LINCOMYCIN HYDROCLORID Lincomycini hydrochloridum · HCl ·H2O C18H34N2O6S HCl H2O P.t.l: 461,0 Lincomycin hydroclorid chủ yếu methyl 6,8-dideoxy-6-[[[(2S,4R)-1-methyl-4-propylpyrolidin-2yl]carbonyl]amino]-1-thio-D-erythro-α-D-galacto-octopyranosid hydroclorid, kháng sinh thu từ nuôi cấy chủng Streptomyces lincolnensis var lincolnensis điều chế phương pháp khác Chế phẩm phải chứa không 790 µg C18H34N2O6S mg Tính chất Bột kết tinh màu trắng gần trắng Rất tan nước, khó tan ethanol 96%, khó tan aceton Định tính Có thể chọn hai nhóm định tính sau: Nhóm 1: A, D Nhóm 2: B, C D A Phương pháp quang phổ hồng ngoại (Phụ lục 4.2) Phổ hồng ngoại chế phẩm phải phù hợp với phổ hồng ngoại lincomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) B Phương pháp sắc ký lớp mỏng (Phụ lục 5.4 ) Bản mỏng: Silica gel G (TT) Dung môi khai triển: Hỗn hợp gồm 20 thể tích 2-propanol (TT), 40 thể tích dung dịch amoni acetat 15% điều chỉnh pH đến 9,6 amoniac (TT) 45 thể tích ethyl acetat (TT) Lắc kỹ, để yên cho tách lớp, lấy lớp làm dung môi khai triển Dung dịch thử: Hòa tan 10 mg chế phẩm 10 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu (1): Hòa tan 10 mg lincomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) 10 ml methanol (TT) Dung dịch đối chiếu (2): Hòa tan 10 mg lincomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) 10 mg clindamycin hydroclorid chuẩn (ĐC) 10 ml methanol (TT) Cách tiến hành:Chấm riêng biệt lên mỏng µl dung dịch Triển khai sắc ký dung môi 15 cm Để khô mỏng không khí, phun dung dịch kali permanganat 0,1% (TT) Vết sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng với vết sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (1) vị trí, màu sắc kích thước Phép thử có giá trị sắc ký đồ dung dịch đối chiếu (2) tách hai vết rõ ràng C Hòa tan khoảng 10 mg chế phẩm ml dung dịch acid hydrocloric 10% (TT) Đun nóng cách thuỷ phút Thêm ml dung dịch natri carbonat 10,6% (TT) ml dung dịch natri nitroprusiat 2% (TT), màu đỏ tím tạo thành D Hòa tan 0,1 g chế phẩm 10 ml nước, dung dịch thu phải cho phản ứng (A) ion clorid (Phụ lục 8.1) Độ màu sắc dung dịch Dung dịch S: Hòa tan 2,0 g chế phẩm 20 nước carbon dioxyd (TT) Dung dịch S phải (Phụ lục 9.2) có màu không đậm dung dịch màu mẫu V6 (Phụ lục 9.3; phương pháp 2) pH pH dung dịch S phải từ 3,5 đến 5,5 (Phụ lục 6.2) Góc quay cực riêng Phải từ +135 đến +150o, tính theo chế phẩm khan (Phụ lục 6.4) Hòa tan 1,000 g chế phẩm nước pha loãng thành 25,0 ml với dung môi Lincomycin B Trong phần định lượng, sắc ký đồ dung dịch thử, diện tích pic tương ứng với lincomycin B không lớn 5% tổng diện tích pic lincomycin lincomycin B Kim loại nặng Không phần triệu (Phụ lục 9.4.8) Lấy 2,0 g chế phẩm tiến hành thử theo phương pháp Dùng 1,0 ml dung dịch chì mẫu 10 phần triệu để chuẩn bị mẫu đối chiếu Nước Từ 3,1 đến 4,6% (Phụ lục 10.3) Dùng 0,500 g chế phẩm Tro sulfat Không 0,5% (Phụ lục 9.9, phương pháp 2) Dùng 1,0 g chế phẩm Độ vô khuẩn Phải đạt quy định (Phụ lục 13.2), chế phẩm dùng để pha thuốc tiêm mà không áp dụng biện pháp tiệt trùng thích hợp Nội độc tố vi khuẩn Phải 0,50 IU/mg (Phụ lục 13.2), chế phẩm dùng để pha thuốc tiêm mà không áp dụng biện pháp loại bỏ nội độc tố vi khuẩn Định lượng Phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao (Phụ lục 5.3) Pha động: Dung dịch đệm pH 6,0 – acetonitril – methanol (78 : 15 : 15) Dung dịch đệm pH 6,0: Thêm 13,5 ml acid phosphoric (TT) vào 1000 ml nước, trộn Điều chỉnh pH 6,0 amoniac (TT) Dung dịch thử: Cân xác khoảng 24,0 mg chế phẩm hòa tan pha động cách lắc học phút lắc siêu âm cần pha loãng thành 20,0 ml với dung môi Dung dịch đối chiếu: Cân xác khoảng 24,0 mg lincomycin hydroclorid chuẩn (ĐC) hòa tan pha động cách lắc học phút lắc siêu âm cần pha loãng thành 20,0 ml với dung môi Điều kiện sắc ký: Cột thép không gỉ (25 cm x 4,6 mm) nhồi pha tĩnh B (5 µm) Nhiệt độ cột 46 oC Detector tử ngoại bước sóng 210 nm Tốc độ dòng: 1,0 ml/phút Thể tích tiêm: 20 µl Cách tiến hàn:; Tiêm dung dịch đối chiếu Thời gian lưu tương đối lincomycin B khoảng 0,5 lincomycin 1,0 Phép thử có giá trị hệ số đối xứng pic lincomycin không 1,3 hiệu suất cột lincomycin không nhỏ 4000 đĩa lý thuyết Độ lệch chuẩn tương đối diện tích pic lincomycin sau lần tiêm lặp lại không lớn 2,0% Tiến hành sắc ký với dung dịch thử Tính hàm lượng lincomycin chế phẩm (µg/mg) dựa vào diện tích pic Bảo quản Trong bao bì kín nhiệt độ không 30 oC Nếu chế phẩm vô khuẩn, bảo quản bao bì vô khuẩn, đảm bảo kín Nhãn Phải ghi rõ chế phẩm nội độc tố vi khuẩn hay vô khuẩn Loại thuốc Kháng khuẩn Chế phẩm Viên nang, thuốc tiêm