Báo cáo hóa sinh thực hành (Tải: https://link1s.com/yHqvN)

Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 MỤC LỤC CHƯƠNG I: PROTEIN 2 BÀI 1: PHẢN ỨNG BIURE 2 BÀI 2: KẾT TỦA THUẬN NGHỊCH BẰNG MUỐI TRUNG TÍNH 4 BÀI 3: PHƯƠNG PHÁP SORENSEN 6 (PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐẠM FORMOL) 6 BÀI 4: ĐỊNH LƯỢNGPROTEIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP KJELDAHL 7 (GIẢNG TRÊN MÔ HÌNH) 7 CHƯƠNG II: ENZYME 9 BÀI 1: ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME 9 BÀI 2: ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT HOẠT HÓA VÀ KÌM HÃM ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME 10 BÀI 3: XÁC ĐỊNH HOẠT ĐỘ α -AMYLASE THEO PHƯƠNG PHÁP WOHLGEMUTH 11 CHƯƠNG III: GLUCIDE 13 BÀI 1: PHẢN ỨNG VỚI THUỐC THỬ FEHLING 13 BÀI 2: PHẢN ỨNG SELIWANOFF 15 BÀI 3: XÁC ĐỊNH ĐƯỜNG KHỬ BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ KẾ 17 CHƯƠNG IV: VITAMIN 19 BÀI 1: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VITAMIN A 19 BÀI 2: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VITAMIN C 20 BÀI 3: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG VITAMIN C 21 BÀI 1: SỰ NHŨ TƯƠNG HÓA LIPIDE 23 BÀI 2: PHẢN ỨNG XÀ PHÒNG HÓA 24 BÀI 3: XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ IOD CỦA CHẤT BÉO 25 BÀI 4: XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ ACIDE CỦA CHẤT BÉO 27 BÀI 5: XÁC ĐỊNH LIPIT TỔNG SỐ 28 (GIẢNG TRÊN MÔ HÌNH) 28 - 2010 - 1 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương I: PROTEIN Bài 1: PHẢN ỨNG BIURE I) Nguyên tắc: − Đây là phản ứng đặc trưng của liên kết peptide (CO-NH-) − Trong môi trường kiềm, các hợp chất có chứa từ hai liên kết peptide trở lên có thể phản ứng với CuSO 4 tạo thành phức chất màu xanh tím, tím, tím đỏ hay đỏ. − Cường độ màu thay đổi tùy thuộc vào độ dài mạch peptide − Phản ứng này thường thường đượcứng dụng để định lượng protein II) Nguyên liệu và hóa chất: − Dung dịch lòng trắng trứng 1% − Ure tinh thể − Dung dịch NaOH 10% − Dung dịch CuSO 4 1% III) Cách tiến hành & kết quả: Điều chế biure: cho vào ống nghiệm khô một ít tinh thể urê, đung trên ngọn lửa yếu. Lúc đầu urê nóng chảy, đến khi bắt đầu cứng lại thì ngừng đun. Quá trình này tạo ra biure, acide cianuric và amoniac Dùng 2 ống nghiệm: Ống nghiệm Cho vào mỗi ống nghiệm 1ml dd NaOH 10% và 1-2 giọt CuSO 4 1% Ống 1 (Đựng biure) Dung dịch tím đỏ Ống 2 (3ml dd lòng trắng trứng 1%) Dung dịch màu tím Chú ý không cho quá nhiều CuSO 4 vì màu xanh của Cu(OH) 2 được tạo thành  Giải thích: - 2010 - 2 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 − Thuốc thử của phản ứng màu biure là dung dịch NaOH và CuSO 4 , đôi khi nó còn được gọi là tác chất biure − Tuy nhiên chữ biure ở đây không phải là thuốc thử có chứa biure mà là vì cả biure và protein đều cho phản ứng màu giống nhau với NaOH và CuSO 4 , Cường độ màu thay đổi tùy thuộc vào độ dài mạch peptide − Phản ứng so màu Biure, liên kết peptide với Cu 2+ trong MT kiềm, là phản ứng đặc trưng để nhận biết protein  Nguyên tắc các phản ứng màu khác của protein: − Phản ứng xantoproteic: đặc trưng với các axit amin vòng thơm. Các gốc amino acid Tyr,Trp,Phe trong protein tác dụng với HNO 3 đặc tạo thành màu vàng và sau khi thêm kiềm sẽ chuyển thành da cam − Phản ứng ninhydrin: đặc trưng với các α- axit amin. − Phản ứng Pholia: đặc trưng với các axit amin chứa lưu huỳnh − Phản ứng Millon : phát hiện Tyrosin. gốc Tyr tác dụng với thủy ngân nitrate trong HNO 3 đặc tạo thành kết tủa màu nâu đất − Phản ứng Folin: phát hiện Tyrosin, Tryptophan. − Phản ứng Sakaguchi: phát hiện Arginin. Gốc Arg tác dụng với dung dịch kiềm của α-naphtol và hypobromite cho màu đỏ anh đào - 2010 - 3 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 2: KẾT TỦA THUẬN NGHỊCH BẰNG MUỐI TRUNG TÍNH I) Nguyên tắc: − Các muối của kim loại kiềm và kiềm thổ (thường dùng là (NH 4 ) 2 SO 4 , Na 2 SO 4 , NaCl, MgSO 4 ) có tác dụng gây kết tủa thuận nghịch protein. Sau đó nếu loại bỏ nhanh các yếu tố gây kết tủa ,protein trở về trạng thái dung dịch keo bền. − Các protein khác nhau có thể bị kết tủa vơí các nồng độ muối khác nhau,vì vậy có thể dùng muối để tách riêng các protein ra khỏi hỗn hợp của chúng. II) Nguyên liệu và hóa chất: − Dung dịch lòng trắng trứng không pha loãng. − Dung dịch (NH 4 ) 2 SO 4 bảo hòa . − Tinh thể NaCl. − Nước cất. III) Cách tiến hành & kết quả: 1) Cho vào ống nghiệm 3ml lòng trắng trứng + 3ml dd (NH 4 ) 2 SO 4 bảo hoà, lắc đều đến khi dung dịch bán bảo hoà và xuất hiện kết tủa globulin. Để 5 phút, lọc bỏ kết tuả ( thấm ướt giấy lọc bằng dd (NH 4 ) 2 SO 4 ) vào một ống nghiệm khác . Cho vào dịch lọc 3g tinh thể (NH 4 ) 2 SO 4 (nếu dịch lọc là 4ml) cho đến khi dung dịch bảo hoà, lắc, albumin kết tủa,lọc, thu kết tủa Cho riêng kết tủa globulin và albumin vào 2 ống nghiệm tương ứng, thêm vào 2 ống từ 2- 3ml nước cất, lắc đều.  Kết quả:  Ống 1 : tức là ống chứa kết tủa globulin ,sau khi cho nước cất vào thì kết tủa tan từ từ trong nước cất . − Do Globunlin vẫn ở dạng kết tủa ,đó là do Globulin đã bị biến tính ,không quay về trạng thái dung dịch keo ngay được ( hiện tượng kết tủa không thuận nghịch ).  Ống 2 : tức là ống chứa kết tủa albumin,sau khi cho nước cất vào thì kết tủa tan ngay trong nước cất. − Do Albumin trở về trạng thái dung dịch keo như ban đầu, kết tủa tan hoàn toàn (hiện tượng kết tủa thuận nghịch). 2)Cho vào ống nghiệm 3ml lòng trắng trứng , cho tiếp NaCl vào ,dùng đũa thuỷ tinh khuấy cho đến khi dung dịch bảo hoà. Để yên 5 phút thì thấy xuất hiện kết tủa a . Lọc kết tủa sau đó acid hoá phần dịch lọc đó bằng cách thêm vào 1 giọt CH 3 COOH 1% ,thì thấy xuất hiện kết tủa b.  Kết quả: Kết tủa a là Globulin. Kết tủa b là Albumin.  Giải thích : - 2010 - 4 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Mỗi loại protein kết tủa ở các nồng độ khác nhau .Khi cho NaCl vào ,đầu tiên Globulin kết tủa trước .Sau đó đó lọc hết kêt tủa ,cho vào dịch lọc CH 3 COOH 1%, pH giảm làm xuất hiện kết tủa Albumin. - 2010 - 5 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 3: PHƯƠNG PHÁP SORENSEN (Phương pháp xác định đạm formol) I) Nguyên tắc: − Các amino acide có thể phản ứng với formol trung tính để tạo thành dẫn xuất metylenic.Kết quả là nhóm amin mất tính chất cơ bản của nó ,ngược lại nhóm cacboxyl trong amino acide tồn tại dạng metylen tự do có thể chuẩn độ với NaOH . − Phương pháp được ứng dụng trong trường hợp nhóm cacboxyl và nhóm amin tự do bằng nhau. II) Nguyên liệu và hóa chất: − Dung dịch formol ½ (pha formol : nước cất tỉ lệ 1:1 và chỉ chuẩn bị trước khi dùng). − Nước mắm,nước cất. − Dung dịch NaOH 0,1N. − Thuốc thử Phenolphtalein 3%. III) Cách tiến hành & kết quả: Lấy 2 bình nón và đánh dấu bình 1 và bình 2  Bình 1 : Dùng làm bình kiểm tra. Cho vào 50ml dd formol ½ và thêm vào đó 3 giọt phenolphthalein 3%.Sau đó dùng dd NaOH 0,1N để hiệu chỉnh màu trong bình cho đến khi chỉ còn màu hồng nhạt. Ta được formon ½ trung hòa  Bình 2 : Dùng làm bình thí nghiệm. Cho vào 10ml dịch mẫu (đã được pha loãng từ 5 đến 20 lần ), thêm 10ml dd formol ½ đã trung hoà và 3 giọt phenolphthalein 3%, lắc đều cho phản ứng xảy ra hoàn toàn. Sau đó chuẩn độ bằng dd NaOH 0,1N cho đến khi dd trong bình 2 có màu hồng (đậm hơn màu ở bình 1) Thực hiện 3 thử thật và 3 thử không(thay dd đạm bằng nước cất), lấy trị số trung bình: Thử không Thử thật Lần 1 0,4 10,6 Lần 2 0,5 10,7 Lần 3 0,4 10,5 Trung bình V 1 = 0,45ml = 0,00045 l V 2 = 10,6ml = 0,0106 l  Lượng đạm formol có trong 1l nguyên liệu : M(g/l) = 1,4 ( V 2 – V 1 )/a Trong đó : V 1 là thể tích NaOH 0,1N trung bình của 3 lần thử không V 2 là thể tích NaOH 0,1N trung bình của 3 lần thử thật a là lượng mẫu (ml) ứng với 10ml dịch mẫu pha loãng x lần (a= 1 ml = 0,001 l). ⇒ M(g/l) = 1,4 (0,0 106 – 0,00045 )/0.001 = 14,21 - 2010 - 6 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 4: ĐỊNH LƯỢNGPROTEIN BẰNG PHƯƠNG PHÁP KJELDAHL (Giảng trên mô hình) I) Nguyên tắc: − Dưới tác dụng cùa H 2 SO 4 đặc ở nhiệt độ cáo ,các hợp chất hữu cơ có chứa nitơ bị phân hủy và bị oxy hóa đến CO 2 và H 2 O ,còn nitơ chuyển thành ammoniac và tiếp tục kết hợp với H 2 SO 4 tạo thành muối amoni sulphate . Quá trình được tiến hành theo các bước sau : − Vô cơ hóa mẫu : R-CHNH 2 – COOH + H 2 SO 4  CO 2 + H 2 O + (NH 4 ) 2 SO 4 − Cất đạm : (NH 4 ) 2 SO 4 + 2 NaOH  Na 2 SO 4 + 2NH 3 + 2H 2 O − Sau đó lượng NH 3 được hơi nước lôi cuốn bằng một dụng cụ là máy Parnas –Wargner (máy chưng cất đạm )và được dẫn đến một bình tam giác có chứa một lượng thời H 2 SO 4 .Từ đây cho phép chúng ta xác định được lượng NH 3 phóng thích ra ,có nghĩa là xác định được lượng đạm có trong mẫu nguyên liệu : NH 3 + H 2 SO 4  (NH 4 ) 2 SO 4 + H 2 SO 4dư − Chuẩn độ H 2 SO 4 dư ở bình hứng bằng dung dịch NaOH 0,01N II) Nguyên liệu và hóa chất: − Vật phẩm có chứa Nitơ ( nước mắm ,đậu hũ ,các loại thực phẩm ) − H 2 SO 4 đậm đặc. − K 2 SO 4 tinh khiết. − CuSO 4 tinh khiết. − Se. − NaOH 40%. − H 2 SO 4 0,1N : 2,8ml H 2 SO 4 đậm đặc (d=1,84/lít). − NaOH 0,1N : 4g NaOH tinh thể/lít. − Phenolphtalein 1% trong cồn . − HCl loãng . (Nên dùng ống chuẩn để chuẩn bị H 2 SO 4 và NaOH 0,1N) III) Cách tiến hành & kết quả: − Đầu tiên hút 1ml (đối với nguyên liệu lỏng ) hay cân chính xác 1g (đối với nguyên liệu khô đã nghiền nhuyễn ) cho vào bình Kjendanl ,cho thêm 10ml H 2 SO 4 đậm đặc (d=1,84).Để tăng quá trình vô cơ hóa (đốt cháy) cần cho thêm chất xúc tác.Tốt nhất là dùng 0,5g hỗn hợp K 2 SO 4 : CuSO 4 : Se (100:10 :1). Có thể dùng một mình Se kim loại 0,05g hoặc dùng hỗn hợp CuSO 4 và K 2 SO 4 hoặc acid perchloric. - 2010 - 7 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Hỗn hợp xúc tác có tác dụng làm tăng nhiệt độ sôi,do đó làm tăng vận tốc của quá tình phản ứng. Sau khi thêm các chất xúc tác đun nhẹ hợp cho đến khi dunh dịch hoàn toàn mất màu. Chỉ đun mạnh khi hỗn hợp đã hoàn toàn chuyển sang dịch lỏng. Trong quá trình đun thỉnh thoảng lắc nhẹ,tráng khéo léo sau cho không còn một vết đen nào của mẫu nguyên liệu thí nghiệm chưa bị phân hủy sót lại trên thành bình .Đun cho tới khi dung dịch hoàn toàn trắng. − Sau đó chuyển toàn bộ dung dịch sau khi đã vô cơ hóa xong ở bình Kjendahl vào bình định mức 100ml ,thêm nước cất cho đến ngấn chia,lắc đều .Dụng cụ cất trước khi sử dụng phải rửa sạch : lấy vào bình tam giác 10ml H 2 SO 4 0,1N ,thêm vài giọt chỉ thị phenolphthalein và lắp vào máy cất như mô hình . Đun sôi nước trong bình cầu tạo hơi nước ,mở nước và ống sinh hàn .Sau đó qua phễu cho vào bình cất 10ml dd thí nghiệm từ bình định mức và tiếp đó 8-10ml dung dịch NaOH 40% .Tráng phễu bằng một lượng nhỏ nước cất ,rồi đóng khóa .Hơi nước từ bình cầu sục qua bình phản ứng và kéo theo NH 3 sang bình hấp phụ . Quá trình cất kết thúc sau 15 phút .Định phân lượng H 2 SO 4 dư bằng dung dịch NaOH 0,1N. − Sau khi đã lấy bình hấp phụ đặt bình nước cất vào ,đóng khóa,đồng thời mở khóa ở bình rửa .Dung dịch chuyển từ bình cất sang bình rửa ,tháo bỏ dung dịch bẩn đi .Sau khi thí nghiệm xong phải rửa sạch máy cất vi lượng 1 lần bằng HCl loãng và nhiều lần bằng nước cất . Tính kết quả : Hàm lượng nitơ tính theo công thức sau : V ba X .10 100.10000.0014,0).( − = X: hàm lượng nitơ (g/l) a: số mol H 2 SO 4 0,1N đem hấp thụ NH 3 b: số mol NaOH 0,1N tiêu xchuẩn tiêu tốn cho chuẩn sđộ V: số ml phẩm vật đem vô cơ hóa 0,0014: lượng g nitơ ứng với 1ml H 2 SO 4 0,1N - 2010 - 8 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương II: ENZYME Bài 1: ẢNH HƯỞNG CỦA NHIỆT ĐỘ ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME I) Nguyên tắc: − Nhiệt độ có ảnh hưởng quan trọng đến tốc độ phản ứng của enzyme. Sự tăng tốc độ phản ứng của enzyme bằng cách nân nhiệt độ chỉ có hiệu quả trong một khoảng nhiệt độ tương đối hẹp − Nhiệt độ tối thích của phần lớn các enzyme là trong khoảng 40-60 0 C. Ở nhiệt độ trên 80 0 C hầu hết các enzyme bị biến tính không thuận nghịch II) Cách tiến hành & kết quả: Chuẩn bị 4 ống nghiệm, cho vào mỗi ống 2ml dd tinh bột 1%  Ống 1 : gia nhiệt ở 85-90 0 C  Ống 2 : cho vào nước đá  Ống 3 : để ở tủ ấm 45-50 0 C  Ống 4 : để ở nhiệt độ phòng − Giữ các ống trong 15 phút để dd trong ống đạt đến các nhiệt độ tương ứng − Tiếp tục cho vào mỗi ống 0,5ml dd amylase cũng đã đạt các nhiệt độ trên và đặt các ống nghiệm ở các nhiệt độ cũ − Sau 1, 2, 4, 6, 8 và 12 phút lấy từ mỗi ống 1 giọt, nhỏ vào các giọt thuốc thử Lugol đã chuẩn bị sẵn trên bản kính. Quan sát màu tạo thành Ống 1 Ống 2 Ống 3 Ống 4 1 phút Xanh đen Tím đen Đen Đen đậm 2 phút Xanh đen Đen nhạt Tím đen Nâu đất 4 phút Xanh đen Nâu đen Nâu nhạt Nâu đất nhạt 6 phút Xanh đen Nâu đen Nâu nhạt nhạt Nâu đất nhạt 8 phút Xanh đen Nâu đất Nâu nhạt hơn Nâu đất nhạt hơn 12 phút Xanh đen Nâu đen Nâu rất nhạt Màu của lugol Qua bảng trên ta thấy : trong ống 1 và ống 2 thì màu dd tinh bột thay đổi không đáng kể, trong ống 3 và ống 4 màu của dd tinh bột thay đổi nhờ enzyme đã thủy phân  Giải thích : Nhiệt độ có ảnh hưởng quan trọng đến tốc độ phản ứng của enzyme. Nhiệt độ tối thích của phản ứng enzyme nằm trong phạm vi 40-50 0 C và có thể biển đổi phụ thuộc vào nhiều yếu tố như độ sạch của enzyme, thời gian phản ứng…Nhiệt độ mà enzyme bị mất hoàn toàn hoạt tính xúc tác gọi là nhiệt độ tới hạn, thường vào khoảng trên 70 0 C. Ở nhiệt độ tới hạn, enzyme bị biến tính, ít khi có khả năng được hồi phục lại hoạt độ. Ngược lại, - 2010 - 9 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 dưới 0 0 C, hoạt độ enzyme tuy bị giảm nhưng lại có thể tăng lên khi đưa về nhiệt độ bình thường Bài 2: ẢNH HƯỞNG CỦA CÁC CHẤT HOẠT HÓA VÀ KÌM HÃM ĐẾN HOẠT TÍNH CỦA ENZYME I) Nguyên tắc: Chất hoạt hóa có khả năng làm tăng cường tác dụng của enzyme. Chất kìm hám là giảm ái lực của enzyme với cơ chất hay làm enyme mất khả năng kết hợp với cơ chất II) Cách tiến hành & kết quả: Chuẩn bị 3 ống nghiệm: Ống nghiệm Sau cho vào mỗi ống 1ml nước bọt và 1ml dd tinh bột, lắc đều. Sau vài phút, thêm vào mỗi ống vài giọt thuốc thử Lugol, lắc đều Ống 1 1ml nước cất Màu vàng hơi đậm Ống 2 1ml dd NaCl 1% Màu vàng nhạt hơn Ống 3 1ml dd CuSO 4 Màu xanh đen  Kết quả: Ta thấy enzyme hòa tan tốt trong nước, trong dung dịch muối loãng nhưng không tan trong dung môi không phân cực - 2010 - 10 [...]... - 17 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5  Đồ thị theo nồng độ đường và độ hấp thu - 2010 - 18 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương IV: VITAMIN Bài 1: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VITAMIN A I) Nguyên tắc: Dưới tác dụng của H2SO4 đậm đặc , Vitamin A bị mất nước và tạo thành sản phẩm ngưng tụ có màu không bền Sau đó biến đổi nhanh thành màu đặc trưng của liporom (nâu đen) II) Cách tiến hành. .. X(%) = - 2010 - 21 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 − Iốt tương đối không tan trong nước, nhưng điều này có thể cải thiện bằng cách pha trộn iốt với iođua và hình thành triiođua: I 2 + I↔ – I3 − Triiođua oxy hóa vitamin C tạo acid dehydroascorbic: C6H8O6 + I3 – + H2O → - 2010 - C6H6O6 + 3I - + 2H + 22 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương V: LIPIDE Bài 1: SỰ NHŨ TƯƠNG HÓA LIPIDE I) Nguyên... trường kiềm, các mono và 1 số dixacarit khử Cu2+ dưới dạng alcolat đồng thành Cu2+, chức aldehit bị oxi hóa thành axit hoặc muối tương ứng Do glucose và maltose có tính khử nên khi đun với dd thuốc thử Fehling thì kết tủa đỏ của Cu2O hình thành ( do đường đã khử Cu(OH ) 2 có trong Fehling thành CuO2 ) - 2010 - 14 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 2: PHẢN ỨNG SELIWANOFF I) Nguyên tắc: − Khi... nước tạo thành sản phẩm ngưng tụ có màu hồng không bền, sau đó biến đổi nhanh thành màu nâu đen - 2010 - 19 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 2: PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH TÍNH VITAMIN C I) Nguyên tắc: Khi trộn dd acid ascorbic với dd xanh metylen thì dd sẽ mất màu Phản ứng xảy ra do acid ascorbic bị oxy hoá thành acid dehydro ascorbic và xanh metylen trở thành dạng không màu II) Nguyên liệu và hóa chất:... đối với các fructose và các cetohexose nhưng không nhạy đối với các aldohexoz - 2010 - 15 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 - 2010 - 16 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 3: XÁC ĐỊNH ĐƯỜNG KHỬ BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ KẾ I) Nguyên tắc: − Các loại đường khử có khả năng khử Ferricyanur (Fe 3+) thành Ferrocyanur (Fe2+) ion này có màu xanh đậm (xanh prusse) Do đó ta có thể dùng phương... vào nhau nỗi lên trên) Chuyển thành trắng đục ,để một thời gian sẽ phân lớp Bản chất là protein  nhũ tương mạnh hơn rỉ đường - 2010 - Cho mật rỉ đường vào thì do trong rỉ đường do có muối mật là chất gây nhũ tương nên xảy ra hiện tương nhũ tương nhưng yếu hơn ống 1 23 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 2: PHẢN ỨNG XÀ PHÒNG HÓA I) Nguyên tắc: − Chỉ số savon hóa là lượng mg KOH cần để trung... thí nghiệm: Cl- trong NaCl làm chất hoạt hóa enzyme - 2010 - 12 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương III: GLUCIDE Bài 1: PHẢN ỨNG VỚI THUỐC THỬ FEHLING I) Nguyên tắc: − Do có chứa chức aldehyde hoặc ceton cho nên các monosaccharide có tính khử và được gọi là đường khử Nếu 2 monosaccharid kết hợp với nhau bằng 2 hydroxyl glucoside thì disacccharide tạo thành bị mất tính khử Còn nếu nhóm OH glucoside... năng bị oxi hóa càng nhanh ⇒ Chỉ số I2 = - 2010 - 26 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 4: XÁC ĐỊNH CHỈ SỐ ACIDE CỦA CHẤT BÉO I) Nguyên tắc: − Chỉ số acide của chất béo là số milligram KOH cần thiết để trung hoà hết những acid béo tự do chứa trong 1g chất béo − Dùng KOH 0,1N để trung hoà các acide béo tự do trong nguyên liệu với phenolphtlein làm chất chỉ thị màu II) Nguyên liệu và hóa chất:... lượng chất béo, chỉ số acid càng cao chứng tỏ chất béo không tươi, đã bị phân hủy và bị oxi hóa một phần - 2010 - 27 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 5: XÁC ĐỊNH LIPIT TỔNG SỐ (Giảng trên mô hình) I) Nguyên tắc: − Dùng dung môi kị nước trích li hoàn toàn lipide từ nguyên liệu đã được nghiền nhỏ Một số thành phần hòa tan trong chất béo cũng được trích li theo, bao gồm sắc tố, các vitamin tan... gián tiếp : chiết xuất lipide ra khỏi nguyên liệu và cân lại nguyên liệu II) Nguyên liệu và hóa chất: − Dung môi chiết xuất lipide thường dùng là ether etylic − Nguyên liệu được nghiền nhỏ ,sấy khô đến khối lượng không đổi III) Thiết bị Soxhlet : - 2010 - 28 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 IV) Cách tiến hành & kết quả: − Chuẩn bị túi bằng giấy lọc để đựng nguyên liệu hoặc dùng ống hình trụ đựng . nhạy đối với các aldohexoz - 2010 - 15 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 - 2010 - 16 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Bài 3: XÁC ĐỊNH ĐƯỜNG. 690nm - 2010 - 17 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5  Đồ thị theo nồng độ đường và độ hấp thu - 2010 - 18 Thực hành Hóa Sinh Lớp K14S1_Nhóm 2_tổ 5 Chương