Phân lập một số hợp chất saponin từ cây đu đủ rừng (Trevesia palmata)

Bài viết trình bày kết quả phân lập và xác định cấu trúc hóa học của 3 hợp chất saponin từ dịch chiết methanol của lá cây đu đủ rừng. Kết quả bước đầu làm sáng tỏ thành phần hóa học của lá cây đu đủ rừng bao gồm ba hợp chất saponin 1-3 có cấu trúc khung aglycon dạng ursan và olean.

TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 PHÂN LẬP MỘT SỐ HỢP CHẤT SAPONIN TỪ CÂY ĐU ĐỦ RỪNG (Trevesia palmata) Lê Thị Thanh Thảo*; Đỗ Quyên**; Nguyễn Thị Ngọc* Lê Thanh Sơn*; Bùi Hữu Tài***; Phan Văn Kiệm*** TÓM TẮT Mục tiêu: phân lập số hợp chất saponin từ dịch chiết methanol đu đủ rừng (Trevesia palmata) Phương pháp: đu đủ rừng sấy khô 40°C, nghiền nhỏ, chiết siêu âm với methanol cô đặc tới cặn chiết Cặn chiết tạo huyền phù với nước chiết với dung môi tăng dần độ phân cực (n-hexan, dicloromethan, ethyl acetat) Tinh chế phân đoạn nước phương pháp sắc ký (sắc ký mỏng, sắc ký cột) sử dụng chất hấp phụ silica gel, pha đảo (RP C-18), diaion (HP-20) để thu hợp chất saponin Xác định cấu trúc hóa học hợp chất phân lập thông số lý hóa chúng độ quay cực, số liệu phổ cộng hưởng từ hạt nhân (1 chiều chiều), phổ khối lượng so sánh với số liệu công bố Kết quả: từ phân đoạn nước đu đủ rừng, ba hợp chất saponin với dạng khung aglycon ursan (1, ilekudinosid C) olean [2, hederagenin-3-O-β-Dglucopyranosyl-(1’3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1’2)-α-L-arabinopyranosid 3, davisianosid B] phân lập xác định cấu trúc hóa học Kết luận: kết bước đầu làm sáng tỏ thành phần hóa học đu đủ rừng bao gồm ba hợp chất saponin 1-3 có cấu trúc khung aglycon dạng ursan olean * Từ khóa: Đu đủ rừng; Ursan saponin; Olean saponin Isolation of Saponin Constituents from Trevesia palmata Summary Objectives: To isolate several saponin compounds from methanol extract of Trevesia palmata leaves Material and methods: Dried and powdered leaves of Trevesia palmata were ultrasonically extracted with methanol and evaporated to get dry residue The extract residue was partitioned with n-hexane, dichloromethane, ethyl acetate to give corresponding fractions and water layer The water layer was purified using various chromatographic technique to obtain separate saponin compounds Chemical structures of the isolated compounds were determined based on their physico-chemical properties such as optical rotation, NMR and MS data and were then compared with those published data Results: Three saponin compounds with ursane-type (1, ilekudinoside C) and oleane-type [2, hederagenin-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1’3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1’2)-αL-arabinopyranoside; and 3, davisianoside B] were isolated and identified Conclusions: Chemical constituents of the leaves of T palmata were roughly clarified including three ursanetypes and oleane-type saponins (1-3) * Key words: Trevesia palmata; Ursane-type saponin; Oleane-type saponin * Trường Cao đẳng Y tế Hà Đông ** Trường Đại học Dược Hà Nội *** Viện Hóa sinh Biển, Viện Hàn lâm Khoa học Công nghệ Việt Nam Người phản hồi (Corresponding): Lê Thị Thanh Thảo (lethanhthao2604@gmail.com) Ngày nhận bài: 20/07/2016; Ngày phản biện đánh giá báo: 19/08/2016 Ngày báo đăng: 14/09/2016 23 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 ĐẶT VẤN ĐỀ Cây đu đủ rừng có tên khoa học Trevesia palmata thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) Theo Từ điển Cây thuốc Việt Nam, số nơi, đu đủ rừng có tên gọi khác Thông thảo gai hay Thầu dầu núi [1] Cây mọc chỗ ẩm, phân bố rộng khắp tỉnh nước ta Sơn La, Lào Cai, Hà Nội, Quảng Trị, Lâm Đồng Người dân thường sử dụng đu đủ rừng với tác dụng giải nhiệt, mát gan, chữa phù thũng, đái dắt, tê thấp, gãy xương [1] Nghiên cứu giới loài T palmata cho thấy có mặt nhiều hợp chất triterpen saponin Đây lớp hợp chất mang lại tác dụng sinh học lồi [2] Nhằm góp phần làm sáng tỏ thành phần hóa học đu đủ rừng, báo này: Chúng công bố kết phân lập xác định cấu trúc hóa học hợp chất saponin từ dịch chiết methanol đu đủ rừng * Thiết bị, dụng cụ: - Sắc ký lớp mỏng (TLC): thực mỏng tráng sẵn DC-Alufolien 60 F254 (Merck 1,05715), RP18 F254S (Merck); phát vết chất đèn tử ngoại hai bước sóng 254 nm 365 nm dùng thuốc thử dung dịch H2SO4 10% phun lên mỏng, sấy khơ hơ nóng từ từ đến màu - Sắc ký cột (CC): tiến hành với chất hấp phụ silica gel, pha đảo, diaion (HP-20) Silica gel có cỡ hạt 0,040 - 0,063 mm (Đức) pha đảo RP C-18 cỡ hạt 150 µm (Nhật Bản) Nhựa trao đổi ion loại HP-20 (Nhật Bản) - Phổ cộng hưởng từ hạt nhân (NMR): đo máy Bruker AM500 (Đức) - Phổ khối lượng phân giải cao (HRESI-MS): đo máy Agilent 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS (Mỹ) Phương pháp nghiên cứu * Phân lập số hợp chất saponin: NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU Nguyên liệu thiết bị nghiên cứu * Nguyên liệu: - Dược liệu: đu đủ rừng thu hái xã Thanh Thùy, huyện Vị Xuyên, tỉnh Hà Giang, tên khoa học: Trevensia palmata (Robx ex Lindl.) Vis Họ: Nhân sâm; mẫu tiêu HNIP/18247/16 Mẫu sau thu hái sấy khô (40°C), xay nhỏ bảo quản phòng chứa dược liệu đến nghiên cứu Dung môi: n-hexan, dicloromethan, ethyl acetat, aceton methanol dung môi công nghiệp cất lại trước sử dụng 24 - Bột loài T palmata (5 kg) chiết siêu âm với methanol (3 lần x lít 50oC, lần giờ) Gom lại dịch chiết, lọc qua giấy lọc cất loại dung môi áp suất giảm thu 530 g cặn chiết metanol Lắc cặn chiết với lít nước cất chiết phân bố với n-hexan (3 x lít), dicloromethan (3 x lít) ethyl acetat (3 x lít), sau cất loại dung mơi áp suất giảm thu phân đoạn n-hexan (TPH, 30 g), dicloromethan (TPD, 70 g), ethyl acetat (TPE, 60 g) lớp nước (TPW, 370 g) Phân đoạn nước TPW đưa lên cột diaion HP-20P để loại đường nước, sau rửa giải methanol nước có nồng độ tăng dần (25, 50, 75 T¹P CHÝ Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 100%, v/v) thu phân đoạn, TPW1TPW4 - Phân đoạn TPW3 TPW4 có sắc đồ TLC giống gộp lại phân tách thô cột sắc ký silica gel, rửa giải với hệ dung môi gradient dicloromethan/methanol (100/1 # 1/1, v/v) thu phân đoạn TPW3A-TPW3F Tiếp tục phân tách phân đoạn TPW3D cột sắc ký silica gel với hệ dung môi rửa giải dicloromethan/ aceton/nước (1/4/0,4, v/v/v) thu 12 phân đoạn TPW3D1-TPW3D12 Tiếp tục phân tách phân đoạn TPW3D2 cột sắc ký pha đảo với hệ dung môi rửa giải aceton/nước (1/1,5, v/v) thu hợp chất (100,3 mg) hợp chất (90,0 mg) Phân đoạn TPW3D4 tiếp tục phân tách cột sắc ký cột pha đảo với hệ dung môi rửa giải aceton/nước (1/1,4, v/v) tinh chế thêm cột silica gel rửa giải với dicloromethan/aceton/nước (1/4/0,4, v/v/v) thu hợp chất (140,0 mg) KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ BÀN LUẬN Hợp chất Hình 1: Cấu trúc hóa học hợp chất - Hình 2: Các tương tác COSY HMBC hợp chất 25 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên đề dợc-2016 Bng 1: S liu ph 1H-, 13C-NMR phần aglycon hợp chất - chất tham khảo STT #,d δC a,b δC a,c δH %,d δC a,b δC (mult, J Hz) 47,3 47,3 0,84 (m) 66,9 68,0 3,78 (m) a,c δH $,e δC a,b δC (mult, J Hz) 39,2 39,6 2,01 (m) 0,99 (m) 26,5 1,75 (m) δH (mult, J Hz) 38,7 39,7 1,63 (m) 26,5 a,c 0,99 (m) 1,62 (m) 25,8 26,6 1,90 (m) 1,77 (m) 1,89 (m) 88,4 88,3 3,44 (d, 9,5) 81,4 82,4 3,64 (m) 79,8 82,4 3,63 (m) 44,7 45,1 - 43,8 43,9 - 42,8 44,0 - 47,7 47,7 1,30 (m) 47,8 48,0 1,29 (m) 46,6 48,1 1,29 (m) 18,2 18,8 1,35 (m) 18,3 18,8 1,38 (m) 17,6 18,8 1,39 (m) 1,46 (m) 33,2 33,5 1,30 (m) 1,52(m) 33,0 33,4 1,62 (m) 1,29 (m) 1,50 (m) 32,7 33,4 1,64 (m) 1,28 (m) 1,64 (m) 40,8 40,9 - 39,9 40,4 - 39,2 40,5 - 48,2 48,7 1,60 (m) 48,4 48,9 1,65 (m) 47,8 49,2 1,66 (m) 10 37,8 38,5 - 37,1 37,6 - 36,5 37,6 - 11 23,9 24,5 1,96 (m) 24,0 24,5 1,91 (m) 23,4 24,5 1,92 (m) 12 126,2 126,9 5,24 (br s) 122,6 123,5 5,26 (br s) 120,2 123,5 5,26 (br s)f 13 138,4 139,2 - 145,3 145,2 - 146,2 145,0 - 14 42,6 43,3 - 42,4 42,9 - 42,2 43,0 - 15 28,7 29,2 1,08 (m) 1,93 (m) 28,6 28,8 1,10 (m) 1,80 (m) 28,1 28,9 1,10 (m) 16 24,7 25,2 1,74 (m) 2,06 (m) 24,0 24,0 1,61 (m) 2,02 (m) 22,5 24,1 1,65 (m) 2,00 (m) 17 48,4 49,3 - 46,9 47,6 - 47,4 47,3 - 18 53,4 54,1 2,22 (d, 11,5) 42,3 42,7 2,86 (br d, 10,5) 42,0 42,8 2,88 (br s) 19 39,2 40,3 1,38 (m) 46,8 47,2 1,16 (m) 1,71 (m) 46,0 47,3 1,14 (m) 1,71 (m) 20 39,4 40,2 0,98 (m) 31,1 31,6 - 31,2 31,6 - 21 30,8 31,7 1,32 (m) 34,4 34,9 1,22 (m) 33,5 35,0 1,22 (m) 1,50 (m) 22 36,8 37,4 1,62 (m) 1,40 (m) 30,1 33,8 1,73(m) 23 63,8 64,0 3,25 (d, 11,5) 3,68 (d, 11,5) 26 1,56 (m) 1,40 (m) 31,7 34,0 1,57 (m) 63,5 64,6 3,35 (d, 10,0) 1,77 (m) 64,3 64,5 3,35 (d, 11,5) 3,58 (d, 11,5) 3,57 (d, 10,0) T¹P CHÝ Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 24 14,7 14,5 0,73 (s) 14,3 13,7 0,72 (s) 13,5 13,7 0,72 (s) 25 17,4 17,9 1,04 (s) 16,3 16,4 0,99 (s) 16,0 16,4 0,99 (s) 26 17,6 17,9 0,82 (s) 17,7 17,8 0,83 (s) 17,9 17,8 0,85 (s)f 27 23,8 24,1 1,11 (s) 26,4 26,5 1,19 (s) 26,1 26,5 1,20 (s) 28 176,2 177,8 - 181,1 181,9 - 181,2 ND - 29 17,8 17,7 0,88 (d, 6,5) 33,5 33,6 0,93 (s) 33,8 33,6 0,93 (s) 30 21,3 21,6 0,94* 24,0 24,0 0,96 (s) 24,2 24,0 0,96 (s) (a)đo CD3OD, b)125 MHz, c)500 MHz, d)đo Pyridine-d5, e)đo DMSOd6, fpic tín hiệu có cường độ thấp chân rộng, NDtín hiệu khơng quan sát cường độ yếu #ilekudinosid C [3], %Hợp chất 2a [6], $davisianosid B [5], mult: độ bội tín hiệu, *) tín hiệu bị chồng chập) Bảng 2: Số liệu phổ 1H-,13C-NMR phần đường hợp chất - chất tham khảo STT #,d δC a,b δC a,c δH (mult, J Hz) Ara %,d δC a,b δC a,c δH (mult, J Hz) Ara $,e δC a,b δC a,c δH (mult, J Hz) Ara 1’ 106,6 106,2 4,28 (d, 7,5) 104,8 104,9 4,52 (d,5,5) 103,7 105,0 4,51 (d,5,0) 2’ 73,1 72,9 3,57 (dd, 7,5, 9,5) 75,6 76,9 3,67 (m) 74,5 76,8 3,68 (m) 3’ 74,9 74,5 3,51 (dd, 3,0, 9,5) 74,8 73,9 3,68 (m) 73,6 74,0 3,68 (m) 4’ 69,7 70,0 3,81 (m) 69,6 69,6 3,80 (m) 68,6 69,7 3,79 (br s) 5’ 67,8 67,8 3,50 (br d, 11,0) 66,2 65,6 3,53 (dd, 3,5, 11,0) 65,4 65,7 3,52* * 3,61 Glc 3,86* 3,86 (br d, 11,0) Rham Rham 1” 95,7 95,6 5,34 (d, 8,5) 101,4 101,7 5,18 (br s) 100,3 101,7 5,20 (br s) 2” 74,1 73,8 3,31 (m) 71,6 71,0 4,26 (br s) 69,8 71,1 4,25 (br s) 3” 78,9 78,1 3,40 (m) 82,8 82,7 3,90 (m) 81,9 82,9 3,90 (dd, 3,0, 9,5) 4” 71,4 71,7 3,34 (m) 72,8 72,5 3,59 (m) 71,2 72,5 3,59 (m) 5” 79,2 78,4 3,34 (m) 69,7 70,1 3,93 (m) 68,6 70,1 3,94 (m) 18,4 18,1 1,28 (d, 6,0) 18,3 18,1 1,28 (d, 6,0) 6” 62,5 62,4 * 3,78 * 3,66 Glc Glc Glc 1”’ 106,5 105,7 4,54 (d, 7,5) 104,6 105,6 4,55 (d, 8,0) 2”’ 75,6 75,3 3,33 (m) 68,3 75,5 3,37 (m) 3”’ 78,4 77,7 3,41 (dd, 8,5, 9,0) 75,1 76,4 3,51 (m) 27 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên đề dợc-2016 71,6 71,2 3,34 (m) 81,3 79,3 3,58 (m) 5”’ 78,3 77,7 3,34 (m) 77,1 76,7 3,40 (m) 61,2 61,8 3,69* 6”’ 62,5 62,4 * 3,89 3,85* 3,71 (dd, 4,5, 11,5) Rham Rham 1”” 100,9 102,9 4,87 (br s) 2”” 71,0 72,4 3,87 (br s) 3”” 72,5 72,2 3,66 (m) 4”” 71,1 73,7 3,43 (dd, 9,5, 9,5) 5”” 68,6 70,7 3,99 (m) 6”” 18,2 19,8 1,29 (d, 6,0) (a)đo CD3OD, b)125 MHz, c)500 MHz, d)đo Pyridine-d5, e)đo DMSOd6,, NDtín hiệu khơng quan sát cường độ yếu #ilekudinosid C [3], %Hợp chất công bố [4], $davisianosid B [5], mult: độ bội tín hiệu,*)tín hiệu bị chồng chập) Hợp chất phân lập dạng chất bột vô định hình màu trắng Cơng thức phân tử xác định C41H66O14, dựa phân tích phổ khối lượng phân giải cao (m/z 817,4161 [M+Cl]-, tính tốn lý thuyết cho anion [C41H66O14Cl]- 817,4147) tín hiệu 41 carbon phổ 13C-NMR Trên phổ 1H-NMR hợp chất cho thấy tín hiệu proton nhóm methyl [δH 0,73, 0,82, 1,04 1,11 (mỗi tín hiệu 3H, singlet); 0,88 (3H, d, J = 6,5 Hz) 0,94 (3H, tín hiệu bị chồng lấp)]; proton olefin δH 5,24 (1H, br s); hai proton anomer δH 4,28 (1H, d, J = 7,5 Hz) 5,34 (1H, d, J = 8,5 Hz) gợi ý hợp chất có đơn vị đường Các tín hiệu proton phần đường, hình dạng tín hiệu proton nhóm methyl xuất số lượng lớn tín hiệu proton vùng trường cao (δH 0,84 ~ 2,01) cho phép dự đoán hợp chất saponin có cấu trúc khung aglycon dạng ursan Tiếp theo, 28 phân tích phổ 13C-NMR DEPT nhận thấy xuất tín hiệu cộng hưởng 41 nguyên tử carbon bao gồm: nhóm carboxyl (δC 177,8) carbon khác không liên kết với hydro (C), 17 nhóm methin (CH), 11 nhóm methylen (CH2) nhóm methyl (CH3) Trong đó, aglycon khung ursan có chứa 30 carbon, tín hiệu 11 carbon lại cho thấy chất có hợp phần đường gồm đơn vị đường hexose đơn vị đường pentose Điều phù hợp với có mặt proton anomer quan sát phổ proton phân tích Sự xuất tín hiệu proton olefin carbon olefin (δC 126,9 139,2) phổ 1H- 13 C-NMR hợp chất cho thấy có mặt liên kết đơi C=C bị ba proton cấu trúc Vị trí nhóm quy kết xác giá trị phổ 1H- 13C-NMR hợp chất thực phân tích phổ cộng hng TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên đề dợc-2016 t ht nhõn hai chiu HSQC v HMBC Các tương tác xa H-C quan trọng nhận phổ HMBC thể hình Trong đó, tương tác HMBC từ H-24 (δH 0,73) tới C-3 (δC 88,3)/C-4 δC 45,1)/C-5 (δC 47,7)/C-23 (δC 64,0) giá trị độ chuyển dịch hóa học C-3 C-23 cho phép xác định liên kết C-O C-3 nhóm hydroxy tự C-23 Tương tác HMBC từ H-27 (δH 1,11) tới C-8 (δ C 40,9)/C-13 (δ C 139,2)/C-14 (δC 43,3)/C-15 (δC 29,2) tín hiệu carbon khơng liên kết với hydro vùng Csp2 C-13 cho thấy vị trí liên kết đơi C=C C-12/C-13 Tín hiệu proton dạng douplet với số J = 9,5 Hz H-3 (δH 3,44) giá trị độ chuyển dịch hóa học C-2 (δC 68.0) gợi ý hai nhóm oxygen C-2 C-3 chiếm vị trí tương đối trans-equatorial Hai đơn vị đường hợp chất xác định glucopyranosyl arabinopyranosyl so sánh liệu phổ 13C-NMR (δC 95,6, 73,8, 78,1, 71,7, 78,4, 62,4; 106,2, 72,9, 74,5, 70,0, 67,8) với số liệu phổ công bố [3] Thêm vào đó, phân tử đường arabinopyranosyl gắn vào vị trí C-3 aglycon xác định nhờ tương tác HMBC H-1δ (δH 4,28) với C-3 (δC 88,3) H-3 (δH 3,44) với C-1’ (δC 106,2); vị trí phân tử đường glucopyranosyl lại gắn vào vị trí C-28 aglycon tương tác HMBC H-1” (δH 5,34) với C-28 (δC 177,8) Như vậy, cấu trúc hóa học hợp chất thiết lập, hợp chất biết có tên gọi ilekudinosid C Các số liệu phổ NMR hoàn toàn phù hợp với số liệu công bố [3] Các sai khác nhỏ số liệu phổ hợp chất ilekudinosid C tài liệu tham khảo khác dung môi đo phổ NMR nghiên cứu Hợp chất Hợp chất có cơng thức phân tử C47H76O17, xác định tín hiệu píc ion giả phân tử quan sát phổ khối lượng phân giải cao (m/z 911,5011 [M-H]-, tính toán lý thuyết cho anion [C47H75O17]- 911,5010) với tín hiệu 47 nguyên tử carbon phân tích phổ 13C-NMR Giống hợp chất 1, tín hiệu cộng hưởng phổ 1H-NMR cho thấy hợp chất saponin Tuy nhiên, xuất tín hiệu nhóm methyl có dạng singlet (δH 0,72, 0,83, 0,93, 0,96, 0,99 1,19; tín hiệu 3H) gợi ý cho thấy hợp chất có aglycon thuộc dạng khung olean Sự xuất tín hiệu proton anomer [δH 4,52 (1H, d, J = 5,5 Hz), 4,54 (1H, d, J = 7,5 Hz) 5,18 (1H, br s)] cho thấy ba đơn vị đường có mặt cấu trúc Mặt khác, tín hiệu dạng multiplet H-3 (δH 3,64), tương tác COSY H-3 H-2 (δH 1,75 1,90), với giá trị độ chuyển dịch hóa học C-2 (δC 26,5, xác định phân tích phổ HSQC) cho thấy hợp chất khơng có nhóm hydroxy C-2 hợp chất Thêm vào đó, giá trị độ chuyển dịch hóa học carbon carboxyl (δC 181,9) thiếu vắng tương tác HMBC từ số proton anomer tới carbon cho thấy hợp chất mang nhóm COOH tự 29 Tạp chí y - dợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 Phân tích chi tiết tương tác COSY HSQC tín hiệu thuộc hợp phần đường cho phép gán giá trị phổ 1H- 13C-NMR hợp phần đường (bảng hình 2) Đồng thời số liệu phổ hoàn toàn phù hợp với số liệu tương ứng chuỗi trisaccharid (3-O-β-D-glucopyranosyl(1 3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1 2)-α-Lrabinopyranosid) thường gặp hợp chất có đu đủ rừng [2] Vị trí liên kết glycosid khẳng định tương tác HMBC, bao gồm tương tác glc H-1’”(δ H 4,54) với rham C-3”(δC 82,7) rham H-1”(δH 5,18) ara C-2’(δC76,9) Đồng thời tương tác HMBC proton anomer H-1’ (δH 4,52) C-3 (δC 82,4) cho phép xác định liên kết hợp phần đường aglycon qua cầu nối O-glycosid C-3 Do đó, hợp chất xác định hederagenin-3-O-â-D-glucopyranosyl(1δ3)-α-L-rhamnopyranosyl-(1δ2)-αL-arabinopyranosid, olean saponin nhà khoa học Nhật Bản phân lập từ loài Aralia elata [4] Mặc dù hợp chất công bố phân lập từ nhiều loài thực vật khác nhau, nhiên theo tìm hiểu chúng tơi, liệu phổ 13C-NMR hợp chất chưa công bố đầy đủ Trong cơng trình trước, hầu hết cơng bố số liệu 13C-NMR hợp phần đường Do đó, cơng trình này, chúng tơi thơng báo cách đầy đủ xác liệu phổ 13C-NMR hợp chất Các số liệu 13C-NMR hợp phần (aglycon đường) so sánh hoàn toàn phù hợp với phần cấu trúc tương tự hợp chất công bố (bảng bảng 2) 30 Hợp chất Hợp chất có dạng bột vơ định hình màu trắng, cơng thức phân tử xác định C53H86O21, dựa píc ion giả phân tử m/z 1057,5588 [M-H]-(tính tốn lý thuyết cho anion [C53H85O21]-, 1057,5589) quan sát phổ khối lượng phân giải cao phù hợp với phân tích phổ 13 C-NMR Phân tích phổ 1H- 13C-NMR hợp chất nhận thấy số liệu phổ hoàn toàn tương tự với số liệu phổ H 13C-NMR hợp chất dung mơi đo CD3OD, ngoại trừ có xuất thêm tín hiệu đơn vị đường rhamnose (bảng bảng 2) Mặc dù điều kiện đo phổ 13C-NMR 3, tín hiệu carbon carboxylic khơng đủ cường độ để quan sát rõ ràng Tuy nhiên, phù hợp gần hoàn toàn số liệu phổ H 13 C-NMR phần aglycon cho phép khẳng định chúng giống cấu trúc aglycon, đồng thời điều hoàn tồn phù hợp với cơng thức phân tử (C53H86O21) chứng minh phổ HRMS nêu khác biệt đơn vị C6H10O4 (rhamnosyl) công thức phân tử so với (C47H76O17) Sự dịch chuyển vùng trường thấp tín hiệu C-4”’ (δC 79,3) so với (δC 71,2) tương tác HMBC rham H-1””(δH 4,87) glc C-4”’ (δC 79,3) cho phép xác định liên kết glycosid đơn vị đường rhamnose cuối mạch O-glycosid (1”” 4”’) Do đó, cấu trúc hóa học thiết lập, hợp chất biết có tên davisianosid B, phân lập trước từ loài Cephalaria davisiana [5] Sự khác biệt nhỏ số liệu phổ 13 C-NMR (đo CD3OD) TạP CHí Y - DƯợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 davisianosid B tài liệu cơng bố (đo DMSO-d6) khác biệt dung mơi đo NMR nghiên cứu Một số tín hiệu 13C-NMR có sai khác lớn (xảy quy kết giá trị phổ vị trí carbon không tương đồng hợp chất tài liệu cơng bố) chẳng hạn vị trí C-3 C-4”’, kiểm tra khẳng định xác lại dựa phân tích phổ hai chiều HMBC hợp chất KẾT LUẬN Từ dịch chiết methanol đu đủ rừng, phân lập hợp chất saponin thuộc hai khung aglycon khác ursan olean Cấu trúc hóa học hợp chất xác định ilekudinosid C (1) hederagenin 3-O-â-Dglucopyranosyl-(1#3)-á-L-rhamnopyranosyl(1#2)-á-L-arabinopyranosid (2) davisianosid B (3) Nghiên cứu bước đầu làm sáng tỏ thành phần hóa học đu đủ rừng, sở để đánh giá hoạt tính sinh học nhằm làm rõ cơng dụng đu đủ rừng thuốc cổ truyền dân tộc, hướng tới phát triển nguồn hợp chất thiên nhiên có hoạt tính chăm sóc bảo vệ sức khỏe người TÀI LIỆU THAM KHẢO Võ Văn Chi Đu đủ rừng Từ điển Cây thuốc Việt Nam Nhà xuất Y học Hà Nội 2012, tập 1, tr.970-971 Nunziatina DT, Giuseppina A, Aurora B, Aldo P, Cosimo P, Raffaella S, Pietro V Antiproliferative triterpene saponins from Trevesia palmata Journal of Natural Products 2000, 63, pp.308-314 Nishimura K, Miyase T, Noguchi H Triterpenoid saponins from Ilex kudincha Journal of Natural Products 1999, 62, pp.1128-1133 Saito S, Sumita S, Tamura N, Nagamura Y, Nishida K, Ito M, Ishiguro I Saponins from the leaves of Aralia elata SEEM: Araliaceae Chemical and Pharmaceutical Bulletin 1990, 38, pp 411-414 Peyker K, Nazli BS, Suheyla K Two novel saponins from Cephalaria davisiana (Dipsacaceae) Phytochemistry Letters 2014, 10, pp.324–329 Bang SC, Kim Y, Lee JH, Ahn BZ Triterpenoid saponins from the roots of Pulsatilla koreana Journal of Natural Products 2005, 68, pp.268-272 31 ... phân tích phổ hai chiều HMBC hợp chất KẾT LUẬN Từ dịch chiết methanol đu đủ rừng, phân lập hợp chất saponin thuộc hai khung aglycon khác ursan olean Cấu trúc hóa học hợp chất xác định ilekudinosid... Nhật Bản phân lập từ loài Aralia elata [4] Mặc dù hợp chất công bố phân lập từ nhiều loài thực vật khác nhau, nhiên theo tìm hiểu chúng tơi, liệu phổ 13C-NMR hợp chất chưa công bố đầy đủ Trong... - dợc học quân số chuyên ®Ị d−ỵc-2016 ĐẶT VẤN ĐỀ Cây đu đủ rừng có tên khoa học Trevesia palmata thuộc họ Nhân sâm (Araliaceae) Theo Từ điển Cây thuốc Việt Nam, số nơi, đu đủ rừng có tên gọi