Shigella

Vi khuẩn Shigella MỤC LỤC Lời nói đầu I Giới thiệu chung II Giới thiệu Shigella II.1 Hình thái sinh lý II.2 Những yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng phát triển Shigella thực phẩm III Độc tố khả gây bệnh III.1 Độc tố III.2 Khả gây bệnh IV Phương pháp kiểm tra IV.1 Các xét nghiệm sinh hoá huyết IV.2 Xét nghiệm dựa DNA IV.3 Xét nghiệm phản ứng ngưng kết latex IV.4 Những xét nghiệm dựa kháng thể khác V Phương pháp phòng ngừa, tiêu diệt V.1 Điều trị bệnh V.2 Vệ sinh sở chế biến thực phẩm Kết luận 1 3 11 11 14 17 18 23 25 25 26 26 27 30 Vi khuẩn Shigella LỜI NÓI ĐẦU Vi sinh vật (microorganisms) tên gọi chung tất sinh vật có hình thể bé nhỏ, muốn thấy rõ phải nhìn qua kính hiển vi Các vi sinh vật có khả trao đổi chất mạnh, hẳn sinh vật khác đặc biệt khả thích ứng nhanh Vi sinh vật (VSV) có mặt khắp nơi Trái Đất: từ đỉnh núi cao đến đáy biển sâu, không khí, đất, nước, thể sinh vật khác… Có nhiều VSV có ích Một số VSV sống đất phân giải xác hữu cơ, biến chúng thành thức ăn cho trồng Một số VSV cố định đạm biến khí nitơ thành hợp chất nitơ mà trồng dễ hấp thu Một số VSV tham gia phân giải chất thải, góp phần bảo vệ môi trường Nhiều chủng VSV dùng để tuyển kim loại quý từ quặng nghèo Nhiều VSV có khả tạo khí sinh học (biogas), giúp giải vấn đề lượng Đặc biệt, từ thời xưa, người chưa biết đến tồn VSV, họ biết sử dụng chúng vào việc sản xuất nhiều sản phẩm lên men khác : nấu rượu, muối dưa, làm tương, làm mắm… Tuy nhiên, bên cạnh có không VSV có hại Chúng gây bệnh cho người sinh vật khác Chúng làm hư hao, biến chất lương thực, thực phẩm, vật liệu… Vi sinh vật học thực phẩm chuyên ngành vi sinh vật học chuyên nghiên cứu ứng dụng tác hại vi sinh vật trình bảo quản chế biến lương thực, thực phẩm Trong công nghệ thực phẩm, vi sinh vật có nhiều ứng dụng, nấm men Saccharomyces cerevisae dùng lên men sản xuất rượu đồ uống có chứa cồn, vi khuẩn Corynebacterium dùng sản xuất bột ngọt, vi khuẩn Streptobacterium dùng sản xuất sữa chua…Bên cạnh có vi sinh vật thúc đẩy trình thối rữa, làm hư hao, biến tính dẫn đến giảm giá trị dinh dưỡng cảm quan thực phẩm Một ảnh hưởng vi sinh vật lên thực phẩm công nghiệp cần quan tâm vi sinh vật gây bệnh lan truyền qua đường thực phẩm Trong tiểu luận này, xin đề cập đến phần nhỏ vi khuẩn Shigella gây bệnh Vi khuẩn Shigella lỵ trực khuẩn ảnh hưởng trình chế biến thực phẩm I.GIỚI THIỆU CHUNG : Các vi sinh vật gây cho người nhiều bệnh khác nhau, có nhiều bệnh lây qua đường thực phẩm Các bệnh chủ yếu bệnh đường ruột, số bệnh tiêu chảy (diarrhea) Tiêu chảy bệnh phổ biến toàn giới, đặc biệt nước phát triển Theo thống kê Tổ chức Y tế Thế giới (WHO), bệnh tiêu chảy gây 30% trường hợp tử vong trẻ tuổi hàng năm làm chết khoảng triệu người Có nhiều nguyên nhân gây bệnh: vi khuẩn, kí sinh trùng, virus Bệnh tiêu chảy vi khuẩn bệnh toàn cầu, tỉ lệ mắc bệnh tử vong trẻ em người lớn cao Có nhiều loại vi khuẩn gây bệnh tiêu chảy như: Vibrio, E coli, Shigella, Salmonella, Yersinia, Clostridium… Bệnh lị trực khuẩn (shigellosis, bacillary dysentery) bệnh tương đối phổ biến giới Bệnh đặc trưng nước thể, kéo theo vài ngày sau xuất chất nhầy phân, có kèm theo máu Bệnh mô tả từ người biết lưu chép sử sách Trong chiến tranh Peloponnesian thành Athens, bệnh mô tả “căn bệnh đường ruột, sinh lở loét mạnh tiêu chảy không kiểm soát nổi”.Hippocrate (khoảùng năm 460 trước Công nguyên), xem người sáng lập y học Hy Lạp, mô tả bệnh sách Nhưng phải đến năm 1898, vụ dịch lị trầm trọng xảy Nhật Bản với 90,000 ca bệnh, từ bệnh nhân bị bệnh, nhà vi khuẩn học người Nhật tên Kiyoshi Shiga mớiõ phân lập xác định đặc tính vi khuẩn, nguyên nhân gây bệnh Một vài năm sau, Flexner phân lập vi khuẩn gây bệnh phân người bị bệnh lị trực khuẩn Conradi, Neisser Shiga xác định chất độc (thường gọi chất độc Shiga) nguyên nhân gây bệnh Năm 1950, trực khuẩn phân lập Shiga, Bacillus dysenteriae, đặt tên lại Shigella dysenteriae Vi khuẩn Shigella Bệnh lị trực khuẩn bệnh dịch ảnh hưởng lên hàng triệu người năm, không nước phát triển mà nước công nghiệp phát triển Bệnh dịch lan nhanh khu dân cư đông đúc khắp giới, đặc biệt nước thiếu thốn sở hạ tầng trì điều kiện vệ sinh thiết yếu nước công nghiệp phát triển, thay đổi phong cách sống làm tăng nhanh số lượng trung tâm chăm sóc sức khoẻ Các cá nhân trung tâm gặp nhiều khó khăn thích nghi nhanh chóng Shigella Bệnh lị trực khuẩn ảnh hưởng lên vùng dân cư rộng lớn kiện nội chiến hay di cư người dân đến trại tị nạn Rwanda Năm 1993, đợt dịch lị trực khuẩn bùng phát Mozambique ảnh hưởng đến 47,483 người, với 199 trường hợp tử vong ghi nhận S dysenteriae type 1, nguyên nhân bệnh lị trực khuẩn châu Phi, xác nhận tác nhân gây đợt dịch Sự lan truyền qua đường thức ăn bệnh lị trực khuẩn xảy khắp giới ảnh hưởng tới nhiều nước Mới đây, đợt dịch lớn xảy nhiều nước châu u ăn phải rau diếp bị nhiễm khuẩn nhập từ Tây Ban Nha Những nghiên cứu phương pháp nhận biết nguồn gốc trận dịch lây nhiễm qua thực phẩm Shigella sau công nghệ phát triển cho nghiên cứu lâm sàng phòng thí nghiệm Trong thực phẩm có khả gây bệnh thường không quan sát thấy Shigella mầm bệnh thường lan truyền chủ yếu hai người tiếp xúc với không gắn bó với loại thực phẩm đặc biệt Năm 1964, LaBrec chứng minh Shigella có khả xâm nhập vào tế bào biểu mô, coi bước cần thiết trình gây bệnh Một phát quan trọng việc làm sáng tỏ tính phân tử chế gây bệnh Shigella tương quan có mặt plasmid 180 đến 220 kbp khả xâm nhập tế bào biểu mô ruột Shigella Rất nhiều gen nằm plasmid có khả gây bệnh Shigella xác định giải mã Bản chất xác cách thức mà gen protein mà chúng mã hoá tương tác lẫn tương tác với môi trường thể người Vi khuẩn Shigella bệnh chưa làm sáng tỏ đầy đủ số mô hình đề xuất II GIỚI THIỆU SHIGELLA : II.1 Hình thái sinh lý : Hình 1: Vi khuẩn Shigella Giống (genus) Shigella gồm bốn loài (species) vi khuẩn Gram âm, hình que (nên gọi trực khuẩn - bacilli), chúng xếp vào tộc (tribe) Escherichia thuộc họ (family) Enterobacteriaceae, trực khuẩn kị khí không bắt buộc, thực trao đổi chất qua đường hô hấp lên men Các vi khuẩn Shigella có chiều dài 1-3µm, chiều rộng 0.30.6µm Các vi khuẩn Shigella không tạo bao nhầy (capsule) có tính kháng acid, ví dụ tế bào S flexneri có khả sống sót nhiều độ pH 2,5, pH tối ưu khoảng 7,8 Nhiệt độ phát triển tối ưu 37 oC, phát triển tốt khoảng nhiệt độ 10 – 40oC Vi khuẩn Shigella Bốn loài phân biệt lên men đường, lên men mannitol, sản phẩm indole tổng hợp enzyme ornithine decarboxylase hay arginine dehydrolase Mặc dù vi khuẩn coi khả di động, theo báo cáo gần đây, bốn loài Shigella (có độc tính độc tính) tiên mao (flagella) mà có khả di động môi trường thạch mềm Tiên mao Shigella thường mọc khắp xung quanh bề mặt tế bào, gọi chu mao (peritrichous) Hình 2: Vi khuẩn Shigella Các thành viên giống Shigella giống với Escherichia coli mặt di truyền, hoá sinh huyết Khác biệt chúng Shigella khả lên men lactose (mặc dù số có khả lên men lactose chậm), hầu hết vi khuẩn E coli vi khuẩn lên men lactose (mặc dù E coli xâm nhập ruột (enteroinvasive E coli – EIEC), tác nhân gây bệnh lị trực khuẩn, vi khuẩn không lên men lactose) Các loài Shigella không sinh trình lên men carbonhydrate Vi khuẩn Shigella sử dụng citrate nguồn cung cấp carbon Bảng 1: Một số test hoá sinh dùng để phân biệt Shigella với E coli [4] Kết Test Shigella Khả di động Lên men D-glucose có sinh Lên men lactose Lên men mucate Lysine decarboxylase Christensen citrate Acetate _ _ _ _ _ E coli + _* _^ + + D + + + * Chủng (strain) S flexneri serovar S boydii serovar 13 14 dương tính ^ Chủng S flexneri serovar 2a, S boydii serovar dương tính, S sonnei dương tính sau vài ngày D phản ứng khác EIEC có nhiều điểm chung với Shigella, chúng chứa plasmid có độc tính cao để gây bệnh mang kháng nguyên O (O-antigen), ví dụ EIEC O124, phản ứng chéo với nhiều type huyết (serotype) Shigella Kháng nguyên O thành phần lớp lipopolysaccharide (LPS) tham gia cấu tạo nên thành tế bào (cell wall), đặc trưng cho vi khuẩn Gram âm Kháng nguyên O phần polysaccharide vươn khỏi thành tế bào vào môi trường, gồm phân tử hexose (bao gồm galactose, ramnose, mannose, abequose) Kháng nguyên O định nhiều đặc tính huyết vi khuẩn có chứa LPS vị trí gắn Vi khuẩn Shigella (thụ thể) thể thực khuẩn Kháng nguyên O gọi kháng nguyên thân Một khác biệt quan trọng loài Shigella vị trí gen tổng hợp LPS S flexneri, gen sinh tổng hợp kháng nguyên O cần thiết cho tổng hợp LPS mã hoá toàn nhiễm sắc thể có vị trí gần locus his S sonnei S dysenteriae, việc tổng hợp kháng nguyên O lại phụ thuộc vào plasmid Ở S sonnei, plasmid độc lực 180 kbp mã hoá chuỗi O đặc hiệu LPS S dysenteriae, plasmid kbp plasmid độc lực rộng (large virulence plasmid) cần thiết để tổng hợp hoàn chỉnh chuỗi O Trong trường hợp này, việc xác định tác nhân gây bệnh trận dịch qua đường thực phẩm khó khăn Ví dụ, trận dịch bùng phát EIEC nhiễm phomat mềm, nhận định ban đầu chẩn đoán sai Shigella Một khác biệt EIEC Shigella có ý nghóa quan trọng liều lượng gây nhiễm (infective dose), EIEC 106 vi khuẩn với Shigella 10 đến 102 vi khuẩn Cơ chế phân tử khác biệt chưa biết đến Bệnh lị trực khuẩn bốn loài giống Shigella gây ra, phân loại theo đặc tính huyết sau: S dysenteriae (nhoùm A), S flexneri (nhoùm B), S boydii (nhóm C) S sonnei (nhóm D) Dựa kháng nguyên O lipopolysaccharide, nhóm chia nhỏ thành type huyết Theo [1]: Nhóm A có 15 type huyết thanh, type sinh độc tố Shiga Nhóm B có type huyết phân type Nhóm C có 19 type huyết Nhóm D nhóm có type huyết đơn Mức độ trầm trọng bệnh tương quan loài khác nhóm huyết (serogroup) chúng Dường có liên hệ type huyết vị trí địa lý S dysenteriae thường có triệu chứng dội thường xuất nước phát triển nhất, khoảng 5-15% trường hợp mắc bệnh bị chết, trẻ em tuổi có tỉ lệ tử vong cao S sonnei gây triệu chứng nhẹ tìm thấy nước công nghiệp phát triển S flexneri thường gặp Vi khuẩn Shigella nước phát triển gây nhiễm độc từ nhẹ đến nặng S boydii gây bệnh từ nhẹ đến nặng phân lập nước phát triển mà thường tìm thấy tiểu lục địa n Độ Bảng 2: Đặc điểm loài Shigella [4] Loài Vị trí địa lí phân bố S dysenteriae độc Shiga, tiểu lục địa n Độ, châu sản Phi, châu Á Đặc điểm phân biệt xuất chất gây trường nặng nhất, hợp khả tử vong cao không điều trị S flexneri phổ biến nước chứng nhẹ phát triển S boydii gặp nước hoá sinh giống S flexneri, phân phát biệt đặc triệu điểm triển huyết học S sonnei nhẹ nhất, có phổ biến nước phát triển gây bệnh type huyết đơn Mặc dù S.sonnei có type huyết tồn hai dạng: dạng I có khuẩn lạc nhẵn – S ( smooth) dạng II có khuẩn lạc nháp – R (rough) Mỗi dạng S sonnei có kháng nguyên riêng biệt phân biệt sử dụng kháng huyết cho hai dạng để xác định Các tế bào dạng I có chứa plasmid xâm nhập độc hại, thường phân lập từ bệnh nhân bị Vi khuẩn Shigella bệnh cấp tính Các tế bào nhanh chóng plasmid xâm nhập hẳn độc tính, tạo thành tế bào dạng II Các tế bào dạng II thường phân lập từ người giai đoạn bình phục giai đoạn cuối vụ dịch Bảng 3: Sự khác đặc điểm sinh hoá loài Shigella (quá trình lên men carbonhydrat) [1] Loài S S S S dysenteriae flexneri boydii sonnei glucose + + + + 10 mannitol _ + + + lactose + _ _ muoän Vi khuẩn Shigella Trong trường hợp nhiễm bệnh qua thực phẩm , thường phát vi khuẩn dựa kết xét nghiệm bệnh nhân Người vật chủ thích hợp Shigella phân có nhiều Shigella nên cần xét nghiệm mẫu phân Bên cạnh đó, phương tiện xét nghiệm đầy đủ nên phân tích lâm sàng phòng thí nghiệm tương đối đơn giản Nhưng điều kiện cao lại phân tích mẫu thực phẩm Thực phẩm thay đổi nhiều thành phần ( pH , chất béo ) hệ vi sinh vật nhiễm Phải xem xét kỹ yếu tố để chọn phương pháp thích hợp việc kiểm tra Shigella Nếu số lượng thấp trạng thái bị tổn thương chẩn đoán xác chẳng mang lại ý nghóa Ngoài lại khó khăn việc thực thành phần độ đặc mẫu thực phẩm Do hệ vi sinh vật thực phẩm khác nên phương pháp để kiểm tra Shigella khác Shigella gây độc với lượng nhỏ nên khó tìm thấy mẫu số lượng loài vi khuẩn khác nhiều Do liều lượng gây nhiễm Shigella thấp nên xét nghiệm chủ yếu mang tính định tính IV.1 Các xét nghiệm sinh hoá huyết : Các xét nghiệm sinh hoá huyết áp dụng cho mẫu bệnh cấp tính trạng thực phẩm Kiểm tra Shigella xét nghiệm sinh hoá huyết đòi hỏi nhiều thiết bị, vật liệu, môi trường thuốc thử Các bước kiểm tra sau: 1) Tăng sinh : Cân vô khuẩn 25g mẫu vào 225ml môi trường dịch thể Shigella thêm novobiocin mức 3µg/ml Để yên dịch huyền phù nhiệt độ phòng 10 phút, lắc để trộn Đổ vào bình tam giác dung tích 500ml đặt bình tam giác bình yếm khí có chứa chất xúc tác, cho gói tạo khí vào, kích hoạt cách cho thêm nước vào Do bình có độ ẩm cao nên phải sấy chất xúc tác sau lần sử dụng bình bể điều nhiệt 42 oC 20 Lắc trộn huyền phù cấy ria lên thạch đóa MacConkey ủ 35oC 20 20 Vi khuẩn Shigella Tăng sinh S sonnei: tiến hành novobiocin thêm vào mức 0,5µg/ml ủ bể điều nhiệt 44oC 2) Phân lập Shigella Kiểm tra đóa thạch MacConkey Khuẩn lạc Shigella có màu hồng mờ Cấy khuẩn lạc nghi vấn Shigella vào môi trường sau: môi trường dịch thể glucose, thạch nghiêng TSI, môi trường dịch thể lysine decarboxylase, thạch test khả di động, tryptone 48 35oC, phải kiểm tra sau 20 Loại bỏ tất môi trường chứa vi khuẩn cho test sau dương tính: khả di động, tạo H2S, sinh hơi, decarboxyl hoá lysine lên men sucrose hay lactose Xét khả tạo indole, loại bỏ vi khuẩn cho test dương tính khỏi tăng sinh 44 oC Tất khuẩn lạc phân lập từ tăng sinh 42 oC dương tính hay âm tính, cần giữ lại 3) Các xét nghiệm sinh hoá Cấy vi khuẩn cần xét nghiệm vào thuốc thử cần sử dụng thuốc thử có chứa vi khuẩn 35oC điều kiện yếm khí sau 24 giờ, kiểm tra ủ thêm 24 Vi khuẩn Shigella nếu: âm tính với phản ứng tạo H2S, với urease, glucose (sinh hơi), di động (thực điều kiện không cần theo số báo cáo, Shigella có khả di đôïng môi trường thạch mềm), decarboxyl hoá lysine, decarboxyl hoá ornithine (trừ S.sonnei dương tính), sucrose, adonitol, lactose (2 ngày), salicin, inositol, KCN, malonate, citrate Voges-Proskauer Hầu hết vi khuẩn Shigella dương tính với mannitol (trừ S dysnteriae âm tính) lên men methyl red Bảng 4: Các phản ứng sinh hoá huyết Shigella Test hay chất Dương tính Glucose (TSI) Thạch sâu Thạch màu vàng màu đỏ Màu vàng Không có khí, Glucose(môi 21 m tính Phản ứng Shigellaa sâu + +/-b Vi khuẩn Shigella trường dịch thể và/hay có khí bromocresol purple) Lactose (TSI) Mặt thạch màu vàngc Lactose (môi Màu vàng trường dịch thể và/hay có khí bromocresol purple) Sucrose (TSI) Mặt thạch màu vàngc Sucrose (môi Màu vàng trường dịch thể và/hay có khí bromocresol purple) H2S (TSI) Màu đen Urease Màu đỏ tím Môi trường dịch Màu tím thể lysine decarboxylase Môi trường dịch Màu tím thể ornithine decarboxylase Indole test Màu tím kết tinh bề mặt Khả di Sinh trưởng động khuếch tán Môi trường dịch thể bromocresol purple với adonitol Môi trường dịch thể bromocresol purple với salicin Môi trường dịch thể bromocresol purple với inositol Môi trường dịch thể bromocresol purple với mannitol KCN Màu vàng và/hay có khí Màu vàng và/hay có khí Màu vàng và/hay có khí Màu vàng và/hay có khí Sinh trưởng, vẩn đục 22 màu không đổi Thạch sâu màu đỏ Không có khí, màu không đổi Thạch sâu màu đỏ Không có khí, màu không đổi Không có màu đen Màu không đổi Màu vàng - Màu vàng -d Màu vàng bề mặt - Không sinh trưởng khuếch tán Không có khí, màu không đổi Không có khí, màu không đổi Không có khí, màu không đổi Không có khí, màu không đổi Không sinh trưởng, không +e - Vi khuẩn Shigella vẩn đục Màu không đổi Citrate Sinh trưởng, Không sinh vẩn đục trưởng, không vẩn đục Methyl red Màu đỏ Màu vàng khuếch tán khuếch tán Voges-Prokauer Màu hồng Màu không đến đỏ đổi Test soma đa hoá Ngưng kết Không ngưng trị kết Malonate Màu xanh + + + : dương tính 90% hay nhiều 1-2 ngày - : âm tính 90% hay nhiều 1-2 ngày b : đa số vi khuẩn Shigella tạo acid không sinh từ glucose c : màu vàng thạch nghiêng TSI chứng tỏ lactose /hay sucrose tham gia trình trao đổi chất d : đa số chủng S.sonnei cho phản ứng dương tính e : đa số chủng S dysenteriae âm tính a 4) Các xét nghiệm huyết Cấy vi khuẩn phát triển 24 thạch nghiêng chứa chất chiết từ bê có 3% NaCl vào môi trường chuẩn McFarland số Vẽ hình chữ nhật 3x1 cm lên đóa Petri nhờ bút sáp Thêm giọt huyền phù vi khuẩn, huyết miễn dịch nước muối theo hướng dẫn bảng Bảng 5: Xác định nhóm huyết miễn dịch soma Shigella hình chữ nhật huyền phù + + + + + + huyết miễn dịch đa hoá trị A A1 B C C1 C2 D A-D + + + + + + 23 nước muối sinh lý Vi khuẩn Shigella + + + + + + Lấy dây cấy sâu trộn thành phần hình chữ nhật, ý không để lẫn sang hình chữ nhật khác Lắc nhẹ đóa Petri 3-4 phút để xúc tiến phản ứng ngưng kết Đọc kết sau: = không ngưng kết 1+= ngưng kết mức phát 2+= ngưng kết 50% 3+= ngưng kết 75% 4+= ngưng kết hoàn toàn Kiểm tra lại dịch huyền phù vi khuẩn huyết miễn dịch đơn hoá trị thuộc huyết miễn dịch đa hoá trị mà phản ứng cho kết dương tính rõ (2+,3+,4+) Nếu phản ứng lại âm tính hơ nóng huyền phù nước 30 phút để thủy phân kháng nguyên giáp mạc (vỏ nhầy) can thiệp phản ứng Kiểm tra lại huyết miễn dịch đa hoá trị, dương tính, kiểm tra huết miễn dịch đơn hoá trị tương ứng 5) Lưu ý: Để phát Shigella thực phẩm cần lưu ý số điểm sau đây: - Ủû tăng sinh Shigella phải thực bể điều nhiệt không sử dụng tủ ấm - Mẫu phải kiểm tra sau lấy mẫu Mẫu dễ bị hỏng phải giữ tủ lạnh oC sẽđược kiểm tra vòng 24 kể từ lấy mẫu Nếu cần kiểm tra sau 24 kể từ lấy mẫu, mẫu đễ hỏng cần phải làm đông - Hình thái chủng Shigella khác khác thạch MacConkey Hơn nữa, có nhiều vi khuẩn đường ruột khó phân biệt với Shigella môi trường chọn lọc Vì cần phải chọn nhiều khuẩn lạc nghi vấn Shigella, có, từ môi trường thạch đóa - Không có phương pháp nhạy sử dụng để phát Shigella Các phương pháp khuyên dùng không phát Shigella với số lượng số loại thực phẩm 24 Vi khuẩn Shigella - Do có chung huyết nên có vài phản ứng huyết bị nhầm lẫn Shigella vi khuẩn đường ruột khác Vì vậy, tất huyết miễn dịch cần phải test với tất loài Shigella lần đầu sử dụng khoảng thời gian định sau IV.2 Xét nghiệm dựa DNA : Ống thông (probe) gen phát triển để phát Shigella mẫu Tính trạng phần DNA phân lập từ plasmid có độc tính lớn chủng gây bệnh Shigella dùng kó thuật lai vô tính để phân biệt chủng có độc tính độc tính Theo nghiên cứu, oligonucleotide đặc hiệu tổng hợp chép liên tiếp gen ipaH dùng ống thăm dò Shigella spp.và EIEC phân lập từ mẫu tính trạng Bản chép gen ipaH xác định vị trí nhiễm sắc thể Shigella plasmid có độc tính lớn, oligonucleotide dùng dụng cụ hữu hiệu để xác định chi So sánh phương pháp sử dụng ống thông olegonucleotide nối với alkaline phosphatase test Séreny việc xác định chủng có độc tính Shigella sử dụng canh trường phân lập từ bệnh phẩm , ống thông phát chủng độc tính Shigella EIEC Ngược lại , phân tích thực phẩm, oligonucleotide dài 18 base tổng hợp dựa đoạn nucleotide gen có độc tính tìm thấy mảnh plasmid xâm nhập 2.5kbp HindIII dùng làm ống thông Ống thông oligonucleotide kiểm tra tính đặc hiệu , với Shigella EIEC , tính nhạy cảm , nhiều thực phẩm gieo giống S.flexneri Tính đặc hiệu ống thông phụ thuộc vào thực phẩm gieo giống S.flexneri gieo giống (102 số khuẩn lạc/g) cỏ linh lăng mọc mầm phát tạo giống lai khuẩn lạc, VSV với 1,4.10 khuẩn lạc/g thực phẩm đặc thù già cỗi gieo giống ng thông DNA để phát mầm bệnh Shigella EIEC thực phẩm , dùng khuẩn lạc lai tạo để chống chọi lại bất lợi Phương pháp phản ứng chuỗi polymerase (polymerase chain reaction - PCR) thuận tiện phương pháp ống thông DNA phương pháp canh trường lặp lại theo hướng phát triển phương pháp phát Shigella vaø 25 ... loài Shigella không sinh trình lên men carbonhydrate Vi khuẩn Shigella sử dụng citrate nguồn cung cấp carbon Bảng 1: Một số test hoá sinh dùng để phân biệt Shigella với E coli [4] Kết Test Shigella. .. phải rau không , chứng tỏ Shigella sống với lượng đủ để gây triệu chứng lâm sàng 12 Vi khuẩn Shigella Trong môi trường có acid, Shigella không sống Khảo sát cho thấy lượng Shigella nhiễm vào thịt... nhóm Shigella có yếu tố độc lực nhau, điều phần giải thích triệu chứng lâm sàng khác nhóm huyết khác Shigella Các loài Shigella tổng hợp hai loại nội độc tố ShET1 ShET2 Gen tổng hợp nội độc tố Shigella