256 Met Arg Ala Gln Phe Gly Asn
3.5. Phát hiện virus trên thực địa
RNA tổng số từ các mẫu ong ấu tr ng và ong trưởng thành từ 180 đàn ong l n lượt được tách chiết và sử dụng làm khuôn cho phản ng RT-PCR với cặp mồi đặc hiệu VP1 như m tả ở trên. Sản phẩm RT-PCR được điện di phân tích trên gel agrose 1%. Kết quả điện di các mẫu dương t nh có xuất hiện 1 băng sản phẩm với ch thước bằng với ch thước của mẫu đối ch ng dương và g n với băng 750 bp trên thang DNA chỉ th (hình 3.6). Sản phẩm PCR tư c c mẫu dương t nh sẽ được tinh sạch đọc trình tự gen và tiến hành phân tích xây dựng cây phát sinh loài.
Hình 3.6. Điện di sản phẩm PCR của mốt số mẫu ong thực địa sử dụng cặp mồi đặc hiệu VP1 của virus DWV. M : Thang chỉ th DNA 1kb (Fermentas); 1: Mẫu đối ch ng dương (plasmid t i tổ hợp mang gen VP1); 2: Mẫu đối ch ng âm (SBV); 3-13: Các mẫu ong thu thập từ thực đ a.
Tiến hành l n lượt với tất cả 180 đàn ết quả đi u tra tỉ lệ nhiễm DWV trên 10 tỉnh được thể hiện trên bảng 3.3 và hình 3.7.
M 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
Sản phẩm PCR 1 kb
Bảng 3.3. Tỉ lệ nhiễm DWV trên các đàn ong 10 tỉnh thành Tỉnh Tổng số đàn đi u tra Tỉ lệ nhiễm Tỉ lệ nhiễm ở c c giai đoạn Ấu tr ng Trưởng thành Bắc Giang 18 0% 0% 0% Điện Biên 18 0% 0% 0% Hòa Bình 18 0% 0% 0% Hưng Yên 18 17% 0% 17% Nghệ An 18 0% 0% 0% Bình Phước 18 22% 0% 22% C n Thơ 18 6% 0% 6% Đồng Nai 18 6% 0% 6% Lâm Đồng 18 17% 6% 11% Ti n Giang 18 0% 0% 0%
Kết quả đi u tra cho thấy tại 10 tỉnh được đi u tra có 12 trên tổng số 180 đàn ph t hiện có sự lây nhiễm DWV chiếm 6.7% tổng số đàn. Khi so s nh tỉ lệ nhiễm DWV gi a các tỉnh Hưng Yên là tỉnh duy nhất tại mi n Bắc phát hiện được virus DWV với 3 trên tổng số 18 đàn chiếm tới 17%. Các tỉnh mi n Nam có tới 4/5 tỉnh đi u tra nhiễm DWV. Trong đó Bình Phước có tỉ lệ cao nhất chiếm 22% tiếp theo là Lâm Đồng với 17%, 2 tỉnh C n Thơ và Đồng Nai tỉ lệ nhiễm 6%, Ti n Giang không phát hiện được đàn nào nhiễm DWV.
Virus gây bệnh trên ong mật có thể lây nhiễm và làm chết ong ở giai đoạn ấu tr ng hoặc giai đoạn ong trưởng thành. Việc x c đ nh được tỷ lệ nhiễm bệnh của DWV trên ong trưởng thành và ấu tr ng ong có nghĩa lớn trong dự phòng và đi u tr bệnh do DWV gây nên. Kết quả đi u tra tỉ lệ nhiễm DWV trên ấu tr ng ong và ong trưởng thành (hình 3.7) chỉ ra rằng DWV được phát hiện trên ong trưởng thành và cả mẫu ấu tr ng. Tuy nhiên ong trưởng thành có tỉ lệ nhiễm cao hơn so với mẫu ấu trùng.
Hình 3.7. Tỉ lệ nhiễm DWV trên các tỉnh thành
Như vậy sự có mặt của DWV trên diện rộng đã được khẳng đ nh. Tuy nhiên tỉ lệ nhiễm chưa cao. Mặc dù vậy, kết quả nghiên c u này cho thấy c n chủ động phòng bệnh chăm sóc tốt đàn ong để tr nh nguy cơ b ng ph t d ch.