2.4.2.1. Kỹ thuật ICSI
Kỹ thuật ICSI được thực hiện tại Bệnh viện Nam học và Hiếm muộn Hà Nội với quy trình như sau: bệnh nhân được khám, tư vấn, làm các xét nghiệm cơ bản, và xét nghiệm nội tiết tố sinh dục, siêu âm đếm nang thứ cấp vào ngày 2 của vòng kinh. Hồ sơ được hoàn thành ngay sau khi đủ kết quả, và được duyệt ngay trong tuần. Sau đó, tùy từng trường hợp, bệnh nhân sẽ được kích thích buồng trứng với phác đồ phù hợp [84].
2.4.2.2. Kỹ thuật sinh thiết phôi
Các phôi thụ tinh trong ống nghiệm đạt mốc thời gian 5 ngày tuổi (khoảng 60 tế bào) sẽ được sinh thiết sử dụng tia lase để lấy ra khoảng 3 đến 5 tế bào bởi các chuyên viên phôi học tại phòng nuôi cấy phôi Bệnh viện Nam học và Hiếm muộn Hà Nội. Các tế bào này sẽ được chuyển về phòng thí nghiệm DNA thuộc Bộ môn Giải phẫu của Học viện Quân Y để kiểm tra bất thường về mặt di truyền. Trước khi chuyển phôi bào ra khỏi phòng nuôi cấy, phôi bào cần được trải qua bước rửa phôi để loại bỏ các mảnh vụn tế bào vòn sót lại trong quá trình sinh thiết cũng như loại bỏ các cặn bẩn trong môi trường còn sót lại.
2.4.2.3. Các kỹ thuật sinh học phân tử
Các kỹ thuật tách DNA, WGA, PCR đa mồi và điện di mao quản được tiến hành tương tự như mô tả ở mục 2.4.1 với các yếu tố nhiệt độ gắn mồi, nồng độ mồi và số chu kỳ khuếch đại đã được tối ưu hóa.
2.4.2.5. Kỹ thuật phân tích di truyền liên kết trên mẫu phôi
Để kết luận tình trạng phôi, cần so sánh kích thước các STR khuếch đại từ mẫu phôi so với mẫu DNA của bố, mẹ và người thân bị bệnh. Theo nguyên tắc phân tích di truyền liên kết, kích thước STR khuếch đại từ mẫu phôi và DNA của con/ người thân bị bệnh phải phù hợp với kích thước STR khuếch đại từ mẫu DNA của bố và mẹ (các con sẽ được di truyền trực tiếp các STR nằm trên 1 NST X từ bố và 1 NST từ mẹ; trường hợp con trai hoặc phôi mang NST Y sẽ xuất hiện đỉnh sản phẩm 145 bp của marker Amelogenin trên NST Y). Có 2 trường hợp có thể xảy ra:
- Phôi mang gen bệnh: xuất hiện các kích thước STR giống của mẫu con/ người thân bị bệnh nhận từ NST X mang gen bệnh của người mẹ
- Phôi không mang gen bệnh: xuất hiện các kích thước STR từ NST X không mang gen bệnh của người mẹ (không xuất hiện ở mẫu con/ người thân bị bệnh).