

Bảng 2.2. Cỏc phức chất, màu sắc và một số dung mơi hịa tan

STT Phối tử Phức chất Màu sắc Dung mơi hồ tan

1 Hthacp Pd(thacp)2 Vàng cam axeton, DMF, CHCl3….

2 Hmthacp Pd(mthacp)2 Vàng cam axeton, DMF, CHCl3….

2.3. ĐIỀU KIỆN GHI PHỔ

Phổ hấp thụ hồng ngoại (IR) của cỏc chất được ghi trờn mỏy quang phổ FR/IR

08101 trong vựng 4000-400cm-1 của hóng Shimadzu tại Viện Hoỏ Học, Viện Hàn

Lõm Khoa học và Cụng nghệ Việt Nam. Mẫu được chế tạo theo phương phỏp ộp viờn với KBr.

Phổ cộng hưởng từ (1H-NMR, 13C-NMR) của cỏc chất được ghi trờn mỏy

Bruker- 500MHz ở 300K, trong dung mụi d6-DMSO, tại Viện Hoỏ học, Viện Hàn Lõm Khoa học và Cụng nghệ Việt Nam.

Phổ khối lượng (MS) của cỏc phức chất được ghi trờn mỏy LC-MSD-Trap-SL tại Phũng cấu trỳc, Viện Hoỏ học, Viện Hàn Lõm Khoa học và Cụng nghệ Việt Nam. Cỏc mẫu phõn tớch được đo trong điều kiện: vựng đo m/z : 50 - 2000; ỏp suất

phun mự 30 psi; tốc độ khớ làm khơ 8 lớt/phỳt; to làm khụ 325oC; tốc độ thổi khớ

0,4ml/phỳt; chế độ đo possitive.

2.4. PHÂN TÍCH HÀM LƯỢNG PALAĐI TRONG PHỨC CHẤT

Để xỏc định hàm lượng của palađi trong phức chất chỳng tụi sử dụng phương phỏp phõn tớch trọng lượng bằng cỏch kết tủa palađi(II) bằng đimetylglyoxim.

+ Qui trỡnh cụ thể:

Cõn một lượng chớnh xỏc mo gam mẫu trong khoảng 0,03 đến 0,05 gam,

chuyển vào bỡnh Kendan. Thấm ướt mẫu bằng vài giọt H2SO4 đặc rồi đun trờn bếp

điện cho tới khi mẫu tan hết. Để nguội một ớt, rồi nhỏ vào đú 2ml dung dịch H2O2 30%, tiếp tục đun cho tới khi cú khúi trắng thốt ra. Lặp lại cụng đoạn như vậy cho tới khi thu được dung dịch trong suốt cú màu vàng nhạt đối với phức của Pd(II). Để nguội dung dịch thu được, sau đú chuyển vào cốc và pha loóng thành 50ml. Chỉnh mụi trường bằng dung dịch NH3 loóng cho tới khi pH = 2 - 4. Thờm vào đú từng giọt dung dịch đimetyl glyoxim (1,5% trong etanol) tới khi khụng thấy kết tủa mới xuất hiện, thờm tiếp 5ml nữa để đảm bảo dư đimetyl glyoxim. Kết tủa được để lắng qua đờm sau đú lọc bằng phễu lọc thuỷ tinh xốp (cú khối lượng ban

10 giờ). Cõn tổng khối lượng phễu lọc và kết tủa (m2 gam). Từ đõy ta tớnh được lượng Pd cú trong mẫu ban đầu lần lượt theo cụng thức:

2 1 Pd o (m m ).0,316 %m = 100% m  

2.5. THĂM DỊ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC PHỐI TỬ, CÁC PHỨC CHẤT

2.5.1. Hoạt tớnh khỏng vi sinh vật kiểm định

Hoạt tớnh khỏng vi sinh vật kiểm định được thực hiện dựa trờn phương phỏp: Đỏnh giỏ hoạt tớnh khỏng sinh bằng phương phỏp khuếch tỏn.

Nguyờn tắc: Mẫu thử (cú chứa hoạt chất thử) được đặt lờn lớp thạch dinh dưỡng đó cấy VSV kiểm định, hoạt chất từ mẫu thử khuếch tỏn vào mụi trường thạch sẽ ức chế sự phỏt triển của VSV kiểm định tạo thành vịng vơ khuẩn (vụ nấm).

2.5.2. Cỏc chủng vi sinh vật kiểm định

Bao gồm những vi khuẩn và nấm kiểm định gõy bệnh ở người: * Vi khuẩn Gram (-):

- Escherichia coli ATCC 25922(E. coli): Vi khuẩn gram (-), gõy một số bệnh về

đường tiờu hoỏ như viờm dạ dày, viờm đại tràng, viờm ruột, viờm lỵ trực khuẩn.

- Salmonella typhy DT 220(S. typhi): Vi khuẩn gram (-), vi khuẩn gõy bệnh thương

hàn, nhiễm trựng đường ruột ở người và động vật.

- Shigella flexneri DT 112(S. flexneri): Gõy bệnh bệnh lỵ trực trựng ở trẻ em.

* Vi khuẩn Gram (+):

- Bacillus cereus ATCC 9946 (B. cereus): Là trực khuẩn gram (+), sinh bào tử,

thường khụng gõy bệnh.

- Staphylococcus aureus ATTC 1228 (S. Aureus): Cầu khuẩn gram (+), gõy mủ

cỏc vết thương, vết bỏng, gõy viờm họng, nhiễm trựng cú mủ trờn da và cỏc cơ quan nội tạng.

- Bacillus subtilis ATCC 10241(B. pumillus): là trực khuẩn cỏ khụ hoặc trực khuẩn cỏ cú khả năng tạo bào tử, cú khả năng chịu đựng cỏc điều kiện mụi trường khắc nghiệt.

- Vi nấm : Aspergillus sp. VSSH1402 (Asp.sp)

2.5.3. Mụi trường thử nghiệm

a. Mụi trường canh thang nuụi cấy VK kiểm định:

NaCl 0,5% ; Pepton 0,5% ; cao thịt 0,3% ; nước vđ 100ml. b. Mụi trường thạch thường :

NaCl 0,5% ; Pepton 0,5% ; cao thịt 0,3% ; thạch 1,6% ; nước vđ 100ml. c. Mụi trường Sabouraud:

Pepton 1%; glucose 2%; thạch 1,6 %, nước vừa đủ 100 ml.

2.5.4. Mẫu khỏng sinh chuẩn

Streptomycin : 20 IU/ml đối với vi khuẩn Gr(-). Benzathin penicillin: 20 IU/ml đối với vi khuẩn Gr(+).

Khỏng sinh chống nấm itraconazol 400 μg/ml pha trong methanol

2.5.5. Cỏch tiến hành

- Cỏc khoanh giấy lọc vụ trựng và đó được sấy khụ được tẩm 3 lần với dung

dịch mẫu thử (khỏng sinh chuẩn), sau mỗi lần tẩm cỏc khoanh giấy lọc cú chứa

mẫu thử (hoặc chuẩn) đều được sấy trờn nhiệt độ < 60oC đến khụ hết dung mụi.

- Chuẩn bị mụi trường và cấy VSV kiểm định:

VSV kiểm định được cấy vào mụi trường canh thang, rồi nuụi cấy cho phỏt

triển trong tủ ấm 37oC trong thời gian 18-24 giờ đến nồng độ 107 tế bào/ml (kiểm

tra bằng pha loóng và dóy dịch chuẩn) (Nấm mốc được nuụi trờn mụi trường

Sabouraud thạch nghiờng ở 28 oC trong 5 ngày, rồi sử dụng dung dịch xà phũng

0,2% vơ trựng lấy đớnh bào tử với nồng độ 105 bào tử/ml) . Mụi trường thạch

thường (cũng như Sabouraud cho vi nấm) vụ trựng (tiệt trựng 118oC/30 phỳt) được

ml. Lắc trũn để VSV kiểm định phõn tỏn đều trong MT thạch, rồi đổ vào đĩa Petri vơ trựng với thể tớch 20ml/đĩa và để cho thạch đụng lại.

- Đặt mẫu thử và chứng: khoanh giấy lọc đó được tẩm chất thử (khỏng sinh chứng chuẩn) và xử lý như trờn được đặt lờn bề mặt mụi trường thạch (thạch thường cũng như Sabouraud) chứa VSV kiểm định theo sơ đồ định sẵn.

- Ủ cỏc đĩa Petri cú mẫu thử và chứng được đặt như trờn trong tủ ấm ở toC =

37oC đối với vi khuẩn (ở 28-30oC đối với vi nấm) trong 18-24h đối với vi khuẩn

(24-72 giờ đối với vi nấm), rồi sau đú lấy ra đọc kết quả, đo đường kớnh vịng vơ khuẩn (vụ nấm) nếu cú bằng thước kẹp Panmer độ chớnh xỏc 0,02 mm.

- Đỏnh giỏ kết quả: Dựa trờn đường kớnh vịng vơ khuẩn (vụ nấm) và được

đỏnh giỏ theo cụng thức: D  = n D n i i  1 , s = 1 ) ( 1 2      n D n i i D D

: Đường kớnh trung bỡnh vịng vơ khuẩn (vụ nấm) Di: Đường kớnh vịng vơ khuẩn (vụ nấm)

s: Độ lệch thực nghiệm chuẩn cú hiệu chỉnh

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) tổng hợp, nghiên cứu cấu tạo và thăm dò hoạt tính sinh học của phức chất Pd(II) với thiosemicacbazon axetophenon001 (Trang 37 - 42)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(80 trang)