Phương pháp thực nghiệm trong phân tích trên thiết bị GC-MS kết hợp sử

2.2 Phương pháp nghiên cứu

2.2.3 Phương pháp thực nghiệm trong phân tích trên thiết bị GC-MS kết hợp sử

dụng phần mềm AIQS-DB

2.2.3.1. Hóa chất, dụng cụ và thiết bị a. Hóa chất

Trong nghiên cứu này, các hố chất và dung mơi sử dụng như: n-hexan, axeton, Diclometan của hãng JT. Baker, USA loại chuyên dùng cho phân tích sắc ký khí và muối Na2SO4 (nung 7000C, 4h) của hãng Merck – Đức với độ tinh khiết 99,99% để phân tích trên máy GC/MS.

Dung dịch nội chuẩn bao gồm 08 chất là 4-chlorotoluene; 1,4 dichlorobenzen- d4; naphathalene; acenaphthanene – d10; phenantherene – d10; fluoranthene- d10; chrysene- d12; perylene- d12.

Dung dịch chuẩn (check standard)

Dung dịch chuẩn đồng hành (surrogate) bao gồm 13 chất (nồng độ 1ppm)

b. Thiết bị thí nghiệm

 Cân phân tích độ chính xác đến 10-4

 Máy siêu âm SUPER RK 510

 Tủ hút, tủ sấy

 Lò nung AWF 1350 – 0006

 Bộ thổi khí N2 để đuổi dung mơi

Thiết bị sắc ký khí GC/MS – QP 2010 (Gas chromatography) của hãng Shimadzu, cột mao quản DB – 5MS, dài 30m, đường kính trong 0,25mm, bề dày lớp pha tĩnh 0,25 μm.

2.2.3.2. Quy trình xử lý mẫu bằng phương pháp chiết lỏng-lỏng

Mẫu nước trước khi tiến hành chiết tách được đưa về nhiệt độ phòng. Thêm 25 g muối NaCl đã được hoạt hóa ở 7000C trong 6 giờ vào phễu chiết chứa 0,5 lít mẫu. pH của mẫu được điều chỉnh tới pH = 7 bằng 0,5ml dung dịch đệm photphat và thêm 50µl dung dịch chuẩn đồng hành có nồng độ10µg/mL. Tiến hành chiết mẫu

2 lần bằng dung mơi DCM với thể tích dung mơi một lần chiết là 50ml. Dịch chiết

25g NaCl (đã được nung ở 700oC trong 6giờ trước khi sử dụng)

0,5 mL dung dịch đệm (NaH2PO4-Na2HPO4, pH7) (10µg/mL x 50µL) chuẩn đồng hành

Mẫu 0,5L

Chiết (50ml, 50ml Dichloromethane )

Loại nước(Na2SO4, đã được nung ở 700oC trong 6giờ trước khi sử dụng)

Cô đặc (tới 5ml bằng máy cất quay chân không)

Cơ đặc (tới 0,5ml bằng dịng khí N2)

GC-MS

Thêm (10µg/mL x 50µL) nội chuẩn Cơ đặc tới 5ml bằng máy cất quay chân không)

được cho chảy qua phễu chứa muối Na2SO4 khan (được nung ở 700 0C trong 6h), sau đó dịch chiết được cơ đặc về 5 ml bằng máy cất quay chân không. Thêm 20ml n hexan vào dịch chiết sau đó làm giàu mẫu xuống 5ml (lặp lại 2 lần). Dịch chiết cuối cùng được làm giàu chính xác cịn 0,5ml sử dụng dịng khí N2. Sau đó thêm 50µl

dung dịch nội chuẩn có nồng độ10µg/mL. Tiến hành đo mẫu trên thiết bị GC/MS sử dụng phần mềm AIQS-DB.

Độ thu hồi của các mẫu M1, M2, M3, M4 và M8 cho dung dịch chuẩn đồng hành được thể hiện ở bảng 2.1

Bảng 2.1. Độ thu hồi của các chất trong các mẫu nước sông Tô Lịch

STT Tên dd chuẩn đồng hành 1ppm M1 M2 M3 M4 M8 RSD, % Re, % 1 2-Fluorophenol 0,87 0,13 0,16 0,13 0,09 0,08 28 14 2 1,2-Dichlorobenzene- d4 0,92 0,16 0,19 0,23 0,17 0,13 21 19 3 2,4-Dichlorophenol- d3 0,89 0,84 0,77 0,80 0,85 0,77 4 90 4 4-Chloroaniline-d4 0,97 0,16 0,14 0,01 0,23 0,31 67 17 5 Benzophenone-d10 1,07 0,78 1,04 0,88 0,93 0,80 12 83 6 Pentachlorophenol- 13C6 1,23 1,16 1,63 1,30 1,21 1,43 14 109 7 4-Nonylphenol-d4 1,29 1,60 1,48 1,66 1,77 1,99 11 132 8 C20D42 1,05 0,66 0,43 0,61 0,70 1,11 36 67 9 BisphenolA-d14 2,03 3,36 1,45 3,43 2,29 1,45 41 118

STT Tên dd chuẩn đồng hành 1ppm M1 M2 M3 M4 M8 RSD, % Re, % 10 p-Terphenyl-d14 0,91 0,91 0,66 1,54 2,12 1,54 43 148 11 4,4’-DDT-13C12 0,97 0 0 0 0 0,02 224 0 12 Tris(2- ethylhexyl)phosphate- d51 0,95 1,74 1,25 1,68 1,83 2,07 17 181 13 3,3’- Dichlorobenzidine-d6 1,08 0,05 0,02 0,05 0,04 0,04 34 4

2.2.3.3. Quy trình phân tích bằng phần mềm AIQS-DB

Quy trình phân tích dùng phần mềm AIQS-DB bao gồm 4 bước cơ bản: Bước 1: Cài đặt các điều kiện thiết bị hiệu chỉnh điều kiện MS

Lắp cột sử dụng cột mao quản DB5 –MS (5% phenyl- methyl polisiloxane capillary column) với chiều dài 30m, đường kính trong 0.25mm và bề dày lớp pha tĩnh 0,25 μm và khởi động thiết bị, bật hệ thống chân không, cài đặt các thông số theo điều kiện chuẩn của phần mềm và hiệu chuẩn điều kiện MS theo phương pháp dữ liệu M625.QGT mở cửa sổ Tuning, mở các điều kiện từ file hiệu chuẩn M625.QGT, sau đó chọn biểu tượng Start Auto Tuning trên thanh cơng cụ. Dữ liệu hiệu chuẩn sẽ bắt đầu chạy, khi dữ liệu chạy xong thì lưu kết quả hiệu chuẩn vào file riêng. Điều kiện tiêu chuẩn cần phải được thiết lập để dự đốn thời gian lưu chính xác và để có thể áp dụng các đường chuẩn có sẵn trong cơ sở dữ liệu của AIQS-DB.

Bước 2: Đo dung dịch chuẩn n-ankan

 Đo dung dịch chuẩn n-ankan sử dụng phương pháp “Measure Check STD.qgm”

 Dữ liệu thu được được lưu dưới dạng “ddmmyy CS.qgd”

 Chạy chương trình phân tích GC/MS, bấm mở dữ liệu file “ddmmyy CS.qgd” trong thư mục lưu trữ, copy dữ liệu và thay tên thành “ddmmyy RT_CS.qgd”

 Xác định n – ankanes trong dữ liệu “ddmmyy RT_CS.qgd” bằng cách sử dụng phương pháp “Measure CheckSTD.qgm”.

 Chọn biểu tượng Quantitative trên thanh công cụ

 Chọn Peak intergration --C9-C33 được xác định chính xác.

 Lưu dữ liệu “ddmmyy RT_CS.qgd”. Nếu thời gian lưu của n- ankane sai lệch

lớn có thể do điều kiện cài đặt GC khác với điều kiện đo chuẩn đo trên GC/MS. Khi đó cần kiểm tra điều kiện vận hành của GC bao gồm việc kiểm tra cột tách. Bước 3: Cập nhật thời gian lưu trong dữ liệu vào phương pháp (Simul_SIM.qgd, Simul_SCAN.qgd, Check STD.qgd and Surrogate.qgd) sử dụng “ddmmyy RT_CS.qgd”

 Mở dữ liệu “ddmmyy RT_CS.qgd” đã cập nhật bằng phương pháp Measure CheckSTD.qgm

 Chọn biểu tượng “Create compound table”

 Chọn biểu tượng “AART”

 Lựa chọn phương pháp dữ liệu mà chúng ta muốn cập nhật thời gian lưu (Simul_SIM.qgm; Simul_SCAN.qgm; Check STD.qgm và Surrogate.qgm)

 Lưu dữ liệu sau khi đã cập nhật thời gian lưu và sử dụng thời gian lưu của các ankanes dự đoán cập nhật thời gian lưu của các chất tại thời điểm phân tích.

Bước 4: Phân tích mẫu sử dụng phương pháp phân tích đã được cập nhật thời gian lưu. Phát hiện các chất dựa trên thời gian lưu và phổ khối, định lượng bằng đường chuẩn có sẵn trong cơ sở dữ liệu.