Ảnh hưởng của nhiệt độ đến sự sinh trưởng của các chủng nấm rơm đột biến bằng tia gamma

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG CỦA CÁC CHỦNG NẤM RƠM ĐỘT BIẾN BẰNG TIA GAMMA Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐỀ TÀI: ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN SỰ SINH TRƯỞNG CỦA CÁC CHỦNG NẤM RƠM ĐỘT BIẾN BẰNG TIA GAMMA Sinh viên thực : Đỗ Thị Lan Ngành : Công nghệ sinh học Mã sinh viên : 620440 Giảng viên hướng dẫn : PGS.TS Nguyễn Văn Giang \ Hà Nội - 2021 HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM KHOA CÔNG NGHỆ SINH HỌC CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập – Tự – Hạnh phúc BẢN NHẬN XÉT SINH VIÊN LÀM KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP I Thơng tin chung Họ tên sinh viên: Đỗ Thị Lan Tên đề tài: Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng nấm Rơm đột biến tia Gamma Họ tên người hướng dẫn: PGS.TS Nguyễn Văn Giang Thời gian thực hiện: 2/2021- 7/2021 Địa điểm thực hiện: Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nấm- Viện Di truyền Nông nghiệp II Ý kiến giáo viên hướng dẫn 1.Tinh thần, thái độ học tập thực khóa luận tốt nghiệp Tích cực, chủ động cơng việc Làm việc nghiêm túc, tuân thủ dẫn cán hướng dẫn Năng lực sáng tạo nghiên cứu cách trình bày khóa luận Có khả sáng tạo để tháo gỡ vướng mắc trình thực đề tài Viết trình bày khóa luận tương đối khoa học Mức độ hồn thành khóa luận Hồn thành tốt  Hồn thành Chưa hoàn thành   Kết luận  Sinh viên khơng đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp  Sinh viên đủ điều kiện nộp Khóa luận tốt nghiệp Hà Nội, ngày tháng 09 năm 2021 Người hướng dẫn PGS.TS Nguyễn Văn Giang LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đề tài: “Ảnh hưởng nhiệt độ đến sinh trưởng chủng nấm Rơm đột biến tia Gamma” trực tiếp thực Số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chưa công bố tài liệu, báo hay tạp chí Tơi xin cam đoan thơng tin khóa luận ghi rõ nguồn gốc, đảm bảo trích dẫn quy định Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2021 Sinh viên Đỗ Thị Lan i LỜI CẢM ƠN Sau thời gian thực khóa luận tốt nghiệp Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nấm – Viện Di truyền Nông nghiệp, nhận giúp đỡ, hướng dẫn tận tình cán phịng thí nghiệm, với lỗ lực, cố gắng học hỏi thực tiễn thân, tơi hồn thành khóa luận Bằng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin gửi lời cảm ơn chân thành tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Văn Giang - Bộ môn Công nghệ vi sinh - Khoa Công nghệ sinh học- Học viện Nông Nghiệp Việt Nam dành nhiều thời gian tâm huyết tận tình hướng dẫn, định hướng, tạo điều kiện giúp đỡ tơi suốt q trình thực tập, nghiên cứu khóa luận tốt nghiệp Tơi xin chân thành cảm ơn đến kỹ thuật viên, cán công tác Trung tâm Nghiên cứu Phát triển Nấm - Viện Di truyền nông nghiệp, đặc biệt Th.S NCS Nguyễn Thị Giang Th.S Nguyễn Thị Hằng - người tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi hồn thành khóa luận Tơi xin gửi lời cảm ơn tới thầy giáo, cô giáo, cán công nhân viên công tác Học viện Nông nghiệp Việt Nam tận tình giảng dạy tơi năm học qua Cuối cùng, tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc gia đình ln bên cạnh, ủng hộ, động viên tồn thể bạn bè giúp đỡ tơi suốt thời gian thực đề tài Hà Nội, ngày 10 tháng năm 2021 Sinh viên Đỗ Thị Lan ii MỤC LỤC   LỜI CAM ĐOAN i  LỜI CẢM ƠN ii  DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT v  DANH MỤC BẢNG vi  DANH MỤC HÌNH vii  PHẦN MỞ ĐẦU 1  1.1  Tính cấp thiết đề tài 1  1.2  Mục tiêu yêu cầu đề tài 2  1.2.1  Mục tiêu 2  PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3  2.1 Giới thiệu chung nấm, tình hình sản xuất nấm giới Việt Nam 3  2.1.1 Giới thiệu chung nấm 3  2.2 Giới thiệu chung nấm rơm 7  2.2.1 Đặc điểm sinh học nấm rơm 8  2.3 Tình hình nghiên cứu sản xuất nấm rơm Việt Nam 17  2.3.1 Tình hình nghiên cứu rơm Việt Nam 17  2.4 Các phương pháp chọn tạo giống nấm 20  2.5 Phương pháp gây đột biến sử dụng tia gamma ứng chọn tạo giống nấm 20  PHẦN 3: VẬT LIỆU, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 23  3.1 Thời gian địa điểm nghiên cứu 23  3.2 Đối tượng nghiên cứu 23  3.3 Nguyên liệu nghiên cứu 23  3.3.1 Nguyên liệu sử dụng 23  3.4 Nội dung nghiên cứu 23  PHẦN 4: KẾT QUẢ THÍ NGHIỆM VÀ THẢO LUẬN 26  4.1 Đánh giá sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V1 27  4.2 Đánh giá sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V2 31  4.3 Đánh giá sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V23 35  4.4 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm V901 38  4.5 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 42  4.6 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 45  4.7 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 48  iii PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 52  5.1 Kết luận 52  5.2 Đề nghị 52  Tài liệu tiếng Việt 53  Tài liệu tiếng Anh 53  Tài liệu tham khảo Web 55                                        iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Viết tắt Viết đầy đủ Cs Cộng CV% Coefficient of variation/ Hệ số biến động LSD0.05 Least Significant Difference/ Sai số nhỏ có ý nghĩa mức ý nghĩa 5% PDA Potato Destrose Agar CAGR Compounded Annual Growth/ Tốc độ tăng trưởng hàng năm kép v DANH MỤC BẢNG Bảng 2.1 Lượng tiêu thụ nấm đầu người số quốc gia năm 2007……… Bảng 2.2.Thành phần dinh dưỡng 100 gram nấm rơm tươi………………… ….14 Bảng 2.3.Thành phần chất khoáng nấm rơm qua giai đoạn…………… … 15 Bảng 2.4 Thành phần acid amin nấm rơm……………………………… ……15 Bảng 4.1 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V1 28°C… …….26 Bảng 4.2 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V1 34°C…… ….27 Bảng 4.3 Sự hình thành bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm rơm V1………… 28 Bảng 4.4 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V2, 280C…… … 30 Bảng 4.5 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V2, 34ºC…… .31 Bảng 4.6 Sự hình thành bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm rơm V2……… …… 32 Bảng 4.7 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V23 280C…… … 34 Bảng 4.8 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V23 340C…… … 35 Bảng 4.9 Sự hình thành hậu bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm V23………… ….36 Bảng 4.10 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V901 280C… ….37 Bảng 4.11 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu nấm rơm V901 340C…………… 38 Bảng 4.12 Sự hình thành bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm Rơm V901……… 39 Bảng 4.13 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971, 280C… …40 Bảng 4.14 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971, 310C… …41 Bảng 4.15 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ V971 đột biến……… … 43 Bảng 4.16 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 280C… ……44 Bảng 4.17 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 340C…… 45 Bảng 4.18 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN…………… 46 Bảng 4.19 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 280C… … 47 Bảng 4.20 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 340C…… 48 Bảng 4.21 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ…………… 49 vi DANH MỤC HÌNH Hình 2.1 Sản lượng nấm lưu thông thị trường giới từ 2010 đến 2019……… Hình 2.2 Giá trị xuất nấm giới từ năm 2010 đến năm 2019…………… ……5 Hình 2.3 Tốc độ tăng trưởng sản lượng nấm Việt Nam qua năm……… …….7 Hình 2.4 Hình ảnh nấm rơm…………………………………………………… …… Hình 2.5: Cấu trúc thể nấm rơm…………………………………………… …… Hình 2.6.Chu trình sống nấm rơm………………………………………… …… 10 Hình 2.7 Bào tử nấm rơm…………………………………………………… ……….11 Hình 4.1 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V1 28°C, sau ngày………… … …27 Hình 4.2 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V1 340C, sau ngày…………… … 28 Hình 4.3 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V2 280C, sau ngày…………… … 30 Hình 4.4 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V2 340C sau ngày………… ………32 Hình 4.5 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V23 280C, sau ngày………… …….34 Hình 4.6 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V23 340C, sau ngày……….… … 35 Hình 4.7 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V901 280C, sau ngày………… …37 Hình 4.8 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V901 340C, sau ngày………… …39 Hình 4.9 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 280C, sau ngày………… ……41 Hình 4.10 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 340C sau ngày………… … 42 Hình 4.11 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 280C sau ngày……… …….44 Hình 4.12 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 340C sau ngày………… ……45 Hình 4.13 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 280C sau ngày………… ……48 Hình 4.14 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 340C sau ngày……… ……….49 vii Quan sát thời gian hình thành mật độ bào tử chủng nấm rơm V901 mẫu chiếu xạ chủng này, nhận thấy rằng: Chủng V901 hình thành bào tử tốt, dịng nấm đối chứng đột biến hình thành bào tử sớm từ ngày thứ 6, cấy nhiệt độ 28 34ºC Ở nhiệt độ 28ºC, bào tử có mật độ khơng đồng chủng đột biến Mật độ bào tử cao hình thành hai mẫu chiếu xạ L1.75 L2.0 ngày thứ 6, mật độ bào tử ngưỡng 60 đến 90%, tiếp đến dòng đột biến L0.75 L0.25 Ở nhiệt độ 34°C, bào tử có mật độ cao, chủ yếu ngưỡng từ 60 đến 90% ngày thứ sau cấy Cá biệt có cơng thức đối chứng mật độ bào tử từ 40 đến 60% Từ kết theo dõi tốc độ mọc sợi hình thành bào tử chủng nấm rơm V901 không xử lý chiếu xạ mẫu chiếu xạ từ chủng cách chiếu xạ, tơi có nhận xét sau:  Chủng nấm rơm V901 có tốc độ sinh trưởng trung bình, khả hình thành bào tử tốt Chủng mẫu chiếu xạ thích hợp với nhiệt độ nuôi 34°C so với 28°C, biểu rõ ràng mật độ bào tử  Các mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu L0.25, L1.0, L1.25 L1.5 có khả sinh trưởng tốt ổn định nhiệt độ nuôi  Đặc biệt liều L1.75 L2.0 liều chiếu cao, gây thay đổi lớn hệ gen, mẫu chiếu xạ giữ tốc độ sinh trưởng ổn định mật độ bào tử nhiều, đồng nhiệt độ nuôi Do đó, cần tiếp tục theo dõi đánh giá để thu chủng nấm rơm phục vụ công tác sản xuất 41 4.5 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 28ºC Bảng 4.13 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971, 280C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng hệ sợi các mẫu nấm rơm V971 đã chiếu  xạ khi ni ở nhiệt độ 28°C 10 ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 2 ngày 3.76 3.33 3.83 4.26 4.43 2.73 3.46 2.76 2.36 3 ngày 7.36 7.96 7.03 7.07 5.67 6.26 5.83 4.56 4 ngày 9 9 9 8.86 9 6 ngày 9 9 9 9 8 ngày 9 9 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Sau ngày nuôi quan sát tốc độ mọc sợi chủng nấm rơm V971 mẫu chiếu xạ đĩa mơi trường PDA, thu kết sau: Chủng V971 chủng có sinh trưởng trung bình nhiệt độ ni 28°C, hệ sợi chủng V971 mẫu chiếu xạ liều chiếu từ L0.25 đến L1.0 mọc kín bề mặt đĩa mơi trường thạch sau ngày, mẫu chiếu xạ lại tạo liều chiếu từ L1.25 đến L2.0 cần đến ngày Liều chiếu từ L0.25 liều chiếu tạo mẫu chiếu xạ có khả sinh trưởng tốt mẫu chiếu xạ tốt đối chứng, tiếp đến liều L0.75, L0.5 L1.0 Ở nhiệt độ 28°C, liều chiếu khác tác động tương đối rõ đến sinh trưởng hệ sợi, cụ thể từ liều chiếu L0.25 đến L2.0, tốc độ phát triển hệ sợi mẫu chiếu xạ giảm rõ từ 7.96 xuống 4.56 sau ngày cấy Tức liều chiếu cao, sinh trưởng Tuy có thay đổi tốc độ sinh trưởng mật độ hệ sợi trì mức dày 42 Hình 4.9 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 280C, sau ngày *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 34ºC Bảng 4.14 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971, 310C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng hệ sợi các mẫu nấm rơm V971 đã  chiếu xạ khi ni ở nhiệt độ 34°C 10 ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 2 ngày 5.5 2.83 5.96 4.73 4.23 4.7 5.23 1.93 3 ngày 7.23 7.4 6.73 7.63 7.46 5.86 6.9 6.73 4.13 4 ngày 9 9 9 9 6 ngày 9 9 9 9 8 ngày 9 9 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Khi nuôi mẫu nấm rơm V971 đột biến chủng V971 thường 34oC, ghi nhận: Ở điều kiện nhân nuôi hệ sợi chủng nấm rơm V971 mẫu chiếu xạ phát triển tốt Tương tự nuôi hệ sợi chủng nấm V971 mẫu chiếu xạ nhiệt độ ni 28°C, ni sợi 34°C, tốc độ sinh trưởng hệ sợi có xu hướng giảm cường độ liều chiếu tăng Các mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu L0.75, L1.0 L0.25 mẫu có hệ sợi sinh trưởng tốt tốt đối chứng với đường kính tản nấm đạt 7.63, 7.46 7.40 cm sau ngày nuôi sợi, tốc độ sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ L2.0 L1.25 phát triển 43 với đường kính 4.13 5.86 cm Ở hai ngưỡng nhiệt độ nuôi 28°C 34°C hệ sợi dày đồng mẫu chiếu xạ chủng đối chứng Hình 4.10 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 340C sau ngày *Bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 28 34ºC Bảng 4.15 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm V971 Công thức ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 Ghi chú: + Sau ngày + + + + + + + + Sự phát triển bào tử sau ngày theo dõi Ở 280C Ở 340C Sau Sau 10 Sau Sau Sau 10 ngày + + ++ ++ ++ + + ++ ++ ++ ++ ++ ++ ++ + + + + + + + + + + + ++ ++ + + ++ ++ ++ + + + + + + ++ - : Chưa có bào tử : Bào tử chiếm < 30% đĩa ++ : Bào tử chiếm 40-60% đĩa +++: Bào tử chiếm 60-90% đĩa Quan sát thời gian hình thành mật độ bào tử chủng nấm rơm V971 mẫu chiếu xạ nó, thấy :Chủng nấm rơm V971 hình thành bào tử kém, hầu hết mẫu chiếu xạ đối chứng hình thành bào tử, mật độ bào tử thấp chủ yếu 30% từ 40 đến 60%, đặc biệt nhiệt độ ni 34°C có dịng đột biến L2.0 L0.5 không xuất bào tử Chủng nấm rơm V971 biểu khả phát triển tốt nhiệt độ 28°C có tốc độ sinh trưởng cao tất 44 mẫu chiếu xạ xuất bào tử, nhiên 34°C mật độ bào tử dày Ngoại trừ hai dòng đột biến L2.0 L0.5 mẫu chiếu xạ khác hình thành bào tử nhiệt độ ni Như vậy, tổng hợp kết thí nghiệm, chúng tơi có nhận xét chủng nấm rơm V971 mẫu chiếu xạ dòng sau:  Các mẫu chiếu xạ liều chiếu xạ L0.25, L0.75 L1.0 biểu tốc độ sinh trưởng tốt khả hình thành bào tử ổn định nhiệt độ từ 28 đến 34ºC, cần ý theo dõi thêm 4.6 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 28ºC Bảng 4.16 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 280C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng hệ sợi các mẫu chiếu xạ VTN đã chiếu xạ  khi ni ở nhiệt độ 28°C 10 ĐC L0.25 L0.5 2 ngày 4.7 5.13 3.67 3 ngày 7.3 7.46 7.23 4 ngày 9 6 ngày 9 8 ngày 9 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 4.1 4.6 3.63 4.36 4.47 4.47 6.67 6.86 6.86 6.83 6.73 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Sau ngày nuôi quan sát tốc độ mọc sợi chủng nấm rơm VTN mẫu chiếu xạ đĩa mơi trường PDA 28°C, thu kết sau: Chủng VTN chủng có sinh trưởng hệ sợi tốt, cơng thức đối chứng công thức chiếu xạ đạt tối đa sau ngày nuôi nhiệt độ 28ºC Các mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu L0.25 L0.5 cho hệ sợi phát triển tương đương cao so với công thức đối chứng cơng thức cịn lại với đường kính tản nấm đạt 7.46 7.23 cm sau ngày nuôi sợi Các mẫu chiếu xạ lại sinh trưởng ngang yếu 45 dòng đột biến L1.25 đường kính tản nấm 6.00 cm Sự khác liều chiếu ảnh hưởng không rõ rệt đến tốc độ sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ Hình 4.11 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 280C sau ngày *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 34ºC Bảng 4.17 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 340C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng hệ sợi các mẫu nấm rơm VTN đã chiếu  xạ khi nuôi ở nhiệt độ 34°C 10 ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 2 ngày 4.93 6.8 6.56 6.23 5.2 6.23 5.96 3 ngày 7.36 7.66 7.76 7.53 7.33 6.9 7.56 7.83 6.9 4 ngày 9 9 9 9 6 ngày 9 9 9 9 8 ngày 9 9 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Sau quan sát tốc độ mọc mật độ hệ sợi chủng VTN mẫu chiếu xạ 34°C, nhận thấy:Các mẫu chiếu xạ sinh trưởng phát triển tốt tương đương so với cơng thức đối chứng, cá biệt có hai mẫu chiếu xạ tạo hai liều chiếu xạ L2.0 L1.25 có tốc độ sinh trưởng chậm hơn, cụ thể đường kính tản nấm đạt 6.90 cm so với 7.36 cm chủng đối chứng Ở nhiệt độ 46 34ºC chủng VTN phát triển tốt, đạt tối đa sau ngày cấy tốt 28ºC Khi nuôi sợi hai nhiệt độ nuôi 28°C 34°C cho mật độ hệ sợi dày đồng Hình 4.12 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN 340C sau ngày *Bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm rơm VNT 28 34ºC Bảng 4.18 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm VTN Công thức ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 Ghi chú: - Sau ngày + + + ++ ++ ++ Sự phát triển bào tử sau ngày theo dõi Ở 280C Ở 340C Sau 10 Sau 10 Sau Sau Sau ngày + + + + + + + + + ++ + ++ ++ + ++ ++ + + + + ++ + ++ ++ + + + ++ ++ + + + +++ +++ + + + : Chưa có bào tử + : Bào tử chiếm < 30% đĩa ++ : Bào tử chiếm 40-60% đĩa +++ : Bào tử chiếm 60-90% đĩa Kết theo dõi khả hình thành bào tử hậu mẫu nấm VTN đột biến chủng VTN đối chứng cho thấy: Chủng VTN hình thành bào tử hậu trung bình, mật độ bào tử đa dạng từ 30% đến 90% đĩa Cơng thức đối chứng hình thành bào tử tiến hành nuôi sợi nhiệt độ 34ºC, không xuất bào tử nhiệt độ nuôi 28ºC Ở nhiệt độ 28º ni sợi ngồi chủng VTN đối chứng, tất công thức chiếu xạ xuất bào tử, đặc biệt ba dòng đột biến liều chiếu L1.5, 47 L1.75 L2.0 cho bào tử sớm mật độ bào tử cao Khi nuôi 34ºC bào tử xuất với mật độ thấp, chủ yếu 30%, cá biệt có mẫu chiếu xạ tạo từ L0.75 khơng hình thành bào tử Kết hợp kết tất thí nghiệm chủng VTN mẫu chiếu xạ nó, dễ thấy rằng:  Trên tiêu chí tốc độ phát triển hệ sợi chủng VTN phù hợp với nhiệt độ nuôi 34ºC, nhiên chưa thể khẳng định nhiệt độ cho bào tử tốt hơn, dù chủng đối chứng hình thành bào tử 34°C, mẫu chiếu xạ lại cho bào tử dày nhiệt độ 28°C  Tùy thuộc vào mục đích nghiên cứu, nghiên cứu cần có hình thành bào tử chủng đối chứng cần ni sợi 34ºC ngược lại cần bào tử đầy đủ mẫu chiếu xạ nên nuôi nhiệt độ 28ºC  mẫu đột biến L0.25 L0.5 cần theo dõi đánh giá thêm 4.7 Đánh giá sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 28ºC Bảng 4.19 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 280C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng các mẫu nấm rơm VTQ đã chiếu xạ khi  ni ở nhiệt độ 28°C 10 ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 2 ngày 2.56 1.76 2.1 1.63 1.6 3 ngày 6.9 4.67 5.23 2.56 3.33 4 ngày 8.06 5.6 6.1 3.2 4.9 6 ngày 9 7.76 8 ngày 9 9 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 1.56 1.86 1.17 1.83 3.73 3.13 1.3 3.46 5.23 5.06 1.53 5.17 7.06 7.83 7.96 5.83 7.93 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Kết q trình ni quan sát tốc độ sinh trưởng hệ sợi chủng VTQ mẫu chiếu xạ nó, nhận thấy:Chủng VTQ sinh trưởng kém, sau đến ngày công thức đối chứng công thức đột biến mọc kính đĩa 48 thạch PDA Các mẫu chiếu xạ phát triển so với công thức đối chứng sau ngày nhân nuôi nhiệt độ 28ºC Đặc biệt hai mẫu chiếu xạ tạo hai liều chiếu L1.75 L0.75 không phát triển nhiều sau ngày ni cấy đường kính tản nấm 1.73 3.20 cm Trong mẫu chiếu xạ, L0.5 sinh trưởng tốt với đường kính tản nấm đạt 6.10 cm sau ngày cấy Tuy nhiên so với chủng nấm rơm khác nghiên cứu trên, đường kính thấp Bên cạnh hai mẫu chiếu xạ L1.75 L2.0 hai mẫu tất dòng nghiên cứu có mật độ hệ sợi trung bình Hình 4.13 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 280C sau ngày *Sự sinh trưởng mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 34ºC Bảng 4.20 Sự sinh trưởng hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 340C Đường kính tản nấm (cm) Tốc độ sinh trưởng hệ sợi các mẫu nấm rơm VTQ đã chiếu  xạ khi ni ở nhiệt độ 34°C 10 ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 2 ngày 2.53 3.23 1.76 3.56 2.46 2.93 2.9 1.83 1.66 3 ngày 6.46 6.67 5.36 3.63 5.86 5.03 5.86 4.06 3.3 4 ngày 9 8.33 9 9 6.87 8.5 6 ngày 9 9 9 9 8 ngày 9 9 9 9 Các mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 2 ngày 3 ngày 4 ngày 6 ngày 8 ngày Khi nuôi hệ sợi chủng VTQ mẫu chiếu xạ nhiệt độ nuôi 34°C, quan sát tốc độ phát triển mật độ hệ sợi chúng, dễ thấy rằng: Ở nhiệt độ 34°C, sinh trưởng chủng VTQ cải thiện so với nuôi 28°C, tất 49 mẫu chiếu xạ dòng nguyên có hệ sợi mọc kín sau đến ngày nuôi Mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu xạ L0.25 phát triển tốt mẫu tốt đối chứng với đường kính tản đạt 6.67 cm so với 6.46 cm chủng đối chứng sau ngày nuôi cấy Tương tự nhiệt độ 28°C, hai mẫu chiếu xạ hai liều chiếu L0.75 L1.75 phát triển với đường kính tán nấm 3.63 3.30 cm sau ngày nuôi Sau ngày nuôi sợi, ba mẫu chiếu xạ L0.5, L1.75 L2.0 chưa mọc kín đĩa thạch Tất mẫu chiếu xạ cho mật độ hệ sợi dày Ảnh 4.14 Hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 340C sau ngày *Bào tử hậu mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ 28 34ºC Bảng 4.21 Sự hình thành bào tử mẫu chiếu xạ nấm rơm VTQ Công thức ĐC L0.25 L0.5 L0.75 L1.0 L1.25 L1.5 L1.75 L2.0 Ghi chú: + Sau ngày + + + + - Sự phát triển bào tử sau ngày theo dõi Ở 280C Ở 340C Sau Sau 10 Sau Sau ngày ngày ++ ++ ++ ++ + + + + ++ ++ + + + + + + + + + + + + + + + + : Chưa có bào tử : Bào tử chiếm < 30% đĩa ++ : Bào tử chiếm 40-60% đĩa +++ : Bào tử chiếm 60-90% đĩa 50 Sau 10 ngày ++ + + + + + + Qua trình quan sát mật độ thời gian hình thành bào tử chủng nấm rơm VTQ mẫu chiếu xạ nó, cho thấy được: Chủng VTQ hình thành bào tử trung bình, nhiệt độ chủng đối chứng hình thành bào tử sau ngày nuôi mật độ bào tử tử 40 đến 60% Tuy nhiên mẫu chiếu xạ chủng lại hình thành bào tử với mật độ bào tử thưa, 30%, cá biệt có hai mẫu chiếu xạ tạo hai liều chiếu xạ L1.75, L1.25 28°C L0.5, L1.75 34ºC không xuất bào tử Mẫu chiếu xạ L1.75 mẫu không tạo bào tử nhiệt độ nuôi tốc độ sinh trưởng Các mẫu L0.25, L0.75, L1.0, L1.5 L2.0 mẫu sinh bào tử nhiệt độ ni, có ổn định tốc độ sinh trưởng Kết hợp kết tất thí nghiệm thực chủng nấm rơm VTQ nhận thấy rõ rằng:  Các mẫu chiếu xạ chủng VTQ chưa thể nhiều ưu việt so với công thức đối chứng không chiếu xạ Mặc dù nhiệt độ ni 34ºC, mẫu chiếu xạ L0.25 có tốc độ sinh trưởng tốt đối chứng, không đáng kể tiêu chí hình thành mật độ bào tử chưa tốt đối chứng  Như mẫu chiếu xạ chủng VTQ chưa thể nhiều ưu điểm để áp dụng cho cơng tác chọn tạo giống nấm 51                                 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận  Sau chiếu xạ, tiến hành nuôi cấy mẫu chiếu xạ chủng đối chứng môi trường cấp PDA, kết không nhận thấy khác biệt mật độ, hình thái màu sắc hệ sợi mẫu chiếu xạ nấm rơm so với đối chứng không đột biến  Đa số chủng nấm rơm thí nghiệm mẫu chiếu xạ chúng tỏ thích hợp với nhiệt độ ni sợi 34ºC so với 28ºC, ngoại trừ chủng nấm rơm V971 mẫu chiếu xạ  Ở hầu hết mẫu nấm rơm chiếu xạ nghiên cứu, cường độ chiếu tăng, sinh trưởng hệ sợi có xu hướng giảm, cá biệt mẫu chiếu xạ L2.0 từ chủng nấm rơm V901 sinh trưởng tốt  Kết hợp tiêu chí đánh giá gồm tốc độ phát triển hệ sợi, mật độ hệ sợi mật độ bào tử chủng nấm rơm V901 mẫu chiếu xạ có tiềm phát triển tốt chủng nghiên cứu chủng nấm VTQ mẫu chiếu xạ 5.2 Đề nghị Cần tiếp tục theo dõi sinh trưởng hệ sợi, hình thái thể, giá trị dinh dưỡng liều chiếu xạ để tìm dịng nấm mới, áp dụng vào thực tế sản xuất  Các mẫu chiếu xạ chủng nấm rơm V1 nhiệt độ nuôi 34°C  Các mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu xạ L0.25 L0.5 nhiệt độ nuôi 28°C mẫu chiếu xạ L0.25, L0.5, L1.0, L1.25 nhiệt độ nuôi 34°C chủng V2  Các mẫu chiếu xạ chủng V23  Các mẫu chiếu xạ chủng V901  Các mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu xạ L0.25 nhiệt độ nuôi 28°C, mẫu chiếu xạ tạo liều chiếu L0.25, L0.75, L1.0 nhiệt độ nuôi 34°C chủng V971  Các mẫu chiếu xạ L0.25, L0.5 nuôi 28°C mẫu chiếu xạ L0.25, L0.5, L0.75, L1.0, L1.5, L1.75 nuôi 34°C chủng VTN 52 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Nguyễn Lân Dũng (2001) Công nghệ nuôi trồng nấm, tập Nhà xuất Nông nghiệp, Hà Nội Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh (2000) Nấm ăn – nấm dược liệu: Công dụng công nghệ nuôi trồng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Trịnh Tam Kiệt (2011) Nấm lớn Việt Nam, Tập Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ Trịnh Tam Kiệt (2012) Nấm lớn Việt Nam, Tập Nhà xuất Khoa học tự nhiên Công nghệ Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh, Nguyễn Thị Sơn, Zani Federico (2005) Nấm ăn – Cơ sở khoa học công nghệ nuôi trồng, NXB Nông Nghiệp, Hà Nội Trịnh Tam Kiệt (2001), Danh mục loài thực vật Việt Nam, tập 1, phần nấm, Nhà xuất Nông nghiệp Hà Nội Nguyễn Hữu Đống, Đinh Xuân Linh (2000) Nấm ăn – nấm dược liệu: Công dụng công nghệ nuôi trồng, NXB Nông nghiệp, Hà Nội Cơng Phiên (2012) Nấm – Dịng sản phẩm chủ lực Báo Sài Gịn Giải Phóng Đinh Xuân Linh, Thân Đức Nhã, Nguyễn Hữu Đống, Nguyễn Thị Sơn, Nguyễn Duy Trình, Ngơ Xn Nghiễn (2012) Kỹ thuật trồng, chế biến nấm ăn, nấm dược liệu NXB Nông nghiệp Hà Nội 10 Việt Chương (2008) Kinh nghiệm trồng nấm Rơm nấm Mèo NXB tổng hợp Thành phố Hồ Chí Minh 11 Hồ Đình Hải (2014) Nấm Rơm, Cây nấm Việt Nam NXB thông tin truyền thơng 12 Lê Huy Thắng (2009) Tình hình sản xuất nấm ăn nấm dược liệu Việt Nam giới Tạp chí Nơng nghiệp Phát triển Nông thôn 13 Nguyễn Minh Khang (2015) Bài giảng Công nghiệ ni trồng Nấm Đại học Bình Dương Tài liệu tiếng Anh Chang, S T and Buswell, J (1996) "Mushroom nutriceuticals." World Journal of Microbiology and biotechnology 12(5): 473-478 53 Chang S T and Miles P G (2004) Mushrooms: Cultivation, Nutritional Value, Medicinal Effect, and Environmental Impact, Second Edition, CRC Press LLC Chang S T (2005) Witnessing the development of the mushroom industry in China Acta Edulis Fungi 12 (Supplement): 3-19.) Chang S T and P G Miles, 1993 “The nutritional attributes and medicinal value of edible mushrooms,” in Edible Mushrooms and Their Cultivation, pp 27–39, CRC Press, 1993 Djajanegara, I (2008) White Oyster Mushroom (Ppleurotus Fflorida) Mutant with Altered Antioxidant Contents BIOTROPIA-The Southeast Asian Journal of Tropical Biology, 15(1) Swetapadma (2012) Paddy straw mushroom Book Publishing Company Chen, A.W (2005) Free from poverty Mushroom Growers Handbook Haeng oon Bldg 150-5 Pyungchang-dong, Jongno-gu, SEOUL 110-846, KOREA R.H.Whittaker (1969) New concepts of kingdoms of organisims Anton.S.M, Sonnenberg, Johan J.P Baars and Rick W.Kerrigan; (2008) Mushroom breeding: hurdles and challenges 10 D.J.Royse, J.J.P Barrs, Qi Tan (2017) Current Overview of Mushroom Production in the Word 11 Peter Oei, (2003) Mushroom Cultivation, appropriate technology for mushroom growers 12 M.P Thakur, (2020) Advances in mushroom production: key to food, nutritional and employment security: A review 13 Esser, K 1971 Application & importance of fungal genetics for industrial research In : Radiation & radioisotopes for industrial microorganisms IAEA, Viena : 83 – 91 14 Chang, S T and Buswell, J (1996) "Mushroom nutriceuticals."World Journal of Microbiology and biotechnology 12(5): 473-476 15 Kaiser, G E (2001) Mutation 16 Nakagawa, H (2009) Induced mutations in plant breeding and biological researches in Japan Crops, 242(188), 48 54 Tài liệu tham khảo Web www.fao.org/faostat/en#data (Food and Agriculture Organization of the United Nations) www.stats.gov.cn/english / (National Bureau of Statistics of China –Tổng cụ Thống kê Trung Quốc www.fortunebusinessinsights.com (Fortune Busuness Insight) 55