1 Phần Mở Đầu 1.1 Đặt vấn đề Là nớc nằm vùng nhiệt đới ẩm Đông Nam á, Việt Nam có thảm thực vật hệ động vật phong phú, đa dạng, thích hợp cho loài ký sinh trùng phát triển, ký sinh gây bệnh, ú cú giun tròn bệnh chúng gây động vật nuôi Chăn nuôi ngành sản xuất kinh tế nông nghiệp Việt Nam, nghề chăn nuôi trâu, bò đà có từ lâu đời, nhng phơng thức chăn nuôi chủ yếu dựa vào điều kiện tự nhiên, số lợng nhỏ trâu, bò đợc nuôi bán thâm canh thâm canh Hin nay, chăn nuôi trâu, bò ó chuyển tõ mục đích chủ yếu cung cp sức kéo phân bón phục vụ sản xuất nông nghiệp, sang mục đích chớnh l cung cấp thịt, sữa cho ngời Vì vậy, chăn nuôi trâu bò đà đợc nhiều địa phơng quan tâm phát triển Khi chăn nuôi trâu, bò đợc tập trung phát triển dịch bệnh ngày gia tăng Ngoi bệnh virus, vi khuẩn bệnh ký sinh trùng,i bệnh virus, vi khuẩn bệnh ký sinh trùng, ú cú bệnh giun xoăn múi khế đà gây thiệt hại đáng kể, làm giảm khả sản xuất thịt, sữa, làm giảm sức đề kháng trâu, bò nớc ta, bệnh phân bố rộng, sở chăn nuôi miền núi, trung du, đồng ®Ịu cã tû lƯ nhiƠm tõ 30,7 - 100% (Ph¹m Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, 2002) [12] Thái Nguyên tỉnh miền núi phía bắc có địa hình thuận lợi để phát triển nghề chăn nuôi trâu, bò Đồng thời điều kiện khí hậu thuận lợi cho tồn phát triển trứng ấu trùng giun xoăn múi khế ngoại cảnh Do điều kiện vệ sinh thú y không tốt, trứng giun xoăn múi khế dễ phát tán ngoại cảnh, phát triển thành ấu trùng có sức gây bệnh, làm cho trâu, bò chăn thả dễ cảm nhiễm bị bệnh Tuy vậy, ngời chăn nuôi quan tâm đến việc sử dụng biện pháp diệt trứng ấu trùng giun xoăn múi khế ngoại cảnh Một mặt hiểu biết bệnh hạn chế, mặt khác cha có nghiên cứu khả phát triển, tồn trứng ấu trùng giun xoăn múi khế ngoại cảnh Từ thực tế trên, tiến hành đề tài: Nghiên cứu phát triển trứng khả tồn ấu trùng giun xoăn múi khế ngoại cảnh 1.2 Mục tiêu đề tài - Nghiên cứu phát triển trứng ấu trùng GXDMK ngoại cảnh - Nghiên cứu tồn ấu trùng ngoại cảnh 1.3 Mục đích đề tài Nhằm mục đích xác định số đặc điểm dịch tễ bệnh, từ có biện pháp phòng trị bệnh có hiệu 1.4 ý nghĩa đề tài 1.4.1 ý nghĩa học tập nghiên cứu khoa học - ý nghĩa học tập: Hiểu sâu, nắm vững, củng cố đợc kiến thức đà học trờng, lm quen vi cong tỏc nghiờn cu khoa hc, sở biết vận dụng kiến thức đà học vào thực tiƠn s¶n xt - ý nghÜa khoa häc KÕt qu¶ đề tài thông tin khoa học khả tồn trứng ấu trùng giun xoăn múi khế ngoại cảnh, sở khoa học góp phần hoàn thiện đặc điểm dịch tễ bệnh giun xoăn DMK trâu, bò 1.4.2 ý nghĩa thực tiễn Kết nghiên cứu đề tài lời khuyến cáo, giúp ngời chăn nuôi phơng pháp phòng bệnh có hiệu bệnh giun xoăn múi khế trâu, bò Phần Tổng quan tài liệu 2.1 Cơ sở khoa học đề tài 2.1.1 Đặc điểm sinh học giun xoăn múi khế 2.1.1.1 Vị trí giun xoăn múi khế hệ thống phân loại động vật học Lớp giun tròn (Nematoda) có nhiều loại ký sinh ngời, động vật trồng Là lớp giun có thành phần loài phong phú, phân bố rộng khắp miền nớc nên Nematoda đà gây nhiều tác hại nghiêm trọng ngành chăn nuôi, có chăn nuôi gia súc nhai lại Bệnh giun xoăn múi khế trâu, bò bệnh phổ biến đàn trâu, bò ë níc ta víi tû lƯ nhiƠm 30,7- 100% (Ngun Thị Kim Lan vi bệnh virus, vi khuẩn nh÷ng bƯnh ký sinh trïng, cs, 1999) [10] BƯnh nhiều loại giun tròn ký sinh múi khế gia súc nhai lại gây nên Theo Skrjabin cs (1977) [22], giun xoăn múi khế có vị trí hệ thống phân loại động vật nh sau: Ngành Nemathelminthes Schneider, 1873 Lớp Nematoda Rudolphi, 1808 Phân líp Rhabditia Pearse, 1942 Bé Strongylida Railliet et Henry, 1913 Phân Strongylata Railliet et Henry, 1913 Siêu họ Trichostrongyloidea Cram, 1927 Hä Trichostrongylidae Leiper, 1912 Ph©n hä Trichostrongylinae Leiper, 1905 Gièng Trichostrongylus Looss, 1905 Loµi T colubriformis (Giles, 1892) Loµi T axei (Cobbold, 1879) Loµi T probolurus (Railliet, 1896) Gièng Ostertagia Ransom, 1907 Loµi O ostertagi (Stiles, 1892) Loµi O circumcincta (Stadelmann, 1894) Gièng Marshallagia Orloff, 1933 Loµi M marshalli (Ransom, 1907) Ph©n hä Haemonchinae Skrjabin et Schulz, 1952 Gièng Haemonchus Cobbold, 1898 Loµi H contortus (Rudolphi, 1803) Loài H similis (Travassos, 1914) Phân họ Cooperinae Skrjabin et Schikhobalova, 1952 Gièng Cooperia Ransom, 1907 Loµi C curticei (Giles, 1892) Loài C punctata (Linstow, 1906) Phân họ Nematodirinae Skrjabin et Orloff, 1934 Gièng Nematodirus Ransom, 1907 Loµi N oiratianus (Rajevskaia, 1929) Loµi N skrjabini (Mizkewisch, 1929) Gièng Mecistocirrus Railliet et Henry, 1912 Loài M digitatus (Linstow, 1906) Theo Trịnh văn Thịnh, Phm Văn Khuê, Phan Trọng Cung Phan Lục, (1982) [17], bệnh giun xoăn dày trâu, bò gia súc nhai lại khác loµi thuéc hä Trichostrongylidae Thêng thÊy giống: Haemonchus, Mecistocirrus, Trichostrongylus, Ostertagia, Marshsllagia, Cooperia Bệnh giun xoăn dày (chủ yếu múi khế loài nhai lại) gồm loài: Haemonchus contortus, Haemonchus similis vµ Mecistocirrus digitatus ký sinh ë múi khế trâu, bò, cừu (Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn Văn Phúc, 2005) [13] Theo Nguyễn Thị Lê cs (1996) [14], thành phần lo i bệnh virus, vi khuẩn bệnh ký sinh trùng,i giun xoăn ký sinh múi khế trâu, bò Việt Nam gồm: T axei (coobold, 1879) T colibriformis (Giles, 1892) H contortus (Rudophi, 1809) M digitatus (Linstow, 1906) Nh vậy, thành phần loài giun xoăn múi khế trâu, bò đa dạng phong phú, đặc điểm chung cỏc loài là: Thân hình sợi chỉ, miệng tận đầu, xoang miệng, đực có túi sinh dục phát triển, có õm h nằm phía sau thân 2.1.1.2 Đặc điểm hình thái chu kỳ sinh học số loài giun xoăn chủ yếu múi khế - Loài Haemonchus contortus Theo Nguyễn Thị Lê cs (1996) [14], loµi H contortus (Rudophi, 1803) ký sinh múi khế ruột non trâu, bò, dê phạm vi toàn quốc phổ biến toàn cầu Tác giả mô tả hình thái H contortus (theo Kamenskii, 1929): Giun đực dài 18,7- 22,3mm, rộng 0,352-0,416mm, tói sinh dơc cã th (2 th bªn dài, thuỳ sau không đối xứng) Các sờn bên hớng vỊ phÝa sau, c¸c sên bơng cong vỊ phÝa tríc Các sờn bên chung gốc lớn, mút cuối có phân nhánh Gai sinh dục màu nâu, dài 0,448- 0,544, phần đuôi thắt nhỏ nhanh kết thúc phần đặc trng nh kim Giun dài 25,0-34,2mm, rộng 0,5880,739mm Lỗ sinh dục cách mút đuôi 5,92- 7,07mm Vùng âm môn có van hình lỡi cµy, dµi 0,750-1,068mm, réng 0,330- 0,580 Tói nhËn tinh dµi 0,80- 1,16mm Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn Văn Phúc (2005) [13] cho biết: H contortus màu hồng nhạt, đầu nhỏ, túi miệng nhỏ có hình móc câu Giun đực dài 15-19mm, túi đuôi có đặc điểm thuỳ hông rõ, sờn nhỏ dài, thuỳ lng nhỏ không đối xứng chệnh phía bên trái Một sờn lng hình chữ Y ngợc, Giun dài 27-30mm, hút máu ký chủ nên ruột màu hồng tử cung có màu trắng nằm xen kẽ dọc thân thành màu rõ rệt nh thừng xoắn màu Con có biểu bì kéo làm thành nắp âm hộ phủ lỗ sinh dục (Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, 2002) [12] - Loài Haemonchus similis: Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn Văn Phúc (2005) [13] đà mô tả loài H similis: Thân hình nhỏ, màu vàng sẫm Giun đực dài 8-11mm, túi đuôi chia thuỳ, thuỳ lng không đối xứng, sờn hông trớc thẳng, sờn hông sau cong phía lng Giun dài 12,5-21mm Âm hộ cách đuôi 2,7-3,0mm, có chỗ nhô ra, quan thải trứng không rõ (Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn văn Phúc, 2005) [13], Phạm Sỹ Lăng, Phan Địch Lân, 2002)[12] - Loài Mecistocirrus digitatus Theo Nguyễn Thị Kim Lan (1999)[10]: Cơ thể giun mảnh, màu hồng nhạt, lớp biểu bì có vân ngang Nang miệng nhỏ, có lớn, thực quản nhỏ, phần sau rộng, dài 1,6-1,8mm Giun đực dài 25-31mm, túi đuôi nhỏ, sờn bụng sau sờn hông trớc gần nhau, dính liền tách đầu mút Sờn lng ngắn đầu mút chia thành nhánh, nhánh đầu lại chia thành nhánh phụ Gai giao hợp nhỏ dài (3,8-7mm) có màng bao bọc, bánh lái giao hợp Giun dài 35-39mm, âm hộ nhô cách đuôi 0,680-0,962mm Đuôi hình nón, đỉnh tù (Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn Văn Phúc, 2005) [13] Trnh Văn Thịnh, Đỗ Dơng Thái (1978) [16] cho rằng: Giun đực dài 1631mm, rộng 0,360mm, giun dài 19-43mm, rộng 0,470mm Âm hộ cách chóp đuôi 0,260- 0,600mm Hậu môn cách chóp đuôi từ 0,140- 0,200mm - Mét sè loµi thuéc gièng Trichostrongylus Gièng Trichostrongylus gồm nhiều loài, có số loài quan trọng ký sinh múi khế ruột non cđa gia sóc nhai l¹i + T axei (Cobbold, 1879) đợc phát nhiều nơi giới Việt Nam nhà khoa học đà tìm thấy loài giun tỉnh Quảng Ninh, Lạng SơnNhiều tác giả đà mô tả (theo Ramson, 1911): Giun đực dài 3,4-4,5mm, rộng 0,05-0,07mm Sờn bụng bên túi sinh dục mảnh Các sờn bụng sau, sờn bụng sờn bên có độ dày nh Sờn lng dài mảnh, chia nhánh cuối, nhánh lại chia thành nhánh nhỏ Gai sinh dục màu vàng nâu, kích thớc khác (chiếc nhỏ dài 0,085- 0,104mm, chiÕc lín dµi 0,1100,128mm Mót ci gai sinh dục có hình tam giác Gai điều chỉnh dài 0,7050,720mm Giun dài 4,6-5,5mm, rộng 0,055-0,075mm Đuôi thẳng, hình nón, dài 0,06-0,09mm Nón sinh dục hẹp (Nguyễn Thị Lê, 1996 [14]; Skrjabin, 1963) [22] Johannes Kaufman (1996) [23] cho biÕt thêm: T axei thấy phổ biến khắp nơi giới Giun đực dài 2,6- 6mm, giun dài 3,5-8mm Theo Skrjabin (1963) [22], loài T axei có loài T colubriformis điển hình cho giống Trichostrongylus Tác giả miêu tả: Giun đực dài 4,06,0mm, rộng 0,078- 0,095mm, túi sinh dục phát triển nhng không cân đối Hai gai sinh dục dài nhau, hình thuyền cong, dài 0,118- 0,145mm, mút cuối có mấu hình tam giác Gai điều chỉnh dài 0,065- 0,078mm, giun cáI dài 5,06,0mm, lỗ sinh dục dạng rÃnh dọc, có môi Túi nhận tinh hình cầu, dài 0,3750,500mm (Nguyễn Thị Lê, 1996 [14]; Phạm Văn Khuê Phan Lục, 1996) [6] - Một số loµi thuéc gièng Cooperia Ramson, 1907 Gièng Cooperia Ramson, 1907 _ tác nhân gây Cooperiosis, ký sinh ruột non trâu, bò, cừu dê Theo Skrjabin (1963) [22] loài điển hình cho giống Cooperia curticei (Giles,1899) Con đực dài 5,41- 7,27mm Gai giao hợp dài 0,1400,148mm, phần có chỗ lồi (cánh), chỗ lồi sẫm ngang, phần đầu gai cấu tạo giống hình đĩa, cuối gai cong có dạng hình giầy Con dài 6,5- 7,38mm, đuôi 0,99-0,149mm Âm hộ có hình lỗ ngang, nằm cách mút đuôi 1,51-2,09mm Tác giả cho biết : Loài Cooperia punctata (Linstow, 1906) ký sinh ruét non vài bÖnh virus, vi khuẩn bệnh ký sinh trùng, múi khế, tuyến hạ vị trâu, bò, bò u, lạc đà cừu Phân bố khắp nơi Con đực dài 5- 9mm Gai giao hợp dài 0,1250,145mm, có chỗ cắt sâu gai, phần đầu gai rộng, cuối gai mảnh dần Con dài 5,7- 10mm Đuôi dài 0,135- 0,26mm Âm hộ nằm cách mút đuôi 0,98- 1,5mm Trịnh Văn Thịnh, Đỗ Dơng Thái (1978) [16] đà mô tả loài Cooperia laterouniformis (Chen 1937) : Thân hình sợi chỉ, biểu bì mỏng có vân ngang, vân dọc dài khắp thân, chóp đầu thờng có hình túi phình, thực quản rộng phần gần cuối Vòng thần kinh khoảng 2/3 thực quản Giun đực dài 4,9mm, rộng tối đa 0,071mm Đờng kính chỗ phình đầu 0,028mm Gai giao hợp đối xứng, dài 0,138mm rộng tối đa 0,016mm, dẫn khí Túi giao hợp có thuỳ ngang thuỳ lng nhỏ Giun dài 5,7mm, rộng tối đa 0,069mm Âm hộ hình khe dài cong, dài khoảng 0,031mm, cách đuôi 0,02mm uôi nhọn, dài 0,13mm - Mét sè loµi thuéc gièng Ostertagia Ramson, 1907 Theo Skrjabin (1963) [22], gièng nµy cã loµi Ostertagia ostertagi (Stiles, 1892) ký sinh ë d¹ mói khÕ cđa sóc vật lớn có sừng, bò u thấy cừu, dê loài nhai lại khác Con đực dài 6.5-7,5mm, gai giao hợp dài 0,220- 0,230mm Nửa sau gai có chồi mảnh, cã mét chåi ë vỊ phÝa lng, cßn mét chåi phía bụng, lái dài 0,040mm Âm hộ cách đuôi 1,3-1,5mm Loài Ostertagia circumcincta (Stadelmann, 1894): Con đực dài 9,810,6mm Gai giao hợp dài 0,40- 0,42mm; lái suốt, dài 0,070mm Con dài 12-13,5mm, đuôi dài 0,18-0,19mm Âm hộ nằm cách mút đuôi 2,37mm 2.1.1.3 Đăc điểm hình thái trứng giun xoăn múi khế Qua tài liệu tác giả nghiên cứu, ta thấy: Kích thớc trứng cỏc loài giun xoăn múi khế khác nhng có đặc điểm chung hình bầu dục, vỏ mỏng, phôi bào xếp thành hình chùm nho - Loài Haemonchus Theo Nguyễn Thị Lê (1996) [16], trøng cđa loµi nµy cã kÝch thíc 0,0800,085 x 0,04-0,05mm Nguyễn Thị Kim Lan cs (1999) [10] cho biÕt, trøng cã kÝch thíc 0,0750,095 x 0,040- 0,050mm, trứng có 16-32 tế bào theo phân Theo Phan Địch Lân, Phạm Sỹ Lăng, Đoàn Văn Phúc (2005) [13], trứng loài Mecistocirrus digitatus hình bÇu dơc, cã kÝch thíc 0,099- 0,105mm x 0,046-0,049mm - Loµi Trichostrongylus axei trøng cã kÝch thíc 90-92 x 35-42 m (Phan Thế Việt, 1977 [20]; Nguyễn Thị Lê, 1996 [14]) Loµi T colubriformis có kÝch thíc cđa trøng lài bệnh virus, vi khuẩn bệnh ký sinh trùng, 73-76 x 43-40m (Nguyễn Thị Lê, 1996 [14]; Phạm Văn Khuê Phan Lục, 1996 [6]) Theo Skrjabin (1963) [21], loµi Cooperia curticei (Giles, 1892) trøng dµi 0,067- 0,081mm, réng 0,035- 0,040mm Loµi O ostertagi (Stiles, 1892) trøng dµi 0,065-0,080mm, réng 0,0300,040mm Lồi O circumcinctai O circumcincta kÝch thớc trứng 0,089- 0,093mm, rộng 0,050mm 2.1.1.4 Vòng đời giun xoăn múi khế Đà có nhiều tác giả nghiên cứu chu kỳ sinh học giun tròn, ®ã có hä Trichostrongylidae Các lồi thc họ Trichostrongylidae phát triển trực tiếp, không cần ký chủ trung gian Đẻ Giun TT (Ký sinh DMK, ruột nonTheo trâu,phân bò) t0, A0 Trứng (Ngoại cảnh) Thích hợp ấu trùng kỳ I Lột xác lần I trùng kỳ III Trâu bò nuốt thức ăn, nớcấu uống (có sức gây nhiễm) Lột xác lần II ấu trùng kỳ II - Vòng đời loài H contortus Skrjabin Petrov (1963) [22] cho biết: đẻ trứng, trứng đợc xuất với phân môi trờng bên Nhiệt độ môi trờng bên thích hợp cho trứng phát triển tiếp tục 20- 30 0C Trong phân, vào ngày thứ đà thấy ấu trùng giai đoạn I nở khỏi trứng, ấu trùng ăn phân sống phân thời gian, nhng không cảm nhiễm đợc động vật ấu trùng bền vững, chết phôi khô, nhiệt độ 30 0C thay đổi nóng lạnh nhiệt độ 15- 200C, ấu trùng giai đoạn I sau đêm đà giai đoạn tiềm sinh, kÐo dµi 12-15 giê Trong thêi gian nµy, Êu trïng lột xác, sau sống trở lại chuyển vào giai đoạn II giai đoạn II, qua ngày, cha đến ngày, ấu trùng lại trở lại giai đoạn tiềm sinh lần thứ II Trong thời gian này, ấu trùng lớn lên, nhng tầng cutin bao quanh giữ nguyên tạo thành nắp Sau hình thành nắp ấu trùng chuyển vào giai đoạn III, ấu trùng có khả cảm nhiễm cần thời gian không dới 4-5 ngày giai đoạn III, ấu trùng có sức đề kháng đặc biệt, chết môi trờng ẩm (500C) môi trờng khô (600C), chịu đợc khô hạn, bền vững với chất tiêu độc Đây giai đoạn ấu trùng có khả gây bệnh Sau phát triển đến giai đoạn cảm nhiƠm ë ph©n, Êu trung chui khái ph©n, có khả bò lên phía theo vật ẩm Nếu phân cỏ ấu trùng chuyển động theo cỏ xung quanh Đặc biệt chuyển động nhanh nơi đồng cỏ thấp, mùa vơ Èm ít, thêi gian ma nhiỊu, s¬ng mù nhiều sơng xuống Để ấu trùng bò theo cỏ không cần phải có lợng ẩm nhiều, mà cần lớp ẩm bọc cỏ đà đủ cho ấu trùng chuyển động Khi độ ẩm cao, ấu trùng khả b¸m