CHƯƠNG 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3. QUY TRÌNH THÍ NGHIỆM
2.3.5. Phân tích thống kê
Các phép tính tốn cơ bản được tính bằng cơng cụ Microsoft Excel 2013. Phần mềm GraphPad Prism 6.07 thực hiện tất cả các phân tích thống kê bao gồm các phép hồi quy và các so sánh giữa các lơ thí nghiệm với lơ đối chứng.
Kết quả của thí nghiệm về tỷ lệ phơi cịn sống cũng như tỷ lệ phôi dị dạng sẽ xử lý hồi quy với dạng bốn tham số của phương trình Sigmoidal:
Trong đó: Top và Bottom là giá trị cao nhất và thấp nhất của Y Y là tỷ lệ phôi chết/sống hoặc dị dạng
X là log của nồng độ thí nghiệm
XC50 có thể là giá trị LC50 hoặc EC50 HillSlope thể hiện độ dốc của đường cong
Từ đó, phần mềm cho phép đưa ra biểu thức và đồ thị thể hiện mối quan hệ giữa nồng độ thí nghiệm và sự ảnh hưởng của hóa chất đối với sự phát triển phơi cá ngựa vằn đồng thời tính các chỉ số độc tính LC50 – nồng độ gây chết 50% phơi thí nghiệm và EC50 – nồng độ gây ảnh hưởng đến 50% phôi hoặc ấu thể. Dựa trên kết quả thu được, chỉ số gây quái thai TI (Teratogenic index) sẽ được xác định bằng tỷ
số LC50/EC50. Một chất được cho là gây quái thai khi TI >1 và được cho là gây chết phôi khi TI < 1 [69].
Phương pháp Mann Whitney test được sử dụng để so sánh sự khác biệt giữa lơ đối chứng và các nồng độ thí nghiệm về tỷ lệ phơi nở ở 72 giờ cũng như số nhịp tim/phút. Sự khác biệt được cho là có ý nghĩa khi p < 0,05.
Chỉ số NOEC (No Observed Effect Concentration) cho biết nồng độ hóa chất thí nghiệm cao nhất khơng có ảnh hưởng đáng kể đến phơi thí nghiệm và chỉ số LOEC (Lowest observed effect concentration) cho biết nồng độ thấp nhất tác động đáng kể đến phơi thí nghiệm theo các tiêu chí đã nêu ở trên được xác định bằng Dunnett’s test với độ tin cậy 95%.