NGHIÊN CỨU CÁC ACETOGENIN VÀ CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC KHÁC TỪ HẠT CÂY NA (ANNONA SQUAMOSA L., ANNONACEAE) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC

Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Quang Hợp NGHIÊN CỨU CÁC ACETOGENIN VÀ CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC KHÁC TỪ HẠT CÂY NA (ANNONA SQUAMOSA L., ANNONACEAE) LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC Luận văn Thạc sĩ Hà Nội – Năm 2014 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 ĐẠI HỌC QUỐC GIA HÀ NỘI TRƢỜNG ĐẠI HỌC KHOA HỌC TỰ NHIÊN - Nguyễn Quang Hợp NGHIÊN CỨU CÁC ACETOGENIN VÀ CÁC THÀNH PHẦN HÓA HỌC KHÁC TỪ HẠT CÂY NA (ANNONA SQUAMOSA L., ANNONACEAE) Chuyên ngành: Hóa hữu Mã số: 60440114 TÓM TẮT LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS PHAN MINH GIANG Hà Nội – Năm 2014 Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 LỜI CẢM ƠN Luận văn thạc sĩ hồn thành Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên, Bộ mơn Hố hữu cơ, Khoa Hoá học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội Em xin chân thành cảm ơn PGS TS Phan Minh Giang, người giao đề tài, hết lịng hướng dẫn bảo tận tình, tạo điều kiện thí nghiệm thuận lợi giúp đỡ em suốt trình làm luận văn thạc sĩ Để có kết em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới GS TSKH Phan Tống Sơn, người quan tâm đến vấn đề nghiên cứu luận văn này, tạo điều kiện thí nghiệm thuận lợi giúp đỡ em hồn thành luận văn thạc sĩ Cuối em xin cảm ơn thầy, anh, chị em sinh viên Phịng thí nghiệm Hố học hợp chất thiên nhiên tạo môi trường nghiên cứu thuận lợi giúp đỡ em thời gian em nghiên cứu hoàn thành luận văn thạc sĩ Hà Nội, ngày 16 tháng 04 năm 2014 Học viên cao học Nguyễn Quang Hợp Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 MỤC LỤC LỜI MỞ ĐẦU CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 TỔNG QUAN VỀ HỌ NA (ANNONACEAE) 1.1.1 Tổng quan họ Na (Annonaceae) chi Na (Annona) 1.1.2 Mô tả thực vật Na (Annona squamosa L.) 1.1.3 Phân bố 1.1.4 Các ứng dụng y học cổ truyền Na 1.2 NGHIÊN CỨU HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐƢỢC PHÂN LẬP TỪ ANNONA SQUAMOSA L 1.2.1 Các hợp chất acetogenin từ Annona squamosa L 1.2.2 Các hợp chất thành phần khác từ Annona squamosa 18 1.2.3 Các hợp chất acetogenin khác thiên nhiên 26 CHƢƠNG 2: PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 36 2.1 PHƢƠNG PHÁP CHIẾT VÀ PHÂN TÁCH CÁC HỢP CHẤT TỪ NGUYÊN LIỆU THỰC VẬT 36 2.1.1 Phƣơng pháp chiết 36 2.1.2 Các phƣơng pháp phân tích, phân tách phân lập sắc ký 36 2.2 CÁC PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU CẤU TRÚC 37 CHƢƠNG 3: THỰC NGHIỆM 38 3.1 THIẾT BỊ VÀ HÓA CHẤT 38 3.2 NGUYÊN LIỆU THỰC VẬT 38 3.3 ĐIỀU CHẾ CÁC PHẦN CHIẾT TỪ HẠT CÂY NA 38 3.4 PHÂN TÍCH SẮC KÍ LỚP MỎNG CÁC PHẦN CHIẾT 39 3.4.1 Phân tích sắc kí lớp mỏng phần chiết diclometan (AS1D) 40 3.4.2 Phân tích sắc kí lớp mỏng phần chiết diclometan (AS2D) 41 3.4.3 Phân tích sắc kí phần chiết etyl axetat (ASE) 42 3.5 PHÂN TÁCH CÁC PHẦN CHIẾT VÀ PHÂN LẬP CÁC HỢP CHẤT 43 3.5.1 Phân tách phần chiết diclometan (AS1D) 43 3.5.2 Phân tách phần chiết diclometan (AS2D) 45 3.5.3 Phân tách phần chiết etyl axetat (ASE) 45 3.6 HẰNG SỐ VẬT LÍ VÀ DỮ KIỆN PHỔ CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐƢỢC PHÂN LẬP 46 3.6.1 Chất AS1D3.0 (Solamin) 46 Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp 3.6.2 3.6.3 3.6.4 3.6.5 3.6.6 3.6.7 Cao học Hóa hữu – K22 Chất AS1D3.1 (Squamocin J) 46 Chất AS1D3.42 (Squamocin G) 47 Chất AS1D3.7 (4-Dehydroxyannonin IV 4-Dehydroxyannonin VIII) 48 Chất AS1D5.6 (Squamocin) 49 Chất AS1D7.2 (Annonin IV Annonin VIII) 50 Chất AS1D7.4 (Annonin XVI) 51 3.6.8 Chất AS1D10 (β-Sitosterol 3-O- -D-glucopyranosid Stigmaterol 3O- -D-glucopyranosid) 52 3.6.9 Chất ASE3.4.4 (N-trans-Caffeoyl-tyramin) 53 3.6.10 Chất ASE5.2 (Squamin A Squamin B) 53 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 56 4.1 ĐỐI TƢỢNG NGHIÊN CỨU 56 4.2 ĐIỀU CHẾ CÁC PHẦN CHIẾT TỪ HẠT NA 56 4.3 PHÂN TÁCH CÁC PHẦN CHIẾT TỪ HẠT NA 59 4.3.1 Phân tách sắc kí phần chiết diclometan (AS1D) 59 4.3.2 Phân tách sắc kí phần chiết etyl axetat (ASE) 61 4.4 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT ĐƢỢC PHÂN LẬP 61 4.4.1 Solamin (AS1D3.0) 62 4.4.2 Squamocin J (AS1D3.1) 64 4.4.3 Squamocin G (AS1D3.4.2 AS1D5.4) 66 4.4.4 4-Dehydroxyannonin IV 4-Dehydroxyannonin VIII (AS1D3.7) 68 4.4.5 Squamocin (AS1D5.6) 70 4.4.6 Annonin IV Annonin VIII (AS1D7.2) 72 4.4.7 Annonin XVI (AS1D7.4) 74 4.4.8 β-Sitosterol 3-O- -D-glucopyranosid (AS1D10a) Stigmaterol 3-O- D-glucopyranosid (AS1D10b) 77 4.4.9 N-trans-Caffeoyl-tyramin (ASE3.4.4) 78 4.4.10 Squamin A (ASE5.2a) Squamin B (ASE5.2b) 79 KẾT LUẬN 81 TÀI LIỆU THAM KHẢO 83 Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 KÝ HIỆU CÁC CHỮ VIẾT TẮT CC (Column Chromatography): Sắc kí cột dƣới trọng lực dung mơi DEPT (Disstortionless Enhancement by Polarition Transfer): Phổ DEPT ESI-MS (ElectroSpray Ionisation-Mass Spectrometry): Phổ khối lƣợng ion hóa phun bụi điện tử FC (Flash Chromatography): Sắc kí cột nhanh HPLC (High Performance Liquid Chromatography): Sắc kí lỏng hiệu cao NMR (Nuclear Magnetic Resonance): Cộng hƣởng từ hạt nhân Mini-C (Mini-Column Chromatography): Sắc kí cột tinh chế TLC (Thin-Layer Chromatography): Sắc kí lớp mỏng H-NMR (Proton Nuclear Magnetic Resonance): Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân proton 13 C-NMR (Carbon-13 Nuclear Magnetic Resonance): Phổ cộng hƣởng từ hạt nhân cacbon-13 Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 1.1 Lá Na (Annona squamosa L., Annonaceae) Hình 1.2 Hoa Na (Annona squamosa L., Annonaceae) Hình 3.1 Sắc ký cột điều chế Hình 4.1 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D3.0 Hình 4.2 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D3.1 Hình 4.3 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D3.4.2 Hình 4.4 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D3.7 Hình 4.5 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D5.6 Hình 5.6 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D7.2a AS1D7.2b Hình 4.7 Cấu trúc lập thể tƣơng đối AS1D7.4 Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 DANH MỤC CÁC BẢNG VÀ SƠ ĐỒ Bảng: Bảng 3.1 Phân tích TLC phần chiết AS1D Bảng 3.2 Phân tích TLC phần chiết AS2D Bảng 3.3 Phân tích TLC phần chiết ASE Bảng 4.1 Hiệu suất thu nhận phần chiết từ hạt Na (phƣơng pháp chiết 1) Bảng 4.2 Hiệu suất thu nhận phần chiết từ hạt Na (phƣơng pháp chiết 2) Sơ đồ: Sơ đồ 4.1 Quy trình điều chế phần chiết từ hạt Na Sơ đồ 4.2 Quy trình phân tách phần chiết diclometan (AS1D) Sơ đồ 4.3 Quy trình phân tách phần chiết etyl axetat (ASE) Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 DANH MỤC CÁC PHỤ LỤC Phụ lục Phổ 1H-NMR Solamin (AS1D3.0) Phụ lục Phổ 13C-NMR Solamin (AS1D3.0) Phụ lục Phổ (+)-ESI-MS Solamin (AS1D3.0) Phụ lục Phổ 1H-NMR Squamocin J (AS1D3.1) Phụ lục Phổ 13C-NMR Squamocin J (AS1D3.1) Phụ lục Phổ (+)-ESI-MS Squamocin J (AS1D3.1) Phụ lục Phổ 1H-NMR Squamocin G (AS1D3.4.2) Phụ lục Phổ 13C-NMR Squamocin G (AS1D3.4.2) Phụ lục Phổ (+)-ESI-MS Squamocin G (AS1D3.4.2) Phụ lục 10 Phổ 1H-NMR 4-Dehydroxyannonin IV 4-Dehydroxyannonin VIII (AS1D3.7) Phụ lục 11 Phổ 13C-NMR 4-Dehydroxyannonin IV 4-Dehydroxyannonin VIII (AS1D3.7) Phụ lục 12 Phổ (+)-ESI-MS 4-Dehydroxyannonin IV 4-Dehydroxyannonin VIII (AS1D3.7) Phụ lục 13 Phổ 1H-NMR Squamocin (AS1D5.6) Phụ lục 14 Phổ 13C-NMR Squamocin (AS1D5.6) Phụ lục 15 Phổ (+)-ESI-MS Squamocin (AS1D5.6) Phụ lục 16 Phổ 1H-NMR Annonin IV Annonin VIII (AS1D7.2) Phụ lục 17 Phổ 13C-NMR Annonin IV Annonin VIII (AS1D7.2) Phụ lục 18 Phổ (+)-ESI-MS Annonin IV Annonin VIII (AS1D7.2) Phụ lục 19 Phổ 1H-NMR Annonin XVI (AS1D7.4) Phụ lục 20 Phổ 13C-NMR Annonin XVI (AS1D7.4) Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 Phụ lục 21 Phổ (+)-ESI-MS Annonin XVI (AS1D7.4) Phụ lục 22 Phổ 1H-NMR β-Sitosterol Stigmaterol (AS1D10) Phụ lục 23 Phổ 1H-NMR N-trans-caffeoyl-tyramin (ASE3.4.4) Phụ lục 24 Phổ 1H-NMR Squamin A Squamin B (ASE5.2) Phụ lục 25 Phổ 13C-NMR Squamin A Squamin B (ASE5.2) Phụ lục 26 Phổ DEPT Squamin A Squamin B (ASE5.2) Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 LỜI MỞ ĐẦU Các hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học đóng vai tr quan trọng đời sống ngƣời Ngoài việc đƣợc sử dụng làm thuốc chữa bệnh cho ngƣời vật nuôi, thuốc bảo vệ thực vật, chất kích thích, điều hồ sinh trƣởng động thực vật làm nguyên liệu cho công nghiệp thực phẩm, mỹ phẩm, hợp chất thiên nhiên chất mẫu, dẫn đƣờng cho việc phát triển thuốc nhƣ cấu trúc chất tổng hợp Việt Nam quốc gia có đa dạng sinh học thực vật với khoảng 13.000 lồi thực vật ậc cao, có gần 3.000 lồi đƣợc dùng làm thuốc dân gian, có nhiều điều kiện thuận lợi để phát triển mạnh hƣớng nghiên cứu Hóa học hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học bao gồm nghiên cứu phân lập, xác định cấu trúc, tổng hợp hữu cơ, sàng lọc hoạt tính phân tích hợp chất thiên nhiên có tác dụng sinh học có tiềm phát triển thành tác nhân điều trị Mặc dù khơng phải lồi xứ nhƣng từ lâu Na (Annona squamosa L., Annonaceae) đƣợc du nhập trở thành loài trồng phổ biến nƣớc ta Ngoài việc cho trái nhƣ loại thực phẩm giàu dinh dƣỡng, phận Na c n đƣợc sử dụng nhƣ vị thuốc y học cổ truyền Do chƣa có nhiều mơ tả chi tiết thành phần hóa học tài liệu khoa học, Na Việt Nam đối tƣợng nghiên cứu lý thú hóa học chức điều chỉnh sinh học hợp chất thành phần, đặc biệt hợp chất acetogenin Trên sở kết nghiên cứu nhận đƣợc hóa học tác dụng sinh học, các giá trị ứng dụng Na đƣợc phát hiện, lĩnh vực phát triển sản phẩm phục vụ cho sức khỏe ngƣời Trong số hợp chất thành phần đƣợc xác định Annona squamosa, acetogenin hợp chất đặc biệt lý thú Có nguồn gốc sinh tổng hợp từ axit béo có từ 34 đến 37 cacbon, chất xuất chọn lọc số loài thực vật họ Annonaceae, đặc biệt chi Annona Các chất thú vị cấu trúc, phức tạp hóa học lập thể, khó phân lập có chất sáp thách thức Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 thời gian dài cho nhà nghiên cứu hóa hợp chất thiên nhiên phƣơng pháp phân lập, xác định cấu trúc tổng hợp toàn phần Đƣợc phát chƣơng trình nghiên cứu sàng lọc hoạt tính sinh học, acetogenin bật với hoạt tính chống ung thƣ với chế tác dụng Sau nghiên cứu phát chế tác dụng gây độc tế bào chống khối u acetogenin từ năm 1991, chất đem lại hy vọng cho việc phát triển hệ thuốc chống ung thƣ Trong chƣơng trình nghiên cứu xác định hợp chất có tác dụng gây độc tế bào từ thực vật Việt Nam Phòng thí nghiệm Hóa học hợp chất thiên nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội, phận Na đƣợc lựa chọn làm đối tƣợng nghiên cứu Mục tiêu nghiên cứu luận văn nghiên cứu đƣợc qui trình phân tích phân tách sắc ký để phân lập hợp chất thành phần, đặc biệt acetogenin, từ hạt Na Việt Nam xác định đƣợc cấu trúc hợp chất phƣơng pháp phổ đại Các nhiệm vụ nghiên cứu cụ thể luận văn: Xây dựng quy trình chiết hợp chất hữu thiên nhiên, đặc biệt acetogenin, từ hạt Na (Annona squamosa L., Annonaceae) Phân tích sắc kí lớp mỏng phần chiết để định tính phần chiết xác định hệ dung mơi thích hợp cho phân tách sắc kí Phân tách phần chiết phân lập hợp chất phƣơng pháp sắc kí điều chế Xác định cấu trúc hợp chất đƣợc phân lập phƣơng pháp phổ đại Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TỔNG QUAN VỀ HỌ NA (ANNONACEAE) 1.1 1.1.1 Tổng quan họ Na (Annonaceae) chi Na (Annona) [5, 3, 45] Họ Na (danh pháp khoa học: Annonaceae) c n đƣợc gọi họ Mãng cầu, họ thực vật có hoa ao gồm loại thân gỗ, ụi hay dây leo Với khoảng 2.300 đến 2.500 loài 120 - 130 chi, họ Na họ lớn ộ Mộc lan (Magnoliales) Họ sinh trƣởng chủ yếu vùng nhiệt đới, có lồi sinh sống vùng ơn đới Có khoảng 900 lồi Trung Nam Mỹ, 450 loài châu Phi, loài khác châu Á Các lồi thuộc họ Annonaceae có đơn, mọc so le (mọc cách), có cuống mép nhẵn Lá mọc thành hai hàng dọc theo thân Vết sẹo nơi đính thƣờng nhìn thấy rõ mạch dẫn Cành thƣờng dạng zíc zắc Chúng khơng có ẹ Hoa đối xứng xun tâm (hoa đều) thƣờng lƣỡng tính Ở phần lớn lồi đài hoa nối với gốc hoa Có - cánh hoa có màu nâu hay vàng, nhiều nhị hoa mọc thành hình xoắn ốc nhƣ nhiều nhụy hoa, nhụy có ầu nhụy dạng ngăn chứa nhiều tiểu nỗn Hoa đơi mọc trực tiếp cành lớn thân Quả nang, ế hay đa Chi Na (danh pháp khoa học: Annona) chi điển hình họ Na (Annonaceae) Chi có khoảng 100 - 150 lồi chủ yếu ụi tân nhiệt đới có đơn, mọc so le ăn đƣợc Trong họ Na, có chi Guatteria có nhiều lồi chi Na Một số lồi na có châu Phi mà khơng có châu Á Phƣơng ngữ Nam Bộ gọi Na mãng cầu hay mẳng cầu Dƣới số lồi quan trọng chi Annona, có giá trị đặc iệt nông nghiệp y dƣợc  Annona amambayensis  Annona ambotay AUBL  Annona bullata A.RICH  Annona cacans WARM Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22  Annona calophylla R.E.FR  Annona campestris R.E.FR  Annona cherimola MILL  Annona senegalensis P (mãng cầu hoang)  Annona coriacea MART  Annona cornifolia L  Annona crassiflora MART  Annona crotonifolia MART  Annona dioica A.ST.-HIL  Annona diversifolia D  Annona dolabripetala  Annona echinata D  Annona excellens R.E.FR  Annona glabra L.(bình bát)  Annona glaucophylla R.E.FR  Annona haematantha MIQ  Annona hayesii SAFF  Annona hexapetala  Annona humboldtiana  Annona humboldtii  Annona hybrid  Annona hypoglauca MART  Annona hystricoides A  Annona incana  Annona jahnii SAFF  Annona longiflora S  Annona lutescens  Annona macrocalyx R.E.FR  Annona macrocarpa  Annona malmeana R.E.FR  Annona marcgravii  Annona microcarpa Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22  Annona montana M (mãng cầu núi)  Annona monticola MART  Annona mucosa  Annona muricata L (mãng cầu xiêm)  Annona myristica  Annona nutans R.E.FR  Annona obovata  Annona paludosa AUBL  Annona palustris  Annona paraguayensis R.E.FR  Annona phaeoclados MART  Annona pubescens  Annona purpurea MOC & SESSÉ EX DUNAL  Annona pygmaea  Annona reticulata L  Annona salzmannii L  Annona scleroderma LAM  Annona sericea D  Annona spinescens MART  Annona spraguei SAFF  Annona squamosa L (mãng cầu ta)  Annona sylvatica  Annona testudinea  Annona triloba  Annona tripetala  Atemoya (loài lai A cherimola A squamosa) 1.1.2 Mô tả thực vật Na (Annona squamosa L.) [1, 2, 14, 45] Cây Na (tên khoa học: Annona squamosa L.) loài thân gỗ nhỏ bụi ăn đƣợc gọi mãng cầu ta, mãng cầu dai hay sa lê Đây loài trung, lâu năm thuộc chi Annona, họ Annonaceae Hiện ngƣời ta Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 chƣa xác định đƣợc xác nguồn gốc địa loài Tuy nhiên, nhiều ý kiến cho lồi có xuất xứ từ vùng Caribe Hình 1.1 Lá Na (Annona squamosa L., Annonaceae) Thân lá: Thân thấp, có nhiều nhánh nhỏ, tán rộng, xịe, cành thƣờng mọc không đều, cao - m Cành, thân có màu nâu nhạt, có rãnh nứt nhỏ vàng nhạt Cành cũ thân thƣờng có nốt nâu nhạt hình trịn, bầu dục Lá đơn, mỏng, dài - 17 cm rộng - cm, nhọn hai đầu, mọc so le Lá già màu xanh nhạt, khơng có lơng hai mặt, cạnh nhẵn khơng có Lá non có lơng nhỏ mặt dƣới, khó nhận biết Cuống dài 0,4 - 2,2 cm, có lơng nhỏ Hoa: Hoa đơn mọc rũ xuống thành chùm - hoa ên nách lá, đỉnh cành, dài 2,5 cm màu vàng xanh, chuyển tím già héo Hoa Na có đài màu xanh lục Cánh hoa xếp hai vòng, vòng cánh, cánh hẹp dầy, dài 1,6 - 2,5 cm, rộng 0,6 - 0,75 cm, cánh hẹp, thiếu hẳn Nhụy hoa nhiều, mọc dày, Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 dài dƣới 1,6 cm, bầu nhụy xanh nhạt Vòi nhụy màu trắng Mỗi nhụy tạo thành đơn tƣơng ứng với mắt Cuống dài cm, có lơng nhỏ Cây bắt đầu có hoa vào khoảng tháng đến tháng 8, lứa hoa đầu lứa cuối thƣờng rụng nhiều không tạo Hoa đƣợc thụ phấn bọ cánh cứng Hình 1.2 Hoa Na (Annona squamosa L., Annonaceae) Quả: Quả kép tập hợp nhiều đơn hình thành từ nhụy hoa riêng lẻ Quả có nhiều nốt lồi hay cịn gọi mắt hình giọt nƣớc tƣơng ứng với đơn Khi c n non có màu xanh nhạt, chín chuyển sang vàng xanh mốc mắt bắt đầu tách khỏi Mỗi mắt dài 1,2 - 1,9 cm, rộng 0,6 - 1,3 cm Quả có đƣờng kính - 10 cm Thịt màu trắng, vàng, mềm có vị mùi thơm đặc trƣng Hạt có màu nâu sẫm đen, vỏ cứng dài 1,3 - 1,6 cm Mùa Na chín khoảng từ tháng đến tháng hàng năm 1.1.3 Phân bố [3, 5] Cây Na sinh trƣởng độ cao từ đến 2.000 m so với mực nƣớc biển, thích ứng với đất phù sa đồng đất đồi tơi xốp dễ nƣớc Na lồi ƣa sáng, đặc biệt phát triển tốt vùng có thời tiết khơ, nóng Hiện nay, Na đƣợc trồng rộng rãi khắp vùng có khí hậu nhiệt đới gió mùa, nhiều khu vực Cari e, Nam Á Đông Nam Á Ở nƣớc ta, Na đƣợc trồng rải rác khắp nƣớc, vựa Na phải kể đến huyện Chi Lăng, tỉnh Lạng Sơn tỉnh Vũng Tàu Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 1.1.4 Các ứng dụng y học cổ truyền Na [1, 2] Từ xƣa, ngƣời ta iết sử dụng Na chín nhƣ loại thực phẩm bổ dƣỡng Ngoài quả, hạt, rễ Na đƣợc sử dụng nhƣ vị thuốc ứng dụng y học cổ truyền Tính vị, tác dụng Na: Có vị ngọt, chua, tính ấm; có tác dụng hạ khí tiêu đờm Quả xanh làm săn da, tiêu sƣng Hạt Na có vị đắng, hơi, tính lạnh, có tác dụng can, giải nhiệt, tiêu độc, sát trùng Lá có tác dụng kháng sinh tiêu viêm, sát trùng Rễ cầm ỉa chảy Quả xanh chứa nhiều tannin làm săn da, tiêu sƣng, dùng để chữa tiêu chảy, kiết lị, tiết tinh, đái tháo Khi dùng, lấy 30 g thái nhỏ, bỏ hạt sắc lấy nƣớc uống Quả Na điếc dùng để trị mụn nhọt Cách dùng: phơi thật khô, tán nhỏ, hịa với giấm, bơi nhiều lần Hạt Na có vị đắng, hơi, tính lạnh có tác dụng can, giải nhiệt, tiêu độc, sát trùng Hạt Na giã nhỏ, ngâm rƣợu, lấy nƣớc ngậm để chữa đau Lá Na nắm rửa sạch, giã nát với bồ công anh, đắp chữa sƣng vú; thêm ớt, táo, từ vi lại chữa mụn nhọt có mủ, đầu đinh Lá Na (10 - 20 g) rửa sạch, giã nát, thêm nƣớc, vắt lấy nƣớc đem phơi sƣơng đêm, thêm rƣợu mà uống trƣớc lên sốt rét khoảng hai Dùng riêng phối hợp với ngải cứu (10 g), thạch xƣơng (8 g), sắc uống Lá Na (20 g), đu đủ xanh (10 g), vôi (5 g), muối ăn (5 g) giã nát, hơ nóng đắp lên vết thƣơng để chữa bong gân, chạm thƣơng Rễ Na thái nhỏ, qua, sắc nƣớc uống để tẩy giun đũa Ở Vân Nam (Trung Quốc), dùng trị xích lỵ cấp tính; dùng trị trẻ em l i dom; dùng trị phù thũng ác tính Ở Thái Lan, tƣơi rễ dùng trị chấy, mụn nhọt, nấm tóc lang en Ở Ấn Độ, rễ đƣợc dùng gây xổ; hạt, dùng diệt côn trùng, duốc cá, diệt chấy; hạt kích thích gây sảy thai Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 Một vài đơn thuốc Na: Đi lị nƣớc không dứt: 10 Na ƣơng (chín nửa chừng) lấy thịt ra, c n vỏ hạt cho vào át nƣớc, sắc c n át, ăn thịt uống nƣớc sắc Nhọt vú: Quả Na điếc mài với dấm ôi nhiều lần Sốt rét lâu ngày: V nắm (20 - 30 g) giã nhỏ, chế thêm nƣớc sôi vào vắt lấy át nƣớc cốt, lọc qua vải, phơi sƣơng, sáng hôm sau thêm tí rƣợu quấy uống trƣớc lúc lên hai Mỗi ngày uống lần, uống liền - ngày Mụn nhọt sƣng tấy: Lá Na, Bồ công anh, giã đắp Giun đũa ch i lên ợ nƣớc trong: Dùng nắm rễ Na mọc hƣớng Đông, rửa sạch, qua, sắc uống giun Trừ chấy, rận: Giã nhỏ hạt lấy nƣớc gội đầu hay ngâm quần áo Để trừ chấy, giã nhỏ hạt Na trộn với rƣợu giấm mà v vào đầu, xát vào chân tóc, ịt khăn lại, giữ 15 phút gội đầu Tránh khơng cho va vào mắt có độc 1.2 NGHIÊN CỨU HĨA HỌC VÀ HOẠT TÍNH SINH HỌC CỦA CÁC HỢP CHẤT ĐƢỢC PHÂN LẬP TỪ ANNONA SQUAMOSA L 1.2.1 Các hợp chất acetogenin từ Annona squamosa L Acetogenin lớp hợp chất poliketide thiên nhiên đƣợc tìm thấy họ Annonaceae, cấu tạo từ mạch 34 - 37 nguyên tử cac on có chứa nhóm chức oxy ao gồm v ng tetrahydrofuran (THF) tetrahydropyran (THP) với nhóm hydroxy, keton, epoxy nối đôi mạch cac on Cấu trúc hợp chất thƣờng kết thúc với nhóm lacton utenolid Hơn 400 hợp chất thuộc lớp đƣợc phân lập từ 51 loài thực vật khác Có thể kể đến số acetogenin tiêu biểu nhƣ annonacin (1), annonin I (2), bullatacin (3) uvaricin (4) Luận văn Thạc sĩ 2014 Nguyễn Quang Hợp Cao học Hóa hữu – K22 Các acetogenin thể nhiều hoạt tính sinh học mạnh có nhiều ứng dụng quan trọng y học nhƣ kháng viêm, kháng vi rút HIV đặc biệt kháng ung thƣ [29] Từ hạt Annona squamosa 56 acetogenin đƣợc phân lập từ hạt, lá, vỏ thân Năm 1988, Fujimoto cộng Đại học Cơng nghệ Tokyo, Nhật Bản, lần tìm thấy squamocin A (2) hay c n đƣợc gọi annonin I từ hạt A squamosa [15] Năm 1990, từ vỏ thân A squamosa, Li X H cộng Đại học Purdue, Hoa Kỳ, phân lập thành cơng acetogenin có hoạt tính sinh học mạnh, bullatacin (3) bullatacinon (5), nhờ tìm nguồn nguyên liệu thực vật dồi cho hợp chất quan trọng [23] Bullatacinon ketomonotetrahydrofuran acetogenin kết thúc đuôi ketolacton lần đƣợc biết tới Hoạt tính gây độc tế bào tăng đáng kể nhóm keton đƣợc khử thành nhóm hydroxy Cả bullatacinon tetrahydrosquamon (6) cho thấy tác dụng gây độc tế bào chọn lọc với tế ung thƣ vú MCF-7 Luận văn Thạc sĩ 10 2014