3.2.2 .Kĩ thuật xung vi phân và kĩ thuật qt sóng vng
3.5. Phân tích một số mẫu thuốc trên thị trƣờng
3.5.3. Mẫu CEFACLOR 125 mg
Đặc điểm : Thuốc bột, 1 gói có khối lượng 3 gam
Xuất xứ : Sản xuất bởi công ty cổ phần dược phẩm BIDIPHAR1 Số đăng kí : VD-1978-06
Số lô sản xuất : 0111
Trộn đều 4 gói Cefaclor 125 mg của công ty cổ phần dược phẩm BIDIPHAR1 và đem cân được 12000 mg ( lượng cefaclor là 500 mg, chiếm tỉ lệ là 500/12000 = 1/24) , lấy 385,8 mg hòa tan bằng nước cất để nguội rồi định mức
thành 100 ml ta được dung dịch gốc
24 1
.10-2 M, lấy dung dịch gốc pha thành dung
dịch
24 1
.10-5 M. Chuẩn bị 5 ống nghiệm 25ml , thể tích mẫu phân tích và thể tích chất chuẩn thêm vào được tính như bảng 3.21 , sau đó thêm 2,5 ml dung dịch NaOH 1M rồi định mức đủ 25 ml, khi đó nồng độ NaOH là 0,1M. Sau khi thủy phân trong 25 phút thì đem đo.
Bảng 3.21. Thể tích mẫu Bidiphar và thể tích chất chuẩn STT 1 2 3 4 5 Mẫu Bidiphar ( 24 1 .10-5M) 10ml 10ml 10ml 10ml 10ml Chất chuẩn (10-5M) 0ml 0,5ml 1ml 1,5ml 2ml
Bảng 3.22. Chiều cao pic khi đo mẫu Bidiphar Nồng độ chất thêm vào(10-7M) 0 2 4 6 8 Ipic (10-7 A) Lần 1 1,9 4,49 6,58 9,06 11,4 Ipic(10-7 A) Lần2 1,85 4,44 6,57 9,01 11,6 Ipic(10-7 A) Lần 3 1,95 4,48 6,62 9,02 11,5 Ipic(10-7 A) TB 1,9 4,47 6,59 9,03 11,5
-200m -400m -600m -800m -1.00 -1.20 U (V) -1.00u -800n -600n -400n -200n 0 I (A )
Hình 3.20. Xác định Cefaclor trong mẫu bằng phương pháp thêm chuẩn
0 2 4 6 8 2 4 6 8 1 0 1 2 I( 1 0 e -7 A ) C ( 1 0 e - 7 M )
Các giá trị đường chuẩn :
Parameter Value Error
------------------------------------------------------------ A 1,946 0,08958 B 1,188 0,01828 ------------------------------------------------------------ R SD N P ------------------------------------------------------------ 0,99964 0,11564 5 <0.0001 ----------------------------------------------------------
Từ đường thêm chuẩn ở trên ngoại suy trên đồ thị và tính tốn từ đường thêm chuẩn ta tính được nồng độ Cx của Cefaclor từ mẫu thuốc Bidiphar lúc đầu thêm vào là :
X = B A .10-7 = 1,638.10-7 M -2 0 2 4 6 8 10 12 14 -4 -2 0 2 4 6 8 10 Cx + Cs (10e-7 M) I (1 0 e -7 A )
5 i Y = 6,698 Sx = B Sy )2 2 2 5 1 i = 0,097 Tra bảng có t(0,95; 3) = 3,182 nên có: X ± t.SXE = 1,638 ± 3,182. 0,097 = 1,638 ± 0,309 (10-7 M) Như vậy khối lượng Cefaclor có trong 1 gói 125 mg là :
m 24 1 . 40 125 ). 309 , 0 638 , 1 ( = 122,85 ± 23,175 (mg)
Kết quả phân tích đạt 98,28 %. So với lượng Cefaclor có trong 1 gói mà nhà sản xuất đưa ra là 125 mg thì độ sai lệch là 1,72 %.
Đánh giá độ thu hồi khi xác định mẫu thuốc Bidiphar bằng phương pháp thêm chuẩn , tiến hành tương tự với mẫu thuốc MKP sử dụng bảng số liệu thu được từ bảng các giá trị thêm chuẩn ở trên của Bidiphar ta có kết quả sau:
∆C I.10-7 (A) Cx (10-7M) Cs (10-7M) Cs - Cx H% 0 1,9 1,638 2 4,47 1,638 3,854 2,216 110,8 4 6,59 1,638 5,681 4,043 101,08 6 9,03 1,638 7,785 6,147 102,45 8 11,5 1,638 9,914 8,276 103,45
Bảng 3.23. Độ thu hồi của quá trình xác định Cefaclor trong mẫu thuốc Bidiphar Vậy độ thu hồi trung bình là : Htb = (∑H) /4 = 104,45%
KẾT LUẬN
Với nội dung nghiên cứu là xây dựng quy trình phân tích cefaclor bằng phương pháp von-ampe hịa tan, từ đó áp dụng phân tích một số mẫu thuốc có trên thị trường. Luận văn đã đạt được một số kết quả như sau:
1. Cefaclor khơng có hoạt tính điện hóa vì vậy khi đo von-ampe hịa tan khơng có pic xuất hiện. Pic chỉ xuất hiện sau khi cefaclor đã được thủy phân trong dung dịch NaOH 0,1M. Như vậy pic xuất hiện không phải là pic của cefaclor mà là pic của sản phẩm thủy phân của cefaclor.
2. Với qui trình phân tích và các điều kiện đo tối ưu đã được xác định ở trên, cefaclor có độ tuyến tính cao trong khoảng nồng độ 10-7M đến 10-6M, đường chuẩn có dạng Y= (1,305 ± 0,0199).X , phương pháp có độ lặp lại cao, giới hạn phát hiện LOD = 6,27.10-9M (hay 2,31ppb), giới hạn định lượng LOQ= 2,09.10-8
M (hay 7,69ppb).
3. Phân tích mẫu thuốc có trên thị trường của cơng ty cổ phần hóa dược Mekophar bằng phương pháp thêm chuẩn, hàm lượng cefaclor xác định được là 251,16/250mg, đạt hiệu suất 100,46%. Đối với mẫu thuốc của công ty cổ phần hóa dược TW , hàm lượng cefaclor xác định được là 245,775/250mg, đạt hiệu suất là 98,31%. Đối với mẫu thuốc của công ty cổ phần dược phẩm BIDIPHAR1, hàm lượng cefaclor xác định được là 122,85/125 mg, đạt hiệu suất phân tích là 98,28%.
Như vậy phương pháp điện hóa nói chung và phương pháp von-ampe hịa tan nói riêng một lần nữa lại khẳng định tính hiệu quả trong việc phân tích những hợp chất hữu cơ có hoạt tính sinh học. Qua việc nghiên cứu xác định cefaclor trong một số mẫu thuốc có thể mở ra hướng mới đó là xác định cefaclor trong mẫu máu và nước tiểu của người đang dùng thuốc này.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
TIẾNG VIỆT
1. Bộ Y Tế (2007), Hóa dƣợc, tập 2, NXB Y học, Hà Nội.
2. Bộ Y Tế (2002), Dƣợc điển Việt Nam, xuất bản lần thứ 3, Nhà xuất bản Y học, Hà Nội.
3. Chương trình hợp tác khoa học kỹ thuật Việt Nam-Hà Lan, Đề tài VH2, Một
số phƣơng pháp phân tích điện hóa hiện đại, Đại học Quốc Gia Hà Nội.
4. Trần Thị Thu Hằng (2010), Tách và xác định β- Lactam trong đối tƣợng sinh
học bằng phƣơng pháp điện di mao quản, Luận văn thạc sĩ khoa học,
ĐHQGHN.
5. Trần Văn Hiếu, Từ Vọng Nghi, Nguyễn văn Ri, Nguyễn Xuân Trung (2003),
Hóa phân tích-phần 2-các phƣơng pháp phân tích cơng cụ, Đại học Quốc
Gia Hà Nội, Hà Nội.
6. http://tusach.thuvienkhoahoc.com/wiki/Cefaclor 7. http:/ www.thuocbietduoc.com.vn
8. Nguyễn Việt Huyến (1999), Cơ sở các phƣơng pháp phân tích điện hóa học, Đại học quốc gia Hà Nội.
9. Nguyễn Thị Nga (2009), Nghiên cứu xác định Trimethoprim trong dƣợc
phẩm bằng phƣơng pháp von-ampe hịa tan hấp phụ sóng vng, Luận văn
tốt nghiệp đại học, Trường đại học khoa học tự nhiên.
10. Từ Vọng Nghi (1969), Phƣơng pháp phân tích cực phổ-các bài tập, bộ mơn hóa phân tích-khoa hóa học-đại học tổng hợp.
11. Phạm Luận (1997), Chuẩn bị dung dịch trong hóa học phân tích.
12. Tạ Thị Thảo (2005), Bài giảng chun đề thống kê trong hóa phân tích, ĐH Quốc gia Hà Nội, Hà Nội.
13. Nguyễn Thu Thủy (2009), Nghiên cứu xác định Ciprofloxacin trong một số
dƣợc phẩm bằng phƣơng pháp điện hóa, Luận văn thạc sĩ khoa học, Trường
đại học khoa học tự nhiên.
14. Ngô Quang Trung (2008), Xây dựng qui trình phân tích đồng thời một số kháng sinh học β_lactam và nghiên cứu sự tồn dƣ tại một số khu vực bệnh viện Hà Nội, Luận văn thạc sĩ khoa học,ĐHQGHN.
15. Trường ĐH Dược Hà Nội (1999), Hóa Dƣợc, Tài liệu lưu hành nội bộ cho
sinh viên trường ĐH Dược Hà Nội, NXB ĐH Dược Hà Nội.
16. Vũ Thị Tuyết (2008), Nghiên cứu xác định Niphedipine trong dƣợc phẩm bằng phƣơng pháp von-ampe hòa tan catot trên điện cực giọt thủy ngân treo,
Luận văn tốt nghiệp đại học, Trường đại học khoa học tự nhiên.
TIẾNG ANH
17. A.Fernández-González, R. Badía and M. E. Díaz-Gar (2003), "Micelle- mediated spectrofluorimetric determination of ampicillin based on metal ion- catalysed hydrolysis", Analytica Chimica Acta,volume (484), pp. 223-231. 18. A.G.Fogg,N.M. Fâyd, C.Burgess and A.McGlynn (1979), “Differential
pulse polarographic determination of cephalosporins and their degradation products”, Analytica Chimica Acta,volume (108),pp. 205-211.
19. Al- Momani (2001),„„ Spectrophotometric determination of selected Cephalosporins in drug Formulations using flow injection analysis‟‟, J. of Pharmaceutical and Biomedical Research, 25, pp. 751-757.
cephalosporins by differential pulse polarography and linear scan voltammetry”,Analytica Chimica Acta, volume (146), pp. 87-95.
21. Attila Gaspar, Melinda Andrasi, Szilvia Kardos (2002), “Application of capillary zone electrophoresis to the analysis and to a stability study of cephalosporins”, Journal of Chromatography B, volume (775), pp. 239–246. 22. Biyang Deng, Aihong Shia, Linqiu Lia and Yanhui Kang (2008),
"Pharmacokinetics of amoxicillin in human urine using online coupled capillary electrophoresis with electrogenerated chemiluminescence detection", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis,volume (48), pp.1249-1253.
23. Bohdar Ogorevcf and Sergej Gomiek (1991), “Electrochemical analysis of cephalosporin antibiotics”, Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysi, volume (9), pp. 225-236.
24. C. Y. W Ang, W.H. Luo, E.B. Hansen, j.p. Freeman, H,C. Thompson (1996), “Rapid determination of ampicillin in bovine milk by liquid chromatography with fluorescence detection”, Journal of AOAC International,volume
(80),pp. 107-190.
25. Daniela P. Santos, Márcio F. Bergamini, Maria Valnice B. Zanoni,(2008) „„Voltammetric sensor for amoxicillin determination in human urine using polyglutamic acid/glutaraldehyde film‟‟, Sensors and actuators B: Chemical, volume (133), pp. 398-403.
26. F. Belal, M. M. El-Kerdawy, S. M. El-Ashry and D. R. El-Wasseef (2000), "Kinetic spectrophotometric determination of ampicillin and amoxicillin in dosage forms", Il Farmaco, volume (55), pp. 680-686.
27. J.M. Cha, S. Yang, K.H. Carlson (2006), , "Trace determination of β-lactam antibiotics in surface water and urban wastewater using liquid chromatography combined with electrospray tandem mass spectrometry",
Journal of Chromatography A, volume(1115), pp. 46-57.
28. L. N. C. Rodrigues, M. V. B. Zanoni and A. G. Fogg, (1999), „„Indirect polarographic and cathodic stripping voltammetric determination of cefaclor as an alkaline degradation product‟‟, J Pharm Biomed Anal, pp.497-505. 29. L.Nozal, L.Arce, A.Ríos, M.Valcárcel (2004),"Development of
ascreening method for analytical control of antibiotic
Residues by micellar electrokinetic capillary chromatography", Journal of AnalyticaChimicaActa, volume (523), pp .21–28.
30. M.I Bailon-Perez, A.M.Garcia-Campana, C. Cruces-Blanco, M. del Olmo Iruela (2008), "Trace determination of β-lactam antibiotics in environmental aqueous samples using off-line and on-line preconcentration in capillary electrophoresis", Journal of Chromatography A, volume (185), pp. 273-280. 31. M.I Bailón-Pérez, L.CuadrosRodríguez,C.Cruces-Blanco (2006),
"Analysis of different β-lactams antibiotics in pharmaceutical preparations Using micellar electrokinetic capillary chromatography ", Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, volume(43),
pp. 746–752.
32. Massaaki Kai, Hiromi Kinoshita, Mikio Morizono (2003), “Chromatographic determinations of a β-lactam antibiotic, cefaclor by means off luorescence, chemiluminescence and massspectrometry”, Journal of Mass Spectrometry,
volume (39), pp. 329 – 340.
33. Merk (1996), The Merck Index, 12th edition.
34. N. Abo El-Maali, A.H. Osman, A.A.M. Aly, G.A.A. Al-Hazmi (2004), “Voltammetric analysis of Cu (II), Cd (II) and Zn (II) complexes and
their cyclic voltammetry with several cephalosporin antibiotics”,
35. Nagori BP and Shukla Shiv Shankar(2008),„„New spectrophotometric determination of Cefaclor in bulk drug and synthetic mixtrure‟‟, Asian Journal of research in chemistry, volume (01), pp. 51-54.
36. Nagwa Abo El Maali , Azza M.M. Ali, Mahmoud Khodari and M.A. Ghandour (1991), “Cathodic stripping voltammetric determination of the cephalosporin antibiotic Ceftriaxone at the mercury electrode in aqueous and biological media”, Bioelectrochemistry and Bioenergetics, volume
(26), pp. 485-492.
37. Rolando Gonzalez-Hernandez , Nuevas-Paz Lauro, Soto-Mulet Laritza, Lopez-Lopez Miguel, Hoogmartens Joseph (2001), "Reversed phase high performance liquid chromatographic determination of cefixime in bulk drugs", Journal of liquid chromatography & related technologies, volume
(24), pp. 2315-2324.
38. Viviane M. Ivama, Letícia N. C. Rodrigues, Cláudia C. I. Guaratini and Maria Valnice B. Zanoni(1999), „„Spectrophotometric determination of cefaclor in pharmaceutical preparations‟‟, Journal of Química Nova, volume (22), pp. 201-204.
39. Wei Liu, Zhujun Zhang, Zuoqin Liu(2007), "Determination of β-lactam antibiotics in milk using micro-flow chemiluminescence system with on-line solid phase extraction", Analytica Chimica Acta, volume (592), pp. 187–192. 40. WJ Blanchflower, Hewitt SA, Kennedy DG (1994), "Confirmatory assay for
the simultaneous detection of five penicillins in muscle, kidney and milk using liquid chromatography - electrospray mass spectrometry",
Analyst,Volume (119), pp. 2595-2601.
41. Yahya Mrestani, Reinhard H. H. Neubert, Albert Hartl and Johannes Wohlra“ Determination of cephalosprins in urine and bile by capillary zone electrophoresis”, Analytica Chimica b (1997), Acta, volume (349), pp. 207-
213.
42. YAN Jin-long (2005), „„Electrochemical behavior of the degradation product of cefaclor and its application to analytical chemistry‟‟, Analytical Laboratory,Department of Chemical Engineering, Yancheng Institute of