Chương 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. Cấu trúc các hợp chất phân lập được từ nấm Linh chi
4.1.9. Hợp chất 9 (GL-9): Ganodermadiol (Lanosta-7,9(11),24-triene-3,26-diol)
Hình 52. Cấu trúc hợp chất GL-9
Hợp chất GL-9 thu được dưới dạng chất kết tinh hình kim, màu trắng. Trên phổ
1H-NMR trên vùng trường mạnh xuất hiện 7 tín hiệu đặc trưng của các nhóm methyl tại
H 0,56 (3H, s, H-18), 0,88 (6H, s, H-28, 30), 0,92 (3H, d, J = 6,5 Hz, H-21), 0,98 (3H,
s, H-19), 1,00 (3H, s, H-29) và 1,67 (3H, s, H-27). Dịch về phía vùng trường trung bình xuất hiện hai tín hiệu proton nhóm methin liên kết trực tiếp với nguyên tử oxy tại H 3,25 (H-3) và 4,00 (H-26). Vùng trường yếu xuất hiện 3 tín hiệu của ba proton olefin tại H
5,32 (1H, d, J = 6,0 Hz, H 24), 5,40 (1H, t, J = 6,0 Hz, H-24) và 5,47 (1H, d, J = 4,5 Hz, H-7). Ngồi ra những tín hiệu dịch chuyển trong vùng trường H 0,82 – 2,22 làn những tín hiệu của các nhóm methylene và methine.
Trên phổ 13C-NMR và DEPT xuất hiện 30 tín hiệu của 30 nhóm ngun tử carbon bao gồm 7 nhóm methyl, 9 nhóm methylene, 6 nhóm methine và 7 nhóm nguyên tử carbon khơng liên kết với hydro. Trong đó tại vùng trường thấp xuất hiện 6 tín hiệu carbon của 3 cặp liên kết đôi dạng (–CH=C<) tại C 120,2 (C-7)/142,6 (C-8), 145,9 (C- 9)/116,2 (C-11) và 126,9 (C-24)/134,3 (C-25). Trên vùng trường trung bình xuất hiện tín hiệu của nhóm methine tại C 78,9 (C-3) và và nhóm methylene tại C 69,0 (C-26). Hai tín hiệu này cộng hưởng vùng trường thấp hơn so với các nhóm methine, methylene thơng thường do chịu ảnh hưởng của hiệu ứng thuận từ vì chúng liên kết trực tiếp nguyên tử oxy hút điện tích mạnh. Vùng trường mạnh xuất hiện 7 tín hiệu singlet đặc trưng của các nhóm methyl tại C 15,6 (C-18), 22,7 (C-19), 36,0 (C-20), 18,4 (C-21), 35,9 (C-22), 24,5 (C-23), 126,9 (C-24), 134,3 (C-25), 69,1 (C-26), 13,6 (C-27), 25,5 (C-28), 28,1 (C- 29) và 15,7 (C-30).
Từ những dữ kiện phân tích trên và so sánh với tài liệu tham khảo cho thấy số liệu phổ hợp chất này phù hợp hồn tồn tất cả các vị trí với hợp chất lanosta-7,9(11),24- triene-3,26-diol [9]. Cùng với việc phân tích phổ khối lượng xuất hiện pic m/z 463 [M+Na]+ nên hợp chất có khối lượng phân tử M = 440. Vậy khẳng định được hợp chất GL-9 là lanosta-7,9(11),24-triene-3,26-diol.
Hình 54. Phổ 13C NMR của hợp chất GL-9
Hình 56. Phổ MS của hợp chất GL-9
4.1.10. Hợp chất 10 (GL-10): methyl 3β-hydroxy-12β-acetoxy-7,11,15,23-tetraoxo- 5α-lanosta-8-en-26-oate
Hình 57. Cấu trúc của hợp chất GL-10
Hợp chất GL-10 thu được dưới dạng chất bột màu vàng nhạt. Trên phổ 1H-NMR trên vùng trường mạnh xuất hiện tám tín hiệu đặc trưng của các nhóm methyl tại H 0,83 (3H, s, H-18), 0,90 (3H, s, H-30), 1,00 (3H, d, J = 6,0 Hz, H-21), 1,02 (3H, s, H-29),
1,19 (3H, d, J = 7,0 Hz, H-27), 1,36 (3H, s, H-19), 1,73 (3H, s, H-28) và 2,23 (3H, s, CH3CO). Dịch về phía vùng trường yếu hơn xuất hiện một tín hiệu singlet đặc trưng cho nhóm methoxy tại H 3,35 (3H, s, COOCH3) và hai tín hiệu methine tại H 3,24 (1H, m, H-3) và 5,71 (1H, s, H-12), hai tín hiệu này xuất hiện về phía vùng trường thấp hơn so với các nhóm methine thơng thường do chúng liên kết trực tiếp với nhóm hút điện tử mạnh của ngun tử oxy. Ngồi ra những tín hiệu của nhóm methine, methylen thơng thường khác dịch chuyển trong vùng trường mạnh hơn từ H 1,17 → 2,90.
Trên phổ 13C-NMR và DEPT của hợp chất GL-10 xuất hiện 33 tín hiệu của các nhóm ngun tử carbon bao gồm 9 nhóm methyl, 6 nhóm methylene, 6 nhóm methine và 12 nhóm nguyên tử carbon khơng liên kết với hydro. Trong đó trên vùng trường thấp xuất hiện sáu tín hiệu nhóm –C=O trong đó có bốn nhóm carbonyl tại C 201,1 (C-7),
195,5 (C-11), 205,6 (C-15), 210,5 (C-23) và hai nhóm cacboxylic tại C 179,5 (C-26) và
C 171,6 (CH3CO), tín hiệu 2 nguyên tử carbon nối đôi dạng (>C=C<) tại C 153,2 (C-
8)/147,1 (C-9).
Trên vùng trường trung bình xuất hiện hai tín hiệu của nhóm oxymethine tại C
78,0 (C-3) và 80,7 (C-12), Hai nhóm methine này chịu ảnh hưởng của hiệu ứng thuận từ nên cộng hưởng ở vùng trường thấp hơn so với các tín hiệu methien thơng thường khác. Dịch chuyển về phía vùng trường mạnh hơn xuất hiện tín hiệu methyl đặc trừng cho nhóm (COOCH3) tại C 49,8. Vùng trường mạnh xuất hiện của 8 tín hiệu của các nhóm methyl tại C 12,6 (C-18), 18,2 (C-19), 22,1 (C-21), 17,5 (C-27), 21,4 (C-28), 28,2 (C- 29), 16,1 (C-30) và 28,0 (CH3CO). Ngồi ra những tín hiệu của các nhóm methine và methylene dịch chuyển trong vùng trường từ C 28,0 → 59,6. Từ những dữ kiện phân tích trên và so sánh với tài liệu tham khảo cho thấy số liệu phổ hợp chất này phù hợp hoàn toàn tất cả các vị trí với hợp chất methyl 3β-hydroxy-12β-acetoxy-7,11,15,23- tetraoxo-5α-lanost-8-en-26-oate [13].
Kết hợp với phổ khối lượng xuất hiện pic m/z 609 [M+Na]+ nên hợp chất có khối lượng phân tử M = 586. Vậy khẳng định được hợp chất GL-10 là methyl 3β-hydroxy- 12β-acetoxy-7,11,15,23-tetraoxo-5α-lanosta-8-en-26-oate.
Hình 58. Phổ 1H của hợp chất GL-10
Hình 60. Phổ DEPT của hợp chất GL-10