MỤC LỤC
BẢNG CÁC CHỮ VIẾT TẮT
ĐẶT VẤN ĐỀ
Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU
1.1. Tổng quan về virus cúm
1.1.1. Đặc điểm hình thái, cấu trúc của virus cúm
1.1.2. Đặc điểm các phân đoạn gen của virus
1.1.3. Cơ chế xâm nhiễm và gây bệnh của virus cúm trong tế bào vật chủ
1.1.4 Các kháng nguyên quan trọng của virus cúm
1.1.5 Tình hình dịch bệnh H1N1
1.2 Vaccine phòng chống cúm
1.2.1 Đại cƣơng về vaccine
1.2.2. Tổng quan về VLPs
1.3 Hệ thống biểu hiện Baculovirus
Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.1. Đối tƣợng nghiên cứu
2.2. Vật liệu
2.2.1 Vector tách dòng
2.2.2. Vector biểu hiện trong tế bào côn trùng
2.2.3. Hóa chất và sinh phẩm
2.2.4. Trang thiết bị:
2.3. Phƣơng pháp nghiên cứu:
2.3.1. Tách chiết RNA tổng số
2.3.2 Kiểm tra RNA bằng quang phổ kế.
2.3.3 Tổng hợp cDNA
2.3.4. Nhân gen M1 của virus cúm A/H1N1 bằng PCR
2.3.5. Điện di trên gel agarose
2.3.6 Tách dòng gen
2.3.7. Biến nạp DNA plasmid vào tế bào E.coli
2.3.8. Tách chiết DNA plasmid từ vi khuẩn E.coli
2.3.9. Kiểm tra DNA plasmid bằng enzym giới hạn
2.3.10. Thu đoạn DNA từ gel agarose
Chương 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. Kết quả tách chiết RNA tổng số
3.2. Thiết kế hộp gen M1 của virus cúm A/H1N1.
3.3. Tách dòng hộp gen M1 vào vector pCR2.1
3.3.1. Gắn sản phẩm PCR chứa hộp gen M1 vào vector pCR2.1
3.3.2. Biến nạp vector tái tổ hợp vào tế bào E.coli chủng DH5α
3.3.3. Tách chiết DNA plasmid từ tế bào vi khuẩn E.coli
3.3.4. Chọn lọc vector tái tổ hợp bằng cắt với enzym giới hạn
3.4. Tinh sạch các plasmid tái tổ hợp
3.5. Kết quả xác đinh trình tự
3.6. Thiết kế vector biểu hiện baculovirus mang hộp gen M1
3.6.1. Thu nhận hộp gen M1 từ pCRM1 và chuẩn bị vector pBluBac4.5/V5-His-
TOPO
3.6.2. Thiết kế vector biểu hiện pBluBac4.5/V5-His-TOPO mang hộp gen M1
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
TÀI LIỆU THAM KHẢO
PHỤ LỤC