Tần suất và đặc điểm lâm sàng bệnh thalassemia ở trẻ em dân tộc Tày và Dao tại Tuyên Quang

Kháiniệmvàlịchsử 1. Khái niệm

Lịchsửbệnhbetathalassemia

Năm 1936, Whippe và Bradford phát hiện ra nhiều bệnh nhân thiếumáu ở vùng Địa Trung Hải có biểu hiện lâm sàng giống “bệnh thiếu máuCooley” và đặt tên cho loại thiếu máu này là Thalassemia (tiếng Hy Lạp cónghĩa là “thiếu máu vùng biển”) [114]. Năm 1940, Wintrobe và cộng sự chorằng thiếu máu Cooley là beta thalassemia thể nặng, đồng hợp tử, và các biểuhiện mà Cooley mô tả đầu tiên là những biểu hiện của hiện tượng thiếu máumạn tính, nhiễm sắt và biến dạng xương [42]. Để chứng minh có hiện tượngtan máu, ngay từ năm 1950, Hamilton dùng phương pháp đánh dấu hồng. Năm 1968, Angelovoy Avà cộng sự, nghiên cứu đời sống hồng cầu ở những trẻ em thiếu máu Cooleythu được kết quả tương tự. Thời gian sống của hồng cầu rút ngắn bằng 1/3 sovới thời gian sống của hồng cầu bình thường. Qua thực nghiệm với nhiềunghiên cứu đã xác định rằng sở dĩ hồng cầu trong β-thalassemia bị vỡ sớm làdokhuyếttậtbêntronghồng cầu [56]. chứcnăngsinhhọc quan trọng:vậnchuyểnO2và CO2. Globin là thành phần protein của phântử hemoglobin, quyết định đặc tính và loại hemoglobin. 2,3-DPG được tạo ratrong quá trình thoáihóaglucose,làmgiảmái lực củaHbvớiO2[107]. Trong quá trình phát triển cá thể ở người, các loại chuỗi polypeptide cósự chuyển đổi, loại chuỗi này thay thế chuỗi kia ở từng giai đoạn của cuộcsống. Các chuỗi globin xuất hiện tuần tự trong quá trìnhpháttriển cáthểvàsau khicặpđôivớinhausẽtạo thànhcácloạiHb sau:. Bảng 1.1.Cấu trúcglobinvà thờikỳ xuấthiện Hbsinhlý. Hb sinh lý Cấutrúc. HbF α2γ),2 Thainhi5tuần,là Hbchủ yếuở thainhi. HbA1 α2β2 Thainhi 6tuần,là Hb chủ yếuở ngườibìnhthường HbA2 α2δ),2 Thainhi lúcgần sinh,Hb ởngườibình thường. Thalassemia không phải là một bệnh đơn lẻ mà là một nhóm các rốiloạn, mỗi bệnh xuất phát từ sự bất thường di truyền của việc sản xuất globin.Các điều kiện tạo thành một phần của phổ các bệnh được gọi chung là bệnhhuyếtsắctố(hemoglobinopathies),cóthểđượcphânloạithànhhailoại[114]. Bệnh hemoglobin Constant spring (Hb Cs): 5 - 10% ở Đông Nam Á,do đột biến ở bộ ba dừng của chuỗi ở ARN thông tin tạo ra một chuỗi α bị kéodài(αCS).Vìsựtổnghợpglobinαbịngăncản(chỉthựchiệnđược1%)nên Hb Constantspringbiểuhiệngiốngmất1genα. Bệnh hemoglobin Lepore: Là chuỗi globin hoà trộn giữa nửa chuỗi γ),có N- tận cùng với nửa chuỗi β có C- tận cùng.

Alphathalassemia

Bệnh do giảm hoặc không sinh được chuỗiα gọi là α thalassemia, bệnh do giảm hoặc không sinh được chuỗi β gọi là βthalassemia.Đâylàhai thểbệnh chính,phổ biến củathalassemia. Trường hợp này đượcgọi làalpha thalassemia thểnhẹ (alpha-thalassemia minor), ký hiệuo-thalassemia, người mang 2 gen đột biến được gọi là người truyền bệnh αthalassemia (alpha thalassemia trait). Gây ra tình trạng phù thai, thai bị bệnhnày thường tử vong ở tuần 23 - 38 hoặc sớm sau sinh với đặc điểm thiếu máurất nặng, gan lách to, phù toàn thân, suy tim, đôi khi kèm theo các dị tật bẩmsinh khác làmthaichết lưuhoặcchếtngaysausinh[110].

Betathalassemia

Vàinétsơlượcvềgenalpha vàbetaglobin

Một số đột biến gen trong nhóm này khi ở trạngtháidịhợp tửchobiểu hiệnkiểuhình thuộc thểimlặng(silent). Bảng 1.3.Mộtsốđộtbiếntạivùng promotertại khuvựcchâuÁ. STT Độtbiếntạivùngpromoter Kiểu Phânbố. b) Độtbiến quátrìnhxửlýmARN Độtbiếntại vịtrí tiếpgiápintron-globin :exon. Quá trình cắt những đoạn intron và nối những đoạn exon của gen β- globinđòihỏicácvịtríchonốiGTtạiđầu5’vàvịtrínhậnđầunốiAGtạiđầu3’c ủaintron.Cáccặpnốibấtbiếnnàylàđiềukiệncầnthiếtchoviệcnối. Thay thế một nucleotide trong exon dẫn đến tạo thành một trong 3 mãkết thúc (UAA, UAG hoặc UGA) làm cho việc dịch mã kết thúc sớm hơn sovới bình thường và tạo sản phẩm β-globin không bền vững bị phá hủy ngaytrong tếbào,dạngđộtbiến nàytạo β0thalassemia. Bảng 1.7.Cácđột biếnvônghĩaở khuvực châuÁ[9]. STT Các độtbiếnvônghĩa Kiểuđột biến Phânbố. Trung Quốc, Nhật BảnĐông NamÁ. Việc chèn hoặc xóa một, haihoặc bốnnucleotide trongvùngmã hóacủa gen β-globin sẽ phá vỡ khung đọc bình thường khi dịch mARN. Do vậy,làmthayđổitoànbộtrìnhtựaxitaminbìnhthường,bắtđầutừđiểmxảy rađột biếnđếncuốigen[5],[9]. Bảng 1.8.Các độtbiếndịchkhungphânbốtại khuvựcchâuÁ[9]. STT Độtbiếndịchkhung Kiểuđột biến Phânbố. Tráingượcvớialphathalassemia,việcmấtđoạngentrongbetathalassemia rất hiếm gặp và thường xuất hiện đơn lẻ với hai nhóm: một nhómmất đoạn bị giới hạn ở gen β-globin và nhóm thứ hai bị mất đoạn lớn hơn ảnhhưởngđếnβ- LCRcóhoặc không cógen β-globin[5],[9]. Trong hộichứng Thalassemia có một hiện tượng chung nhất là sự thiếu hụt một loạichuỗi polypeptid của phần Globin, gây ra dư thừa tương đối loại chuỗi kia.Nếu sự thiếu hụt xảy ra đối với chuỗi β thì gọi là bệnh β-Thalassemia, khichuỗi β giảm thì chuỗi α nối vớiβ bị giảm vàchuỗi α còn dư sẽ tăng nối vớichuỗiδ),vàchuỗiγ),.Ngượclại,nếusựthiếuhụt xảyraở chuỗiαthì gọi làbệnhα-Thalassemia, khi chuỗi globin α giảm, globin β tăng nối với globin còn lại,sự nối kết α và δ),, γ), giảm.

Đặcđiểmdịchtễthalassemia

Trongnhóm các đột biến gây α+-thalassemia, -3.7và -4.2là 2 đột biến thường gặpnhấtởhầuhếtcácvùngdịchtễ.Trongnhómđộtbiếngâyαo-thalassemia,có3 kiểu phổ biến nhất là --SEAở vùng Đông Nam Á, --MEDvà --20.5ở vùng ĐịaTrungHải.KiểuđộtbiếnmấtđoạntrêngenHbAphổbiếntạiBắcPhilàkiểu --MED.Trongkhiđó,khuvựcĐôngNamÁlạilưuhànhđộtbiến--. Với sự phát triển của công nghệ sinh học phân tử hiện nay, có rất nhiềuphương pháp giúp xác định các loại đột biến gen gây bệnh thalassemia với độnhạy cao, kỹ thuật ngày càng tiên tiến, hiện đại, kinh tế hơn và cho kết quảnhanh; các xét nghiệm này đã được ứng dụng rộng rãi trong chẩn đoán xácđịnh bệnh, phát hiện người lành mang gen và chẩn đoán trước sinh. V ớ i các đột biến mất đoạn có kích thước nhỏ hơn 1 kb, cặp mồi sẽ tạo ra hai sảnphẩm,đoạnnhỏhơnlàsảnphẩmtừallenbịmấtđoạn.Vớinhữngđộtbi ếnmất đoạn lớn, khoảng cách giữa hai mồi quá lớn để có thể khuếch đại đượcallen bình thường, mà chỉ có thể khuếch đại sản phẩm từ allen mang đột biếnmất đoạn.

Cỡmẫuvàphươngphápchọnmẫu 1. Cỡmẫu

Tiêu chuẩn lựa chọn, trẻ thuần chủng (cả bố và mẹ đều là người dân tộcTày hoặc dân tộc Dao, trẻ không có cùng huyết thống, không mắc các bệnhcấp hoặc mạn tính, không cho/nhận máu truyền trong 3 tháng trước thời điểmđiềutra và đồngýthamgia nghiêncứu. - Khai thác tiền sử, lý do vào viện, bệnh sử, khám thực thể và lấy mẫuxét nghiệm cần thiết phục vụ cho các đối tượng nghiên cứu theo một mẫuthốngnhất.Nghiêncứuđượcthựchiệnvớisựthamgiacủanghiêncứusinh, 3 bác sĩ và 5 điều dưỡng của Bệnh viện đa khoa tỉnh Tuyên Quang. - Các chỉ số hồng cầu như: Số lượng hồng cầu, hemoglobin (Hb),hematocrit (HCT), thể tích trung bình hồng cầu (MCV), hemoglobin trungbình hồng cầu (MCH), nồng độ hemoglobin trung bình hồng cầu, độ phân giảikíchthướchồngcầu(RDW).