Eƒe"d⇔ずc tiｘn hành:
- H厩n h嬰p ph違n 泳ng: 6 mL dung d鵜ch DPPH cho vào 4 mL dung d鵜ch m磯u. - H厩n h嬰r"8逢嬰c l逸e"8隠w"x "8吋 yên trong bóng t嘘i trong 30 phút 荏 nhi羽v"8瓜 phòng. - Aq"8瓜 h医p thu quang c栄a dung d鵜ch 荏d逢噂c sóng 517 nm.
- Thí nghi羽o"8逢嬰c th詠c hi羽n 3 l亥n, l医y giá tr鵜 trung bình.
- Xây d詠pi"8欝 th鵜 th吋 hi羽n m嘘i quan h羽 gi英a n欝pi"8瓜 và ph亥p"vt<o"*'+"d逸t g嘘c t詠 do. T瑛8„"zƒe"8鵜nh giá tr鵜 IC50 c栄a m磯u/ axit ascorbic.
2.2.4.2. Thぬ nghiうm hoＴt tính kháng khuｂn
Các ch栄ng vi khu育p"8逢嬰c cung c医p theo chu育n ATCC g欝m:
Staphylococcus aureus (ATCC®875:ª+
Escherichia coli (ATCC®:95;ª+
Vi khu育p"8逢嬰c c医{"vt‒p"8 c"vj衣ch ch泳c"o»k"vt逢運pi"fkpj"f逢叡pi0"O»k"vt逢運ng nuôi c医y 8吋 vi khu育n phát tri吋p"d·pj"vj逢運ng là LB t鰻ng h嬰p. H医p 荏 nhi羽v"8瓜 121oC trong 20 ph¿t, 8吋 ngu瓜k"8院n 40 Î 45oC."8鰻 th衣ch vàq"8 c"rgvtk"x»"vt́pi."8院n khi th衣ej"8»pi"jq p"vqàn l壱v"pi逢嬰e"8 c."栄 kho違ng 1Î4"pi {"8吋 lo衣i b臼8 c"pjk宇m khu育n trong quá trình thao tác.
A鵜c"8k吋m g穎i m磯u: Vi羽n Nghiên c泳u Sinh h丑e"x "O»k"vt逢運pi."vt逢運pi"A衣i h丑c Nông N¤o"Vr0JEO."rj逢運ng Linh Trung, Tp.Th栄A泳c, Tp.HCM.
2.2.4.3. Thぬ nghiうm とc chｘ enzyme c-glucosidase
Cao trích 8逢嬰c hòa tan trong FOUQ"7'"x "p逢噂c c医t vô trùng v噂i các j o"n逢嬰ng khác nhau (0, 4, 16, 64 và 256 µg/mL).
Hút 40 N"8羽m phosphate 100 mM 荏 pH 6,8 và 25 µL c-glucosidase 0,2 U/mL và 8 c";8"ik院ng. Thêm 10 µL m磯u th穎, 25µL p-nitrophenyl c-D-glucopyranoside 2,5 mM.
8"oN"fwpi"f鵜ej" FRRJ"3"oO 6"oN"fwpi"f鵜ej"o磯w N逸e"8隠w 曳"vtqpi"v嘘k"52"rj¿v Aq"o壱v"8瓜"swcpi"荏"739"po
31
L逸e"8隠u, 栄荏 37oC trong 30 phút. D瑛ng ph違n 泳ng b茨ng 100 µL Na2CO3 100 mM. Ti院n j pj"8q"o壱v"8瓜 quang c栄a dung d鵜ch b茨ng máy BIOTEK t衣k"d逢噂c sóng 401 nm.
M磯w"8嘘i ch泳pi"f逢挨pi<"cectdqug"épi"f«{"j o"n逢嬰ng v噂i cao trích. M磯w"8嘘i ch泳ni"¤o<"8羽m phosphate 100 mM 荏 pH 7.
A鵜c"8k吋m g穎i m磯u: Phòng Sinh h丑c 泳ng d映ng Î Vi羽n Hóa h丑c Î Vi羽n Hàn Lâm Khoa H丑c Và Công Ngh羽, Phòng 601, 18A, Hoàng Qu嘘c Vi羽t, C亥u Gi医y, Hà N瓜i.
32
K蔭T QU謂 VÀ BÀN LU一N A鵜nh danh n医m linh chi
Hình 3.1 th吋 hi羽p"8q衣n DNA m映c tiêu và sau khi PCR v噂i primer ITS1/ITS4 cho d<pi"8 ej"uƒpi."t "e„"m ej"vj逢噂c kho違ng 600bp.
Hình 3.1: K院t qu違 PCR v噂i c員p primer ITS1/ITS4 M: Ladder 1000bp; S: Mｄu thぬ nghiうm.