Trang 1 Bài tập 1 Trong trình tự bộ gen của Propionibacterium acnes vi khuẩn gây ra mụn trứng cá, bạn đã phát hiện ra một gen dự đoán mã hóa lipase.. Đây là một enzyme phân hủy chất béo
Bài tập Trong trình tự gen Propionibacterium acnes (vi khuẩn gây mụn trứng cá), bạn phát gen dự đốn mã hóa lipase Đây enzyme phân hủy chất béo da, sử dụng phát triển chất ức chế điều trị cho mụn trứng cá Bạn muốn tìm hiểu thêm enzyme Bạn lên kế hoạch tạo dịng gene biểu E coli tạo protein nghiên cứu đặc tính Lipase gene (743 bp) KpnI EcoRI HindIII Acc65I KpnI Ecl136II SacI BamHI SpeI EcoRI AflII EcoRI PciI EcoRV NotI AvaI XhoI BfrBI NsiI Ppu10I XbaI EcoO109I ApaI PspOMI Plac DraIII 3500 BspHI 500 f1 origin PsiI pCR2.1 1000 3000 BstAPI 3929 bps AhdI BsaI BpmI 2500 AmpR 1500 2000 XcmI BglII BclI KanR TatI ScaI MscI Tth111I XmnI BssHII BtgI NcoI RsrII Bài tập Nhóm nghiên cứu bạn giao nhiệm vụ nhân protein huznh quang phát biểu E coli để nghiên cứu sâu Khi kích thích tia cực tím, protein phát ánh sáng tím Gene mã hóa cho protein đặt tên HusK tìm thấy gen lồi Chó Vàng hoang dã (Canis insanus) hoi tiếng May mắn thay, bạn có mẫu tế bào đơng lạnh chó Bạn tiến hành nhân dòng biểu gene E.coli với thông tin saU BamHI 2000 bp Đoạn gene nhiễm sắc thể NotI promoter EcoRI EcoRI restriction site: -gal gene N N N G A A T T C N N N N N N C T T A A C N N N pCM999 NotI restriction site: (4000 base pairs) N N G C G G C C G C N N N N C G C C G G C G N N Vector nhân dòng chứa trình tự cắt EcoRI NotI Kanamycin resistance gene (KanR) Hãy trình bày cách chèn đoạn gene vào vector, biến nạp chọn lọc dòng tế bào mang đoạn gene mong muốn A B C D tổng hợp cDNA thiết kế primer với trình tự nhận biết enzyme cắt giới hạn nhận biết hệ thống xanh trắng nhận biết chiều chèn vào gene quan tâm enzyme cắt giới hạn Bài tập 3: Đoạn trình tự mã hóa protein A tạo dịng thu nhận có trình tự theo hình Codon bắt đầu kết thúc dịch mã in đậm Các amino acid nằm phía ngồi đoạn 1500bp đầu 3’ khơng ảnh hưởng đến hoạt tính của protein A Vector biểu có cấu trúc promoter , trình tự enzyme cắt giới hạn khung đọc thể theo hình Hãy lựa chọn phương án để chèn đoạn gene vào vector đảm bảo cho đoạn gene biểu tạo protein có chức